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人乳头瘤病毒58型L1壳蛋白在原核细胞中的高效表达及抗体制备
被引量:
3
1
作者
田厚文
韩立群
+2 位作者
任皎
骆卫峰
阮力
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期317-320,共4页
目的 人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)是重要的高度致瘤性病毒之一 ,用原核细胞表达HPV5 8L1主要壳蛋白 (McP) ,并制备相应抗体血清 ,为基因工程疫苗研制打下基础。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV5 8L1完整编码区基因 ,并克隆、测序...
目的 人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)是重要的高度致瘤性病毒之一 ,用原核细胞表达HPV5 8L1主要壳蛋白 (McP) ,并制备相应抗体血清 ,为基因工程疫苗研制打下基础。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV5 8L1完整编码区基因 ,并克隆、测序。构建原核表达载体pRSETB 5 8L1,表达的L1蛋白经SDS PAGE纯化 ,免疫BALB c小鼠。结果 在原核细胞中表达了HPV5 8L1壳蛋白 ,该壳蛋白的相对分子质量为 6 0 0 0 0 ,此蛋白与HPV16L1抗体有交叉反应。获得抗HPV5 8L1壳蛋白特异性抗体 ,抗体滴度为 1∶80 ,并用该抗体鉴定了昆虫细胞中表达的HPV5 8L1壳蛋白。结论 HPV5 8壳蛋白在原核细胞中获得有效表达 ,纯化免疫小鼠后能产生抗HPV5 8L1特异性抗体 ,此抗体可用于鉴定真核细胞表达的HPV5
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关键词
人乳头状瘤
病毒
病毒基因表达调控
病毒
包膜蛋白质类
抗体
制备
原文传递
庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价
2
作者
丛郁
焦宏远
+2 位作者
张文英
田瑞光
詹美云
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期150-153,共4页
目的 表达庚型肝炎病毒 (HGV)基因组NS5区部分基因重组抗原 ,分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGVNS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThioC表达载体上 ,构建成 3个重组表达质粒 ,分别转化大肠埃希菌JM1 0 9(DE3) ,用IPTG诱导表达...
目的 表达庚型肝炎病毒 (HGV)基因组NS5区部分基因重组抗原 ,分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGVNS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThioC表达载体上 ,构建成 3个重组表达质粒 ,分别转化大肠埃希菌JM1 0 9(DE3) ,用IPTG诱导表达重组蛋白。表达产物经纯化后采用Westernblot和间接ELISA方法分析 3个重组蛋白的抗原性。结果 经酶切和序列分析鉴定正确 ,3种表达蛋白均高效表达且相对分子质量与预期大小相符。Westernblot分析和间接ELISA试验表明 ,3种表达蛋白均能与抗 HGV阳性血清发生特异性反应。将应用重组蛋白检测的抗 HGV抗体与混合重组抗原 (包括C区合成肽、NS5a合成肽、NS3区基因重组抗原 )的检测结果进行了比较 ,在混合重组抗原阳性的 2 2份血清中 ,P5a检出率为 68% (1 5 2 2 ) ,P5b检出率为 91 % (2 0 2 2 ) ,Pc 5b检出率为 73 % (1 6 2 2 )。在 70份阴性标本中 ,3种抗原的检出率分别为P5a:7% (5 70 ) ;P5b :1 % (1 70 ) ;Pc 5b :6 % (4 70 )。3个重组抗原单独检出阳性的标本 ,其中有一部分经RT PCR检测亦为阳性。结论 原核表达的NS5区蛋白所检测的抗 HGV抗体不能完全被其他区段的抗原所覆盖 ,是免疫诊断HGV感染所必需的抗原表位之一。
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关键词
庚型肝炎
病毒
病毒基因表达调控
抗原
原文传递
题名
人乳头瘤病毒58型L1壳蛋白在原核细胞中的高效表达及抗体制备
被引量:
3
1
作者
田厚文
韩立群
任皎
骆卫峰
阮力
机构
中国预防医学科学院病毒学研究所遗传与免疫研究室
出处
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期317-320,共4页
基金
欧共体合作项目基金资助 (No .ERBICI18 CT97 0 2 3 4 )
文摘
目的 人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)是重要的高度致瘤性病毒之一 ,用原核细胞表达HPV5 8L1主要壳蛋白 (McP) ,并制备相应抗体血清 ,为基因工程疫苗研制打下基础。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV5 8L1完整编码区基因 ,并克隆、测序。构建原核表达载体pRSETB 5 8L1,表达的L1蛋白经SDS PAGE纯化 ,免疫BALB c小鼠。结果 在原核细胞中表达了HPV5 8L1壳蛋白 ,该壳蛋白的相对分子质量为 6 0 0 0 0 ,此蛋白与HPV16L1抗体有交叉反应。获得抗HPV5 8L1壳蛋白特异性抗体 ,抗体滴度为 1∶80 ,并用该抗体鉴定了昆虫细胞中表达的HPV5 8L1壳蛋白。结论 HPV5 8壳蛋白在原核细胞中获得有效表达 ,纯化免疫小鼠后能产生抗HPV5 8L1特异性抗体 ,此抗体可用于鉴定真核细胞表达的HPV5
关键词
人乳头状瘤
病毒
病毒基因表达调控
病毒
包膜蛋白质类
抗体
制备
Keywords
Human papillomavirus
\ Gene expression regulation,viral
\ Viral envelope proteins
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价
2
作者
丛郁
焦宏远
张文英
田瑞光
詹美云
机构
中国预防医学科学院病毒学研究所肝炎研究室
出处
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期150-153,共4页
基金
国家"九五"攻关项目(96 90 6A 0 3 0 8)
文摘
目的 表达庚型肝炎病毒 (HGV)基因组NS5区部分基因重组抗原 ,分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGVNS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThioC表达载体上 ,构建成 3个重组表达质粒 ,分别转化大肠埃希菌JM1 0 9(DE3) ,用IPTG诱导表达重组蛋白。表达产物经纯化后采用Westernblot和间接ELISA方法分析 3个重组蛋白的抗原性。结果 经酶切和序列分析鉴定正确 ,3种表达蛋白均高效表达且相对分子质量与预期大小相符。Westernblot分析和间接ELISA试验表明 ,3种表达蛋白均能与抗 HGV阳性血清发生特异性反应。将应用重组蛋白检测的抗 HGV抗体与混合重组抗原 (包括C区合成肽、NS5a合成肽、NS3区基因重组抗原 )的检测结果进行了比较 ,在混合重组抗原阳性的 2 2份血清中 ,P5a检出率为 68% (1 5 2 2 ) ,P5b检出率为 91 % (2 0 2 2 ) ,Pc 5b检出率为 73 % (1 6 2 2 )。在 70份阴性标本中 ,3种抗原的检出率分别为P5a:7% (5 70 ) ;P5b :1 % (1 70 ) ;Pc 5b :6 % (4 70 )。3个重组抗原单独检出阳性的标本 ,其中有一部分经RT PCR检测亦为阳性。结论 原核表达的NS5区蛋白所检测的抗 HGV抗体不能完全被其他区段的抗原所覆盖 ,是免疫诊断HGV感染所必需的抗原表位之一。
关键词
庚型肝炎
病毒
病毒基因表达调控
抗原
Keywords
Hepatitis G virus
\ Gene expression regulation,viral
\ Antigens
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人乳头瘤病毒58型L1壳蛋白在原核细胞中的高效表达及抗体制备
田厚文
韩立群
任皎
骆卫峰
阮力
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
原文传递
2
庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价
丛郁
焦宏远
张文英
田瑞光
詹美云
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
原文传递
已选择
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