2016—2018年天津地区规模化猪场猪主要病毒性腹泻病原的调查与分析

为了确定2016—2018年天津地区规模化猪场流行的猪腹泻病主要病原,试验共采集腹泻样品1519份,应用RT-PCR的方法进行病原检测,检测病原包括猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(RV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV),对样品的PEDV、PDCoV、TGEV和RV的阳性率进行统计,并按不同年份、不同地区、不同月份、不同季节及猪群腹泻病原混合感染和单一感染情况进行统计分析。结果表明:PEDV是导致天津地区猪群发病的主要病原,2016,2017,2018年阳性率分别为56.60%、45.44%、55.78%;其次为PDCoV,阳性率分别为25.24%、26.64%、33.33%;TGEV阳性率分别为7.46%、5.98%、7.48%;RV阳性率分别为5.54%、5.27%、5.10%。统计不同地区腹泻病毒的感染情况,发现宁河区的PEDV阳性率较高,为13.03%,静海区的TGEV阳性率是2.17%;RV和PDCoV在宝坻的阳性率较高,分别是1.38%和8.10%。PEDV和RV在春季高发,阳性率是60.06%和5.91%;TGEV在夏季阳性率较高,为7.33%;PDCoV在秋季阳性率较高,为40.06%。在被检样品中,混合感染病例占6.91%(105/1519),其中PEDV和RV混合感染率最高,为2.11%(32/1519)。说明天津地区猪腹泻病病原种类多且感染情况复杂,给该地区猪场的腹泻病防控工作带来了严峻的挑战。

重组酶聚合酶扩增技术及其在猪病毒性腹泻病原基层现场检测中的应用

猪病毒性腹泻是对养猪业危害严重的一类疾病,导致仔猪大量死亡,损失惨重。重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是一种核酸恒温扩增技术,恒温条件下,短时间内实现靶基因大量扩增,可实现病原的现场快速检测,具有广阔的应用前景。文章综述了RPA技术的原理、产物检测方式及在猪病毒性腹泻病原检测中的应用,旨在为猪病毒性腹泻病原的基层现场检测提供参考。

猪四种病毒性腹泻病原多重PCR检测方法的建立及应用

分别以猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因、猪轮状病毒(Po RV)VP6基因、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因、猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Npro基因为靶基因,参照Gen Bank上登录的基因序列,利用DNAStar和Oligo7软件设计了4对引物。采用PCR分别扩增各病毒基因,并克隆至p MD18-T载体,获得4个阳性重组质粒。以重组质粒为模板,进行多重PCR方法的优化。特异性试验检测可分别扩增出相应的病毒基因片段;敏感性试验结果显示,检测PEDV、TGEV、Po RV及BVDV质粒的最低拷贝数分别为730copies/L、547 copies/L、6.47×103copies/L、705 copies/L。应用该方法对猪场44份猪腹泻样品进行检测,结果检出15份PEDV样品,3份TGEV样品,2份BVDV样品,其中PEDV与TGEV混合感染样品2份,TGEV与BVDV混合感染样品1份。随机抽取其中2份PEDV阳性样品进行病毒分离,病毒经细胞传3代以上PCR检测均为阳性,对PCR产物测序证实为PEDV。结果表明,本研究建立的多重PCR方法具有快速、简便、特异性强、敏感度高的特点,能够对PEDV、Po RV、TGEV和BVDV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。

牛病毒性腹泻病毒的分子生物学研究进展

牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)是导致牛腹泻的重要致病病毒之一,BVDV感染不仅能造成严重的临床症状,且可导致患畜的免疫力降低从而感染其他病原,致使患病动物的发病率和死亡率大大增加,给养牛业造成重大的损失。随着近年来分子生物学相关理论及技术不断发展,对于BVDV的研究逐渐深入,人们对该病毒的分子生物学方面有了一些新的了解,作者主要从BVDV的病毒粒子结构组成及功能、国内外的流行情况和BVDV基因的遗传与变异情况3个方面阐述近几年BVDV的分子生物学研究进展。