RT-PCR法检测甲肝疫苗滴度

建立快速灵敏特异的甲肝减毒活疫苗滴度的ＲＴ－ＰＣＲ检测法。方法：以编码甲肝病毒（ＨＡＶ）ＶＰ３羧基端的基因区为目标区，运用ＲＴ－ＰＣＲ法对甲肝疫苗病毒进行检测，并与ＴＣＩＤ５０检测法进行比较。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法灵敏度和特异性均与ＴＣＩＤ５０法相似，...

实验室检测脊髓灰质炎疫苗滴度应注意的问题

Ｈｅｐ－２细胞是脊髓灰质炎（脊灰）病毒的敏感细胞之一，其敏感性受多种因素制约，本文以培养Ｈｅｐ－２细胞是否使用乳蛋白水解物及小牛血清的质量差异对脊灰糖丸疫苗滴度的影响进行了分析。结果表明：乳蛋白水解物的使用可使脊灰三价糖丸疫苗总滴度平均提高０．３６ＬｏｇＣＣＩＤ５０／粒，显著高于未使用乳蛋白水解物培养的Ｈｅｐ－２细胞。另外，小中血清的影响不容忽视，本文发现有些进口小牛血清对病毒的生长产生非特异性抑制，对脊灰病毒的抑制滴度可达１．９ＬｏｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ以上。这提示我们。组织培养试剂的更换应格外慎重，实验室标准体系的建立也是非常必要的。

猪乙型脑炎传代细胞活疫苗保护剂的效力试验

为了提高活疫苗的稳定性,便于活疫苗的保存和运输,本试验将猪乙型脑炎病毒分别与耐热冻干保护剂和传统冻干保护剂进行配比、冻干,制备活疫苗,分别将疫苗置2~8℃保存,定期测定其病毒含量,同时进行25℃、37℃耐老化试验和小鼠免疫原性试验。结果显示,疫苗在2~8℃条件下保存24个月,使用耐热冻干保护剂制备的疫苗病毒含量下降不超过1.0 Log PFU/mL,使用传统冻干保护剂制备的疫苗病毒含量下降超过3.0 Log PFU/mL;25℃常温保存2个月,使用耐热冻干保护剂制备的疫苗病毒含量下降不超过1.0 Log PFU/mL,而使用传统冻干保护剂制备的疫苗病毒含量下降约2.0 Log PFU/mL;37℃保存10 d,使用耐热冻干保护剂制备的疫苗病毒含量下降不超过1.5 Log PFU/mL,使用传统冻干保护剂制备的疫苗下降超过1.5 Log PFU/mL。使用耐热冻干保护剂制备的活疫苗和使用传统冻干保护剂制备的活疫苗对小鼠的免疫原性相当,半数有效剂量分别为10^(-3.12)/0.1 mL和10^(-3.11)/0.1 mL。试验结果表明,耐热冻干保护剂对病毒的保护效力明显优于传统冻干保护剂,具有良好的热稳定性,使用耐热冻干保护剂制备的活疫苗具有良好的免疫原性。

RT—PCR—ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究

目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用RT-PCR-ELISA，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取吸光度(A值)，判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度，并与常规细胞培养法(CCID50）比较。结果本方法与细胞培养法的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论RTPCR—EUSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。

草鱼赤皮病的免疫效应研究

采用0．5％福尔马林灭活草鱼赤皮病病原菌分别制成浸泡疫苗、注射疫苗和VI服微囊疫苗，然后以相应的疫苗分别浸泡（含菌数为1．5×107cfu／ml的菌苗溶液）3～5cm当年夏花草鱼、0．2ml／尾注射（含菌数为1．5×108cfu／ml的菌苗）10g左右的草鱼、16g／组·次微囊疫苗混合饲料（含2％微囊疫苗）投喂10g左右的草鱼。接种免疫后，分别于第21d、35d、49d、63d及77d，通过检测实验对象的血清和采用活菌攻毒的方法，探讨了灭活菌苗对预防草鱼赤皮病的效果。结果显示，所制疫苗3种免疫途径都有免疫效果。全菌灭活疫苗浸泡免疫、注射免疫和微囊化疫苗口服免疫的抗体滴度（凝集抗体效价）平均分别为1：19、1：190、1：62；用荧光假单胞菌活菌进行浸泡和注射攻毒，结果显示，3种免疫途径均产生良好的保护效应。浸泡和注射攻毒后其免疫保护率分别为41．6％和40．0％、83．4％和80％、58．4％和53．3％。

病毒性传染病

麻疹疫苗的热稳定性与2004年广西麻疹疫苗冷链状况调查研究——杨庆利，等（广西南宁广西壮族自治区疾病预防控制中心530021）；《广西预防医学》，2005，11（4）：199-201[目的：了解麻疹疫苗在不同温度条件下滴度降低的特征和维持有效滴度的时间期限，以及广西麻疹疫苗的冷链状况。方法：将麻疹疫苗置于不同环境温度下，间隔不同时间收集样品测定疫苗滴度变化。

吉林省1989～1996年口服脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗效力及冷链运转效果评价

对吉林省１９８９～１９９６年口服脊髓灰质炎（脊灰）疫苗（ＯＰＶ）和麻疹疫苗（ＭＶ）经运输、贮存后的效价，以及冷链运转效果进行了评价。检测结果表明，１９９０～１９９６年共检测省卫生防疫站冷库ＯＰＶ３５批，达到出厂合格滴度（５７０ｌｏｇＣＣＩＤ５０／人份）的２５批，占７１４３％；１９８９～１９９６年，检测省卫生防疫站冷库ＭＶ４９批，都达到合格滴度（３５ｌｏｇＣＣＩＤ５０／１ｍｌ）。从各级采样点检测的结果，与省卫生防疫站冷库相比较，无论是ＯＰＶ还是ＭＶ，差异均无显著性（Ｐ＞００５）。由链头（省卫生防疫站冷库）至链尾（接种点），两种疫苗均保持较高的效价，提示我省自１９８９年以来冷链运转良好，而且ＭＶ稳定性较好，优于ＯＰＶ。由于冷链的正常运转，使我省计划免疫工作质量有很大提高。ＯＰＶ、ＭＶ的接种率、免疫成功率均达９６％以上，发病率明显下降。