受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性

按GenBank中受病原物诱导的植物启动子(PPPs)的碱基序列设计3对引物,从烟草基因组中扩增到3个启动子PPP1,PPP2和PPP3.用PPPs替换pBI121中与uidA基因(编码β-葡萄糖醛酸酶GUS)相连的35S启动子,再将重组质粒导入农杆菌GV3101,构建了PPPs和uidA相连的转化单元.通过农杆菌介导法将受PPPs控制的uidA基因导入辣椒.对转基因辣椒叶片接种青枯菌无致病性菌株(AVRS1),24 h后检测GUS活性.结果表明,接种AVRS1后,PPPs启动了uidA的表达,GUS活性显著增强.

受细菌诱导的植物启动子的克隆及其在转基因烟草中的活性

从烟草中克隆了受病原物诱导的植物启动子 (pathogen inducibleplantpromoters,PPPs)PPP1、PPP2、PPP3,其长度分别为 130 8,1170 ,2 2 0bp ,序列分析表明它们均含有受细菌诱导的反应元件 (Bac)。资料检索表明 ,PPP3可能是从植物分离的、受细菌诱导的最短的启动子。构建了包括每个PPP启动子和报道基因uidA (编码 β 葡萄糖醛酸酶 ,GUS)的转化单元 ,用它们以及包括来自椰菜花叶病毒 35S启动子和uidA单元 ,在相同条件下分别转化烟草 ,获得了分别含PPP和 35S启动子的 4类转基因烟草品系 ;分子检测表明 ,转化单元在转基因烟草染色体上能稳定整合。根据对转基因烟草GUS组织化学测定 。

应用人工启动子培育广谱抗病性作物的进展与设想

转基因抗性作物常因目的基因的过表达而造成品质下降、减产、甚至畸形发育.因此,转基因抗病必须解决好广谱抗性、持久抗性和消除副作用等关键问题.本文综述了病原物诱导型启动子的克隆,总结了基因工程中应用病原物诱导型启动子的优点,分析了病原物诱导型启动子中与诱导抗病相关的保守系列,提出了构建人工启动子和选用npr1基因培育广谱抗病性作物的设想.

含双病原物诱导启动子植物安全表达载体的构建

本研究用来自烟草的具有高度病原物特异性的两个诱导启动子EAS4和hsr203J,串联驱动GUS基因的表达,同时考虑到转基因植物的安全性,引入双边界序列,构建了含双病原物诱导启动子的植物安全表达载体。将表达载体转化烟草获得转基因植株。分析显示,在正常生长情况下转基因烟草检测不到GUS活性,或活性极低;而受疫霉激发子parasiticein、Phytophthora nicotianea[0]的孢子悬浮液和Ralstonia solanacarum的菌悬液诱导后,转基因烟草叶片中可检测到明显的GUS活性。结果表明,构建的植物表达载体所含双病原物诱导启动子均具有良好的诱导活性,可用于植物遗传转化。

植物抗病基因工程进展

植物抗病基因工程进展洪剑明印莉萍邱泽生（首都师范大学生物系，北京１０００３７）ＰＲＯＧＲＥＳＳＯＦＧＥＮＥＴＩＣＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧＦＯＲＰＬＡＮＴＤＩＳＥＡＳＥＳＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＨｏｎｇＪｉａｎ－ｍｉｎｇＹｉｎＬｉ－ｐｉｎｇＱｉｕＺｅ－ｓｈｅ...

植物受病原物诱导启动子概述

植物受病原物诱导启动子是一类能对病原物的侵染作出响应的启动子,其活性主要局限于被侵染之时及被侵染的位点。植物受病原物诱导启动子的这一特性赋予其在抗病基因工程中潜在的应用价值。相比植物庞大的启动子组,已发现的植物受病原物诱导启动子仍是少数,关于其作用机制的研究仍有待加强和深入,而其调控的基因与植物抗病性关系还需要引起足够的重视。作者在对植物受病原物诱导启动子进行归类的基础上,重点关注了病原物诱导启动子调控基因的编码产物与植物抗病性的关系,对植物受病原物诱导启动子的顺式调控元件作了简要分析,并对该领域的发展动向进行了讨论。

植物的免疫性及病虫害防治

长期以来,人们在防治植物病虫害的过程中,较多地注意了病原物的浸染问题,因而大量使用化学农药,由此造成的环境污染和食品污染已经严重地危及人类健康,成为全球普遍关注的大问题。

串联双病原物诱导启动子驱动基因表达的特性

在植物抗病基因工程中,目标基因可控的高效表达是一重要目标。在前期的研究中,我们将串联的病原物高度特异性诱导启动子EAS4(EP)和hsr203J(HP)转入烟草,uidA基因在相应病原物或激发子诱导后可被驱动表达。为进一步研究此串联双启动子驱动的基因表达特性,采用荧光法对GUS诱导表达活性进行了定量检测。结果发现,双启动子表现较高的诱导表达活性,双启动子与单启动子的活性差异均达极显著水平。研究还发现,两个启动子串联的顺序对其活性强度和时间动态有影响,双启动子HP+EP的诱导表达高峰出现在诱导后6～10 h,而EP+HP的活性高峰出现在诱导后8～14 h。同时,初步分析了串联的EP和HP协同促进基因高水平表达的原因。串联的双病原物特异性诱导启动子不但可响应较广谱的病原物的诱导表达,而且可协同促进基因的高效表达,因而在植物抗病基因工程中具有广阔的应用前景。

含双病原物诱导启动子无选择标记转基因烟草的获得

外源基因的引入造成转基因植物的食用安全性和环境安全性问题。此外，选择标记基因还可能使植株再生困难，及后继转基因工作不能再用相同的选择标记基因。若转基因植株在释放时其外源抗性选择标记基因得到剔除，则上述问题可得到解决。

稻瘟病病原物诱导启动子的构建及表达

利用PCR技术从小麦和马铃薯中分别扩增并克隆了病原诱导性谷胱甘肽_S_转移酶基因GstA1和Gst1启动子片段 ,将它们分别与水稻肌动蛋白基因 (Act1 )核心启动子序列、5′端非翻译前导序列以及GUS基因融合构建出植物载体pWMIG_5 0和pPMIG_5 0 ,然后转化水稻 ,并对嵌合启动子的诱导活性进行了分析 .结果表明 :( 1 )在转基因水稻细胞中嵌合启动子可受稻瘟病病原物的诱导 ;( 2 )水稻Act1第一内含子序列对单子叶和双子叶外源基因启动子在水稻中的表达具有重要的影响 ;( 3)水稻Act1基因核心启动子及其