水稻条纹病毒外壳蛋白和病害特异蛋白在寄主体内的积累

ＰＡＳＥＬＩＳＡ检测结果表明：（１）水稻条纹病毒外壳蛋白和病害特异蛋白在水稻寄主体内累积量的变化趋势是一致的，而且均与寄主症状的严重度密切相关．（２）不同水稻品种中，２种蛋白的累积量和累积速率有明显差异．明恢６３（高感）２种蛋白的累积量均比ＩＲ３６（高抗）的明显大；０６３８１（耐受性低）２种蛋白的累积速率均比岗优２２（耐受性高）的明显快，０６３８１病叶中２种蛋白累积量在其显症３０ｄ左右达到高峰。

水稻条纹病毒病害特异蛋白的提纯及血清学特性

应用差别ｐ Ｈ 值沉淀蛋白质的原理，建立了水稻条纹病毒病特异蛋白（ Ｓ Ｐ） 的两种提纯方法。这两种方法都可以从病叶中提纯到大量的 Ｓ Ｐ，其粗提纯量分别为０ ．８ 和２ ．０ ｍｇ／ｇ 病叶。通过 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 分离后得到了精提纯的蛋白，其分子量为２０ ．１ ｋ Ｄａ 。将粗提纯和精提纯的 Ｓ Ｐ 分别免疫兔子，制备出效价为５１ ２００ 和６ ４００ 的抗血清。将效价为６ ４００ 的高度特异性的抗血清用于研究 Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 与 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 及同属的水稻草状矮化病毒（ Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ） Ｓ Ｐ、 Ｃ Ｐ 之间的血清学关系，结果表明， Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 的抗血清与 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ、 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 之间无反应，但可与 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 微弱反应；而 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ、 Ｃ Ｐ 及 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 的抗血清与 Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 之间都无血清学反应。结果证实了 Ｒ Ｓ Ｖ 和 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ

农杆菌介导的水稻草矮病毒NS6基因的转化

水稻草矮病毒(Ricegrassystuntvirus,RGSV)RNA6片段毒义链编码的非结构蛋白NS6,与病害症状密切相关,被称为病害特异蛋白.因此,应用农杆菌介导法,选取对RGSV表现不同抗性的台农67、中花6号、中花12号、中花15号、台中1号、合系28和063817个水稻品种,以其未成熟胚或成熟胚预培养4d后,诱导生长旺盛的愈伤组织为外植体,将NS6基因导入其中,对影响水稻再生及农杆菌转化的主要因素进行了比较研究,并获得了转NS6基因工程植株.结果表明,以未成熟胚为受体,获得的抗性愈伤组织转化率明显高于成熟胚;水稻不同品种对农杆菌转化反应不同;添加一定浓度乙酰丁香酮和葡萄糖,可提高抗性愈伤组织形成率;选用G418进行抗性筛选能获得转NS6基因再生植株,用卡那霉素筛选产生的愈伤组织则未能获得再生植株.