产苦马豆素的疯草内生真菌研究进展

含苦马豆素(Swainsonine, SW)的棘豆属(Oxytropis DC.)和黄芪属(Astragalus L.)植物称为疯草,其共生着一种疯草内生真菌(Alternaria Section Undifilum oxytropis)。疯草中的SW由其内生真菌产生,而非由宿主植物产生。SW是一种吲哚里西啶类生物碱,牲畜食用疯草后引起中毒,严重者死亡,对我国畜牧业危害巨大。本文对棘豆属疯草的分类与分布,疯草内生真菌的分类、分布、传播方式及形态学差异,不同真菌中SW的合成相关酶及合成途径的研究进展进行综述,讨论了SW合成途径及其关键酶的作用,旨在为疯草内生真菌的研究、利用及SW合成途径的明晰提供参考。

疯草灵解毒缓释丸和疯草毒素疫苗防治效果的比较

目的比较"疯草灵解毒缓释丸"和疯草毒素疫苗对绵(山)羊疯草中毒的防治效果。方法 16只藏系绵羊随机分成试验组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ和对照组。对试验组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ每只羊分别投服疯草灵解毒缓释丸1丸、2丸和3丸,对照组不投服。18只山羊随机分为未免疫攻毒对照组、免疫攻毒Ⅰ组和免疫攻毒Ⅱ组,未免疫攻毒对照组不接种疯草毒素疫苗,免疫攻毒组接种疯草毒素疫苗。通过临床症状、血清酶学和生化指标的变化来评价两种方法的预防效果。结果各处理组血清α-甘露糖苷酶活性和血清AST活性的变化,说明疯草毒素疫苗免疫动物后,能有效保护苦马豆素对山羊肝、心和肾等组织器官的损伤。结论两种方法对绵(山)羊疯草中毒都具有明显的预防效果,其中以缓释丸预防简便实用,成本低廉,易于推广。

疯草灵缓释丸对绵羊黄花棘豆中毒的预防效果研究

将16只藏系绵羊随机分成4组，分别为试验组Ⅰ、试验组Ⅱ、试验组Ⅲ和对照组，每天以10g／kg·BW的量饲喂黄花棘豆干草粉，试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ每只羊分别投服“疯草灵缓释丸”1丸、2丸和3丸，对照组不投服。每天观察临床症状，出现棘百中毒症状后停止饲喂黄化棘豆T草粉，试验‘前及试验期间每7d采血1次，做Ⅱll清酶学和血清乍化指标检验。结果表明：对照组16～21天H={现棘豆中毒症状，试验组出现症状的时间分别为：试验组i33～48天、试验组Ⅱ75～77天、试验组11175～77天；血清α-甘露精苷酶活性测定结果，试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ第14天前与对照组比较差异不显著（P〈0．05），从第14天开始与对照组比较升高差异显著（P〈0．05）；灭门冬酸氨基转移酶活性测定结果，试验组Ⅰ从第14天开始与对照组比较下降，试验组Ⅱ和试验组Ⅲ从第7天开始与对照组比较下降，差异显著（P〈0．05）。

疯草研究进展

疯草是指含有苦马豆素的豆科黄芪属和棘豆属有毒植物,动物疯草中毒病是危害草原畜牧业最严重的问题之一.苦马豆素是疯草的主要毒性成分,它能抑制动物细胞α-甘露糖苷酶和甘露糖苷酶Ⅱ的活性,影响低聚糖的代谢和糖蛋白的加工,导致低聚糖蓄积和糖蛋白合成障碍.中毒动物表现为行为异常、瘫痪、不育、流产、体质量下降,严重的发生死亡,造成巨大的经济损失.本文主要对疯草的毒性成分、中毒机理、化学防除和脱毒利用等方面的研究进行了综述,旨在为疯草中毒病的防治和疯草的利用提供思路和认识.

中国西部天然草地疯草生态及动物疯草中毒研究与防控现状

西部天然草地是中国草地畜牧业的重要生产基地,也是其重要的绿色生态屏障,对维护生态安全和食物安全,保护人类生存环境,实现草地永续利用,具有重要战略意义。长期以来,由于草地干旱、超载过牧、盲目开垦等自然和人为因素的影响,以及草地基础建设投入不足和管理滞后,导致草地大面积沙化和毒草化。特别是近几十年来,草地毒害草的迅速蔓延,造成草地植被群落和生物多样性减少,草地植被单一,沙漠化等生态学问题,严重影响了草地生态平衡以及牧区畜牧业的可持续发展。"疯草"已成为西部天然草地主要毒害草之首,每年给畜牧业造成直接经济损失超过几十亿元。本文就中国西部天然草地疯草研究历史、种类与生态分布、毒性灾害状况、毒性成分与毒性机理、灾害及综合防控技术进行综述,并提出今后疯草研究中应注意的问题,对认识疯草在天然草地中的生态作用和疯草灾害综合防控具有重要指导意义。

西藏3种疯草中合成苦马豆素内生真菌的鉴定

【目的】从西藏毛瓣棘豆、冰川棘豆、茎直黄芪中分离内生真菌。【方法】应用薄层色谱法、气相色谱、气相色谱-质谱联用法检测内生真菌中的苦马豆素(swainsonine,SW),筛选可生成SW的内生真菌;应用聚合酶链反应对真菌的ITS序列和IGS序列进行扩增,并根据ITS序列信息构建系统发育树,确定其种属分类;对IGS序列进行限制性酶切,并分析酶切产物。【结果】从3种疯草中分离到可以产生SW的4株内生真菌,各菌的形态、ITS序列的同源性与埃里格孢属真菌较为接近,系统发育分析表明4株真菌均为棘豆埃里格孢菌。ITS序列和IGS序列的限制性片段的分析表明,4株真菌遗传距离较近,但仍存在种间变异,可能为棘豆埃里格孢菌的不同亚种。【结论】本研究结果为探讨内生真菌合成SW机理研究奠定了基础,为动物疯草中毒病的防除和疯草资源的合理利用提供了新思路。

薄层扫描测定5种疯草中苦马豆素含量

称取甘肃棘豆粉 2 0 0 g,变异黄芪粉 2 0 0 g,茎直黄芪粉 171g,毛瓣棘豆粉 174 g,冰川棘豆粉 2 0 0 g,甲醇渗漉 ,回收甲醇 ,浸膏用 1m ol/ L HCl溶解 ,过阳离子交换柱 ,洗脱液 75℃水浴挥干 ,残留物先用甲醇溶解 ,回收甲醇后再用氨性氯仿溶解 ,回收氯仿 ,分别得到总生物碱 2 14、117.5、75 .4、33.1、10 .5 mg。甲醇溶解总生物碱与苦马豆素标准品 ,定量点样于硅胶板 ,显色后薄层扫描得出甘肃棘豆、变异黄芪、茎直黄芪、毛瓣棘豆和冰川棘豆中苦马豆素的含量分别为0 .10 6、0 .0 30、0 .0 5 3、0 .0 32、0 .0 2 0 mg/ g。

疯草及毒性成分研究进展

疯草是指含苦马豆素的豆科黄芪属和棘豆属有毒植物,能引发家畜疯草病。疯草的分布比较广泛,属于世界性有毒植物,近年来疯草蔓延迅速,在一些地区已经造成草地毒草化,频繁出现放牧家畜中毒死亡现象,严重威胁草地畜牧业发展。研究表明,疯草的毒性与其含有的苦马豆素有关,但苦马豆素却不是疯草自身代谢产物,而是疯草携带内生真菌的代谢产物,此外苦马豆素还是一种良好抗肿瘤药物。笔者结合国内外相关研究对疯草的分布、危害、防治及毒性成分研究进展进行综述,并对疯草分类、研究地域及利用前景进行了讨论。

美国动物疯草中毒诊断与防治技术研究进展

疯草是美国西北部草原上分布最广泛的有毒植物,约有370多种,其中含有毒生物碱苦马豆素的疯草有24种,造成家畜中毒灾害的有11种。动物采食疯草后不仅引起中毒死亡,还影响其繁殖和畜种改良。此外,疯草的蔓延使草地利用率降低,给草原畜牧业造成巨大经济损失,严重威胁当地畜牧业的发展。为减少疯草中毒造成的经济损失,美国投入大量人力、物力和财力致力于疯草的研究,目前已经在疯草的生物学、生态学和生理学、毒物学与毒理学、临床诊断与防治技术等方面取得重大进展。就美国疯草的种类及生态分布、中毒诊断与防治技术方面的最新研究进展进行综述。

不同因素对疯草内生真菌合成苦马豆素的影响

研究不同因素对疯草内生真菌——Undifilum oxytropis合成苦马豆素的影响,筛选出显著影响U.oxytropis苦马豆素合成的因素。将U.oxytropis分别接种到不同pH或不同浓度聚乙二醇(PEG)、L-哌可酸、L-赖氨酸、α-酮戊二酸的培养基中培养,测定菌丝及其发酵液中苦马豆素,分析各条件下真菌苦马豆素产率的变化。结果表明:当pH在4.5~6.5时,随pH增加,真菌SW产率显著增加(P<0.05);当PEG质量浓度在0~32g·L-1时,随PEG增加,真菌苦马豆素产率显著降低(P<0.01);当在培养基中添加相同量(10-3 mol·L-1)的L-哌可酸、L-赖氨酸、ɑ-酮戊二酸时,L-哌可酸添加组的苦马豆素产率显著降低(P<0.05),L-赖氨酸添加组苦马豆素产率显著增加(P<0.05);当L-哌可酸的初始浓度为10-3和10-2 mol·L-1时,真菌的苦马豆素产率显著下降(P<0.05),当其浓度为10-4 mol·L-1时,苦马豆素产率显著增加(P<0.01);当L-赖氨酸的初始浓度为10-1、10-2或10-4mol·L-1时,真菌苦马豆素产率显著降低(P<0.05)。当ɑ-酮戊二酸的初始浓度分别为10-1、10-2、10-3 mol·L-1时,真菌的苦马豆素产率显著降低(P<0.05)。由试验可知,低pH或添加PEG可抑制U.oxytropis中苦马豆素的合成,L-哌可酸、L-赖氨酸、α-酮戊二酸均对U.oxytropis的苦马豆素合成产生显著影响,但对苦马豆素合成的影响与各物质在培养基中的浓度密切相关。

中国主要疯草内生真菌分离鉴定及其抑菌活性研究

探明中国西部草地主要疯草内生真菌的种类及其分布,并通过内生真菌次生代谢产物抑菌活性筛选,为疯草内生真菌次生代谢产物开发利用提供参考。将采自青海和内蒙古草地的小花棘豆、黄花棘豆、甘肃棘豆、急弯棘豆、兰花棘豆和变异黄芪,运用表面消毒法进行内生真菌分离纯化;采用形态学和结合rDNA-ITS序列分析技术种属鉴定,NJ法构建系统发育树并分析其亲缘关系;以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌和沙门菌为测试菌株,用纸片法进行抑菌活性筛选。结果从中国6种主要疯草中分离获得265株内生真菌,合并得到38株,30株分属12科19属,8株未确定科。其中镰刀菌属、链格孢属和拟青霉属是优势种群,分别占总菌株的16.98%、11.32%和9.81%;系统发育分析显示,38株内生真菌绝大部分具有较高亲缘关系,仅少数亲缘关系偏低,其亲缘关系的远近受疯草种类、部位及生态环境等多种因素的影响;抑菌试验结果表明,38株内生真菌有29株次生代谢产物至少对1种测试病原菌有抑菌活性,占总分离菌株的76.32%,其中有2株次生代谢产物对4种测试病原菌均有较强抑菌作用。中国西部草地疯草含有丰富的内生真菌,不同生态地域的疯草内生真菌分布存在空间差异性,其次生代谢产物中存在丰富的天然抑菌活性物质,可作为筛选抑菌活性物质的新资源。

中国主要疯草中苦马豆素的动态变化规律

通过研究疯草中主要毒性成分—苦马豆素的动态变化规律,为疯草防治利用提供理论依据。在采集疯草时对其生长环境进行观察和GPS定位,确定样品采集信息。采用气相色谱方法,对不同地区采集的不同种类、不同生长时期和不同生长部位的疯草样品中的苦马豆素含量进行测定,分析苦马豆素动态变化规律。按照疯草种类区分,甘肃棘豆苦马豆素平均含量最高,达到0.148‰,最低为哈密黄芪,为0.044‰;按照区域区分,采于青海野牛坡的花期急弯棘豆苦马豆素含量最高,达到0.277‰;按照生长阶段区分,花期苦马豆素含量最高,平均达到0.139‰;不同部位中,花的含量最高,平均达到0.162‰。不同种类疯草中苦马豆素含量由高到低的顺序依次为:甘肃棘豆、急弯棘豆、茎直黄芪、小花棘豆、变异黄芪、哈密黄芪;按区域区分,不同区域疯草中苦马豆素含量随海拔升高而升高;按生长阶段区分,不同生长时期的疯草中苦马豆素含量由高到低依次为花期、花果期、果期和花前期,按生长部位区分,苦马豆素含量也有差别,由高到低分别是花、叶、荚果、根和茎。

内蒙古疯草及其研究进展

对内蒙古的疯草分布概况、牲畜疯草中毒机理、中毒的生态环境因素及其危害和疯草的开发利用进行了综述。

西藏疯草研究进展

通过查阅现有文献资料和实地调查结果表明,西藏共有疯草类有毒植物22种,其中棘豆属植物14种,黄芪属植物8种。疯草对西藏草地畜牧业生产危害十分严重,引起大批牲畜中毒死亡,造成严重经济损失;影响畜种改良,畜群结构严重失衡;破坏草地生态平衡,致使草地退化。西藏目前针对疯草的防除措施主要有人工挖除和应用化学除草剂灭除,并且应用解毒药物和生态控制工程预防和防治牲畜疯草中毒。疯草类植物虽然有毒,但含有较高的粗蛋白和含硫氨基酸,粗纤维含量较低,可作为动物饲料或药物进行开发利用。

“疯草灵”解毒缓释丸预防绵羊黄花棘豆中毒试验

将8只绵羊随机分为试验组和对照组,每天按10 g/kg饲喂黄花棘豆Oxytropis ochrantha鲜草,同时试验组投服疯草灵解毒缓释丸3丸,对照组不投服,以探索疯草灵解毒缓释丸对绵羊黄花棘豆中毒的预防作用。结果表明:对照组在试验第16-21天出现黄花棘豆中毒症状,试验组在试验第50-72天出现黄花棘豆中毒症状;实验室结果为2组羊血清谷草转氨酶(SGOT)、血清碱性磷酸酶(AKP)活性、尿素氮(BUN)含量比试验前明显升高(P<0.05或P<0.01)。表明投服3丸疯草灵解毒缓释丸对绵羊黄花棘豆中毒具有预防作用,但还不能完全防止黄花棘豆对绵羊肝脏和肾脏等组织器官的损害。

气相色谱内标法测定两种黄芪属疯草中苦马豆素含量

【目的】建立一种苦马豆素（Swainsonine,SW）的微量定量检测方法。【方法】以甲基--αD-吡喃甘露糖苷（me-Gal,纯度99%）为内标,在柱温200℃、进样口温度300℃、氢火焰离子化检测器（FID）温度280℃、高纯氮气载气压力200 kPa条件下,对苦马豆素进行气相色谱分析,以SW进样质量浓度对SW和me-Gal峰面积的比值进行回归分析,得回归方程,并进行单点校正因子测定和加样回收试验。【结果】单点校正因子为1.067 8,在0.047～6mg/mL SW进样质量浓度对SW和me-Gal峰面积比值的线性关系良好。加样平均回收率为107.33%,变异黄芪地上部分SW含量为（39.2±0.16）mg/kg,茎直黄芪地上部分SW含量为（43.6±0.13）mg/kg。【结论】气相色谱内标法准确、重现性好,可作为苦马豆素的微量定量检测方法。

内蒙古阿拉善盟草原疯草危害调查

采用现场调查和资料收集相结合的方法,对内蒙古阿拉善盟的阿拉善左旗、阿拉善右旗和额济纳旗3个旗疯草的种类、分布、危害及防治对策进行了调查研究。结果表明:阿拉善盟有疯草7种,其中棘豆属有毒植物3种,黄芪属有毒植物4种,分布面积超过139.33万hm2,危害最严重的是小花棘豆和变异黄芪,给当地畜牧业造成了极大的危害,并就如何综合利用疯草提出了几点措施。

疯草内生真菌研究现状与存在问题

疯草是世界范围内危害草原畜牧业可持续发展最严重的毒草。引起家畜疯草中毒的主要成分是吲哚里西啶生物碱——苦马豆素,苦马豆素除具有毒性外,还具有显著的抗菌、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫等药理活性,有关苦马豆素产生机制、毒理和药理活性研究已成为人们研究的热点。为了揭示疯草毒性物质产生机制、疯草内生真菌与疯草抗逆性,特别是疯草毒性物质与疯草内生真菌互作关系等诸多问题,国内外科技工作者从20世纪末就开始致力于疯草内生真菌生物多样性、疯草内生真菌与苦马豆素产生关系以及与疯草抗逆性形成机制研究,已从多种疯草中分离到可产苦马豆素的内生真菌,并发现疯草内生真菌与疯草之间存在密切关系。本文对近年来国内外疯草内生真菌研究的主要内容及研究现状进行综述,并对该研究领域中存在的若干问题进行了探讨。

青藏高原家畜疯草中毒发生规律及绿色防控技术体系

本文论述了青藏高原家畜疯草中毒与全球变暖、干旱、超载过牧、早春低温、海拔高度、家畜品种及年龄等因素之间的关系;同时提出疯草五项利用技术:作为"生态卫士"、抗灾饲料、重要药材、芫菁昆虫寄主、牧草贮存库;疯草中毒5项防治技术:自然康复、生态康复、药物治疗、药物防治、控制载畜量;疯草猖獗发生5项控制技术:进行生物防治、交替放牧、竞争化感、物理防治、化学防治,简称疯草绿色防控"三·五"技术体系。

疯草的生态学研究概况

疯草是豆科棘豆属和黄芪属有毒植物的统称,含有吲哚里西啶生物碱——苦马豆素(SW),是世界范围内危害草原畜牧业生产可持续发展最严重的毒草。论文在深入调查及试验研究的基础上,结合已报道的最新文献资料,综述了世界疯草的种类与生态学分布,SW与生态因子的关系,以及疯草的生态学控制研究概况,为我国草地生态学研究及疯草的合理开发利用提供科学依据。