SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1

该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子P1的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法,用于P1的早期诊断。以感染P1的猪血清DNA提取物为模板,采用PCR扩增P1 101 bp的基因片段,将其克隆至pMD18-T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测。经测序证实扩增片段属于P1,所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1的反应在101-108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,反应的检出下限为10拷贝/μL,而对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测为阴性,表明该方法敏感、特异。成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1载量的方法,为P1致病机制和机体免疫保护机制的研究提供了技术平台。

类猪圆环病毒因子P1核酸链型和极性的研究

研究报道类猪圆环病毒因子P1的核酸链型和极性的研究结果。采用氯化铯平衡密度梯度离心获得较为纯净的病毒粒子后,提取病毒DNA,经S1核酸酶消化、特异性单引物第一轮PCR扩增结合常规第二轮PCR扩增等研究,结果表明,类猪圆环病毒因子P1为单股、负链基因组。

应用高分辨熔点曲线分析区分类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型

为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HRM分析可区分相差1个碱基的靶序列。因此,HRM分析可为P1和PCV2的分子诊断提供一种新的技术手段。

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响

探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响。将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头。在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性进行检测。P1感染组的T淋巴细胞数量(绝对数和相对数)整体趋势低于对照组,而两组的T淋巴细胞增殖活性没有显著差别。P1感染对机体的细胞免疫功能有一定程度的影响。

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血单核细胞中细胞因子mRNA转录的影响

猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）属于圆环病毒科,无囊膜,基因组为单股环状DNA。PCV是迄今发现的一种最小的动物病毒,也是一种重要的病原微生物。根据致病性、抗原性及核苷酸序列的差异,PCV被划分成了无致病性的PCV1和有致病性的PCV2两个基因型[1-2]。猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）于1991年首发于加拿大,随后世界其他地方陆续报道。

类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用实时定量PCR技术对类猪圆环病毒因子P1感染猪不同时相猪肺泡巨噬细胞中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DR、SLA-DM和CD74及共刺激分子CD40、CD80和CD86 mRNA的表达进行了检测。结果表明,病毒感染后3 d,上述分子的mRNA表达皆低于对照组相应分子的mRNA表达。其中,CD80 mRNA的表达呈下调趋势(P<0.1),CD40、CD74和SLA-DR的mRNA的表达显著下调(P<0.05);感染后8 d的SLA-DR和SLA-DM以及感染后17 d SLA-DM的mRNA的表达有下调趋势(P<0.1);感染后24 d的CD86 mRNA的表达呈上调趋势(P<0.1);感染后40 d的CD74 mRNA的表达显著下调(P<0.05)。结果揭示,类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能有显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降及紊乱,进而使机体的体液免疫应答功能受到影响。

类猪圆环病毒因子P1感染对猪红细胞的影响

探讨类猪圆环病毒因子P1感染后,广西巴马小型猪发生贫血的类型,推断贫血发生的原因。12头30日龄的猪随机分成两组,每组6头,试验组经腹股沟淋巴结途径接种P1分子克隆。采用自动血液分析仪对接种后3d、8d、17d、24d、31d及40d猪的外周血进行红细胞各参数检测。统计分析结果显示P1感染后,与对照组相比,红细胞参数之间无差异的指标有RBC、HGB、HCT、MCV和MCHC等5项,而MCH在接种后17d明显降低,而RDW在31d增高明显。可见,猪感染类猪圆环病毒因子P1可导致小细胞低血色素性贫血。

新型抗病毒因子APOBEC3G研究进展

APOBEC3G是一种天然抗病毒活性的胞嘧啶脱氨基酶家族成员,近年来因其独特的抗病毒作用机制受到了广泛的关注。在艾滋病病毒(HIV)复制过程中,APOBEC3G大量包装进入新生成的病毒颗粒内部,诱导病毒负链cDNA胞嘧啶(C)脱氨基突变为尿嘧啶(U),导致病毒丧失活性。而HIV编码的Vif蛋白能拮抗APOBEC3G的脱氨基酶作用,二者形成动态平衡。作为一种机体天然抗病毒因子,APOBEC3G参与了宿主抵抗HIV入侵的防御机制,为新型抗病毒药物的开发和机体天然免疫机制的研究开拓了新的方向,可能对未来的HIV及其他病毒性疾病的防治提供新的线索并产生重要的影响。

天然食品中的抗病毒因子

本文将食品中的天然抗病毒因子按其生物化学特性进行了分类概述。这些抗病毒因子的生物化学结构涉及广泛,包括蛋白质、碳水化合物、维生素、微量元素、脂类等等。它们的抗病毒特性和抗病毒活性则是本文所要介绍的重点。

猪感染类猪圆环病毒因子P1后血小板的变化

探讨类猪圆环病毒因子P1感染对广西巴马小型猪血小板参数的影响。将12头30日龄的广西巴马小型猪随机、平均分成两组,实验组经腹股沟淋巴结途径接种类猪圆环病毒因子P1的分子克隆。采用自动血液分析仪检测接种后3d、8d、17d、24d、31d及40d猪的外周血血小板参数。统计分析显示猪感染P1后,与对照组相比,实验组的血小板平均体积(MPV)无显著差异,而血小板计数(PLT)和血小板压积(PCT)在接种后8d明显降低,血小板体积分布宽度(PDW)在接种后17d显著降低。

HIV-1 Vif与机体内在抗病毒因子APOBEC3G的研究进展

近期研究表明,非允许性细胞中存在的载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)是机体内在的抗病毒因子,它在人免疫缺陷病毒(HIV)反转录过程中,使所形成的负链cDNA中的胞嘧啶脱氨,进而降低病毒的感染力。而Vif蛋白可结合APOBEC3G,并激活泛素-蛋白酶体途径,使之降解,拮抗APOBEC3G的抗病毒活性,且二者之间的相互作用还存在种属特异性。Vif与APOBEC3G间的相互作用,为抗HIV药物的研究提供了新靶点。

团头鲂血清中抗病毒因子的研究

作者比较了团头鲂、草鱼、鲤鱼血清对草鱼出血病病毒（ＧＣＲＶ－８５４）的中和效价，发现团头鲂的血清中和效价高达６３００，并测得其春夏秋冬的中和效价无明显差异。用提纯的病毒蛋白偶联上Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ作为亲和层析柱，成功地从团头鲂血清分离到了抗ＧＣＲＶ－８５４的蛋白质因子。

非特异性抑制病毒因子的理化特性及作用机理

为探讨牛血清中非特异性抑制病毒因子的理化特性，作用机制及存在形式，本研究以鸡传染性法氏囊病病毒Ｄ７８（ＩＢＤＶ－Ｄ７８），貉细小病毒（ＲＥＶ）为指示病毒，应用蚀斑形成仰制试验，核内包涵体形成抑制试验等证明，成牛血清对病毒有较强的非特异性抑制作用（平均抑制率为８０％以上）而胎牛血清的这种作用很弱；成牛血清经乙醚，高岭土，受体破坏酶（ＲＤＥ）处理后，抑制作用显著降低．

类猪圆环病毒因子P1感染对外周血单个核细胞Toll样受体mRNA转录的影响

采用实时定量反转录多聚酶链反应方法,检测健康对照组及类圆环病毒因子P1感染组的猪外周血单个核细胞中TLRs mRNA的表达。结果表明,病毒感染后3 d,除TLR2和TLR10外,其余TLRs mRNA表达皆下调。此后不同时相感染组的TLRs mRNA表达水平基本都处于恢复、上调地位。具有明显变化的表现为感染后第24天和第40天,TLR2 mRNA的表达显著上调(P<0.05);此外,感染后第31天和第40天的TLR9 mRNA表达也呈现上调趋势(P<0.1)。结果提示,TLR2和TLR9介导的炎性反应可能在P1识别及其致病机制中起重要作用。

DNA病毒编码的病毒因子和病毒受体

ＤＮＡ病毒编码的病毒因子和病毒受体杨天兵金奇（病毒基因工程国家重点实验室，北京１０００５２）关键词ＤＮＡ病毒病毒因子病毒受体病毒在长期的进化过程中已演绎出一套用于逃避宿主免疫系统攻击，有利于病毒存活与繁殖的微妙策略。近年来国际上提出了病毒因子（ｖｉｒ...

家蚕消化液中抗病毒因子的研究进展

家蚕是一种鳞翅目的模式昆虫,具有重要的经济价值和科研价值。家蚕幼虫容易遭受病原体的侵染,其中以病毒病的危害最为严重。中肠在家蚕先天性免疫中起着重要的作用,是抵御病原体的第一道天然屏障。从家蚕的消化液中发现并分离出许多抗病毒物质。通过讨论病毒对家蚕的感染模式以及消化液中的抗病毒因子的研究进展进行综述,为抗病毒免疫的进一步研究以及其他生物的病毒病研究提供参考。

植物抗病毒因子

耶路撒冷希伯莱大学的研究者报道,他们从植物中分离出抗病毒因了(AvF),它与人β-干扰素极相似.这证实了更早的实验结果,即干扰素能抑制烟草叶花叶病这种危害许多种作物的病毒病;用AVF处理染病植物具有同样的抑制效果.研究者确信这一发现具有突破性.首先,可从不同来源得到相似的抗病毒物质。

中美发现大麦黄矮病关键病毒因子

农作物病害是影响全球粮食安全的重要因素之一。中美两国研究人员通过一项长达10年的合作研究,发现了影响全球谷物产量的主要病害——大麦黄矮病的关键病毒因子,一种名为BYDV 17K的蛋白。这一发现对于更深入地了解黄矮病发病机理,从而寻求更有效的病害防治手段具有重要意义。相关研究论文5月13日在线发表在《科学进展》杂志上。BYDV,即大麦黄矮病毒是一种独特的植物病原体,能感染超过150种禾本科植物。