原核表达技术在动物传染病疫苗生产中的应用

原核表达技术是基因表达中开发最早、使用最广泛的蛋白表达技术。因具有成本低廉,遗传背景清晰,培养周期短,可大量收获等特点,而在动物传染病疫苗的生产中广泛应用。论文主要总结了利用原核表达技术生产动物传染病疫苗时目的基因的选择,宿主菌的选择、以及疫苗的安全性和免疫效力的检测方法,并对原核表达技术在动物传染病疫苗生产中的安全性与制备成本的优势进行了讨论,以期为今后利用原核表达技术研发和生产疫苗提供参考和借鉴。

基于"双抗体夹心法"全自动酶免工作站检测方法的建立

目的 建立"双抗体夹心法"测定抗原含量全自动酶免工作站检测方法,并验证可替代手工操作.方法 根据"双抗体夹心法"检测试剂盒操作规程对全自动酶免工作站进行程序设计,除样品解吸附操作外,样品稀释、多次孵育、多次洗板、加入显示抗体与酶标抗体、加入显色液及酶标仪测定OD值均实现了自动化操作.同时进行了单板和多板自动化检测与人工检测的比对,并对显色底物的稳定性、回收试剂的稳定性及全自动酶免工作站操作精密度和方法精密度进行了考察.结果 单板和多板自动化检测与人工检测的结果比对偏差符合规定;显色液稳定考察结果表明可以提前加入显色液,无需中断程序;回收试剂稳定性满足多次使用,可有效降低检验成本;精密度考察结果表明采用全自动酶免工作站进行60批样品的测定,操作精密度和方法精密度均符合要求.结论 "双抗体夹心法"为半定量方法,步骤繁琐,手工操作影响因素多,并且该方法是目前多种疫苗进行效力检测的主要方法.通过开发全自动酶免工作站检测方法替代手工操作,可有效降低手工操作带来的偏差,提升检验结果的准确度和重现性,并显著提升检验效率.当前新冠疫情仍在全球肆虐,疫苗作为有效遏制疫情蔓延的最有效的武器,需求量的急剧增加对检验效率和检验准确性提出了更高要求.因此,开发全自动酶免工作站替代手工操作在提升检验效率、保障疫苗供应方面具有重要的意义.