云南不同蚕区僵蚕致病菌株的分离鉴定及致病力差异研究

[目的]了解云南省不同蚕区家蚕僵蚕病原的多样性及不同来源白僵菌菌株对家蚕的致病力差异。[方法]从云南省9个县(市)收集僵蚕样品,分离纯化获得病原菌,通过观察菌株的形态特征、产孢结构,并结合菌株核糖体rDNA-ITS序列的系统发育分析,确认病原种类。同时测定分析不同地理来源以及不同孢子浓度的球孢白僵菌菌株对家蚕致病力的影响。[结果]形态学和ITS序列分析发现,云南蚕区僵病病原菌属于白僵菌属(Beauveria)、虫草菌属(Cordyceps)和绿僵菌属(Metarhizium),其中以球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)为主要病原,分别占57.58%和30.30%。不同地理来源的球孢白僵菌株对家蚕幼虫的致病力存在一定差异,供试菌株侵染后,家蚕的僵蚕率在72.5%~95.0%,半致死时间(LT50)在5.093~7.133 d,其中LL1-1菌株的僵蚕率最高(95.0%),半致死时间最短(5.093 d),致病力最强;CB1-2菌株的僵蚕率较低(75.0%),半致死时间最长(7.133 d),致病力最弱。随着接种浓度的增加,病原的致病力变强,家蚕的僵蚕率也升高。[结论]云南省蚕区家蚕僵病病原种类呈多样性,球孢白僵菌和莱氏绿僵菌为主要病原菌,不同来源的白僵菌株对家蚕的致病力存在差异,本研究结果可为家蚕僵病的防治和僵蚕的生产提供参考依据。

无核荔枝僵果病的病原菌鉴定、入侵途径及快速检测技术

2022年在海南无核荔枝上发现一种僵果病,与海南常见的荔枝病害炭疽病、酸腐病等病症差别明显,主要为害幼果,发病时幼果果实外观无明显变化,但无核荔枝完成疏果后,果实长至蚕豆大小时,发病果实的外果皮颜色变暗,剖开后内果皮发生不规则褐变,果实不再膨大,形成僵果,易造成严重的经济损失。本研究对该病害的病原菌进行分离和鉴定,对入侵途径和快速检测技术进行研究。结果表明:通过形态学鉴定、ITS、RBP2和TEF1基因序列分析,鉴定引起无核荔枝新型僵果病的病原菌为伯氏镰刀菌(Fusarium pernambucanum)。无核荔枝幼果期果实果皮受农事操作、风、刺吸性昆虫为害等损伤后,易受到病原菌的入侵发病,而果实表面无伤口时不发病。病原菌入侵主要集中在果实纵经3.2~4.8 mm的幼果期,随着果实的生长、果皮保护组织的增加和伤口的减少,病原菌难以入侵,果实发病率快速降低。基于TUB基因序列,以伯氏镰刀菌及其他分离获得的镰刀菌属菌株基因组DNA为模板进行扩增测序,根据序列信息设计筛选出一对伯氏镰刀菌的特异性引物,构建了基于普通PCR的快速高效分子检测方法,该检测方法灵敏、高效,可用于指导无核荔枝僵果病的早期诊断与预防。

荣县家蚕白僵病的发生与防治措施

荣县是四川蚕茧主产县之一,每年因白僵病爆发且病原难以彻底消除而造成蚕农较大的经济损失。介绍了白僵病的病原、发病症状和发病条件,提出了白僵病的应急处理和防治措施。

荣县家蚕白僵病的发生与防治

白僵病是荣县常见的一种蚕病,每年都有发生,但真正成灾的时候不多。一般是部分镇街的一些村社在正秋或晚秋季危害严重。荣县曾经出现过一些养蚕户几乎年年都发生家蚕白僵病的现象,似乎白僵菌难以杀灭一样。事实上,这些养蚕户频繁暴发白僵病,主要原因是消毒不彻底。

家蚕灰僵病病原的鉴定

家蚕灰僵病(grey muscardine)是一类不常见的真菌病,其病原一直未能确定。从感染灰僵病的家蚕体中分离获得一株棒束孢(Isaria),菌株编号为RCEF197,测定了该菌株的ITS1-5.8S-ITS2 rDNA区域序列,研究了该菌株的菌落和显微形态特征。与一些近似的棒束孢和拟青霉(Paecilomyces)的ITS序列进行比较,该菌株和爪哇棒束孢菌株CBS134.22的相似性为99.8%,在构建的棒束孢属部分种的系统发育树中,该菌株与爪哇棒束孢聚为一类,再结合该菌株具有的淡灰紫色菌落和长椭圆形分生孢子大小等形态学特征,将家蚕灰僵病的病原确定为爪哇棒束孢Isaria javanica。

安徽西南部家蚕白僵病病源及传播途径追踪

【目的】明确安徽西南部家蚕白僵病菌株来源和传播途径,控制蚕病流行。【方法】利用ISSR分子标记对安徽西南潜山的病蚕、蚕室及其周边桑园、农田及松林的70株球孢白僵菌进行聚类分析和三维主坐标分析。【结果】该地区的球孢白僵菌为优势性明显的异质种群;6个类群中仅主病源第II-1类群和次病源第IV类群引起家蚕的地方性白僵病,与用于防治松毛虫的菌株及在附近松毛虫种群中自然流行的土著菌株关系较远。生物测定表明,使用松毛虫分离株使家蚕死亡25%的LC25、LD25和LT25分别为使用家蚕分离株使家蚕死亡75%的LC75、LD75和LT75的1 327、1 378和1.5倍。【结论】鉴于松毛虫分离株明显的寄主专化性,在该蚕区使用由这类菌株研制的白僵菌杀虫剂防治松毛虫对蚕业是相对较为安全的。另外,当年夏秋季蚕室附近螳螂种群的白僵病大流行与家蚕白僵病无关。

天蚕白僵病的菌种鉴定及致病性的研究

天蚕患白僵病后使蚕体色稍暗、食欲减退、行动呆滞、蚕体上出现油渍状病斑,死前排软粪,尸体硬化,最后被白僵菌的白色菌丛所覆盖。引起天蚕白僵病的病原菌是[Beauveria bassiana(Bals.)Vuill.],分生孢子呈球形或卵圆形,球形直径2.5～4.4μm,卵圆形为2.8～4.4×2.5～3.8μm,多数分生孢子堆积在一起呈白粉状。体内的营养菌丝呈丝状无色,具隔膜,分枝生长,直径为2,5～3.3μm。芽生孢子圆筒形,大小为6.3～46.6×1.0～3.9μm。体表的气生菌丝直径为2.5～3.3μm,无色具隔膜,分枝生长。试验证明白僵菌能经接触侵染天蚕、桑蚕和柞蚕虫体引起白僵病,来自3种蛋体上的白僵菌可以互相感染,感染率均为100％。

桑树内生拮抗细菌Lu10-1对家蚕白僵病的防治效果及抑菌作用

为了开发新型微生物农药用于家蚕病害防治,研究了桑树内生拮抗细菌洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholde-ria cepacia)Lu10-1菌株对家蚕白僵病的防治与抑菌效果。防治试验表明,Lu10-1菌株发酵上清液对家蚕白僵病的预防及治疗有效率分别达到55.88%、34.00%,且对家蚕生理及茧质无不良影响。体外抑菌试验表明,Lu10-1菌株的抗菌粗提物对白僵菌有较强的拮抗作用,抑菌圈直径为17.00 mm;抗菌粗提物还能够抑制白僵菌的生长及孢子萌发,当其作用于白僵菌孢子后,孢子出现聚集、内容物分布不均、变形、空腔及胞壁断裂等异常,作用于菌丝后,菌丝出现变粗、扭曲、皱褶、膨大、内容物流出、消融等现象;抑菌率随着抗菌粗提物浓度的增加而不断增大。初步认为Lu10-1菌株可以用于家蚕白僵病的防治。

家蚕灰僵病种群遗传结构研究

家蚕灰僵病为低频率发生的家蚕真菌性地方病,病原为爪哇棒束孢。采用ISSR分子标记对安徽潜山和浙江桐乡的2个家蚕灰僵病病原种群进行了指纹图谱分析。利用12个ISSR引物共扩增出132个位点,其中多态位点数为93个,占70.45%。在种群水平上的Nei’s遗传多样性指数(h)和Shannon’s指数(I_s)具有一致性。采用UPGMA法进行聚类分析,来自2个地区的19个菌株在遗传相似系数0.76处完全按地理来源分为2个类群;基于ISSR信息的三维主坐标分析(PCA)结果与分子聚类结果一致。2个家蚕灰僵病病原种群间的基因流(N_m)为0.5106,遗传分化系数(G_(st))为0.3287,说明种群间遗传多样性高于种群内。2个种群单独聚类表明,潜山地方病种群在0.8的相似处有一个明显的优势类群,而桐乡种群未表现出优势性。上述分析可知,家蚕灰僵病病原种群表现出与地理来源相关的空间异质性,种群异质性是地方病种群维持的重要原因。

蚕期防治家蚕僵病用药适期的探讨

通过对病原真菌侵入蚕体所需时间及蚕体蚕座消毒药剂药效持续时间的研究，探讨了蚕期蚕体防僵用药的适期。白僵菌和曲霉菌侵入蚕体所需时间均为１１ｈ以上；蚕体蚕座消毒药剂“防病１号”消杀白僵菌和曲霉菌的持续时间，在覆盖条件下分别为２５ｈ和３ｈ，在敞开条件下分别为１０ｈ和１ｈ。根据试验结果，提出了养蚕生产上蚕期蚕体防僵的用药适期。

温州蜜柑“僵果”病的发生原因及防治试验

深入调查了温州蜜柑"僵果"病害症状和发生情况,同时从细胞结构上观察了"僵果"果皮的显微结构特征,通过进一步对试验园土壤、叶片及果实养分含量的测定和分析,揭示了"僵果"病为生理性病害,是由柑橘树体缺硼引起的。通过连续两年在通山柑橘产区开展施硼肥试验和示范,实践证明,在萌芽期、花蕾期和幼果期分3次叶面喷施硼肥或在早春萌芽前土施硼肥,对温州蜜柑"僵果"病起到了较好的防治效果,试验园土壤及柑橘树体的硼元素含量均达到了正常水平,且果实品质显著提高。在此基础上,进一步总结了温州蜜柑"僵果"病的防治技术。

五线五区十三穴推拿法治疗颈僵型项痹病105例临床疗效验证观察

[目的]验证五线五区十三穴推拿法治疗颈僵型项痹病的临床疗效。[方法]按照国家中医药管理局"十一五"推拿重点专科项痹病诊疗方案临床验证要求,建立临床病例观察表(Case Report Form,CRF),采用多中心验证评价,观察五线五区十三穴推拿法对颈僵型项痹病疼痛、麻木、眩晕、上肢肌力、颈项活动度、X线颈椎曲度、情绪变化等7项指标的疗效,共验证病例105例。[结果]经10次治疗后,7项指标的改善均有统计学意义(P<0.05);2周后随访与治疗前比较,除上肢肌力一项外,其余6项指标的改善均有统计学意义P<0.05;2周后随访与10次治疗后比较,随访者上肢麻木、眩晕、上肢肌力、情绪变化等4项指标没有出现显著变化(P>0.05),疼痛、颈椎活动度、X线颈椎曲度3项指标较疗程结束(10次)有进一步改善,具有统计学意义(P<0.05)。[结论]五线五区十三穴推拿法对改善颈僵型项痹病7项指标具有良好的疗效,经随访显示疗效肯定。

冬虫夏草寄主蝠蛾的绿僵病及其防治方法

蝠蛾绿僵病的典型病症是蝠蛾幼虫感菌后僵化,僵虫体上生长出绿色分生孢子层。侵染传播特点是绿僵菌分生孢子穿透幼虫表皮进入血淋巴,断裂增殖充满病虫血体腔,幼虫僵化。病害可以通过病死虫体、饲料、基质、用具等途径反复传播。防治技术和方法是综合防治,主要采用热力、化学药剂、微波、紫外线等消毒方法杀灭环境、用具、基质中的分生孢子,可以有效的防治人工饲养的蝠蛾幼虫的绿僵病。

家蚕白僵病的防治对策

在蚕桑生产上,由真菌引起的病害有家蚕白僵病、曲霉病、绿僵病;家蚕受真菌寄生而发病死亡后,其尸体都有僵化现象,因此把家蚕的真菌病叫作僵病或硬化病。家蚕真菌病最常见的是白僵病,其次是绿僵病、黄僵病、曲霉病,以白僵病的危害最为严重。

家蚕僵病的发生、诊断和防治

家蚕受真菌寄生而导致发病死亡，因其死后尸体部有僵化现象，故俗称僵病或硬化病。感染家蚕发病的真菌孢子在自然界中分布很广，土壤、空气、水、养蚕用具、病死蚕尸体和排泄物都可存在。同时，由于寄生的菌类不同，尸体上产生出各种不同颜色的分生孢子，以致尸体呈现白、黄、绿、赤、灰、黑、褐等各种颜色，生产中根据颜色的不同将其划分为白僵、黄僵、绿僵、褐僵、赤僵病等。

农村家蚕白僵病的发生与防治

受农村养蚕条件和养蚕环境等综合因素的影响,家蚕白僵病在农村比较常见,给蚕农的养蚕生产带来损失。分析了农村家蚕白僵病的发生原因,提出可行的防治措施。

我省上半年部分地区白僵病爆发原因分析及应对措施

今年上半年省内部分县市急报在一些蚕桑主产区出现大范围的白僵病,有些甚至是全村爆发。根据对部分县市村镇和蚕农的初步调查了解,这些地区的白僵病确实来势凶猛、发病急、受害面积大、为害程度深,给蚕农造成了比较大的损失。

防治桑蚕僵病的方法

桑蚕僵病，蚕农又叫硬化病，群众叫僵蚕，是养蚕中的常见病和多发病。春蚕和晚秋蚕发病较多，早秋、中秋和夏蚕，如遇多湿环境，也有发生。僵蚕可因病源菌的种类不同而分为黄僵、绿僵和白僵三种。病菌的分生孢子可以寄生在松毛虫、桑毛虫、棉铃虫、桑螟、桑尺蠖等200多种昆虫体上，通过接触传染，侵入蚕体、蚕蛹，造成危害。蚕僵病对养蚕业危害较大，但只要我们摸清它的发生规律，是完全可以防治的。

家蚕蛹期败血病与僵病的发生及防治

蚕种场在蚕种生产中,为确保生产任务的完成,除加强幼虫期防病工作外,防止蛹期败血病、僵病的发生也必须引起注意。蚕种生产种茧保护中,常招致败血病及僵病的严重危害,可以说,家蚕蛹期的蚕病以这两种病的危害最为严重,生产上常有因这两种病蔓延而使制种生产惨遭失败的事例。这里,就这两种病的发生原因及防治对策谈谈个人的见解。一、蛹期败血病的发生及防治(一)蛹期败血病的发生状况及其特征蛹期败血病的发生时期多见于削茧。

家蚕自僵病的发生原因分析及对策

白僵病是家蚕真菌性病害之一,是由白僵菌经表皮侵入蚕体而引起发病的。蚕死后,蚕体先软后硬,全身被白色分生孢子覆盖,称之为白僵蚕。白僵菌喜湿怕干,家蚕处于多湿、多雨的环境中,容易被传染白僵病。1998年和1999年秋天我校实习场在饲养秋蚕时,该病的发病率较高,2000年我们根据该病的发病规律,采取了一系列措施,该病基本上得到了控制。