猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的研究——菌种选择、疫苗制备及安全性试验

以国内多发的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 (APP) 1、3、7血清型强毒株作为制苗菌株 ,制成油佐剂三价灭活苗。经效力试验 ,对上述 3种血清型强毒攻击的保护率分别为 88.8%、88.8%和 10 0 % ;试验动物安全性检验及田间安全检验 ,除个别猪出现轻微体温反应及暂时减食外 ,无其他异常反应。

基于机器视觉的疫苗制备中胚蛋成活性检测

将机器视觉技术引入疫苗制备的胚蛋孵化中期成活性检测环节中。针对其不可漏检坏死胚蛋的特殊需求,提出了首先以多尺度形态学滤波增强图像、检测图像谷带特征,然后以基于直方图WFCM的局部自适应二值化方法提取血丝,最后通过血丝数量来判定成活性的算法。以150幅图像进行实验,实验结果显示,本算法检测速度快、对胚蛋活性无影响。判定正确率、漏判率和误判率分别为99.33%、0和0.67%,可满足疫苗制备的特殊需求。

重组胰酶在口服轮状病毒活疫苗制备中的初步应用

目的探究重组胰酶替代猪源胰酶在轮状病毒疫苗制备中的可行性。方法确立3种重组胰酶的最佳工作浓度;观察3种重组胰酶和猪源胰酶消化MA104细胞并连续传10代(P1~P10),根据消化时间、消化后细胞总数、细胞活率、细胞生长状况、细胞形态变化等方面进行考量比较;观察轮状病毒LH9株经4种胰酶活化,分别接种对应胰酶传代的MA104细胞上培养,通过病毒滴度(lg CCID_(50)/mL)及RNA-PAGE检测,分析重组胰酶替代猪源胰酶在轮状病毒疫苗制备中的应用。结果连续P1~P10代后3种重组胰酶和猪源胰酶在细胞总数、细胞活率及细胞生长状况,差异均无统计学意义(P>0.05),显微镜观察细胞形态无明显改变。轮状病毒LH9株经不同胰酶活化,接种MA104细胞P1~P10代培养后,病毒滴度差异均无统计学意义(P>0.05),且RNA-PAGE电泳图谱未见差异。结论初步应用试验表明3种重组胰酶均可替代猪源胰酶用于轮状病毒疫苗的制备。

锦鲤竖鳞病疫苗制备与免疫效果研究

在日常生产实践中，竖鳞病是危害锦鲤生长发育、造成大量死亡的重要疾病。受感染的锦鲤发病周期短，传播速度快，感染范围广，死亡率高，特别是锦鲤亲鱼死亡率最高可达85％。相关资料显示：导致此病有几种病原体，包括如点状假单胞菌、产气单胞菌等，均可单一或共同导致锦鲤细胞感染，致使内部器官功能失调。为克服使用中西药对锦鲤体色、体型产生的不良影响，我们通过对患病锦鲤病灶细胞的菌株进行疫苗制备，并对所制备的疫苗进行了免疫效果分析，旨在为防治锦鲤竖鳞病提供一种有效的免疫学方法。

嗜水气单胞菌灭活疫苗制备及其血清凝集抗体检测

从辽宁省沈阳市辽中区及其周边患细菌性败血症的草鱼（Ctenopharyngodonidellus）体内分离到嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）的大量致病菌株中,选取毒力较强的菌株,制备成福尔马林灭活菌苗后,接种健康草鱼并收集其免疫血清.用血凝板法测定了免疫血清中对各分离菌株的凝集抗体效价,比较分析了分离菌株之间的抗原性（antigenicity）差异.结果表明,用6个菌株制备的灭活菌苗接种草鱼后,均可以诱导受免草鱼的血清中产生较高的凝集抗体效价,说明制备的灭活菌苗具有比较高的抗原性;免疫血清与各个分离菌株制备的灭活菌苗反应,出现的凝集效价高达512~2,048之间,说明用不同菌株制备的灭活菌苗上,存在能诱导草鱼产生凝集抗体的大量共同抗原.

沙眼衣原体的免疫清除机制及其疫苗制备

沙眼衣原体(Ct)感染是当今世界上最常见的性传播疾病,而疫苗在预防和控制Ct感染方面将是有效措施之一。大量研究表明细胞介导免疫是体内清除Ct的主要应答机制,动物实验也支持体液免疫抗Ct感染的可行性。本文从Ct的免疫清除机制和可能的靶抗原分析等角度,综述了目前抗Ct疫苗研制中存在的主要障碍,以及探讨实施最佳免疫路径和发展新型Ct疫苗的可能性等最新进展。

除菌过滤器在疫苗制备中的作用及应用前景

除菌过滤器能降低药品中微生物污染的风险。研究除菌过滤器在疫苗制备中的作用发现,除菌过滤器有利于菌体处理,能减轻热原污染,可采用稳定温度的方式改善抗生素配制,提高疫苗免疫保护力。研究除菌过滤器在疫苗制备中的应用前景,发现除菌过滤器能提高疫苗制备质量,在未来的疫苗制备中可大规模使用。

除菌过滤器在疫苗制备领域的作用及前景

随着医药领域的科技水平不断提升,过滤除菌技术在生物制药领域得到了广泛应用,主要结合相关疫苗的特性去选用适宜的除菌过滤器,确保疫苗能够达到无菌水平。除菌过滤器作为疫苗制备领域中保证疫苗无菌的关键保障,文章则主要针对于此,对除菌过滤器的疫苗原理、类型及其在疫苗制备领域的作用和发展前景展开分析。

预防鳖病的疫苗制备与应用

现阶段,鳖病的免疫预防是采用类毒素的方法,使其对病原体产生抵抗力,免受其感染。此法属于后天自动免疫的范畴,亦即土法免疫。土法免疫在鱼类中应用获得了很好的效果,移植到鳖病预防上同样有实用价值。应用土法(类毒索)免疫预防鳖的红脖子病、赤斑病。

猪瘟的防控与疫苗制备要点

一．当前猪病防控中面临的主要问题 集约化养殖场在建设时偷工减料，造成小环境恶化；规模化养殖场在环境处理上不投钱，造成大环境污染；需求专家的技术服务却不愿付费，专家只好站在付费人的角度说话；玉米霉变的程度大为提高，造成免疫抑制；兽药企业的保键方案是假定猪只处在隐性感染威胁的前提下有一定的意义.

基于TEM-8新型颗粒性疫苗的制备、鉴定和体外激发CTL杀伤活性的研究

目的制备、鉴定基于肿瘤抗原TEM-8(tumor endothelial marker-8)的复合颗粒性疫苗,研究其在体外激发CTL杀伤活性。方法在特定的条件下将阳离子肽和DNA制备成复合颗粒性的结构,以透射电镜、DNA阻滞试验、DNa-seI保护试验、Westernblot等对该疫苗进行制备和鉴定,同时进行体外激发CTL杀伤活性的标准51Cr释放实验。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L、电荷比为2的制备条件下,电镜扫描结果显示该疫苗能形成颗粒;Westernblot鉴定其可有效介导TEM-8蛋白表达;该疫苗有明显的杀伤毒性,杀伤率为59.7%,与对照组性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备了基于肿瘤抗原TEM-8的复合颗粒性疫苗,其在体外能够有效激发出特异性CTL应答。

新型肽-DNA复合颗粒性疫苗的制备方法

目的研究、优化新型颗粒性肽-DNA复合疫苗的制备方法。方法以DNA沉淀试验、DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和电镜分析对该疫苗颗粒的制备参数进行优化。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L,电荷比为2的制备条件下,该疫苗形成直径为20nm的均一颗粒,并可有效介导DNA疫苗所携带基因的表达。结论该研究为颗粒性肽-DNA复合疫苗获得良好的免疫学效应奠定了基础。

鹿产气荚膜梭菌二价灭活疫苗的制备和免疫效力试验

为了研制鹿产气荚膜梭菌A型和C型二价灭活疫苗,对疫苗的免疫效力和免疫持续期以及疫苗保存期进行测定,从而为开发免疫原性较好的无毒副作用的灭活疫苗奠定基础。将产气荚膜梭菌T5-A和J28-C株的培养液按1∶1混和,混合菌液按9∶1加入灭菌铝胶,经浓缩制备3批灭活疫苗0406-1,0406-2,0406-3。安全检验合格后,采用"血清中和试验"检验技术,进行家兔攻毒与血清抗体效价的平行试验,测定疫苗的免疫效力和免疫持续期以及疫苗保存期。结果是疫苗的安全性良好,免疫效力表明疫苗的免疫保护率为100%,抗体效价显示C型抗体效价高于A型,疫苗对C型菌的保护期长达6个月,而对A型菌的保护期为3个月。疫苗保存期的测定表明,疫苗可以保存10个月以上。表明3批疫苗安全性较好,对家兔有较强的免疫保护,为疫苗的下一步鹿田间试验提供了理论依据。

河西走廊牛源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗的制备及临床效果检测观察

根据牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的培养特性,本研究采用脑心浸液肉汤（BHI）培养基静止培养24 h,每2h震荡一次的方法进行培养,将培养的A型多杀性巴氏杆菌灭活后制成A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,免疫小白鼠和日本大耳白家兔.结果显示：A型灭活苗的保护率为100％;将制备的灭活疫苗进行肉牛安全性试验,均未发现过敏反应等异常情况;在河西走廊嘉峪关、酒泉、张掖、金昌和武威5市应用对网牛春（2～3月）、秋（10～11月）两季分别免疫注射制备的A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,剂量为体重100 kg以上6 mL/头,100 kg以下4 mL/头的方法进行了较大规模的临床效果观察,免疫牛均未发现不良反应,实验组牛巴氏杆菌病发病、死亡率分别分别比对照组低2.4、1.99个百分点,差异极显著（p＜0.01）.

肿瘤坏死因子αDNA疫苗的制备及其对肿瘤的治疗作用

目的观察pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis肺癌瘤局部注射的治疗效果及相关免疫机理。方法用双酶切的方法由pBluescdpt／TNFα载体上切下TNFα基因片段，构建真核表达载体，转染COS及Hda细胞，并对小鼠Lewis瘤体内注射pcTNFα重组质粒，观察疗效。结果构建了携带TNFα的重整pcTNFα真核表达质粒，肿瘤局部注射pcTNFα组肿瘤生长缓慢，存活期比对照组明显延长。结论pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis瘤局部注射，有一定的抗肿瘤效应。

树突状细胞疫苗的制备及其临床应用研究

本文主要就近 2年来树突状细胞 (DC)疫苗的发展和临床应用等方面作一综述 ,着重讨论DC疫苗的制备方法及存在问题。

犊牛大肠杆菌和沙门氏菌佐剂灭活疫苗的制备与临床效果观察

为有效预防铁门关地区犊牛大肠杆菌病和沙门氏菌病,提高对犊牛腹泻的防治水平,利用分离到的优势致病菌O78血清型大肠杆菌、O111血清型大肠杆菌、都柏林沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌,制备氢氧化铝佐剂二联四价灭活疫苗,并就其效果开展临床试验。利用上述疫苗接种4组牛:A组(1日龄首免,14日龄加强免疫1次),B组(1日龄首免,21日龄加强免疫1次),C组(60日龄首免,74日龄加强免疫1次),D组为对照组(注射生理盐水)。采用玻片凝集试验方法,分别于首免后7 d、14 d、21d、42 d和180 d检测血清抗体水平,并进行攻毒保护试验。结果表明,A,B,C组免疫42 d后血清抗体水平超过1∶32的比例达93.3%以上,不同组的抗体水平无明显差异。免疫牛能抵抗90亿的O78血清型大肠杆菌、O111血清型大肠杆菌、都柏林沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌的攻击,说明制备的疫苗安全可靠且对疾病有较好的预防效果。

多表位HBV DNA疫苗的中试制备及质量研究

目的建立多表位HBVDNA疫苗(PVAX-HS)的中试制备及质量控制方法。方法采用分批补料发酵方式,碱裂解结合超滤浓缩,三步柱层析制备DNA疫苗,并对终产品进行全面质量控制。结果分批补料发酵获得生物量50～60g/L,质粒最终产量约为1.0mg/g菌体,符合药用DNA疫苗质量标准。结论建立了质量稳定的PVAX-HS中试制备工艺,符合规模化生产要求。