1例恙虫病合并人类疱疹病毒4型的治疗与药学监护

1病例资料(1)基本资料:患者男性,68岁,农民,体质量:67.5 kg,身高:170 cm,BMI 23.4 kg·m^(-2)。因发热4 d入院。患者4 d前无明显诱因下出现发热,最高体温39.3℃,伴畏寒寒战,有头晕、头痛,无腹痛腹泻,无恶心呕吐,双侧大腿远端肌肉痛。患者自行口服阿莫西林胶囊500 mg,每8 h 1次,治疗3 d后,体温未见好转。门诊拟“发热”收住感染性疾病科。(2)既往史:患者平素身体一般。2016年行胃癌根除术,胃大部切除。高血压病史3年,常规服用缬沙坦氨氯地平片(Ⅰ)85 mg,每日1次,口服,血压控制良好。其余无特殊。

应用一步PCR法检测并鉴定马疱疹病毒1型和4型

聚合酶链反应 (PCR)可作为一种快速检测并鉴别马疱疹病毒 1型 (EHV 1)和马疱疹病毒 4型 (EHV 4)的诊断方法。PCR引物是根据编码EHV 1和EHV 4的糖蛋白B(gB)基因上的共有的核苷酸序列或型特有的核苷酸序列设计的。利用这两种病毒的型特异性混合引物 ,在一步PCR反应中检测并鉴别EHV 1和EHV 4,而同一疱疹病毒科的单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1)、伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病病毒 (MDV)均无特异性扩增。应用建立的PCR方法检测了普氏野马流产胎儿病料 ,实验结果表明 ,这种PCR方法是一种直接检测并鉴定EHV 1和EHV 4的快速、敏感的诊断方法 ,同时 ,它可在一步PCR反应中直接鉴别这两种病毒 ,可用于病料中EHV 1和EHV 4检测的初步筛选。

检测马疱疹病毒4型抗体间接ELISA方法的建立及应用

为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒1型(EHV1)阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。

蕈样肉芽肿皮损及外周血人类疱疹病毒1、2、4、5型DNA的检测

目的 探讨蕈样肉芽肿与人类疱疹病毒 1型 (单纯疱疹病毒 1型 )、2型 (单纯疱疹病毒 2型 )、4型 (ep stein barr病毒 )、5型 (人类巨细胞病毒 )间有无相关性。方法 酚 氯仿法提取皮肤组织 (蕈样肉芽肿 3 2份、正常皮肤 2 9份、慢性湿疹与慢性单纯性苔藓 2 4份 )及外周血白细胞 (蕈样肉芽肿 15份、健康献血员 40份、慢性湿疹与慢性单纯性苔藓 11份 )中基因组DNA。采用聚合酶链反应技术检测病毒DNA ,扩增产物回收后以限制性内切酶BamHⅠ、SmaⅠ酶切鉴定。结果 蕈样肉芽肿皮损及外周血中 ,各有 2份检测到人类疱疹病毒 1型DNA ;蕈样肉芽肿皮损中有 5份存在人类疱疹病毒 4型DNA ;健康献血员外周血以及正常皮肤、慢性湿疹与慢性单纯性苔藓患者皮损组织及外周血中未检测到此4种病毒DNA。结论 蕈样肉芽肿与人类疱疹病毒 1、2、4、5型间可能不具有相关性。

药疹病人EB病毒和人疱疹病毒6型感染检测

目的探讨EB病毒(EBV)和人疱疹病毒6型(HHV6)感染在药疹发生中的作用。方法采用PCR-Southern blotting检测药疹病人和正常对照组外周血单个核细胞中EBV DNA;采用巢式聚合酶链反应检测HHV6 DNA,并对HHV6阳性标本进行酶切分型;采用ELISA法检测EBV VCA-IgM;采用RT-PCR-Southernblotting检测EBV即刻早期基因BZLF1 mRNA。结果药疹病人EBV DNA阳性率(77.42%,24/31)明显高于正常对照组(χ2=77.84,P<0.01),但HHV6阳性率(32.26%,10/31)与正常对照组比较差异无显著性(χ2=3.00,P>0.05)。10例HHV6阳性药疹病人全部为HHV6A亚型,未检测到HHV6B亚型;而正常对照组73例HHV6阳性标本中有13例为HHV6A亚型。药疹病人EBV VCA-IgM阳性率(19.34%,6/31)与正常对照组比较差异具有显著意义(χ2=4.61,P<0.05)。10例HHV6阳性药疹病人中有9例检出EBV DNA,5例BZLF1 mRNA阳性病人中有4例检出HHV6 DNA,药疹病人BZLF1 mRNA检出率与HHV6有明显的相关性(r=0.45,P<0.05)。结论药疹病人存在EBV的活动性感染,且EBV和HHV6可能有相互激活作用。

上海市某马场马疱疹病毒1型感染的确诊

采用马疱疹病毒1型和4型二重PCR分型方法,对上海市某马场临床疑似病例的鼻拭子和血浆样品进行检测,同时对扩增产物进行测序和比对,确诊为马疱疹病毒1型阳性,表明上海市马群中存在马疱疹病毒1型感染。因此,应提高上海市马匹饲养管理水平,加强马疱疹病毒1型的定期免疫和检疫,及时对阳性马匹进行隔离,对马厩进行消毒。

用一步法PCR法检测并鉴定马疱疹病毒1型和4型

马疱疹病毒1型(EHV-1)也叫马流产病毒,马疱疹病毒4型(EHV-4)也称马鼻肺炎病毒,这两种病毒对养马业危害很大,在世界40多个国家和地区存在。马疱疹病毒1型主要引起妊娠马流产、神经性疾病和呼吸系统疾病,马疱疹病毒4型主要引起呼吸系统疾病。新疆大学理化测试中心易新萍等。

人类疱疹病毒4型相关胆管细胞癌影像及临床分析

人类疱疹病毒4型相关胆管细胞癌(EBVaICC)是肝内胆管细胞癌(ICC)的一种少见类型,约占ICC的6.6%,其预后在ICC中较良好。本研究旨在进一步探讨该疾病的临床及影像表现。

侵袭性牙周炎患者龈下菌斑中的疱疹病毒与牙周致病菌

目的：检测侵袭性牙周炎（aggressive periodontitis，AgP）患者龈下菌斑中的人巨细胞病毒（humancyto megalovirus，HCMV）、EB病毒1型（Epstein-Barr virus-1，EBV-1），探讨疱疹病毒与牙周致病菌及牙周临床指标间的关系。方法：应用巢式PCR技术，检测89名AgP患者和31名健康对照者龈下菌斑中的2种疱疹病毒：人巨细胞病毒（HCMV）、EB病毒1型（EBV-1），同时应用16SrRNA为基础的PCR技术检测8种牙周可疑致病菌，包括伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）、牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）、福赛类杆菌（Bacteroides forsythus，Bf；现已更名为Tannerella forsythensis，Tf）、中间普氏菌（Prevotella intermedia，Pi）、直形弯曲菌（Campylobacter rectus，Cr）、具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum，Fn）、牙密螺旋体（Treponema denticola，Td）、变黑普氏菌（Prevotella nigrescens，Pn）。结果：89名AgP患者的HCMV检出率为43．8％，显著高于健康对照者（12．9％），差异有统计学意义（P〈0．01）。AgP组的EBV-1阳性率虽高于对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。检出6—8种牙周致病菌的AgP患者其HCMV和EBV-1检出率均明显高于仅检出3～5种细菌的AgP患者的病毒检出率（P〈0．05）。结论：HCMV、EBV-1在AgP患者龈下的检出率较健康对照高；且在检出牙周致病菌种类数较多的样本中，疱疹病毒的检出率高，提示牙周感染HCMV和EBV-1与侵袭性牙周炎相关，疱疹病毒与牙周致病菌在侵袭性牙周炎的发病中可能起着协同作用。

儿童EB病毒感染后外周血淋巴细胞亚群变化的分析

目的探讨儿童EB病毒感染后外周血淋巴细胞亚群变化。方法选取我院2019年9月至2021年9月收治的60例EB病毒感染儿童作为本次研究对象,并依据患儿不同感染形式将研究组分为单纯EB病毒感染组与IM组;又依据患儿的年龄差异将研究组分为<3岁组和≥3岁组;另选择到我院体检的60例健康儿童作为参考组。比较研究组和参考组免疫状态变化。结果淋巴细胞亚群状态方面,结果显示单纯EB病毒感染组CD4^(+)及CD56^(+)显著低于参考组(P<0.05),CD19^(+)显著高于参考组(P<0.05),CD8^(+)高于参考组(P>0.05);另外,IM组CD8^(+)显著高于另外两组(P<0.05),CD4^(+)、CD56^(+)显著低于其他两组(P<0.05),CD4^(+)、CD8^(+)、CD19^(+)显著低于参考组和单纯EB病毒感染组(P<0.05)。通过分析,<3岁组患儿的CD3^(+)及CD4^(+)显著低于参考组(P<0.05),CD19^(+)高于参考组和≥3岁组(P<0.05),而CD8^(+)、CD56^(+)与参考组差异无统计学意义(P>0.05);≥3岁组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)显著高于参考组和<3岁组(P<0.05),CD56^(+)更低(P<0.05),CD4^(+)/CD8^(+)低于其余两组;CD19^(+)与参考组比较差异无统计学意义(P>0.05),但低于≥3岁组(P<0.05)。结论年龄小同时为单纯EB感染感染的患儿与年龄大且为IM的患儿比较,后者淋巴细胞亚群变化更加显著。

原发性胆汁性胆管炎病人咽漱液中EB病毒分型

目的明确原发性胆汁性胆管炎(PBC)病人咽漱液中EB病毒(EBV)的1/2分型及EBV核抗原1(EBNA1)基因的多态性分布。方法采用PCR结合凝胶电泳鉴定54例PBC病人EBV感染和1/2分型情况。应用PCR/测序的方法检测54例PBC病人咽漱液中EBNA1基因的多态性。比较PBC病人和健康人群EBV 1/2分型及各基因变异类型的分布,并比较EBV不同亚型病人的临床特征。结果54例PBC病人EBV感染率为100%。PBC病人2型EBV感染率明显高于健康人群(χ^(2)=5.959,P=0.015,OR=2.782,95%CI=1.208~6.410)。在PBC病人咽漱液标本中最多见的EBNA1亚型是P-thr变异型,其在PBC病人中所占的比例高于健康人群,差异具有显著性(χ^(2)=8.290,P=0.004,OR=3.253,95%CI=1.440~7.347)。EBV-2型PBC病人直接胆红素异常升高比例显著高于EBV-1型病人(χ^(2)=9.714,P=0.002)。结论2型EBV感染及P-thr变异型携带可能与PBC相关,2型EBV感染与PBC病人的直接胆红素异常升高有关。

人类疱疹病毒性脑膜脑炎合并低钠血症一例报告

病毒性脑膜脑炎是临床上常见的颅内感染性疾病,其主要由肠道病毒感染引起,如柯萨奇病毒、埃可病毒、脊髓灰质炎病毒等,其次由疱疹病毒感染引起如单纯疱疹病毒、人类疱疹病毒(EB病毒)等。低钠血症为儿科临床常见病,多伴发于其他疾病。颅内感染性疾病及低钠血症严重时均会有惊厥或癫痫样症状,但颅内感染性疾病及低钠血症出现惊厥或癫痫样症状时,临床处理原则迥异。本文报告1例人类疱疹病毒性脑膜脑炎合并低钠血症伴有癫痫症状的临床病例。

临沂市体检人群EB病毒抗体联合检测结果的临床分析

目的分析体检人群EB病毒相关血清学标志物Rta蛋白IgG抗体(Rta/IgG)、早期抗原IgA抗体(EA/IgA)、衣壳抗原IgA抗体(VCA/IgA)3项抗体的检测结果,为临沂地区鼻咽癌(NPC)的早期筛查和防治提供理论参考。方法收集2019年10月-2022年10月临沂市人民医院体检中心15873名体检人员的3项抗体检测结果,按照年龄聚集情况将其分为≤30岁组、31~40岁组、41~50岁组、51~60岁组、≥61岁组,比较各组间3项抗体吸光度值,应用SPSS 26.0软件进行统计学分析。结果Rta/IgG、EA/IgA、VCA/IgA 3项抗体阳性检出率分别为10.34%、9.96%、19.30%,阳性率差异具有统计学意义(χ^(2)=780.030,P<0.05),在不同年龄组段(≤30岁组、31~40岁组、41~50岁组、51~60岁组、≥61岁组)进行比较时,抗体阳性率总体随年龄增大而升高,VCA/IgA(16.76%、18.81%、18.85%、19.06%、31.61%)在不同年龄区间总体阳性率要高于Rta/IgG(8.54%、8.91%、9.89%、11.05%、11.63%)、EA/IgA(7.42%、8.67%、8.87%、9.71%、13.64%),差异具有统计学意义(χ^(2)=18.957、64.805、16.222,P均<0.05);在性别间比较时,Rta/IgG、VCA/IgA在性别间存在差异(χ^(2)=5.479、48.310,P均<0.05);在对3项抗体阳性聚集情况进行分析时,其中3项抗体阴性、1项抗体阳性、2项抗体阳性、3项抗体阳性占比分别为(67.27%、26.38%、5.79%、0.56%),差异具有统计学意义(χ^(2)=23319.137,P<0.05);对249名男性及137名女性高风险人员进行追踪,有1例男性被确诊为NPC。结论临沂市体检人群EB病毒血清学检测阳性率与年龄及性别有关,对检测结果进行风险评估并对高风险人群进行追踪,有利于NPC的早期筛查和防治。

EB病毒相关嗜血细胞综合征1例报道并文献复习

目的:探讨成人EB病毒(EBV)相关嗜血细胞综合征(HPS)的临床症状体征和影像学表现,提高临床诊断准确率,减少漏诊和误诊。方法:回顾性分析2021年11月西安医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科收治的1例成人EBV相关HPS患者的资料,分析诊疗过程。结果:患者主要临床表现为发热、血小板减少和脾肿大、胆汁淤积、脂肪肝,血NGS对EB病毒DNA检测阳性,结合病史查体及辅助检查结果明确诊断为EB病毒相关嗜血细胞综合征。结论:成人EBV相关HPS临床表现多变,缺乏特异性,血NGS检测和腹部CT可协助明确诊断,提高了临床医师对该病的诊出率,减少误诊漏诊的发生。

传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞数量与EB病毒浓度的关系

目的:观察传染性单核细胞增多症外周血中异型淋巴细胞的形态和数目变化,并对EB病毒进行检测,探讨二者的关系。方法:对已确诊的50例传染性单核细胞增多症患者按异型淋巴细胞比例进行分组,观察其临床表现和EB病毒浓度的关系。结果:通过临床症状观察,大多患者具有发热、淋巴结肿大、肝脾肿大等。通过实验室检查分析,外周血中存在数目不等的异型淋巴细胞。Ⅰ组(异型淋巴1%～5%)有4例,Ⅱ组(异型淋巴6%～10%)有7例,Ⅲ组(异型淋巴11%～15%)有10例,Ⅳ组(异型淋巴16%～20%)有13例,Ⅴ组(异型淋巴20%以上)有16例。通过荧光PCR-DNA检测EB病毒拷贝数发现Ⅴ组患者外周血病毒平均含量最高,并与其他组比较,差异有统计学意义。结论:传染性单核细胞增多症临床表现多样,异型淋巴细胞与EB病毒的检查对该病的初期诊断和病程发展有重要的指导意义。

急性戊型肝炎合并EB病毒感染诱发重度再生障碍性贫血一例

病毒性肝炎相关性再生障碍性贫血是病毒性肝炎最严重的并发症之一,虽然发生率低于1%,但病情重,常伴有严重感染及内脏出血,贫血呈进行性加重,患者的生存期短。由于该病临床经过急骤,预后较差,加之传染科医生对本病缺乏认识，因而给及时诊断造成一定的困难。现对我院收治的一例急性戊型肝炎诱发重度再生障碍性贫血进行分析报道。

EB病毒感染和NK/T细胞淋巴瘤免疫表型相关性研究

目的:探讨EB病毒感染和NK/T细胞淋巴瘤免疫表型的相关性。方法:选取病理科NK/T细胞淋巴瘤25例存档的蜡块,另选取鼻咽反应性增生淋巴组织20例作为对照。运用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化酶连接法,原位杂交检测EBV编码的RNA(EBER1/2)。结果:25例均有一定程度的炎性细胞浸润,凝固性坏死,多形性淋巴样瘤细胞弥漫或散在分布,主要为中等细胞及大细胞,有血管中心性浸润12例;CD20阳性0例,CD45RO阳性25例(100.0%),CD56阳性21例(84.0%),CD3阳性25例(100.0%),粒酶B阳性22例(88.0%),T细胞内抗原1(TIA1)阳性25例(100.0%);EBER1/2阳性21例(84.0%),LMP-1阳性12例(48.0%),EBER1/2、LMP-1均阳性12例(48.0%)。20例反应性增生淋巴组织EBER1/2、LMP-1阳性均为0例,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EB病毒感染和NK/T细胞淋巴瘤免疫表型显著相关(r=12.562,P=0.002),EB病毒感染可能在NK/T细胞淋巴瘤的发生发展中发挥重要作用。

烟台地区EBV相关胃癌临床病理特征及病毒基因分型

目的明确烟台地区EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)的临床病理特征和病毒基因分型,探讨病毒基因变异与EBVaGC发生的相关性。方法收集烟台地区653例胃癌组织标本和116例健康人群咽漱液(TW)标本,分别采用原位杂交和PCR技术检测筛选EBV阳性标本;PCR结合限制性片段长度多态性及测序检测EBV阳性标本中1/2分型、C/D分型和F/f分型。结果共筛选和鉴定EBVaGC标本40例(6.1%)和EBV阳性TW标本42例(36.2%)。与EBV阴性胃癌比较,EBVaGC在男性中的检出率高于女性(χ2=4.998,P<0.05),在胃底贲门、胃体的检出率高于胃窦(χ2=22.766,q=4.290、5.724,P<0.05),低分化腺癌的检出率高于高分化腺癌、中分化腺癌和黏液腺癌(χ2=17.013,q=3.219～5.041,P<0.05)。40例EBVaGC中1/2型、C/D型和F/f型EBV的比例分别为90.0%/10.0%、42.5%/57.5%和97.5%/2.5%,42例TW标本中3种基因分型的比例分别为81.0%/19.0%、69.0%/31.0%和92.9%/7.1%。EBVaGC和健康人群之间1/2型、F/f型的分布差异均无统计学意义,而EBVaGC中D型EBV的检出率高于健康人群,差异有显著性(χ2=5.863,P<0.05);3种基因型综合分析,1DF型在EBVaGC的检出率高于健康人群(P=0.009)。结论烟台地区EBVaGC占胃癌的6.1%,好发于男性,主要发生在胃底贲门区和胃体(中上2/3),以低分化腺癌多见;EBVaGC中以1型、F型和D型EBV为主,D型变异可能与EBVaGC相关。

套式PCR分型检测马鼻肺炎病毒的方法研究

马鼻肺炎病毒亚型１和亚型２被重新分类并命名为马疱疹病毒１型（ＥＨＶ－１）和马疱疹病毒４型（ＥＨＶ－４）。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术可应用于检测并区分ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４。选择编码ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４的糖蛋白Ｂ（ｇＢ）基因作为引物。外侧引物为ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４ ＤＮＡ共有的核苷酸序列。内侧引物分别为ＥＨＶ－１或ＥＨＶ－４ ＤＮＡ特有的核苷酸序列。将琼脂免疫扩散试验检测为阴性的７１份马血清样品进行ＰＣＲ检测，其中检出３份血清为阳性，并确诊为ＥＨＶ－１型。结果表明，套式ＰＣＲ的灵敏度比一般ＰＣＲ提高１００倍左右，从而建立了一种快速、敏感、特异的检测并区分ＥＨＶ－１和ＥＨＶ－４的方法，确诊了从新疆普氏野马上分离的ＰＨ９３－１株为ＥＨＶ－１型。

EB病毒早期基因BHRF1转基因模型鼠的建立

目的构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型。方法自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRF1基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1-BHRF1重组载体。重组载体用NruⅠ和DraⅢ双酶切,电泳后纯化回收长约2000 bp的目的片段溶于显微注射缓冲液。从超排小鼠取健康受精卵,通过显微注射技术,将纯化的CMV+BHRF1+polyA DNA片段注射入小鼠受精卵,短暂培养后选择健康受精卵移入假孕母鼠输卵管内。采用PCR检测子鼠鼠尾组织DNA,鉴定筛选BHRF1阳性首建鼠。结果经PCR、限制性内切酶鉴定及测序证实pcDNA3.1-BHRF1重组载体构建成功,DraⅢ和NruⅠ双酶切获得长约2 000 bp的CMV+BHRF1+polyA DNA片段。自18只见栓超排小鼠获取健康受精卵480枚,分别注入纯化的目的片段,经短暂培养后390枚受精卵仍健康,移入14只假孕母鼠输卵管内,11只受孕,产下74只子鼠。PCR检测子鼠鼠尾DNA获得16只阳性首建鼠,阳性率为21.6%(16/74)。结论本实验首次建立了BHRF1转基因鼠模型,为深入研究BHRF1的生物学特性及其在EBV相关肿瘤发生发展中的作用提供了理想的动物模型。