疫苗制备中外源病毒检测方法

疫苗安全性是公众及药品监管机构非常关注的问题。由于疫苗生产原材料如组织、细胞基质、血清、胰蛋白酶等来源于动物,因此疫苗产品存在外源病毒污染的风险。外源病毒对人有潜在危害,实施系统性的检测和采取严格的预防措施可以有效降低外源性因子污染的风险。几十年来,某些经典的检测法已经成为广谱筛查外源病毒污染的标准方法,但其存在一定的局限性。随着大规模基因并行测序、微阵列等分子生物学检测新方法的建立,疫苗外源因子检测方法日趋多样化,增加了检测疫苗外源因子污染种类和概率。

肠道病毒检测方法述评

综述了肠道病毒的种类、结构、生物学特性、致病性及肠道病毒的检测方法.通过对各方法优缺点的比较,认为免疫学检测方法在方便快速检测肠道病毒中的独特优势,尤其是免疫胶体金标记法和酶联免疫吸附试验备受青睐.提出确定肠道病毒的共同抗原和研制胶体金多元化检测试纸条可作为今后肠道病毒的通用检测方法的研究重点.

云计算环境下编程过程病毒检测方法仿真

互联网技术的飞速发展,传统的病毒防护系统已经无法快速、及时处理日益增多的网络安全威胁。为了解决传统方法存在的弊端,提出基于云计算环境下的编程病毒检测方法。根据OpenFlow交换机的流表项,分析云计算环境下编程过程病毒的特性,提取病毒特征。建立支持向量机(SVM)分类器,利用粒子群算法优化SVM参数,获取最优参数,将病毒特征输入到最优分类器,由最优SVM检测编程病毒。实验结果证明,所提方法能够快速、及时为用户提供病毒检测服务,保证平台的安全运行。

鸡传染性法氏囊病病毒检测方法研究进展

对鸡传染性法氏囊病病毒检测方法研究进展进行了综述。

JC病毒检测方法研究进展及对比

JC病毒（John Cunningham virus, JCV）属于乳多空病毒科（Papovaviridae）多瘤病毒属（Orthopolyomavirus），1971年从进行性多灶性白质脑病（progressive multifocal leukoencephalopathy, PML）患者的脑中分离并以该患者名字命名，普通人群血清阳性检测率为40%～60%，因AIDS并发PML的患者致死率约为50%，对于免疫力缺陷和免疫力低下的既往感染者，还会引起多瘤病毒相关性肾病（polyomavirus-associated nephropathy, PVAN）、病毒血症等相关疾病，并与胃癌、肺癌、食管癌等癌症的发生密切相关，但其致病机理尚未阐明。由于目前无特异的预防和治疗方法，因此在病毒感染早期的准确检测对疾病的诊断和治疗十分关键，尤其在免疫低下的人群中实现高效、精准、及时的检测至关重要。本文对现有JC病毒的检测技术进行了分析与总结，一些新兴技术的涌现将为实现临床上快速、高效的检测提供参考。

血液筛查中常用的丙型肝炎病毒检测方法分析

目的:探讨血液筛查中常用的丙型肝炎病毒检测方法分析。方法:选择从2016年3月～2017年3月输血前或手术前需检测丙型肝炎病毒抗体患者11216例纳入本次研究工作,均使用胶体金法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒进行检测,使用酶联免疫吸附试验丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒及化学发光测定法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒对检测结果为阳性及可疑的标本进行复检。结果:经胶体金法检测结果可知,检出阳性及可疑的标本223例;应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有27例、9例、187例;应用化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有21例、5例、197例;两组一致性强度较好(Kappa=0.728, U=16.21, P<0.01)。检出56例可疑标本应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有5例、15例、36例;化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有6例、10例、40例;两组一致性强度中等(Kappa=0.496, U=6.78, P<0.05)。检出167例阳性标本应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有6例、14例、147例;化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有5例、9例、146例;两组一致性强度较好(Kappa=0.704, U=11.57, P<0.01)。结论:在临床血液筛查中使用酶联免疫吸附试验法、化学发光测定法等常用丙型肝炎病毒检测方法的可疑标本检测结果一致性中等,而阴性标本及阳性标本检测结果一致性较好,临床可使用更特异、更敏感检测方法以验证其可疑结果。

贝氏方法在检测计算机病毒中的应用

随着网络技术的急速发展与普及,计算机病毒以广域网、电子邮件等为媒介,发生速度和传播速度越来越迅猛,危害程度和危害范围也越来越大,如果不能有效地加以控制和制止,它的破坏将是灾难性的。由于现存的病毒检测方法无法对抗新发生的计算机病毒,在病毒的遏制方面十分被动。贝氏方法一直被应用于垃圾邮件的检测中,并显示了良好的性能,而应用于计算机病毒检测的研究却非常少。该研究利用贝氏理论找到一种具有预知性的检测病毒的新方法,试验证明,利用该研究提出的新的贝氏方法来检测已知的病毒和新出现的病毒,检测率要高于其他的贝氏方法。能够检测出新发生的计算机病毒,对病毒的防范与根除无疑是积极的。

丙型病毒性肝炎临床检测方法的相关性分析

目的:分析丙型病毒性肝炎(HCV)临床检测方法的相关性及其诊断价值。方法:选取偃师市人民医院2011年10月至2012年10月收治的疑似HCV患者86例,分别进行酶联免疫吸附法抗HCV检测、ALT检测、HCV-RNA定量检测,分析3种检测方法的相关性。结果:抗-HCV阳性率、ALT检测异常率与HCVRNA滴度均呈正相关(P<0.05)。结论:HCV-RNA、ALT和抗-HCV三者联合检测能够提高丙肝诊断的准确率,在HCV的早期治疗和预防方面有重要的临床应用价值。

禽流感H_5、H_7、H_9亚型多重实时荧光RT-PCR检测方法的建立

禽流感病毒抗原变异性强,血清亚型多,涉及的范围广。所以,需要进一步实行保护,才能避免交叉感染。但在禽流感病毒检测时,每种检测方法每次只能检测禽流感单个亚型,耗时长。本研究的目标是采用多重实时荧光RT-PCR技术,同时检测禽流感H、H、H亚型,并研制相应的快速检测试剂盒。

Yamagata系乙型流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

目的制备Yamagata系乙型流感病毒血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)的特异性单克隆抗体,建立检测Yamagata系乙型流感病毒的双抗体夹心ELISA方法。方法用Yamagata系乙型流感病毒(B/Phuket/3073/2013)抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,通过4次有限稀释获得阳性杂交瘤细胞并建株。将单克隆抗体1F7和2H6分别作为捕获抗体和检测抗体,建立一种检测Yamagata系乙型流感病毒的双抗体夹心ELISA法。结果该方法中捕获抗体1F7在96孔板的包被量为40 ng/孔,检测抗体2H6工作浓度为100 ng/孔;该方法仅能与Yamagata系乙型流感病毒发生反应,具有较强特异性。灵敏度分析显示,该方法对病毒尿囊液和病毒纯化HA蛋白最低检测值分别为2-1 HAU/100μL和1.22 ng/mL,具有较高灵敏度。重复性试验表明,该方法批内和批间重复性变异系数均小于5%。结论本研究建立的ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为Yamagata系乙型流感病毒快速诊断及定量检测提供技术支持。

逆转录病毒及对生物制品污染的安全问题

自80年代发现引起人类淋巴细胞白血病和艾滋病等疾病的病源体都属于逆转录病毒以来,大量文献对逆转录病毒及其逆转录酶的研究进行了报道。随着人们越来越重视生物制品的外来因子污染问题[1],而对于生物制品如疫苗等的生产用动物源细胞基质逆转录病毒的安全检测一直是WHO以及药品监管部门关注的重点。本文就这方面的研究进展作一综述。

梨叶片中苹果褪绿叶斑病毒的引物原位标记检测

选用带苹果褪绿叶斑病毒的香梨叶片,制备成适合进行原位RT-PCR的石蜡切片。设计特异引物,利用引物原位标记(Primedin situlabeling,PRINS)技术对切片组织中的病毒进行了检测研究,结果表明,PRINS-FITC染色法和PRINS-Rhodamine染色法均能获得良好的检测效果,有病毒部位分别显示绿色荧光和红色荧光,而且荧光出现的位置与原位RT-PCR检测的结果一致。由此证明引物原位标记技术可用于果树病毒的原位检测。

口罩病毒提取法检测呼吸道病毒的可行性及精确性验证

目的 探讨一种通过提取口罩残留病毒来检测呼吸道病毒的新方法,并且验证其可靠性和灵敏度。方法将不同稀释浓度的新型冠状病毒类似物--鸡新城疫病毒La Sota株及传染性支气管炎病毒H120株的稀释液通过呼吸模拟器喷洒至医用外科口罩及N95口罩,在室温环境中分别静置2 h和12 h,利用普通PCR技术及实时荧光定量PCR技术检测鸡新城疫病毒N基因条带和传染性支气管炎病毒NP基因条带及其扩增循环数(CT);对比不同存留时间下口罩中最低可检测病毒浓度及病毒含量。结果 不同时间存留的口罩均可以检出新型冠状病毒类似物--鸡新城疫病毒La Sota株及传染性支气管炎病毒H120株的基因条带,且病毒总RNA在10 pg~10 ng的范围内均有较好的扩增曲线。2 h内提取的病毒残留物,普通医用外科口罩和N95口罩检测N基因、NP基因的CT均值分别为22.55±0.34、23.70±0.50和22.86±0.31、24.04±0.34;但12 h后只有部分可被检测到,且两种口罩在相同时间内CT值无统计学差异(P=0.452、P=0.355)。口罩中最低可检测病毒的稀释浓度为1∶800,可检测残存病毒数量约为6.75×10^(3)个。结论 通过检测2 h内口罩中残留病毒来筛查冠状病毒的方法是可行的,且适用于医用外科口罩及N95口罩,该方法可以用于呼吸道病毒的初步筛查。

5种新冠病毒呼吸检测仪

越来越多的音乐会场馆、国际机场甚至是餐厅都要求顾客在进入前提供新冠病毒阴性检测报告.有些机构还要在现场进行检测.不过,目前的新冠病毒检测方法不够方便,不便于有些企业进行大规模的每日筛查.快速抗原检测需要15分钟,而且供应不足.黄金标准分子检测的结果通常需要数天才可以得出.这两种方法一般都需要在鼻腔内搅动棉签,正要去喝一杯鸡尾酒的人往往不愿意这样做.

前沿科技动态

英国研究人员开发纳米粒子新冠病毒检测方法据cnBeta网2022年4月16日消息,英国纽卡斯尔大学研究人员发明了一种使用分子印记聚合物纳米颗粒代替抗体的新冠病毒检测方法。研究人员通过在纳米颗粒中创建分子印记,生产了针对新冠病毒刺突蛋白的一个小片段nanoMIPs,其可以与新冠病毒结合。研究人员开发了一种3D打印设备,将7名患者的鼻咽拭子样本放入该设备,15分钟后,检测到了COVID-19阳性样本的温度变化。nanoMIPs还能在更极端的温度条件下发挥作用,能够耐受炎热的气候。该方法更灵敏、更高效,能发现低病毒负荷的早期感染,对监测废水和唾液样本非常有帮助。

《华南预防医学》2022年刊授试题

1.影响新冠肺炎疫苗免疫原性的因素有哪些?2.灭活疫苗、减毒活疫苗、DNA疫苗、RNA疫苗、亚单位疫苗和病毒载体疫苗这6种类型的新冠疫苗有何区别?3.目前常用的新冠病毒检测方法有核酸检测和抗原检测,二者有何区别?4.常见的传染病动力学模型有哪些?各自的模型假设是什么?