鸡新城疫活疫苗种毒HB1株和F株保存期试验

对不同保存年代的鸡新城疫活疫苗种毒HB1株(Ⅱ系)和F株(Ⅲ系)各3批进行了病毒含量测定和免疫原性试验。3批不同保存年代的鸡新城疫病毒HB1株和F株病毒含量均≥108.4EID50/0.1 mL,最小免疫量均≤2500 EID50。结果表明,鸡新城疫病毒HB1株和F株毒种在-70℃分别保存16年和19年,病毒含量和免疫原性仍符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》(二〇〇〇年版)规定。

应用电镜技术对犬五联疫苗种毒的检查

应用电镜技术对犬五联疫苗种毒的检查李成（中国农科院哈尔滨兽医研究所哈尔滨，１５０００１）李六金，阎庆润（中国人民解放军第四军医大学，西安）（辽宁省营口市兽医站，营口）犬五联疫苗种毒包括犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、狂犬病病毒。犬瘟热...

电镜技术对动物病毒性疫苗种毒的监测

电镜技术对动物病毒性疫苗种毒的监测李成（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨，１５０００）根据＂兽用新生物制品管理办法＂的规定，对病毒性疫苗毒种标准要求，在毒种中不应有支原体和外源性病毒。关于对这些非目的毒的检出，作者认为应用电镜技术是较好的方法。该...

一株1型非洲马瘟疫苗毒种的初步鉴定

为做好非洲马瘟疫苗的储备性研究,以更好应对我国周边地区非洲马瘟疫情传入风险,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心的一株1型非洲马瘟病毒鼠脑组织毒进行了复壮和细胞适应性培养,并对其病毒含量、特异性、对小鼠毒力等进行测定。结果显示,该毒种在Vero细胞连续传代至F10代后病变产生明显,病毒含量可稳定在10^(6.5) TCID_(50)/0.1mL以上;对小鼠毒力表现稳定,细胞适应毒也可达10^(6.5) TCID_(50)/0.1mL。根据OIE参考引物进行RT-PCR鉴定,序列比对证实该毒株为血清1型,与泰国毒株THA2020/01拥有99.7%的同源性。血清学试验结果表明,该毒株可被非洲马瘟1型特异性血清中和。本研究获得了一株Vero细胞适应毒,可作为良好的疫苗毒株候选株,适用于规模化生产,为疫苗储备奠定良好基础。

单克隆抗体在甲肝减毒活疫苗毒种检定中应用

目的 利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行甲型肝炎减毒活疫苗毒种外源因子检查及鉴别试验。方法 选择适宜的单克隆抗体浓度与甲肝病毒进行中和试验 ,观察单克隆抗体的中和作用 ;利用单克隆抗体中和毒种 ,进行外源因子检查 ,并应用于鉴别试验。结果 此单克隆抗体可中和 10 5细胞培养半数感染量 (CCID50 )甲肝病毒 ,比人、猴免疫血清的中和能力高约 10 0倍 ;将此高效价的单克隆抗体中和毒种后进行血吸附及非血吸附外源因子检查 ,结果均为阴性 ;此单克隆抗体还可用于毒种鉴别试验。结论 此高效价的单克隆抗体可代替人、猴免疫血清应用于毒种的外源因子检查及鉴别试验。

长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批的建立及疫苗的临床观察

目的:建立长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批;进行疫苗的临床观察.方法:将长47株麻疹减毒活疫苗毒种从26代连续传代至38代,其中27代定为原始种子批;29代定为主种子批;30～38代定为工作种子批.将不同代次的毒种制备疫苗,接种麻疹易感儿童,观察麻疹抗体的阳转率及GMT值.结果:新建立的长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批,符合<中国生物制品规程>2000年版的要求.27代、32代疫苗的阳转率均为100%,GMT值分别为56.3、44.2.结论:新建立的长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批,可作为制备麻疹减毒活疫苗的种子批.长47株麻疹减毒活疫苗毒种具有良好的免疫原性及安全性.

两种脾毒浓度对猪瘟活疫苗原料兔利用率的影响

将原料兔随机分成两组(A、B),每组各4 772只。A组接种猪瘟活疫苗种毒,每毫升含0.05 g猪瘟兔化脾毒;B组接种的种毒,每毫升含0.02 g猪瘟兔化脾毒。每组分成30个批次,每个批次确定一个反应率。结果表明,A组30个批次的平均反应率(等同利用率)为90.49%,变动幅度为±7.0%;B组的平均反应率为67.71%,变动幅度为±16.24%,差异极显著。同时,A组的变异系数低于B组,表明A组利用率批间稳定性优于B组。

鸡传染性支气管炎毒种保存期试验(一)

对３批不同时期制备的ＩＢＶＨ１２０毒种用ＳＰＦ鸡胚进行毒种保存期测定。用保存５年的ＩＢＶＨ１２０毒种经复壮后繁殖冻干毒种并进行全面鉴定。结果表明冻干毒种在－７０℃条件下保存４年、８年及１５年后毒种效价下降不明显，用保存１５年的ＩＢＶＨ１２０毒种复壮后繁殖、冻干的毒种其免疫原性、安全性等指标均符合规程规定标准。

2株H7N9亚型重组禽流感病毒的生物学特性和免疫原性研究

为评估经反向遗传构建的H7N9亚型重组禽流感病毒(AIV)H7-Re1株和H7-Re2株的生物学特性及免疫原性,本研究将这2株病毒分别以10^4倍稀释接种10日龄SPF鸡胚后,36℃培养,观察鸡胚存活情况并检测病毒HA效价,结果显示96 h时,2株病毒接种的鸡胚全部存活,培养至72 h时其HA效价均为9 log2,均显著高于亲本分离株。测定2株病毒的静脉内接种致病指数(IVPI),结果显示均为0。将2株病毒分别以10^6 EID50剂量鼻腔内接种5周龄SPF鸡,进行致病性试验,结果显示,接种后14 d内,2株病毒接种鸡均无临床症状,也不排毒。以2株病毒为种毒分别制备油乳剂灭活疫苗,以0.3 mL/只接种3周龄SPF鸡后3周时检测免疫鸡血清中HI抗体,结果显示,两种疫苗免疫鸡平均HI效价均可达到8.0 log2。于免疫后21 d,H7-Re1株免疫组鸡分别攻击10^6 EID50的H7N9亚型低致病力AIV(PG/SHH/S1069/13株)和10^5 EID50的高致病力AIV(CK/GX/SD098/17株),进行攻毒试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均全部存活,且无发病和排毒出现。H7-Re2株免疫组鸡于免疫后21 d分别以10^5 EID50的剂量进行高致病力H7N9亚型AIV(CK/GX/SD098/17株)和H7N2亚型AIV(DK/FJ/SE0195/18株)的攻毒保护试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均不发病、不死亡、不排毒。以上结果表明,以H1N1亚型A/Puerto Rico/8/34株病毒为内部基因供体、经反向遗传学方法构建的H7-Re1株和H7-Re2株均具有生长滴度高、生物安全性高和免疫原性好的特点。本研究为H7N9亚型禽流感疫苗的研制和应用奠定了基础。

腮腺炎减毒活疫苗毒种S79株工作种子批猴体神经毒力试验

目的:考察腮腺炎减毒活疫苗毒种S79株工作种子批是否有潜在神经毒力作用。方法:受试物接种于MV-IgG抗体阴性的恒河猴两侧丘脑,检测血清抗体及AST和ALT含量,观察中枢神经系统等临床症状及脑、脊髓主要部位的病理变化。结果:丘脑注射给药后,观察期未见试验猴中枢神经系统症状和死亡;毒种组猴注射给药后摄食、体重波动正常,少数猴短时体温升高,对血清AST,ALT无影响;观察结束,毒种组猴抗体阳转率100%,对照组猴抗体阴性;所有猴丘脑及周围组织具明显针迹通路或针迹反应,组织病理学镜检除毒种组猴局部脑组织有轻微局灶性淋巴细胞浸润和血管套现象,未见其他组织形态学异常和病变。结论:腮腺炎减毒活疫苗毒种S79株工作种子批丘脑注射后具明显免疫原性,除有轻微局部脑组织炎性反应,无明显神经毒力临床症状和其他毒副反应。

疫苗毒种支原体检测中去除本病毒干扰方法的探索

目的探索疫苗毒种支原体检测中去除本病毒干扰的方法。方法分别采用非敏感细胞直接接种法、特异性抗血清中和法及离心加中和法处理21株疫苗毒种样品后,评价去除本病毒干扰的效果。结果21株疫苗毒种中,13株可通过非敏感细胞法去除本病毒干扰;6株可通过特异性抗血清中和法去除干扰;2株可通过离心加中和法去除干扰。应用上述3种方法检测161批疫苗毒种,均能有效去除本病毒干扰。结论非敏感细胞直接接种法、特异性抗血清中和法及离心加中和法可针对不同毒种去除本病毒的干扰,适用于疫苗毒种的支原体检测。