河北省疫苗变异脊髓灰质炎病毒1例调查分析

目的了解河北省疫苗变异脊髓灰质炎(脊灰)病毒1例的调查情况。方法急性弛缓性麻痹(AFP)病例按个案调查表进行调查,临床分类由省级AFP专家诊断小组会诊并做出最后分类。结果2007年7月河北省发生了1例疫苗变异脊灰病毒病例,临床表现类似脊灰,在对病例及接触者所分离到的脊灰病毒株进行核苷酸序列测定时,发现VP1区与脊灰疫苗(Sabin)株脊灰病毒相比有0.77%～0.88%的核苷酸变异。患儿发病前未接种口服脊灰减毒活疫苗(OPV),但与本村有免疫史健康儿童有接触史。结论各级卫生部门采取了包括AFP病例主动搜索、OPV强化免疫等多项措施,有效地控制了疫情的扩大和蔓延。

免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎4例病例系列报告

背景目前在我国关于免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎(iVAPP)的病例报道少见。目的总结iVAPP的临床表现、免疫学指标及转归。设计病例系列报告。方法纳入2018年5月至2023年6月在复旦大学附属儿科医院临床免疫科住院的iVAPP患儿,截取患儿的人口学资料、接种脊髓灰质炎病毒(PV)疫苗的相关情况、临床表现、发病时免疫相关指标、病原学检测结果、治疗、转归和肌力恢复情况。主要结局指标临床表现和免疫相关指标。结果4例iVAPP患儿均为男孩,发病年龄为7~12月龄,处于口服脊髓灰质炎病毒疫苗(OPV)4~7个月后;首剂均在3月龄接种OPV,例1、2、4分别接种OPV 1、2、3剂,例3接种OPV 2剂、灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV)1剂。2例为联合免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎(CID-VAPP),因“肺部感染、腋下淋巴结破溃”入院,T、B细胞数量均严重降低,呈现多部位肢体瘫痪,存在多侧肢体的肌力减退,积极治疗后未发生缓解;感染累及部位多,感染病原种类多,均发生卡介苗相关结核分枝杆菌感染、重症肺炎,在1周岁内因严重感染死亡。2例为原发性抗体缺陷病(PAD)-VAPP,因“肢体活动障碍”入院,仅B细胞数量降低和抗体分泌障碍,肢体瘫痪症状可累及一侧或双侧,经治疗后肌力可恢复正常,且感染症状轻,预后良好。结论CID和PAD患儿口服OPV均有可能导致iVAPP,患儿的预后主要取决于原发病。

安徽省疫苗变异脊髓灰质炎病毒病例的监测及其流行病学分析

安徽省在 2 0 0 1、2 0 0 2、2 0 0 4年急性弛缓性麻痹 (AFP)病例监测中 ,有 8例AFP病例粪便标本分离到疫苗变异脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒 ,与脊灰疫苗 (Sabin)株相比 ,VP1 区核苷酸差异率为 0 2 2 %～ 0 99%,其中 1例为疫苗衍生脊灰病毒 (VDPV)。 8例主要分布在几个相邻的县 ,年龄主要在≤ 1岁 (7例 ) ,有明显的类似脊灰症状 ,其中 5例未免疫或未全程免疫。密切接触者及周围儿童粪便标本未分离到疫苗变异脊灰病毒 ,当地口服脊灰疫苗 (OPV)接种率调查 ,除 1个村为 4 0 %外 ,其余均 >80 %。表明安徽省局部地区自然环境中存在疫苗变异脊灰病毒的循环 ,但未在人间传播。今后仍应加强儿童OPV常规免疫 ,加强AFP病例监测 ,有计划地开展OPV强化免疫。

山东省急性弛缓性麻痹病例疫苗变异脊髓灰质炎病毒的分子生物学性状分析

目的对山东省1997～2004年急性弛缓性麻痹(AFP)病例中疫苗变异脊髓灰质炎(脊灰)病毒的分子生物学性状进行分析,以提高对疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)的认识,从而增加AFP病例监测系统检出VDPV的灵敏度.方法分离的脊灰病毒血清定型采用中和试验的方法,型内鉴定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)两种方法,疫苗变异脊灰病毒分子生物学性状分析采用VP1区序列测定的方法.结果山东省1997～2004年未分离到脊灰野病毒,分离到的脊灰疫苗病毒以Ⅱ型为主(173株),接近Ⅰ型和Ⅲ型之和.其中疫苗变异脊灰病毒10株,仍以Ⅱ型为主(8株),且有1株(CHN1025)VP1区变异率达到1%,为VDPV,但该毒株无2代病例发生.结论在山东省连续多年的口服脊灰疫苗免疫已经阻断了脊灰野病毒在人群中的传播,但从AFP病例中曾分离到1株VDPV,结合流行病学分析发现,局部地区仍存在免疫空白,因此存在着VDPV以及发生循环的VDPV潜在的可能,应引起相关部门的关注.

中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究

为研究中国急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中脊髓灰质炎 (简称脊灰 )病毒分离株的分子特征 ,为中国继续维持“无脊灰野毒状态”提供理论依据 ,对 2 0 0 2年所有省级疾病预防控制中心送检的脊灰分离株 ,用PCR RFLP法及ELISA法进行型内鉴定。用PCR RFLP法筛查出与疫苗株相比有异常酶切图谱的毒株共 2 4株 ,其中Ⅰ型毒株 1株 ,Ⅱ型毒株 2 1株 ,Ⅲ型毒株 2株 ;用ELISA法筛查出与疫苗株相比有不同的抗原抗体反应的毒株共 2 2株 ,其中Ⅰ型毒株 7株 ,Ⅱ型毒株 4株 ,Ⅲ型毒株 1 1株 ,在 7株Ⅰ型毒株中有 3株为非疫苗类似株 (NSL) ,其余为双反应毒株 (DRV)。随后对这 4 6株毒株进行了全VP1区的基因序列分析。结果表明 :2 0 0 2年脊灰分离株都是疫苗株或疫苗衍生株 ,没有发现野毒株 ,中国继续保持着“无脊灰野毒状态” ;口服减毒活疫苗 (OPV)株与其它野毒株在稳定性性质方面是类似的 ,即通常是不稳定的 ,在人体肠道内有很强的选择性 ;在人体肠道内 ,病毒复制产生的基因变异导致毒力升高 ,是引起疫苗相关麻痹病例 (VAPP)的重要原因 ,但宿主本身的因素也有很大的作用 ;在局部地区有疫苗株的循环或脊灰疫苗衍生株 (VDPV)的存在 ;最终消除疫苗株引起的AFP病例可能还需要脊灰灭活疫苗(IPV)的介入。

急性弛缓性麻痹病例中Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗病毒变异株基因特征分析

研究Ⅱ型脊髓灰质炎（脊灰）疫苗变异株的基因特征，为我国使用口服脊灰减毒活疫苗／脊灰灭活疫苗使用策略，维持无脊灰状态和全球最终消灭脊灰提供科学依据。根据型内鉴定的检测结果，从2000-2001年AFP病例分离到的Ⅱ型脊灰疫苗变异株中选取有聚集性的5株病毒进行全基因组序列测定（贵州省3株、山东省2株），并进行核苷酸、氨基酸同源性分析。贵州省3株病毒全基因组序列完全一致，但与SabinⅢ型病毒发生重组，重组区域在3A区（nt5343-5353）；与疫苗株相比，Ⅱ型区域变异10个碱基，其中VP1区变异4个，与SabinⅡ型株核苷酸同源性为99．56％，氨基酸同源性99．34％；Ⅲ型区域变异9个碱基。山东省2株病毒全基因序列共享16个突变位点，没有发生重组，与SabinⅡ型株相比，VP1区分别变异7个和4个碱基，核苷酸同源性分别为99．22％和99．56％，氨基酸同源性分别为99．0％和99．67％。上述5株病毒在重要的减毒位点nt481、nt2909均发生突变。此研究中5株病毒分属于两个不同的传播链，但是共享nt481、nt2909、nt2992三个突变位点，这3个突变位点不在重组区域内，他们的共同作用可能是影响病毒传播力的重要因素，但目前尚无证据证明脊灰疫苗病毒型间重组会增加病毒的毒力及传播力。

中国脊髓灰质炎Ⅱ型疫苗相关分离株病毒性状的观察

对１９９４年中国分离的１３株脊髓灰质炎Ⅱ型疫苗相关株进行了ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析，发现７株为重组病毒，毒力较疫苗株有回复。在Ⅱ型脊髓灰质炎病毒基因序列上，对于神经毒力有重要影响的第４８１位核苷酸发生了突变（Ｃ→Ｇ），另一个被视为重要位点的第２９０８位核苷酸无一发生变化，反而在第２９０９位核苷发生了高频率的点突变，意味着２９０９位点在中国Ⅱ型疫苗相关株的自然变异中可能起着重要作用。根据转基因小鼠实验和温度敏感实验（Ｒｃｔ－ｍａｒｋｅｒ），脊髓灰质炎病毒的神经毒力大小并不与温度敏感实验所显示的毒力特征呈正相关性。

中国脊髓灰质炎病毒疫苗株基因特征及其神经毒力的初步观察

中国脊髓灰质炎（脊灰）病毒疫苗株普遍存在基因变异的现象，如重组、点突变等〔１〕。我们选出１０株有代表性的变异株，在具有人脊灰病毒受体基因的转基因小鼠ＰＶＲ－Ｔｇ２１〔２〕中做毒力分析，发现Ｓａｂｉｎ１基因型（ＶＰ１）与野毒基因型（３Ｄ）的重组株显示很强的神经毒力，其ＰＤ５０ｉｎＴＣＩＤ５０（简称ＰＤ５０）值为４．５，而Ｓａｂｉｎ１标准株的ＰＤ５０值大于８．０。另外两株Ⅰ型疫苗株只在关键性核苷酸位点发生突变，只在位点５２５－Ｕ发生突变的一株，其ＰＤ５０值为５．０，另一株在位点４８０－Ｇ及２７９５－Ａ突变，其ＰＤ５０值为５．８，均显示较强的神经毒力。一株Ｓａｂｉｎ２基因型（ＶＰ１）与Ｓａｂｉｎ３基因型（３Ｄ）的重组株，其神经毒力（ＰＤ５０≥５．９）亦明显高于Ｓａｂｉｎ２标准株（ＰＤ５０＞７．５）；而１株Ｓａｂｉｎ２基因型（ＶＰ１）与（Ｓａｂｉｎ１＋Ｓａｂｉｎ２）基因型（３Ｄ）重组株的神经毒力（ＰＤ５０＝７．５０）无明显提高。对Ⅲ型疫苗株的神经毒力分析发现，１株Ｓａｂｉｎ３基因型（ＶＰ１）与Ｎｏｎ－Ｓａｂｉｎ基因型（３Ｄ）重组株的神经毒力，高于仅在核苷酸位点４７２－Ｕ突变的一株疫苗株。值得提出的是，另一株Ⅲ型疫苗?

贵州省贞丰县疫苗衍生脊髓灰质炎病毒循环的病毒学分析

为及时发现和阻断疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(vaccine-derived polioviruses, VDPVs)循环、脊灰野病毒的输入和能够引起临床脊灰的其它脊灰疫苗相关病毒,做好贵州省无脊灰状态下脊灰病毒学监测工作,采用病毒分离、鉴定与核苷酸序列测定和分析方法,对贵州省贞丰县及周围10个县2003～2004年报告的急性弛缓性麻痹(AFP)病例及2004年接触者粪便标本的病毒学监测的结果进行了分析. 对收集到的105例AFP病例和47例密切接触者的278份便标本进行了病毒学监测,结果从66例中共分离到肠道病毒(EV)66株,阳性率为43.4%,其中脊灰病毒(PV)29例,分离率为19.1%,非脊灰肠道病毒(NPEV)37例,分离率为24.3%.29例PV经中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室鉴定,24例为疫苗相似株,5例为脊灰Ⅰ型VDPVs,这5例均为2004年从贞丰县所分离到.贞丰县及周围县EV阳性检出率(43.4%)高于2003～2004年全省水平(22.9%～24.6%),2004年PV分离率比2003年高达2.6倍,29株PV中单个Ⅰ型占34.5%,明显高于往年(2000～2002年全省平均4.1%).本研究提示,Ⅰ型VDPVs在贞丰县引起了循环(cVDPVs),通过口服脊灰疫苗强化免疫已经阻断cVDPVs的传播.人群中PV和NPEV带毒率明显增高,非VDPVs引起的临床符合脊灰病例不容忽视;应加强脊灰病毒学监测数据的分析和早期疫情预警工作.

贵州省疫苗衍生脊髓灰质炎病毒循环事件的调查

目的:掌握应对2004年中国贵州省贞丰县首次Ⅰ型疫苗行脊髓灰质炎病毒循环(cVDPV)事件主要开展的工作。方法:对贵州省疾病预防控制中心(CDC)cVDPV事件现场调查资料进行描述性分析。结果:2004年发生贵州省黔西南布依族苗族自治州(黔西南州)贞丰县发生了Ⅰ型cVDPV,在中国尚属首次。现场调查、现场诊断以及实验室检验结果表明,本次疫情共发现实验室确诊VDPV病例2例,在2例确诊病例的3名健康儿童接触者及1例高危AFP病例的1名健康儿童接触者分离到VDPV。结论:低脊灰质炎减毒活疫苗(OPV)接种率,仍然是本次cVDPV发生的最主要原因。对cVDPV事件所采取的AFP病例主动搜索、OPV强化免疫等措施是有效的,成功的阻断了cVDPV。

中国脊髓灰质炎病毒中Ⅱ_（17）和中Ⅲ＿2疫苗株部份基因序列的分析

对中国脊髓灰质炎Ⅱ型减毒活疫苗株──中Ⅱ１７和Ⅲ型减毒活疫苗株──中Ⅲ２的ＶＰ１段部份核酸片段进行序列分析，并分别与相应的Ｓａｂｉｎ２和Ｓａｂｉｎ３株有关片段的核苷酸序列进行比较。在４１６个核苷酸序列中，中Ⅱ１７与Ｓａｂｉｎ２有９９．３％同源性，中Ⅲ２与Ｓａｂｉｎ３株完全一致。从我国服用国产活疫苗地区急性弛缓性麻痹病例中分离到的部份２型疫苗株，分别与中Ⅱ１７和Ｓａｂｉｎ２相比较，发现与中Ⅱ１７株更为近缘，海南、山东、湖南株分别只有０、１或２个核苷酸的改变。

脊髓灰质炎减毒活疫苗中SV40和泡沫病毒的检测

目的 检测脊髓灰质炎减毒活疫苗中的SV4 0和猴泡沫病毒 (SimianFoamyVirus,SFV)。方法 用PCR方法检测我所 1997年至 2 0 0 3年生产用的毒种 10批、半成品 14 0批及成品糖丸疫苗 12 8批。结果 脊髓灰质炎减毒活疫苗毒种、半成品和成品糖丸疫苗中均未检测到SV4 0和SFVDNA。

口服脊髓灰质炎疫苗免疫儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的抗体水平

目的：为了解我国口服脊髓灰质炎（以下简称脊灰）疫苗（OPV）按现行免疫程序接种后，被免疫儿童对四川1型脊灰病毒的免疫水平，以指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法：应用微量中和试验方法检测血清中对三种毒株的中和抗体滴度。结果：儿童基础兔疫后对三种毒株Sabinl、Mahoney、四川株的阳性率为100％，免后GMT分别为1196．8、317．9、62．9。结论：免疫儿童对四川Ⅰ型脊灰病毒抗体的GMT较SabinⅠ型和Mahoney低．但OPV能诱生抗四川株的抗体，OPV对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。

悬浮吸附法在人胚肺二倍体细胞(KMB17)中培养脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒

目的研究在KMB17细胞中培养脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒及其用于生产疫苗的可行性。方法应用悬浮吸附和添加血清的方法,在KMB17细胞上培养SabinⅠ、Ⅱ、中Ⅲ2型病毒,用微量法检测病毒滴度。结果在悬浮吸附加10%血清培养条件下,SabinⅠ滴度可达8.125 LgCCID50,SabinⅡ滴度可达7.5 LgCCID50,中Ⅲ2滴度可达7.583 LgCCID50。与传统的猴肾原代细胞培养的病毒滴度比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论可进一步研究应用KMB17细胞进行疫苗生产。

海南省脊髓灰质炎病毒疫苗株分离及相关资料分析

目的 了解海南省 1995～ 2 0 0 0年报告的 15岁以下急性弛缓性麻痹 (AFP)病例及密切接触者粪便标本中脊髓灰质炎病毒 (PV)疫苗株的分离情况 ,分析病例流行病学特征、PV型别分布等相关资料。方法 采用试管法分离肠道病毒 ,微量中和试验法鉴定脊灰病毒 ,国家脊灰实验室采用PCR -RFLP法进行型内鉴别。结果 海南省 1995～ 2 0 0 0年报告的 15岁以下急性弛缓性麻痹 (AFP)病例 177例及 6 85名密切接触者的粪便标本中 ,脊髓灰质炎病毒疫苗株的分离率分别为 10 80 %和 2 .48% ,3岁以内的儿童分别占 94 73%、47 10 %。 19例脊灰病毒疫苗株阳性的AFP病例中 ,31.5 8%的儿童无OPV免疫史 ,2 1.0 5 %的儿童有 1～ 2次免疫史 ,仅 47 37%完成了三次OPV全程免疫。其中 9例病例发病后 6 0天残留麻痹。结论 我国已进入“无脊灰状态” ,已无本土脊灰野病毒感染的病例 ,脊灰病毒疫苗株在人群中的循环及其致病性应进一步研究 ,同时 ,继续保持儿童高的OPV免疫覆盖率仍然是十分必要和有效的。

菏泽市疫苗衍生脊髓灰质炎病毒的应急处置措施

目的评价疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(VDPV)应急处置措施的效果。方法在山东省卫生厅及山东省CDC的指导下,成立调查处理小组,制订调查提纲,研究控制措施,并深入现场调查,包括病例调查及免疫功能测定,所在地及医院急性弛缓性麻痹(AFP)病例主动搜索,评估市、县级AFP病例监测系统运转情况,采集密切接触者和健康儿童粪便标本、血清标本进行病毒分离和脊髓灰质炎抗体测定,对脊髓灰质炎病毒阳性分离物进行血清型和型内鉴定以及核苷酸序列分析,儿童脊髓灰质炎疫苗(OPV)接种率调查与评估等。结果病例确认为VDPV病例,免疫功能基本正常;市、县级AFP病例监测系统运转情况良好;该VDPV病例所在村OPV3接种率为75.86%,所在乡镇及周围相邻乡镇接种率OPV3接种率为85.56%～91.01%,平均为87.78%,不同乡镇差异无统计学意义(χ2=0.19,P>0.05);当地医院未发现AFP病例漏报;适龄儿童第一轮OPV应急免疫接种率为95.05%,第二轮则为98.85%;密切接触者、健康儿童和VDPV病例粪便标本经连续监测未再发现VDPV。结论当地脊髓灰质炎病毒学监测和流行病学监测系统的敏感性、及时性、完整性和准确性等指标良好;能够及时启动应急预案,果断实施突发公共卫生事件Ⅵ级应急响应,重点开展了应急免疫活动,适龄儿童OPV应急免疫接种率达到目标,整个应急处置过程严谨规范,快速有效。

广东省1997～1999年AFP病例中脊髓灰质炎病毒Ⅱ型疫苗衍生株分子生物学特征及致病性分析

目的 了解广东省 1997～ 1999年急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中脊髓灰质炎 (脊灰 )Ⅱ型疫苗衍生株病毒的分子生物学特征及致病性。方法 从脊灰病毒感染的细胞悬液中提取总RNA ,将RT PCR扩增的产物进行RFLP分析及采用Sanger末端双脱氧终止法进行序列测定 ,并结合病例流行病学资料进行分析。结果 1997～ 1999年共从AFP病例中分离到 2 5例脊灰Ⅱ型疫苗株病毒 ,占分离到脊灰病毒病例总数的 37.9% ,其中S2×S3型重组病毒 18例 ,占 72 % ,S2×S1型 1例 ,非重组病毒 6例。S2×S3型重组病毒致残留麻痹 8例 ,占 4 4 .4 %。未服苗儿童感染S2×S3重组病毒致残留麻痹率(6 0 0 % )高于非重组病毒的残留麻痹率 (33 3% )。结论 Ⅱ型疫苗株脊灰病毒普遍存在基因重组现象 ,以S2×S3重组病毒多见 。

1例脊髓灰质炎疫苗变异株病毒病例监测、诊断、处理分析

讨论脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的监测、诊断、处理方法与预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例发生的策略。根据此病例的个案调查、预防接种相关信息、临床诊断、治疗与脊髓灰质炎实验室病毒检测等方面的资料进行分析。脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例监测、诊断、处理仍需改进,须严格把握Ⅰ+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗接种禁忌证,进一步改进消灭脊髓灰质炎免疫策略,预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的发生。

菏泽市疫苗衍生脊髓灰质炎病毒患者的调查及控制对策

目的分析疫苗衍生脊髓灰质炎病毒患者发病原因,并探索控制对策。方法对发生VDPV的患者进行个案调查,采集大便标本分离病毒;开展急性弛缓性麻痹患者主动搜索;对患者所在地及相邻地区开展口服脊髓灰质炎减毒活疫苗快速评价;对密切接触者和周围健康儿童进行大便标本带毒情况调查;开展应急免疫。结果该病发病症状属于AFP,并从其标本中分离1型VDPV病毒和2型疫苗病毒,最终分类诊断为VDPV;患者密切接触者及周围健康儿童大便标本分离到脊髓灰质炎疫苗病毒,无VDPV;当地OPV3接种率偏低。结论该VDPV患者未在当地造成循环;今后务必引起高度重视,维持高水平的OPV3接种率,保持AFP监测系统的灵敏性,加强技术培训和督导检查。