弓形虫DNA疫苗联合诱导BALB/c小鼠保护性免疫力的研究

研究弓形虫表面抗原P30和P22 DNA疫苗联合诱导BALB/c小鼠的保护性免疫作用。48只BALB/c小鼠随机分成4组:A组(NS对照组),肌注生理盐水100μl/鼠;B组(空质粒对照组),肌注pBK-CMV 100μl/鼠(1mg/ml);C组(pBK-P30免疫组)肌注pBK-P30 100μl/鼠(1mg/ml);D组(pBK-P30&pBK-P22联合免疫组)分别肌注pBK-P30和pBK-P22各100μl/鼠(1mg/ml),免疫后5周,通过ConA刺激,MTT法测定免疫鼠脾脏T淋巴细胞转化率,使用间接免疫荧光法,用流式细胞仪对CD4+、CD8+T细胞群进行测定。免疫后10周,免疫鼠腹腔注射弓形虫速殖子攻击感染。结果表明,ConA刺激小鼠脾T淋巴细胞均发生增殖反应,疫苗免疫组略高于两对照组,但4组之间的差异均无显著性(P>0.05)。T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+动态分析,CD4+T细胞在各组的增殖均不明显(P>0.05),但两免疫组CD8+T细胞数量升高,CD4+/CD8+比值降低,与空质粒pBK-CMV对照组和NS对照组之间差异均有显著性(P<0.05,P<0.01),pBK-CMV对照组与NS对照组之间差异也有显著性(P<0.01),两免疫组之间差异无显著性(P>0.05)。弓形虫速殖子攻击感染,联合免疫组平均存活时间较两对照组均延长(P<0.05)。但两免疫组间、pBK-P30免疫组与两对照组之间差异无显著性(P>0.05)。弓形虫DNA疫苗能诱导BALB/c鼠产生特异性细胞免疫应答及部分抗虫免疫保护作用,此两种DNA疫苗联合免疫有一定的免疫保护效果。

猪支原体肺炎弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果评估

为研究猪支原体肺炎(MPS)弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果,本研究选取40头10日龄猪肺炎支原体(Mph)阴性仔猪,随机平均分为4组。A组肌肉注射灭活疫苗;B组喷鼻弱毒活疫苗;C组肌注灭活疫苗同时喷鼻弱毒活疫苗;D组为空白对照。疫苗免疫后每天观察猪群的整体状态,于免疫后3 d、30 d、90 d、180 d,分别采集鼻腔棉拭子和血液样品,进行应激相关指标以及相关疾病的抗体检测,并于免疫后180 d进行MPS病原检测。仔猪屠宰时称重,采集其完整肺脏,计算其平均增重并进行肺脏病变评分。结果显示:C组猪生长状况最好,猪群支原体感染率低、抗体水平高、平均增重高并且肺脏病变程度低,表明采用MPS灭活疫苗和弱毒活疫苗联合的免疫效果更好,并且未引起严重的应激反应。本研究对MPS疫苗的合理应用提供了实验依据。

高原型藏羊多疫苗联合免疫与单苗免疫效果对比试验

对成年藏羊进行O型口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘组合和口蹄疫、小反刍兽疫、布鲁氏菌病组合联合免疫,与单苗免疫效果进行比较。结果显示,2种组合的安全性较好,未发生明显免疫副反应,同时表现出了与单苗一致或稍好于单苗的免疫效果,抗体合格率达到或超过了国家规定的70%的标准,相互干扰和拮抗作用不明显。

恩替卡韦(ETV)与“重组乙型肝炎疫苗联合GM-CSF”序贯治疗CHB患者的疗效及安全性分析

目的分析恩替卡韦(ETV)与"重组乙型肝炎疫苗联合GM-CSF"序贯治疗CHB患者的疗效及安全性。方法本次研究的对象均为2015年6月至2017年5月来我院就诊的CHB患者,选取HBeAg阳性患者60例,HBeAg阴性患者60例,HBeAg阳性患者和HBeAg阴性患者均随机分为对照组和治疗组,每组为30例,对照组患者采用ETV单药治疗,治疗组在继续使用ETV单药治疗(服用方法同前)的同时加用重组乙型肝炎疫苗60μg及GM-CSF 150μg三角肌皮下注射。结果 HBeAg阳性治疗组、HBeAg阴性治疗组的ALT和AST值均治疗12周恢复正常,HBeAg阳性对照组的ALT和AST值均治疗48周恢复正常,HBeAg阴性对照组的ALT和AST值均治疗72周恢复正常;HBeAg阳性治疗组患者治疗12、24、48周的HBeAg转阴率分别为33.3%、70.0%和93.3%,比对照组患者对应时间的HBeAg转阴率更高,比较具有统计学意义(P<0.05);HBeAg阳性治疗组患者治疗12、24、48周的HBV DNA转阴率分别为83.3%、93.3%和100.0%,比对照组患者对应时间的HBV DNA转阴率更高,比较具有统计学意义(P<0.05);所有患者在治疗期间都没有出现重症肝炎、肝功能失代偿等不良反应,说明恩替卡韦与"重组乙型肝炎疫苗联合GM-CSF"序贯治疗CHB的安全性高。结论恩替卡韦(ETV)与"重组乙型肝炎疫苗联合GM-CSF"序贯治疗CHB患者的疗效显著,安全性高。

口服轮状病毒减毒活疫苗与麻疹-风疹联合减毒活疫苗联合接种的免疫原性和安全性研究

目的:探讨口服轮状病毒减毒活疫苗(oral live attenuated rotavirus vaccine,ORV)与麻疹-风疹联合减毒活疫苗(measles and rubella combined attenuated live vaccine,MR)联合接种的可行性,为制定免疫规划程序提供可靠的科学依据。方法:设两种疫苗同时接种组和单苗接种组,观察疑似预防接种异常反应(AEFI)发生情况,接种前后、联合接种与单独接种组之间抗体几何平均滴度/浓度(GMT/GMC)、抗体阳性率和阳转率的差异。结果:各接种组临床反应都轻微,实验组与各对照组免前免后同种抗体GMT/GMC、阳性率,以及免后抗体阳转率,其差异均无显著意义(P>0.05)。结论:ORV与MR同时接种未发现严重异常反应和相互干扰免疫应答,可以同时接种。

口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫临床效果评估

为探索口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫在猪场中的临床应用,研究进行了实验室和猪场临床效果评估,通过实验室对疫苗混合后的物理性状、疫苗效价变化进行探讨,证明联合免疫的可行性;分别选取40日龄的保育猪(2 500头)、后备母猪(1 000头)、经产母猪(1 000头)作为试验对象,将其分成5组(即:A、B、C、D、E组)通过检测口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病抗体效价来评估猪群的临床免疫效果。结果显示,3种疫苗联合免疫后效果不受影响,免疫副反应率比较低,猪只免疫次数以及人猪接触频率显著降低,特别是猪群进行二免后抗体效价更高,免疫持续期不受影响,此次研究结果适宜临床推广。

呼吸道感染细菌联合疫苗制备及其免疫效果评价

目的探讨呼吸道感染细菌联合疫苗对免疫效果的影响。方法分离培养6种呼吸道感染细菌(溶血性链球菌、流感嗜血杆菌B型、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯菌),制成联合疫苗。根据联合疫苗质量浓度分为对照组(生理盐水)、低水平组(0.1 g/L疫苗)、中水平组(0.3 g/L疫苗)及高水平组(0.5 g/L疫苗)。各组疫苗作用于人外周血单个核细胞,检测外周血单个核细胞增殖活性、淋巴细胞表型的变化及细胞因子水平。各组疫苗作用于SPF级小鼠,测定各组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬指数及血清溶血素含量。结果人外周血各组单个核细胞增殖活性、γ干扰素、白细胞介素-2水平均随时间延长而升高,且在相同时间,联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P<0.05)。与对照组比较,低、中、高水平组单个核细胞CD4+、CD19+水平升高,CD8+水平降低,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平变化越明显(P<0.05)。与对照组小鼠比较,低、中、高水平组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数、溶血素水平升高,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P<0.05)。结论呼吸道感染细菌联合疫苗有利于提高细胞及体液免疫能力,且联合疫苗质量浓度为0.5 g/L时,可获得的免疫效果最佳。

2016—2022年武汉市0~6岁儿童出生队列DTaP-IPV/Hib联合疫苗接种情况动态分析

目的:分析2016—2022年武汉市0~6岁儿童无细胞百白破疫苗、脊髓灰质炎灭活疫苗、b型流感嗜血杆菌疫苗联合疫苗(DTaP-IPV/Hib联合疫苗,简称五联疫苗)的接种情况和其对脊髓灰质炎疫苗(Poliovirus Vaccine,PV)的替代情况。方法:通过湖北省免疫规划信息系统儿童接种数据建立武汉市2016—2022年0~6岁出生队列,进行五联疫苗接种率和PV替代率的流行病学分析。结果:截至2022年12月31日,武汉市0~6岁儿童出生队列五联疫苗1~4剂累计接种率分别为22.87%、21.46%、20.54%和14.28%,五联疫苗覆盖率在6.94%~34.67%之间。随着出生年份的后移五联疫苗各剂次接种率均呈上升趋势,各出生队列五联疫苗1~4剂接种率逐渐降低。武汉市各辖区之间五联疫苗1~4剂接种率差异较大。五联疫苗1~4剂对PV的替代率分别为25.57%、22.45%、22.80%和14.62%,各剂次替代率随出生年份后移均逐年上升。结论:武汉市五联疫苗接种率呈逐年缓慢上升趋势,但不同辖区间分布不平衡,其对PV的替代率在合理范围,建议通过强化疫苗接种健康宣教、增加政府投入、加强疫苗管理等措施进一步提升五联疫苗全程接种率。

真实世界12岁以下儿童接种麻腮风联合减毒活疫苗后30天内单纯性热性惊厥发生风险分析

目的分析甘肃省12岁以下儿童接种麻腮风联合减毒活疫苗(MMR)后30 d内发生单纯性热性惊厥(SFS)特征。方法筛选甘肃省2021年1月1日至2023年12月31日电子病历库中诊断为“热性惊厥”个案,利用病例身份信息匹配甘肃省免疫规划信息系统中该病例的接种信息,采用观察性流行病学方法分析12岁以下儿童出现SFS的流行特征及接种MMR 30 d内SFS发生风险。结果共纳入10614例SFS儿童患者,12岁以下儿童SFS总体发生率为92.42/10万,其中12~24月龄儿童发生率最高,为297.67/10万,男性儿童发生SFS风险高于女性儿童(RR值为1.61,P<0.001)。接种MMR后30 d内发生SFS风险较未接种该疫苗的高(RR值为2.66,P<0.001)。接种第1剂次的发生率(27.98/10万)较第2剂次(18.48/10万)高,12~24月龄儿童在接种第1剂次MMR 6~14 d SFS发生风险较<12月、25月~6岁组高(RR值分别为4.06和2.64,P<0.001)。结论12~24月龄儿童在接种MMR后6~14 d SFS发生风险增加,以12~24月龄儿童最为常见,应高度关注高风险人群并加强对SFS监测。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗的多糖含量

目的 采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定吸附无细胞百(三组分)白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗(以下简称DTac P-s IPV-Hib)中多糖含量,并对方法进行验证。方法 在1 ml样品中加入0.02 g柠檬酸钠,振荡混匀后,置于37℃保温24 h,4000×g离心5 min收集上清液,稀释后加入6 mol/L盐酸,100℃下加热2 h,冰浴10 min后加入0.8 ml氢氧化钠(1 mol/L)溶液用于终止酸水解。采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法根据检测信号峰面积计算对应水解荚膜多糖(PRP)含量,通过PRP占多糖含量干重的41.3%计算出总的多糖含量。结果 核糖醇参考品浓度在0.1~1.5μg/ml范围内标准曲线r2>0.99,检测下限可达10ng/ml。核糖醇加标回收率均在95%~105%;对高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法检测多糖的重复性和中间精密度进行验证,相对标准偏差(RSD)均小于5%,方法专属性和耐用性良好。结论 使用柠檬酸钠作为解吸附剂,与高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法相结合可用于DTac P-s IPV-Hib中Hib多糖的含量检测,为产品的质量控制和稳定性研究提供参考。

潍坊市2017—2021年无细胞百白破联合疫苗预防接种安全性评价

目的分析潍坊市2017—2021年无细胞百白破联合疫苗(DTaP)疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价DTaP预防接种的安全性。方法通过全民健康保障疾控信息系统-免疫规划信息系统,收集潍坊市2017—2021年报告DTaP引起的AEFI个案和接种数据,进行描述性流行病学分析。结果①此期间共报告DTaP引起的AEFI有2100例,报告发生率为93.00/10万剂;其中一般反应2095例(99.76%,92.78/10万剂),异常反应2例(0.10%,0.09/10万剂),偶合症3例(0.14%,0.13/10万剂);没有发现疫苗质量和接种单位违反操作规程引发的接种事故。②年龄分布中,DTaP引起的AEFI均在0~9岁,其中<1岁占43.52%,这部分人群以3~<8月龄为主,占<1岁病例数的82.60%。③每月均有DTaP引起的AEFI个案报告,以4—7月份较多,共1054例,占50.19%。④接种疫苗后以≤1天发生反应为主,占86.86%。⑤接种DTaP4的AEFI报告发生率最高,为172.97/10万,后依次为DTaP3(104.83/10万)、DTaP2(42.10/10万)、DTaP1(39.54/10万)。⑥一般反应中,发热、红肿、硬结报告发生率分别为55.89/10万剂(1262/2258044)、43.31/10万剂(978/2258044)、19.62/10万剂(443/2258044)。结论潍坊市2017—2021年DTaP引起的AEFI报告病例主要为一般反应,疫苗安全性良好。

联合疫苗研发关键技术

目前国内外已上市的各种联合疫苗有几十种,其主要目标是简化免疫程序、提高疫苗接种的便利性和依从性,从而提高疫苗接种率,为人类提供更全面更及时的保护。联合疫苗按照所含抗原种类分为细菌蛋白组成的联合疫苗、细菌多糖组成的联合疫苗、病毒组成的联合疫苗以及不同类别成分组成的联合疫苗,如蛋白-多糖成分组合、蛋白-病毒成分组合、蛋白-多糖-病毒成分组合等。本文从联合疫苗开发的基本原则、研发关键技术路线及研发所面临的挑战几个方面进行综述,为我国新型联合疫苗的研发策略提供技术参考。

2018—2021年扬州市无细胞百白破联合疫苗预防接种安全性评价

目的:分析扬州市无细胞百白破联合疫苗(DTap)接种后出现疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征及分布情况,为进一步评价DTaP疫苗预防接种的安全性提供依据。方法:通过中国免疫规划信息管理系统的AEFI监测系统收集2018年1月1日—2021年12月31日扬州市报告的DTaP疫苗相关AEFI个案数据,采用描述流行病学方法进行分析。结果:2018—2021年扬州市共接种DTaP疫苗365215剂次,共报告DTaP疫苗相关AEFI个案1055例,年均报告发生率为288.87/10万剂次,其中,一般反应1015例,占96.21%,报告发生率为277.92/10万剂次,临床表现主要为发热、红肿、硬结;异常反应38例,占3.60%,报告发生率为10.40/10万剂次,主要为过敏性皮疹和荨麻疹;偶合症最少,共2例,占0.19%,报告发生率为0.55/10万剂次,均为热性惊厥;无心因性反应、疫苗质量事故及预防接种事故发生。9个县(市、区)各年度均有DTaP疫苗相关AEFI个案报告,其中,报告发生例数最多的为江都区,为232例;各月份均有DTaP疫苗相关AEFI个案报告,其中5、6、7月份报告例数较多。1055例AEFI个案中,男性621例,女性434例,男女性别比为1.43∶1;年龄分布主要以0岁组(271例)和1岁组(731例)病例为主;97.91%的病例随访结果为好转或痊愈。结论:扬州市DTap疫苗预防接种安全性较好,监测系统敏感性较高。

人用流感禽流感联合疫苗的研究

目的了解人流感疫苗和H5N1禽流感疫苗联合后的安全性和疫苗之间产生抗体的相互干扰现象。方法制成禽流感单价疫苗、人流感3价疫苗和流感禽流感联合4价疫苗,免疫家兔,测定中和抗体和血凝抑制抗体,并接种小鼠和豚鼠,观察毒性反应和过敏反应。结果人流感疫苗和禽流感疫苗的联合,基本上没有发生疫苗对各自抗体产生的干扰;接种动物无毒性反应。结论 2种疫苗的联合是完全可能的。

吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌联合疫苗的安全性和免疫原性

研究吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎和b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP-IPV/Hib)的安全性和免疫原性。方法 运用随机数字表法将2021.1-2022.12我院疫苗接种婴儿(n=200)分为联合疫苗组、非联合疫苗组,每组各100例,前者接种五联疫苗(DTaP-IPV/Hib),后者同时在不同部位分别接种吸附无细胞百白破联合疫苗(DTaP)、脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、b型流感嗜血杆菌结合疫苗(Hib)。比较各组免疫原性及安全性。结果 联合疫苗组所有婴儿对百日咳、白喉、破伤风、各型脊髓灰质炎、b型流感嗜血杆菌均产生血清学保护浓度抗体;两组抗白喉抗体、抗破伤风抗体、抗脊髓灰质炎抗体、抗b型流感嗜血杆菌荚膜多糖抗体、抗百日咳抗体滴度血清学保护浓度抗体相似;而联合疫苗组抗丝状血凝素抗体滴度98.06%显著高于非联合疫苗组89.15%。联合疫苗组不良反应发生率14.39%显著低于非联合疫苗组27.68%(P<0.05)。结论 对3月龄-18月龄婴幼儿采用(DTaP-IPV/Hib)联合疫苗,可确保免疫原性的同时保障接种安全性。

国产冻干麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的接种反应和免疫原性观察

目的观察冻干麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的接种反应和免疫原性。方法分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期进行,分别选择7～15岁和8～18月龄儿童接种国产MMR疫苗,同时设进口MMR疫苗、单价麻疹、腮腺炎、风疹疫苗对照,进行接种反应和免疫原性观察。结果Ⅰ期7～15岁接种国产MMR疫苗的11人中,仅3人发生局部弱反应,反应率为27.3%;8～11月龄接种国产MMR疫苗的26人中,发热率和皮疹反应率分别为11.5%、15.4%,其中高热率为3.8%。Ⅱ、Ⅲ期观察的1188名8～18月龄儿童中,接种国产MMR疫苗发热率为10.69%,皮疹反应率为3.64%,局部反应率为0.44%,其他反应率为0.22%。与对照疫苗比较,仅发热率高于腮腺炎疫苗及风疹疫苗,且差异有统计学意义,其他反应差异均无统计学意义。接种国产MMR疫苗后,麻疹、腮腺炎、风疹HI抗体阳转率和抗体GMT分别为99.5%、85.9%、100%和1∶57、1∶4.2、1∶890。与对照疫苗比较,麻疹抗体GMT国产MMR疫苗高于进口MMR疫苗和麻疹疫苗,抗体阳转率国产MMR疫苗高于进口MMR疫苗,且差异有统计学意义;腮腺炎抗体GMT国产MMR疫苗低于进口MMR疫苗,且差异有统计学意义,其他各疫苗组差异均无统计学意义。结论国产MMR疫苗具有良好的安全性和免疫原性。

成人乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者再接种甲乙型肝炎联合疫苗的免疫效果

目的探讨成人乙型肝炎疫苗免疫对策。方法对多次免疫后抗-HBs仍为阴性的228名研究对象接种甲乙型肝炎联合疫苗,按0、1、6个月20μg×3免疫程序进行免疫,于210d抽血,采用放射免疫法进行抗-HBs检测。结果228名乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者,接种甲乙型肝炎联合疫苗后,抗-HBs阳性172名,阳转率75.44%,抗体几何平均滴度(GMT)为197.20m IU/ml。结论对成人乙型肝炎疫苗多次免疫无应答者,增加接种剂量或接种甲乙型肝炎联合疫苗,可提高抗-HBs阳转率。