禽痘疫苗病毒中网状内皮组织增生病病毒5′LTR整合位点序列分析

参照国外发表的禽网状内皮组织增生病病毒（REV）5’长末端重复序列（LTR）在禽痘病毒（FPV）疫苗株基因组上的整合位点及相关序列，合成一对来自FPV的引物，从国内5个不同厂家生产的禽痘疫苗中经PCR均扩增到REV-5’LTR。通过序列比较发现，我国5个FPV疫苗毒株中REV-5’LTR整合位点与美国和澳大利亚的天然重组禽痘疫苗完全一致。其中，有3个的REV-5’LTR插入序列也与美国的Vac-3-Am株和澳大利亚的Vac-M3-Au株有100％的同源性。另2个中国疫苗毒株中的REV．LTR插入序列与美国疫苗毒株Vac-1-A。中的REV-LTR插入序列有99．6％的同源性。但是，这5个中国禽痘疫苗毒株中整合的REVLTR与中国近年分离到的REV野毒株HA9901的5’LTR的同源性只有75．4％-92．4％。

悬浮吸附法在人胚肺二倍体细胞(KMB17)中培养脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒

目的研究在KMB17细胞中培养脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒及其用于生产疫苗的可行性。方法应用悬浮吸附和添加血清的方法,在KMB17细胞上培养SabinⅠ、Ⅱ、中Ⅲ2型病毒,用微量法检测病毒滴度。结果在悬浮吸附加10%血清培养条件下,SabinⅠ滴度可达8.125 LgCCID50,SabinⅡ滴度可达7.5 LgCCID50,中Ⅲ2滴度可达7.583 LgCCID50。与传统的猴肾原代细胞培养的病毒滴度比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论可进一步研究应用KMB17细胞进行疫苗生产。

鸡马立克氏病疫苗免疫机理和不同疫苗病毒之间的保护协同作用(续)

４疫苗病毒之间的保护协同机理虽然１０多年来有关ＭＤ疫苗病毒之间的免疫协同作用已积累了很多资料，而且由此产生的Ⅱ、Ⅲ型和Ⅰ、Ⅲ型双价疫苗及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三价疫苗已在生产中广泛应用，但是关于发生这种协同作用的机理研究得很少。主要原因之一是进行这样的研究存在...

猪瘟疫苗病毒荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立一种检测猪瘟疫苗病毒(HCLV)含量的荧光定量PCR方法。【方法】用RT-PCR方法扩增HCLV基因200bp片段,构建含有该基因片段的重组质粒,对此重组质粒进行系列稀释后作为SYBR GreenⅠ荧光定量PCR模板,绘制定量检测HCLV的标准曲线。【结果】在(6.4×107~6.4×102)copies/μL模板浓度范围内,荧光定量PCR的扩增效率为92.2%,标准曲线的决定系数为0.9997。该方法的精确灵敏度为640copies/μL,重复性试验的变异系数小于2%,对牛病毒性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测结果均为阴性。临床检测结果显示,不同商品猪瘟疫苗之间的病毒载量存在明显差异。【结论】建立了1种具有良好特异性与敏感性的HCLV荧光定量PCR检测方法。

西安市1995-2008年检出脊髓灰质炎疫苗病毒的急性弛缓性麻痹病例流行病学分析

分析脊髓灰质炎(脊灰)病毒(PV)的急性弛缓性麻痹(AFP)病例流行病学特征,提高对疫苗衍生脊灰病毒(VDPVs)和循环的疫苗衍生脊灰病毒(cVDPVs)的认识,增加AFP病例监测系统敏感性。对西安市1995-2008年检出的PV阳性AFP病例进行流行病学分析。对疫苗变异PV采用VP1基因核苷酸序列测定方法进行分子生物性状分析。西安市1995-2008年共检出PV13株,检出率4.29%。分离到的PV以II、III型为主,AFP病例散在发生,无聚集性。未全程免疫儿童(全程免疫儿童,年龄以≤1岁儿童为主(84.62%)。麻痹残留率高达84.62%。脊灰相关病例(VAPP)的发生危险性为0.24/100万。型内特征鉴定有1株为疫苗变异PV,经VP1基因核苷酸序列测定未达到VDPV的分类标准。维持无脊灰阶段,存在着VDPV和发生cVDPVs的可能,在保持高水平脊髓灰质炎疫苗(OPV)免疫覆盖率的同时,高质量的AFP病例流行病学监测和病毒学监测工作,具有重要的现实意义。

黄热疫苗病毒17D株在Vero细胞上的适应性传代

目的 建立黄热疫苗病毒17D株的Vero细胞适应株.方法 将2批鸡胚黄热疫苗病毒在Vero细胞上进行2次蚀斑筛选,并连续传代培养,然后对获得的4株Vero细胞适应株病毒YFV-Vero（5）-A1、YFV-Vero（5）-A2、YFV-Vero（5）-B1和YFV-Vero（5）-B2进行稳定性和免疫原性检测.结果 4株Vero细胞适应株病毒可被黄热病毒（17D）猴免疫血清中和.在传代过程中,不同代次的病毒滴度稳定在6.90LgPFU/ml以上,高峰病变出现时间为5～7 d.家兔和小鼠的免疫血清中和抗体效价分别为1：640～1：5 120和1：640～1：2 560.结论 4株Vero细胞适应株病毒生物学性状稳定,免疫原性良好.

麻疹疫苗病毒感染对JEC生长的影响

目的探讨麻疹疫苗病毒(MV)对子宫内膜腺癌细胞系JEC的敏感性及其生长的影响。方法用倒置显微镜、HE染色法,观察麻疹疫苗病毒感染JEC的形态结构变化,以此确定JEC对MV感染的敏感性;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法动态监测MV对JEC增殖活力的影响。结果MV感染后第2天,即见形成形态巨大的多核巨细胞,HE染色可见在胞浆和胞核内有嗜酸性包涵体结构形成,MTT结果提示,感染后6d内,病毒对细胞的生长表现为促进作用,而且感染浓度越高,其促进作用越强。6天后,MV对细胞的生长开始发挥抑制作用,最终造成细胞死亡,其抑制作用于感染时间、浓度呈正相关。结论JEC是一株对MV敏感的细胞,MV能够抑制JEC的生长。

不同母源抗体水平胚蛋对繁殖鸡新城疫疫苗病毒的影响探讨

目前国内生产的鸡新城疫灭活疫苗基本上都是采用普通种蛋孵化接种病毒生产，因普通种蛋含有新城疫母源抗体，直接影响了疫苗的质量。为了弄清母源抗体水平对疫苗生产和质量的具体影响，本试验选择了三种不同母源抗体水平的种蛋进行试验。

猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻疫苗病毒培养条件的优化

猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）是引起猪病毒性腹泻的主要病原。猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗应用于预防猪传染性胃肠炎（TGE）及猪流行性腹泻（PED）。在疫苗的生产过程中,要将形成良好单层的细胞进行传代,扩大培养后用TGEV和PEDV两种病毒按5%的接毒量分别感染相对应的ST细胞和Vero细胞单层,37℃条件下培养,繁殖病毒,待细胞病变（CPE）达到80％以上时收获含病毒细胞培养液，病毒液的含毒量应不低于10^7.0TCID50／mL。

流感病毒裂解疫苗病毒种子批的制备和培养条件的研究

目的制备流感病毒裂解疫苗的主代和工作种子批,优化病毒培养条件提高产量,制备高质量的流感病毒裂解疫苗。方法将H1N1、H3N2和B型3株流感病毒分别接种SPF鸡胚,收获尿囊液,制备流感病毒裂解疫苗主代及工作种子批。流感疫苗工作种子批按不同稀释倍数、pH值、收获时间和冷胚时间优化病毒培养条件,制成疫苗,进行产量、安全性和免疫原性研究。结果通过优化不同型别流感病毒的培养条件,提高了抗原的血凝滴度,血凝滴度达到1∶1 024及以上,制备的疫苗具有良好的安全性和免疫原性。结论制备出了高产量和高质量的流感病毒裂解疫苗。

H3N2v疫苗病毒的鸡胚适应性突变能提高病毒收量,而又不失去抗原性和免疫原性

最近发现的人畜共患H3N2型变异甲型流感病毒（H3N2v）已导致有记录的343例与猪接触相关的人类感染。需要研制针对病毒的有效疫苗,这些病毒可能获得了在人群中的遗传稳定性。然而,从人体中分离的病毒在鸡胚中不能良好复制,这构成了基于鸡胚的疫苗生产的障碍。为了解决这个问题,我们想得到表面蛋白的鸡胚适应性突变以在保留免疫效力的前提下，增加候选疫苗病毒的产量。

绿地(过硫酸盐)消毒剂对三疫苗病毒株的杀灭试验报告

一、材料: 过硫酸盐(商品名:绿地)(广东海康兽药厂生产、批号971028),送检样品;11日龄非免疫鸡胚(中监所健康动物室提供);NDVI系种毒(来源于中监所,83.11.4冻干);IBVB_(87)种毒(来源于中监所,96.12冻干);IBDVB_(52)种毒(来源于中监所,92.12冻干);硫代硫酸钠(分析纯);无菌生理盐水(中监所培养基室提供)。

2019—2022年连云港市人乳头瘤病毒疫苗接种率和疑似预防接种异常反应监测分析

目的了解连云港市适龄女性人乳头瘤病毒(HPV)疫苗接种现状和疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,为评价疫苗安全性、制定疫苗接种策略提供依据。方法基于江苏省预防接种综合服务管理信息系统和中国AEFI监测管理信息系统,收集连云港市2019—2022年HPV疫苗接种和AEFI报告数据,分析HPV疫苗的首剂和全程接种率和AEFI报告发生率。结果连云港市2019—2022年9~45岁女性HPV疫苗首剂接种率为8.70%、全程接种率为5.20%,市区首剂接种率(9.41%)远高于郊县(3.37%),差异有统计学意义(χ2=17359.68,P<0.01);9~<16岁、16~<27岁、27~<36岁、36~45岁首剂接种率分别为2.08%、11.07%、10.71%、10.27%,全程接种率分别为0.07%、7.22%、6.31%、6.80%。HPV疫苗AEFI报告发生率为8.75/10万剂,其中一般反应为7.44/10万剂、异常反应为1.31/10万剂,分别以接种部位红肿(4.38/10万剂)、过敏反应(0.88/10万剂)为主,无严重AEFI病例发生。结论连云港市适龄女性HPV疫苗接种率总体偏低,不良反应发生率在预期范围内,疫苗安全性良好。建议加强对HPV和HPV疫苗的科普宣传,重点提高9~<16岁年龄组及农村地区女性HPV疫苗接种率。

新型冠状病毒疫苗的研究进展

新型冠状病毒感染是近年来全球最关注的紧急公共卫生事件之一,严重威胁着世界人民的生命健康。接种新型冠状病毒疫苗(简称新冠疫苗)是降低新冠病毒对人群危害的最经济有效的措施,各国积极开展新冠疫苗研发和接种工作,其中重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗、灭活疫苗、mRNA疫苗占据了主要市场。随着变异株传播能力和变异逃避能力增强,新冠疫苗的保护效果和持久性成为了当前的研究热点。该文就新冠疫苗的研究进展作一简要综述,以期为新冠疫苗的研发工作提供借鉴。

诺如病毒疫苗研究概况

诺如病毒(norovirus,NoV)是引发急性胃肠炎疾病的主要病原体之一。NoV易发生突变产生多种毒株,对人类健康造成严重威胁。由于缺乏成功的动物模型,抗NoV药物和疫苗的后续评价受到了限制,目前尚没有上市的疫苗用于NoV的预防。对NoV疫苗的研究进展进行了综述,重点阐述了病毒样颗粒(virus like particles,VLP)疫苗、病毒载体疫苗和基于P颗粒疫苗的研究现状和发展前景,以期为NoV疫苗的研发提供新思路。

我国预防儿童肠道病毒感染疫苗的临床研究进展

肠道病毒是单股正链RNA病毒,属于小RNA病毒科肠道病毒属,感染人的肠道病毒主要包括脊髓灰质炎病毒(polioviruse,PV)、柯萨奇病毒(coxsackievirus,CV)、肠道病毒68-71型(enterovirus,EV)、甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)[1]。肠道病毒感染能引起流行性胸膜痛、手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)、疱疹性咽炎、脊髓灰质炎、甲型病毒性肝炎等疾病。在美国,每年肠道病毒导致1000万~3000万人患病,高发于夏季和秋季[2]。肠道病毒是儿童感染的重要病原体,为家庭和社会带来严重的疾病负担。自1949年至今,脊髓灰质炎和甲型病毒性肝炎都是我国儿童肠道病毒感染导致的主要肠道传染病。2008年,我国EV71感染所致的HFMD暴发和流行,是迄今为止亚太地区最严重的一次HFMD流行。这些肠道病毒疾病的暴发和流行给流行地区带来了巨大的社会、经济负担。

新型冠状病毒疫苗接种对维持性血液透析合并COVID-19患者的价值

目的探讨接种新型冠状病毒疫苗(新冠疫苗)对维持性血液透析(MHD)患者新型冠状病毒感染(COVID-19)严重程度的影响。方法回顾性分析2022年12月至2023年1月安徽医科大学附属阜阳人民医院肾内科收治的166例终末期肾脏病行MHD合并COVID-19患者的临床资料。依据疫苗接种情况分为未接种组(接种0针)及接种组(接种≥2针)。比较两组患者临床特征及短期预后,并应用logistic回归模型分析患者住院及重症风险增加的独立危险因素。结果166例MHD合并COVID-19患者中,未接种组91例(54.8%),接种组75例(45.2%)。未接种组年龄与吸烟比例高于接种组(P<0.05)。感染新型冠状病毒肺炎后,患者临床表现多样,发热(73.1%)、乏力(65.6%)、食欲减退(57.5%)最常见。接种组使用激素、中心吸氧、住院、重症比例明显减少,治愈患者比例显著增加(P<0.05)。接种新冠疫苗可减少MHD患者住院(OR=0.364,95%CI:0.147~0.901)及重症(OR=0.182,95%CI:0.037~0.901)发生风险。合并糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是MHD合并COVID-19患者住院及重症风险增加的独立危险因素,年龄是其重症风险增加的独立危险因素。结论终末期肾脏病接受MHD合并COVID-19患者临床表现多样,合并糖尿病、冠心病患者住院及重症风险均增加,年龄增加患者重症风险增加,接种新冠疫苗可减少住院及重症风险。

湖北省新型冠状病毒疫苗与乙型肝炎疫苗前后接种的安全性回顾性分析

目的回顾性分析湖北省新型冠状病毒疫苗与乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗)前后接种(间隔60 d内)的疑似预防接种异常反应(adverse events following immunization,AEFI)发生情况,评价新型冠状病毒疫苗与乙肝疫苗前后接种的安全性。方法通过“湖北省免疫规划信息系统”筛选出2020—2022年有新型冠状病毒疫苗与乙肝疫苗前后接种(间隔60 d内)记录的3岁以上人群的个案数据,与“AEFI信息系统”的个案信息进行匹配;以AEFI发生率为评价指标,采用描述性流行病学方法分析AEFI特征。结果2020—2022年湖北省3岁以上人群新型冠状病毒疫苗与乙肝疫苗前后接种(间隔60 d内)合计581337剂次,共报告AEFI 157例次,总体AEFI发生率为0.270‰(罕见)。乙肝疫苗(CHO)和新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)前后接种AEFI发生率最高(5.629‰),不同疫苗组合AEFI发生率差异有统计学意义(χ^(2)=23.737,P=0.014)。中部地区AEFI发生率最高(0.395‰),不同地区AEFI发生率差异有统计学意义(χ^(2)=29.892,P<0.001)。不同前后接种时间间隔AEFI发生率差异无统计学意义(P>0.05)。一般反应中,临床诊断为发热、红肿、硬结的发生率最高(0.229‰),不同临床诊断AEFI发生率差异有统计学意义(χ^(2)=384.375,P<0.001);异常反应和偶合症中,不同临床诊断AEFI发生率差异均无统计学意义(P值均>0.05)。从人群分布来看,不同性别AEFI发生率差异无统计学意义(P>0.05);3~<18岁年龄组AEFI发生率最高(0.158‰),不同年龄组AEFI发生率差异有统计学意义(χ^(2)=85.473,P<0.001);职业为托幼儿童的AEFI发生率最高(0.100‰),不同职业AEFI发生率差异有统计学意义(χ^(2)=116.380,P<0.001)。结论新型冠状病毒疫苗与乙肝疫苗前后接种(间隔60 d内)的AEFI发生率属于罕见,新型冠状病毒疫苗与乙肝疫苗可以同时接种,疫苗安全性良好。

鸭瘟病毒载体疫苗研究进展

疫苗接种是控制疫病的有效方法一,其中病毒载体疫苗以其转染效率高、外源基因表达水平高等优点成为当前疫苗的重要研究方向。鸭瘟病毒基因非常适合作为插入和表达其他病原体的外源抗原基因,并且随着CRISPR/Cas9技术、细菌人工染色体技术、同源重组技术等基因编辑技术的发展,鸭瘟病毒作为最有前途的载体被广泛应用于传染病疫苗研发。经试验验证,基于重组鸭瘟病毒载体的禽细菌病疫苗以及禽流感、鸭病毒性肝炎等多种病毒病疫苗均具有较好的免疫效果和安全性。本文综述了鸭瘟病毒作为疫苗载体的特点、鸭瘟病毒的基因编辑技术和鸭瘟病毒载体疫苗应用研究进展情况,以期为进一步研发鸭瘟病毒载体疫苗提供理论基础,同时也为新发传染病预防提供新策略。