马病毒性动脉炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立检测马病毒性动脉炎病毒(EAV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对EAV ORF7基因序列设计引物及探针,并对其反应体系进行优化,建立标准曲线,结果显示,EAV荧光定量RT-PCR方法在退火温度为61℃、引物和探针终浓度均为0.6μmol/L的反应条件下效果最优;质粒标准品体外转录的cRNA在1.6×10^(7)拷贝/μL~1.6×10^(2)拷贝/μL时与Ct值之间呈现良好的线性关系,标准曲线方程为y=-2.68x+32.88,R^(2)=0.9927,初步建立了EAV荧光定量RT-PCR方法。采用该方法检测EAV、马焦虫、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马流感病毒,结果显示,该方法仅能特异性检测到EAV,其他病原检测均为阴性,该方法特异性强;将体外转录合成的质粒标准品cRNA 10倍倍比稀释后利用该方法检测,结果显示该方法最低检测限为1.6×10^(2)拷贝/μL,灵敏性高;重复性试验结果显示,该方法组内及组间变异系数均小于2.0%,重复性好。采用本实验建立的荧光定量RT-PCR方法和文献发表的EAV荧光定量RT-PCR方法分别对234份临床样品进行检测,两者的阳性检出率均为14.1%(33/234),两种方法的符合率为100%。本研究建立的荧光定量RT-PCR检测方法为马病毒性动脉炎的防控提供了新的技术手段和思路。

马病毒性动脉炎病毒数字PCR方法的建立

在马病毒性动脉炎病毒(EAV)基因组序列的高度保守区域ORF7上设计引物和探针,对反应体系中的条件进行优化,验证其灵敏性、特异性、重复性,建立了马病毒性动脉炎病毒数字PCR方法(digital PCR,dPCR)。结果显示,建立的EAV数字PCR方法在退火温度为58℃、引物终浓度为0.9μmol/L和探针终浓度为0.6μmol/L的反应条件下效果最优;该方法与马泰勒虫、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马流感病毒均无交叉反应;最低检测限为0.16 copies/μL;组内及组间变异系数均在2.5%之内;通过对234份临床样本进行dPCR检测,阳性检出率为15.81%,高于实时荧光RT-PCR方法检出率(14.1%)。结果表明,建立的dPCR能快速、精准定量EAV在样本中的病毒载量,可用于马病毒性动脉炎病毒的早期检测。

马病毒性动脉炎

马病毒性动脉炎由动脉炎病毒引起,对养马产业引起严重的经济损失。该病的临床表现和损伤类似于某些其他疾病,结合免疫组化的病理学检查、病毒分离和血清学检测可进行直接和准确的诊断。文章综合近年来的研究资料,着重对该病的临床损伤、发病机理及鉴别诊断做了简要叙述。

马病毒性动脉炎诊断技术研究进展

马病毒性动脉炎(EVA)是马属动物之间通过呼吸道或生殖器官传播的传染病,是危害养马业及赛马比赛的重要疾病之一,应用各种诊断技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。EVA的诊断技术包括检测病毒,检测血清抗体,涉及的技术和方法包括病毒的分离及中和试验、血凝及血凝抑制试验、免疫荧光试验以及酶联免疫吸附试验等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据目的及工作条件等综合情况予以选择,论文就各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。

马病毒性动脉炎的检测诊断及防控建议

马病毒性动脉炎由马动脉炎病毒引起,以水肿、出血以及孕马流产为主要临床特征,在马属动物之间通过呼吸道或生殖器官传播,马病毒性动脉炎为禁止入境我国的二类动物传染病。本文概括比较马病毒性动脉炎的临床诊断、实验室病原学、血清学等检测诊断方法,在实际应用中要综合考虑不同检测方法的优点及局限性,根据检测目的针对性选择以更好准确诊断。基于我国当前马病毒性动脉炎的流行现状,建议密切关注国内外最新流行动态,建立完善的生物安全措施,全力确保我国马业的安全健康发展。

马的病毒性动脉炎

马的病毒性动脉炎四川省养猪研究所（６３２４６０）黄正才马的病毒性动脉炎（ＥＶＡ）是以危害生殖器和呼吸道为主要特征的马特有的传染病。本病自１９５３年由美国Ｄｏｌ等从马流产死胎体内最初分离病毒以来，到目前为止本病毒仍是导致马流产的主要病因之一。本病的重要...

马病毒性动脉炎实验室诊断技术研究进展

马病毒性动脉炎是由马动脉炎病毒引起的一种马属动物呼吸道和生殖道疾病,是危害马业的疾病之一。该病引起的发热和流产等症状易与某些马属动物疾病混淆,给临床诊断带来了一定的困难,因此,结合实验室检测进行准确的诊断是关键。实验室检测方法主要有病原学检测方法和血清学检测方法,每种检测方法都有其各自的优点和不足,要根据不同的检测目的进行选择或者联合使用,综合分析数据。论文对该病实验室诊断技术的最新研究进展进行综述,为马病毒性动脉炎的诊断与防控提供参考。

新疆马病毒性动脉炎的血清学调查

为搞清马病毒性动脉炎在新疆昭苏县的流行情况,本实验采用法国进口马病毒性动脉炎间接ELISA诊断试剂盒对来自新疆4个地区的435份马血清样品进行检测结果显示,有2份血清检测为阳性,阳性率为1.26%。其中伊犁种马场,昭苏种马场和哈密伊吾县送检血清均为阴性,巴州和静县检出2份阳性血清。目前该病在我国还没有分离到病毒的相关报道,本次流行病学调查研究,对于该病在我国新疆地区的流行现状具有重要的指导意义。

新疆部分地区马病毒性动脉炎的血清学调查

为了解马病毒性动脉炎(EVA)的流行现状,采集新疆部分地区马血清样品388份,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测EVA血清抗体,分析不同品种、性别及地区EVA血清抗体阳性率。结果显示,EVA血清抗体总阳性率为10.31%(40/388),昌吉、伊宁、巴州和哈密地区EVA血清抗体阳性率分别为7.50%(18/240)、2.74%(2/73)、41.46%(17/41)和8.82%(3/34),其中巴州与其他地区差异显著(P<0.05)。纯血马、伊犁马、哈萨克马、焉耆马和伊吾马EVA血清抗体阳性率为2.00%~41.46%,纯血马显著低于其他品种马(P<0.05)。公马EVA血清抗体阳性率(35/272,12.87%)显著高于母马(5/116,4.31%)(P<0.05)。表明EVA血清阳性率与品种、性别和地区相关,研究结果为EVA的流行病学研究提供了基础数据。

马病毒性动脉炎

马病毒性动脉炎（Equineviral Arteritis，EVA）又称马传染性动脉炎，是一种由马病毒性动脉炎病毒（Equine Arteritis Virus，EAV）引起的、在马属动物之间传播的急性接触性传染病。1957年，美国Doll等人首次从流产的马胎儿中分离出病毒（Bucyrus株），并将该病毒命名为马动脉炎病毒（Equine Arteritis Virus，EAV）。

新疆地区2011～2012年马病毒性动脉炎的血清学调查

本实验采用法国进口马病毒性动脉炎间接ELISA诊断试剂盒对来自新疆4个地区的435份马血清样品进行检测,结果显示,有2份血清检测为阳性,阳性率为1.26%。其中伊犁种马场、昭苏种马场和哈密伊吾县送检血清均为阴性,巴州和静县检出2份阳性血清。目前该病在我国还没有分离到病毒的相关报道,本次流行病学调查研究,对于该病在我国新疆地区的流行现状具有重要的指导意义。

马病毒性动脉炎血清微量中和试验的研究及应用

参照美国的马病毒性动脉炎（ＥＶＡ）诊断技术和马动脉炎病毒（ＥＡＶ）标准种毒和阳性、阴性血清，确立了ＥＡＶ在ＲＫ－１３细胞上生长的最适条件，制备了标准ＥＡＶ高免血清建立了ＥＡＶ微量中和试验。通过对进出口的５５０头份马血清抗体检测，有１９头血清抗体滴度达１４～１１２８。用标准马传贫阳性血清进行交叉中和试验未发现交叉反应；用自制的琼扩抗原进行比较试验，有８头份为阳性，证实微量血清中和试验与琼扩试验的符合率为４２．１％。

马病毒性动脉炎的研究进展

马病毒性动脉炎的研究进展连云港动植物检疫局朱其太马病毒性动脉炎（Ｅｑｕｉｎｅｙｉｒｕｓａｒｔｅｒ－ｉｉｓ，ＥＶＡ）是由马动脉炎病毒（Ｅｑｕｉｎｅａｒｔｅｒ－ｔｉｔｉｓｙｉｒｕｓ，ＥＡＶ）引起马的一种急性传染病，该病曾被称为“流行性蜂窝织炎火腿”或“马...

马病毒性动脉炎血凝及血凝抑制试验研究与应用

在ＲＫ－１３细胞上培养的马动脉炎病毒在４℃、室温和３７℃条件下，用各种动物的红细胞进行血凝试验，证实病毒在不同温度下均可凝集小鼠和鸡的红细胞，但不能凝集牛、绵羊、山羊、马、猪、豚鼠、仓鼠、兔及鹅红细胞。病毒用吐温－８０和乙醚处理后，血凝活力会显著增强，其血凝滴度比未经处理的病毒高４～８倍，且血凝像更加清晰。最适处理条件是病毒在冰浴状态下用终浓度０．０６％～０．１２５％（Ｖ／Ｖ）吐温－８０振荡处理１５ｍｉｎ～６０ｍｉｎ，再加５０％（Ｖ／Ｖ）乙醚振荡作用５ｍｉｎ～１５ｍｉｎ。用ＥＡＶ免疫ＳＰＦ豚鼠，４周后采血做ＨＩ和ＮＴ试验，显示ＨＩ抗体和ＮＴ抗体产物成正相关。对５５０份来自新西兰、吉尔吉斯、内蒙古、新疆的马血清做ＥＡＶ的抗体检测。比较两个试验，二者符合率为９７．８％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关，但抗体效价略低于后者。

马病毒性动脉炎病毒中和试验的建立以及与ELISA方法的比较研究

参照世界动物卫生组织(OIE)《陆生动物诊断与疫苗手册》,建立了马病毒性动脉炎病毒中和试验,并采用马病毒性动脉炎病毒中和试验(Virus Neutralization Test,VNT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法,对广东省部分地区马场共182匹马血清和7份标准阴阳性血清进行马病毒性动脉炎抗体的检测,并对两种方法进行比较分析,结果两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为43.48%和96.34%,总符合率为93.12%;以我们建立的VNT作为马病毒性动脉炎抗体检测的"金标准",试验中所用的ELISA方法的敏感性和特异性分别为71.43%和93.96%。因此,我们认为在马病毒性动脉炎抗体检测中,ELISA的敏感性以及与VNT的阳性符合率较低,不适合作为VNT的替代方法。

在进口赛马中检出马病毒性动脉炎病

1995年10月,新疆喀什某公司从吉尔吉斯进口6匹赛马,根据条款进行了马病毒性动脉炎应用微量中和试验检查,发现5匹马血清EAV抗体阳性,抗体从1:8—1:32。而条款要求EAV血清抗体滴度1:4为阳性。

马病毒性动脉炎的检测诊断及防控建议

马病毒性动脉炎是由马动脉炎病毒引起的疾病,主要通过呼吸道或生殖器官进行传播。当前我国将该病被列为二类动物传染病,对马的健康生长有较大的影响,也是伊金霍洛旗无规定马属动物疫病区建设控制疫病种类之一。基于此,本文介绍了马病毒性动脉炎的检测、诊断方法,提出了防该病的有效控建议。