柯萨奇病毒A6型空心和实心病毒抗原检测系统的建立和应用

目的建立和应用柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)空心和实心病毒抗原检测系统。方法利用蔗糖密度梯度分离CV-A6空心和实心病毒颗粒,采用CV-A6病毒纯化液免疫Balb/c小鼠,筛选出特异性强的CV-A6空心和实心病毒单克隆抗体,进行效价测定;CV-A6单克隆抗体与多克隆抗体进行酶联免疫吸附试验双抗夹心系统匹配,建立病毒抗原检测系统,验证其线性、灵敏度、结合能力和特异性;应用其检测CV-A6疫苗研发过程中的抗原含量。结果本研究获得了特异性强的CV-A6空心和实心病毒颗粒单克隆抗体,效价分别为10^(7)和10^(6);分别与CV-A6兔多克隆抗体匹配出ELISA双抗夹心病毒抗原检测系统。该系统与其他肠道病毒无交叉反应,与CV-A6空心和实心病毒抗原含量存在明显的剂量效应关系,对CV-A6疫苗研究过程中的各工序段样品含量的检测结果准确。结论本研究建立的CV-A6空心和实心病毒抗原检测系统符合定性和定量检测需求,为CV-A6疫苗研究提供了一种快捷和准确的抗原含量检测方法。