病毒白细胞介素-10的基因克隆与原核表达

目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因。PCR产物经EcoRI和XhoI双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在IPTG诱导下表达目的蛋白。结果:以终浓度为100μmol/L的IPTG于30℃诱导6h后,重组菌可高效表达相对分子质量(Mr)约为24000的His-vIL-10融合蛋白。结论:成功地克隆vIL-10的编码基因并在大肠杆菌中高效表达,为制备抗vIL-10单克隆抗体(mAb)、分析vIL-10结构与功能的关系提供了条件。

基于血清白细胞介素-10水平探究扫白茴风丸治疗白癜风的临床疗效及作用机制

目的观察扫白茴风丸治疗阳虚血瘀型白癜风的临床指标及对血清中白细胞介素-10(IL-10)水平的影响。方法选取2020年1~11月就诊于黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科门诊的阳虚血瘀型白癜风患者120例,随机分为治疗组和对照组各60例。治疗组采用扫白茴风丸,对照组予中成药白癜风丸,2组共治疗4个月。4个月后观察2组白斑面积、临床疗效、皮肤病生活质量指数(DLQI)评分、血清中IL-10水平和不良反应的情况。结果治疗4个月后,2组均可以改善白斑面积,治疗组效果更加确切[(5.68±3.29)cm^(2)比(8.34±4.21)cm^(2),P<0.01];DLQI评分均有所下降,治疗组评分更低[(5.67±2.20)分比(7.79±2.35)分,P<0.01];血清IL-10水平均有上升,且治疗组优于对照组[(149.07±26.39)pg/mL比(139.35±24.70)pg/mL,P<0.05]。治疗组总有效率高于对照组(93.10%比82.14%,P<0.05);治疗期间2组均无不良反应发生。结论扫白茴风丸治疗阳虚血瘀型白癜风患者有效且效果优于白癜风丸,能够缩小患者白斑面积,改善生活质量,并可以调节患者机体的免疫功能,使血清中IL-10水平趋向正常。

人乳头瘤病毒感染合并宫颈病变患者血清青 白细胞介素-10和转化生长因子-β_(1)水平及其与病毒载量的关系研究

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染合并宫颈病变患者血清白细胞介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β_(1)水平及其与病毒载量的关系。方法回顾性选取2021年3月至2023年6月在我院确诊的HPV感染合并宫颈病变患者60例,同期纳人在妇科健康体检的女性志愿者50名为健康组,检测高危型HPV-DNA负荷量和血清IL-10、TCF-β_(1)水平,分析IL-10、TGF-β_(1)与宫颈病变程度、病毒载量的关系。结果宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级组(73%)、宫颈癌组(92%)高危型HPV-DNA检出率均明显高于CINI级组(33.3%)(=4.821、10.155,P=0.028、0.001),宫颈癌组(92%)高危型HPV-DNA检出率高于CINIⅡI级组(59%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.224,P=0.039);血清IL-10、TCF-β_(1)水平比较,宫颈癌组>CIN组>健康对照组,组间差异均具统计学意义(P<0.05);CIN组内比较显示,癌前病变程度越高,患者血清IL-10、TCF-β_(1)水平越高,差异有统计学意义(P<0.05);HPV感染合并宫颈病变患者血清IL-10、TCF-β_(1)水平比较,HPV病毒载量>1000组、101~1000组、1~100组依次降低,且两两比较组间差异有统计学意义(F=25.494、7.539,P<0.001);经Spearman相关性分析,HPV-DNA病毒负荷量与血清IL-10、TGF-β_(1)水平均呈显著正相关(r=0.461、0.172,P<0.05)。结论血清IL-10、TCF-β_(1)水平与宫颈病变严重程度有关,二者表达水平与HPV病毒载量呈正相关,检测血清IL-10和TGF-β_(1)对评估宫颈病变病情具有重要参考价值。

动脉导管未闭患儿手术前后血清脑利钠肽、肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-10水平变化及临床检测价值研究

目的:探讨动脉导管未闭(PDA)患儿手术前后血清脑利钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)水平变化及临床检测价值。方法:选取PDA患儿124例为观察组,选取年龄相当的体检健康者124名为观察组。比较两组及观察组患儿手术前后心脏结构指标[左心房内径(LAD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)及右心室舒张末期内径(RVEDD)]、Tei指数及血清BNP、TNF-α和IL-10水平。分析PDA患儿心脏结构指标、Tei指数与血清BNP、TNF-α和IL-10水平的相关性。分析血清BNP、TNF-α和IL-10对PDA的诊断价值。结果:观察组LAD、LVEDD、LVESD、RVEDD、Tei指数及血清BNP、TNF-α和IL-10水平高于对照组(均P<0.05)。术后3 d和术后3个月PDA患儿LAD、LVEDD、LVESD、RVEDD、Tei指数及血清BNP、TNF-α和IL-10水平低于术前,且术后3个月低于术后3 d(均P<0.05)。PDA患儿LAD、LVEDD、LVESD、RVEDD及Tei指数与血清BNP、TNF-α和IL-10水平呈正相关(均P<0.05)。血清BNP、TNF-α和IL-10对PDA均有一定诊断价值,三者联合的诊断价值更高(均P<0.05)。结论:PDA患儿心脏结构指标、Tei指数与血清BNP、TNF-α、IL-10水平均升高,术后以上指标得到一定改善,且血清BNP、TNF-α和IL-10三者联合检测对PDA的诊断价值较高。

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染患儿血清干扰素-γ、白细胞介素-10的检测

目的 :探索呼吸道合胞病毒所致下呼吸道感染 (LRTI)的免疫学发病机制。方法 :采用双抗体夹心ELISA法对30例呼吸道合胞病毒 (RSV)所致下呼吸道感染患儿血清进行了干扰素_γ(IFN_γ)和白细胞介素_10(IL_10)的检测。结果 :RSV所致下呼吸道感染患儿血清中IFN_γ水平明显降低 ,IFN_γ的降低与疾病的严重程度相关 ,而IL_10水平明显高于健康儿童 ,两者呈负相关。结论 :IFN_γ在RSV所致下呼吸道感染中起着重要作用 ,并与疾病的严重程度相关 ,IL_10与感染后喘息的发作有关。

乙型肝炎病毒C基因启动子变异与白细胞介素10与12、肿瘤坏死因子α、γ-干扰素及病毒含量的关系

目的探讨慢性肝病患者乙型肝炎病毒C基因启动子变异(HBV BCP)与血清白细胞介素10(IL-10)、12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及病毒含量(HBV DNA)的关系。方法采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,对176例HBV慢性感染者(慢性乙型病毒性肝炎轻、中、重度,肝炎肝硬化,慢性重型肝炎和原发性肝癌)血清进行检测HBV BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764碱基G→A联合突变;采用双抗体夹心ELISA检测技术,检测患者血清细胞因子(IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ)水平。结果HBVBCP变异阳性组、阴性组间对细胞因子(IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ)及HBV DNA复制水平的影响差异有统计学意义(P<0.05),BCP变异阳性组的血清IL-10(80.96±30.86vs72.11±24.19 mg/L)I、L-12(41.33±15.10vs35.98±14.47 mg/L)、TNF-α(56.04±27.05vs38.01±10.49 mg/L)、IFN-γ(19.81±12.29vs16.55±8.99mg/L)和HBV DNA(108.2478±0.9826vs105.8876±1.4822拷贝/ml)的水平明显高于BCP变异阴性组。结论HBV BCP变异可导致血清IL-10I、L-12、TNF-α、IFN-γ和病毒复制水平增高。

白细胞介素-10基因多态性与乙型肝炎病毒感染的关系

目的:探讨中国人白细胞介素-10基因启动子单核苷酸多态性与乙型肝炎病毒感染之后临床发展之间的关系.方法:分别采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-序列特异性引物扩增法(PCR-SSP)检测478例慢性乙型肝炎患者,223例乙肝病毒携带者及267例自限性感染者基因组DNAIL-10基因启动子区域3个多态位点-592、-819、-1082的基因多态性,并进行相关性分析.结果:IL-10-1082A等位基因及AA基因型在慢性乙型肝炎患者组的频率明显高于自限性感染者组和乙肝病毒携带者组(A:χ2=37.72,P=0.000;χ2=45.23,P=0.000;AA:χ2=20.53,P=0.000;χ2=19.14,P=0.000).IL-10-819T等位基因及TT基因型在慢性乙型肝炎患者组的频率也高于自限性感染者组和乙肝病毒携带者组(T:χ2=10.5,P<0.001;χ2=17.38,P<0.001;TT:χ2=8.76,P=0.003;χ2=5.656,P=0.017).IL-10-592C/A等位基因频率和AA/CC/AC基因型在三组的分布没有统计学意义(P>0.05).结论:IL-10基因启动子多态性与乙肝病毒感染后临床发展过程可能相关.

血清白细胞介素-17A和白细胞介素-10对急诊重症肺炎患者预后的影响

目的探讨血清白细胞介素(IL)-17A和IL-10变化对急诊重症肺炎患者预后的影响。方法对2020年4月至2024年4月山西医科大学附属运城市中心医院重症监护病房(ICU)收治的246例急诊重症肺炎患者的临床资料进行回顾性分析,根据发病后28 d内生存情况将患者分为预后不良组(n=41)和预后良好组(n=205)。比较两组血清IL-17A和IL-10水平变化,分析两指标对急诊重症肺炎患者预后的影响。结果预后不良组改良的肺炎评分(CURB-65)、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分、有创机械通气占比、白细胞计数、D-二聚体、C反应蛋白、入院时血清IL-17A及IL-10水平均高于预后良好组(P<0.05);Cox回归分析显示,CURB-65评分、APACHEⅡ评分、白细胞计数、C反应蛋白、IL-17A及IL-10均是急诊重症肺炎患者预后不良的影响因素(P均<0.05);预后不良组入院时、入住ICU 24 h和48 h时血清IL-17A和IL-10水平均高于预后良好组(P<0.05);限制性立方样条结果显示,当IL-17A>12.04 pg/mL、IL-10>7.91 pg/mL时,其导致急诊重症肺炎患者预后不良风险显著增加;决策曲线显示,阈值在0.187~0.437时,IL-17A与IL-10联合预测急诊重症肺炎患者预后不良的净收益率均高于两指标的单独预测效能;阈值在0~1.0时,基于Cox回归分析构建的预测模型预测急诊重症肺炎患者预后不良的净收益率均高于IL-17A和IL-10单独及联合的预测效果;血清IL-17A和IL-10对急诊重症肺炎患者预后不良风险具有正向交互作用。结论血清IL-17A和IL-10水平异常升高与重症肺炎患者预后不良有关,其动态变化可提示重症肺炎患者免疫与炎症的失衡状态,且两指标对患者预后不良风险存在正向交互作用。

双氢青蒿素对脑胶质瘤小鼠血清白细胞介素-10和白细胞介素-12表达的影响

目的:探讨双氢青蒿素是否能调节脑胶质瘤小鼠血清中白细胞介素-10(IL-10)与白细胞介素-12(IL-12)的表达及其作用机制,讨论双氢青蒿素潜在的药物价值。方法:应用C6胶质瘤干细胞立体定向法构建脑胶质瘤小鼠模型,并用双氢青蒿素干预,分为对照组、模型组、双氢青蒿素低剂量组和双氢青蒿素高剂量组,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测各组小鼠血清IL-10和IL-12水平。结果:与正常组相比,模型组的血清中IL-10和IL-12的含量均显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,双氢青蒿素低剂量组血清中IL-10和IL-12的水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),双氢青蒿素高剂量组小鼠血清中的IL-10和IL-12的水平也明显下降,且下降程度比双氢青蒿素低剂量组的更为突出。结论:双氢青蒿素能降低由立体定向法建立的脑胶质瘤小鼠血清IL-10、IL-12的表达水平,双氢青蒿素可能通过某些信号通路来调控血清中IL-10、IL-12,进而影响脑胶质瘤的免疫反应或炎性反应情况,使得脑胶质瘤的症状减轻。

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染手足口病患儿血清基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-1β、白细胞介素-10水平变化及临床意义

目的探讨肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染手足口病(HFMD)患儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平变化及临床意义。方法选择2017年4月至2019年4月郑州大学附属儿童医院收治的HFMD患儿72例为研究对象,根据感染的病毒类型将患儿分为EV71组(n=32)和CA16组(n=40),另选择同期入院体检的健康儿童30例为对照组。记录EV71组和CA16组患儿入院前7 d内的病程、热程并计算临床症状发生率;入院第2天,检测3组患儿血清MMP-9、IL-1β及IL-10水平;采用Spearman对EV71组和CA16组患儿血清MMP-9、IL-1β及IL-10水平与病情程度进行相关性分析。结果EV71组患儿病程、热程显著长于CA16组(P<0.05)。EV71组和CA16组患儿的手足部出疹发生率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.981,P>0.05);EV71组患儿嗜睡、易惊、肢体抖动发生率显著低于CA16组(χ^(2)=5.113、4.194、4.500,P<0.05),咳嗽、惊厥、呕吐、肌肉挛缩发生率显著高于CA16组(χ^(2)=8.937、4.800、8.733、5.946,P<0.05)。EV71组和CA16组患儿血清MMP-9、IL-1β及IL-10水平显著高于对照组(P<0.05);EV71组患儿血清MMP-9、IL-1β及IL-10水平显著高于CA16组(P<0.05)。EV71组和CA16组重度患儿血清MMP-9、IL-1β及IL-10水平显著高于轻度患儿(P<0.05);CA16组轻度患儿血清MMP-9水平显著低于EV71组轻度患儿(P<0.05);CA16组重度患儿血清MMP-9水平显著低于EV71组重度患儿(P<0.05);2组轻度和重度患儿的血清IL-1β、IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。EV71组患儿血清MMP-9、IL-1β、IL-10水平与病情程度呈正相关(r=0.345、0.412、0.309,P<0.05);CA16组患儿血清MMP-9、IL-1β与病情程度呈正相关(r=0.405、0.367,P<0.05),血清IL-10水平与病情程度无明显相关性(r=0.135,P>0.05)。结论HFMD患儿尤其是EV17感染患儿的血清MMP-9、IL-1β、IL-10水平显著升高,且MMP-9、IL-1β与患儿病情程度呈正相关。

白细胞介素-10基因多态性与儿童肠道病毒71型感染的相关性研究

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)基因位点-1082A/G、-819C/T和-592C/A多态性与IL-10水平及儿童肠道病毒71型(EV71)感染程度的关系。方法选取EV71感染的手足口病患儿137例为研究对象,其中轻症组91例,重症组46例,另选取行健康体检儿童122例为健康对照组,采集临床数据。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-10水平。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测IL-10基因位点-1082A/G、-819C/T和-592C/A的多态性。结果与健康对照组相比,EV71感染组患儿的-1082位点AA基因型频率和A等位基因频率更高(P<0.05)。在EV71感染组中,重症组-1082位点AA基因型频率和A等位基因频率高于轻症组(P<0.05)。两组间IL-10基因位点-819C/T和-592C/A多态性的分布比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重症组患儿血清IL-10水平明显高于轻症组和健康对照组(P<0.05)。IL-10-1082AA基因型、-819 TT基因型和-592 AA基因型与IL-10的低表达有关(P<0.05)。在单倍型构建上,EV71感染组GCC单倍型的频率低于健康对照组(P<0.05)。在EV71重症感染组中,ATA单倍型患儿的IL-10水平较其他单倍型显著降低,而GCC患儿的IL-10水平较其他单倍型显著升高(P<0.05);轻症组和健康对照组各单倍型间的IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-10基因多态性与IL-10表达水平及EV71感染严重程度有关。

白细胞介素-10基因多态性与肿瘤患者化学治疗后乙型肝炎病毒再激活的关系

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区域-592A/C、-1 082G/A位点单核苷酸多态性(SNP)与肿瘤患者化学治疗后乙型肝炎病毒(HBV)再激活的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCRRFLP)分析法,检测80例携带HBV的肿瘤患者的IL-10基因启动子-592A/C、-1 082G/A多态性,并确定其基因型和等位基因频率分布。结果 80例携带HBV的肿瘤患者,化学治疗期间出现HBV再激活18例(HBV激活组),62例患者未发生HBV再激活(HBV未激活组),HBV再激活发生率为22.5%。2组患者IL-10启动子区-592A/C基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者IL-10启动子区-1 082G/A位点SNP分析发现仅存在AA和AG基因型,而无GG基因型。HBV激活组患者IL-10启动子区-1 082G/A位点AA基因型及A等位基因频率显著高于HBV未激活组(P<0.05)。结论携带HBV的肿瘤患者化学治疗后HBV再激活与IL-10基因启动子区域-1 082G/A位点AA基因型及A等位基因有关。

巨细胞病毒肝炎患儿血清白细胞介素-10、12、18测定的意义

目的探讨巨细胞病毒(CMV)肝炎患儿治疗前后血清IL-10、12、18水平,为评判肝脏炎性反应活动性、肝损害程度及预测药物抗病毒疗效提供依据。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测36例CMV肝炎患儿治疗前后及21例健康婴儿血清IL-10、12、18水平。2组均采用全自动生化分析仪检测血清ALT水平。并比较治疗前后2组各指标的差异。结果CMV肝炎患儿血清IL-10、12、18水平明显高于健康对照组(Pa<0.001),且均与血清ALT呈显著正相关(Pa<0.01)。治疗有效者治疗结束血清IL-10、12、18水平均较治疗前显著降低(Pa<0.001),无效者IL-10、12、18治疗前后无明显变化(Pa>0.05)。结论血清IL-10、12、18检测可作为婴儿CMV肝炎炎性反应活动性和肝损害程度和药品疗效的评判指标。

血清转化生长因子-β、白细胞介素-23在婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎患儿中的表达及其与病情严重程度的相关性

目的观察婴幼儿呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿的血清转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-23(interleukin 23,IL-23)表达水平,并分析TGF-β、IL-23与患儿病情严重程度的相关性。方法采集2021年1月至2023年12月郴州市第一人民医院收治的100例婴幼儿RSV肺炎患儿资料,纳入观察组,另采集同期医院健康体检的100例婴幼儿资料,纳入对照组。患儿及健康婴幼儿的疾病资料、体检资料等均保存完整。观察组患儿入院后根据病情严重程度分为轻度组(37例)、重度组(63例),比较对照组与不同病情严重程度患儿的基线资料及TGF-β、IL-23水平,重点分析血清TGF-β、IL-23与婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎病情严重程度的相关性。结果相较于对照组,轻度组、重度组的TGF-β较低、IL-23水平较高;相较于轻度组,重度组的TGF-β较低、IL-23水平较高。经Logistic回归分析,婴幼儿RSV肺炎患儿病情严重程度可能与患儿TGF-β、IL-23有关(P<0.05)。受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)结果显示,患儿入院时的TGF-β、IL-23评估重度病情有较好效能,AUC均大于0.70,有评估价值,且二者联合评估AUC为0.937,评估价值更佳(P<0.05)。结论婴幼儿RSV肺炎患儿的血清TGF-β普遍呈低表达、IL-23呈高表达,且二者与患儿的病情严重程度有关,病情越严重的患儿的TGF-β越低、IL-23越高,联合测定婴幼儿RSV肺炎患儿TGF-β、IL-23水平或可早期评估患儿病情严重程度。

白细胞介素-10和白细胞介素-12在丙型肝炎病毒感染中的作用

丙型肝炎病毒(HCV)感染是慢性肝病、肝细胞癌的主要病因。目前,有关丙型肝炎发病的具体机制仍未明确,但多项研究证实,CD4+T细胞应答与肝细胞的损伤和HCV感染的结局密切相关。IL-12、IL-10是CD4+T细胞Th1型、Th2型细胞免疫的代表性细胞因子,在HCV感染过程中发挥了特殊作用。该文就IL-10、IL-12在HCV感染中的作用的相关研究进行综述。

病毒白细胞介素-10转基因在造血干细胞中的表达

目的 观察逆转录病毒转病毒白细胞介素 10 (vIL 10 )基因在体内的表达。方法 用MSCVneo vIL 10重组体在体外转导CBA (H 2 K)小鼠的造血干细胞 (HSCs) ,给经致死照射(90 0rads)的 2 0只同基因CBA(H 2 K)小鼠注入经MSCVneo vIL 10转染的HSCs ,2× 10 6HSCs/只。酶联免疫吸附测定 (ELISA)、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )、Westernblot分析vIL 10的表达。结果 移植MSCVneo vIL 10转染HSCs的 2 0只小鼠 ,移植后 8周用ELISA检测 ,其中 15只小鼠血清的vIL 10浓度为 :2 70～ 13 40ng/L ,5只小鼠血清的vIL 10为阴性。 12周后有 2只小鼠vIL 10测不出 ,13只小鼠长时间表达vIL 10达 6个月。对照组小鼠血清vIL 10均为阴性。RT PCR和Westernblot证实小鼠的器官均有vIL 10的mRNA和蛋白的表达。结论 逆转录病毒能有效地将vIL 10基因导入造血干细胞并在体内长时间表达。

慢性乙型肝炎病毒携带儿童血清及外周血单个核细胞培养上清干扰素γ和白细胞介素-10的水平及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带儿童血清及外周血单个核细胞(PBMC)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)刺激后培养上清干扰素γ(IFN-γ)和IL-10水平及临床意义。方法HBeAg阳性慢性HBV携带儿童21例(A组)、抗-HBe阳性慢性HBV携带儿童20例(B组)及正常儿童19例(C组),每例采集外周静脉血5 mL,分离血清及PBMC,PBMC体外单独培养或与HBcAg共培养72 h后,检测血清及培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果血清IFN-γ在各组间无明显差异,A和B组血清IL-10较C组显著增高。经HBcAg处理后PBMC培养上清中,IFN-γ水平在B和C组较A组显著增高。同时,经HBcAg处理后A和B组PBMC培养上清中IL-10水平均较C组显著增高,尤以A组明显。结论IL-10水平及PBMC对HBcAg应答低下在儿童HBV携带者发病机制中起一定作用。

腺病毒介导的白细胞介素-10治疗自身免疫性内耳病的实验研究

目的研究以重组复制缺陷型腺病毒为载体的白细胞介素-10(IL-10)对豚鼠自身免疫性内耳病的治疗作用。方法采用同种内耳组织抗原加弗氏佐剂免疫豚鼠,制作自身免疫性内耳病动物模型20只,随机分为3组,采用圆窗膜微量注射的方式,A组(10只)注入携带IL-10因子的重组腺病毒(Ad-IL-10),B组(5只)注入等量的携带黄色荧光蛋白标记的腺病毒(Ad-EYFP),C组(5只)注入等量人工外淋巴液(对照组),7天后行ABR测试,然后取豚鼠耳蜗制做石蜡切片,行HE染色和光镜观察,并行免疫荧光和酶免疫组织化学试验,检测豚鼠内耳基因产物IL-10表达。结果免疫组化显示携带IL-10的腺病毒可以转染耳蜗血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节、蜗轴小血管周围及其耳蜗的骨壁等部位的细胞,并产生相应的蛋白产物(IL-10)。造模后各组豚鼠ABR反应阈较造模前升高,差异有统计学意义(P<0.05),内耳注射后A组ABR反应阈明显低于B组和C组。光镜检查示A组内耳组织的免疫炎性反应亦明显较B组和C组轻。结论腺病毒可以携带IL-10因子转导入豚鼠内耳,并在内耳表达基因产物,可在一定程度上减轻内耳组织免疫炎性损伤和听损伤。

M2型巨噬细胞通过分泌白细胞介素-10调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的:探讨M2型巨噬细胞通过调控白细胞介素-10(IL-10)表达影响胆囊癌(gallbladder cancer,GBC)细胞增殖、迁移、侵袭的研究。方法:将人单核细胞株THP-1在体外诱导成M2型巨噬细胞,利用RTqPCR检测相应标记物和IL-10的表达情况;利用ELISA检测细胞上清液中IL-10的表达情况。将GBC细胞株NOZ和GBC-SD分组为Control组(无血清培养基)、M2-CM组(M2型巨噬细胞条件培养基)、M2-CM+anti-IL-10组(含IL-10中和抗体的M2-CM)和M2-CM+IgG组(含IL-10同型对照抗体的M2-CM)。采用CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭变化状况,再用Western blot实验检测各组细胞的上皮间质转化标志物(E-cadherin和Vimentin)的表达量。结果:M2型巨噬细胞在体外诱导成功;与诱导前的THP-1相比,IL-10在M2型巨噬细胞内和上清液中表达明显升高(P<0.05);M2型巨噬细胞可促进GBC细胞增殖、迁移和侵袭,以及能抑制E-cadherin表达和促进Vimentin表达,阻断IL-10可抑制M2型巨噬细胞的这一影响(P<0.05)。结论:M2型巨噬细胞可通过分泌IL-10促进GBC细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化。

鸡白细胞介素-2抗家禽病毒病作用及机制研究进展

家禽病毒病严重危害我国养殖业的发展和公共卫生安全。鸡白细胞介素-2(Chicken interleukin-2,ChIL-2)是一类具有免疫活性的细胞因子,广泛参与非特异性免疫和特异性免疫应答,发挥重要的抗病毒作用,在动物疾病防治、新型免疫佐剂研发、提高动物抗病能力等方面具有广阔的应用前景。文章对ChIL-2的结构、ChIL-2介导的免疫信号通路及其在家禽病毒病的应用进行综述,旨在为研发新型家禽抗病毒药物和疫苗佐剂提供理论参考。