南美白对虾十足目虹彩病毒病症及防控技术研究

南美白对虾是当前世界上产量最高,规模最大的养殖对虾,以其美味和广泛的适应性,已成为世界各地水产养殖业的重要品种。然而,随着养殖规模的扩大,一种名为十足目虹彩病毒的疾病在南美白对虾养殖中变得越来越普遍。这种病毒的感染会导致对虾生长停滞、免疫力下降,甚至死亡,给养殖业带来了巨大的经济损失。因此,深入了解十足目虹彩病毒病症,并研究有效的防控技术,对于南美白对虾养殖业的可持续发展至关重要。

布尼亚病毒目新分类概述

布尼亚病毒目中许多病毒是新发现的,而且对人类健康构成威胁或潜在威胁。本文结合国际病毒分类委员会(ICTV)2017年第十次报告,针对新列的布尼亚病毒目的最新分类系统,总结了该类病毒ICTV分类的历史变化情况,对其下属各病毒科的分类、中英文定名、代表种、病毒形态、病毒基因组结构、编码蛋白、病毒主要传播媒介、病毒感染宿主、地理分布、理化特性等进行了介绍,并且基于病毒基因组的编码RdRp的基因序列对9个科13个属的布尼亚病毒做了系统发育分析。

套式病毒目病毒核衣壳蛋白的结构与功能研究进展

介绍了套式病毒目病毒的分类及其基因组特点,论述了核衣壳(N)蛋白的结构及其功能特性,包括N蛋白的RNA结合特性、N蛋白的核定位特性、N蛋白在病毒复制中的作用,并就其在冠状病毒和动脉炎病毒中的不同作用进行了着重阐述。

冠状病毒TGEV调控Ⅲ型干扰素的新机制

冠状病毒是一类单股正链不分节段的RNA病毒,属于尼多病毒目,冠状病毒科,根据其遗传演化可分为α、β、γ、δ4个属,其中许多病毒能够感染人或动物的呼吸道或肠道,如β冠状病毒属的新型冠状病毒主要侵袭呼吸道,严重威胁人类健康;而α冠状病毒属的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)主要感染肠道,引起仔猪腹泻,死亡率可高达100%。

十足目虹彩病毒(DIV1)环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用

本研究以十足目虹彩病毒(Decapod iridescent virus 1,DIV1)主要衣壳蛋白基因为靶序列设计引物,建立了DIV1的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并以pMD18-DIV1质粒标准品为模板对该方法的检测灵敏度、检测特异性等进行了评估。结果显示,此方法最适反应温度为64.4℃,优化后的25μl反应体系中包含2.5μl 10×Isothermal amplification buffer、4.0 mmol/L Mg^2+、1.2 mmol/L dNTPs、6.4 U Bst 2.0 WarmStart■DNA聚合酶、0.8μmol/L EvaGreen■和4.4μl ddH2O。该方法检测灵敏度下限为3.54×10^2拷贝/反应;与虾肝肠胞虫(EHP)、致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、对虾偷死野田村病毒(CMNV)、传染性皮下及造血组织坏死病病毒(IHHNV)、白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉综合征病毒(TSV)和黄头病毒(YHV)等主要虾类病原没有交叉反应;具有较好的重复性和稳定性。以GeneFinder■替换EvaGreen■并将其预置于反应管内,结合上述扩增方法可实现对DIV1的现场快速高灵敏检测。本研究建立的DIV1-LAMP实时荧光定量和现场检测方法具有灵敏、特异和快速等特点,为近几年新发虾类病原DIV1的定性、定量以及现场快速检测提供了新的技术选择,有利于对虾养殖业中开展DIV1的监测、预警和防控。

重组酶快速检测十足目虹彩病毒1方法的建立

为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30 ℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7 拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测。笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测。

罗氏沼虾野田村病毒和十足目虹彩病毒1二重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

【目的】建立能同时检测罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)和十足目虹彩病毒1(DIV1)的二重荧光定量PCR,为罗氏沼虾白尾病(WTD)及虹彩病毒病(DIV1D)的临床诊断和疫情监测提供更简便和高效的检测方法。【方法】分别根据MrNV-CP基因和DIV1-MCP基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,将目的基因片段分别克隆至pGM-T载体上制备重组质粒(pGM-T-CP^(MrNV)和pGM-T-MCP^(DIV1)),其中,pGM-T-CP^(MrNV)用Sal I酶切后经体外转录获得MrNV标准品RNA,pGM-T-MCP^(DIV1)则直接作为DIV1标准品DNA;以标准品为模板进行反应条件优化及标准曲线制定,建立可同时检测MrNV和DIV1的二重荧光定量PCR,并对该方法进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验。【结果】制备的MrNV标准品RNA和DIV1标准品DNA均具有很好的稳定性,可作为标准品和阳性对照使用;标准品起始模板范围为1.0×10^(1)~1.0×10^(8)Copies/反应时,建立的标准曲线具有良好线性关系。优化后的二重荧光定量PCR灵敏度高,对标准品的检测灵敏度可达10 Copies/反应,对罗氏沼虾组织样品的检测灵敏度约10 Copies/mg;与其他虾类常见病原无交叉反应,且整个检测过程仅需1 h左右。二重荧光定量PCR检测MrNV的组内试验和组间试验变异系数分别为0.31%~0.93%和0.96%~1.33%,检测DIV1的组内试验和组间试验变异系数分别为0.35%~0.81%和0.78%~1.04%。应用建立的二重荧光定量PCR和国内现行有效标准的套式PCR分别对117份临床样品进行MrNV和DIV1检测,结果显示对MrNV和DIV1检测的符合率分别为99.15%和97.44%,且二重荧光定量PCR检测目标病毒拷贝数较低样品时较套式PCR具有更高的灵敏度。2020年广西罗氏沼虾样品MrNV和DIV1的阳性检出率分别为6.0%和11.0%。【结论】结合TaqMan-MGB探针技术建立的二重荧光定量PCR能同时检测MrNV和DIV1,且具有灵敏度高、特异性强、重复性好、简便快速的特点,可为WTD和DIV1D的临床诊断及实时监测提供技术保障。

猪德尔塔冠状病毒的流行与防控

猪德尔塔冠状病毒（Porcine Deltacoronavirus,PDCoV）,又称猪δ冠状病毒、猪丁型冠状病毒。它是这几年新发现的一种猪病病毒,也是引起仔猪腹泻的一种重要病原体。 1病原学 冠状病毒（Coronavirus,Cov）属于套式病毒目（Nidovirales）冠状病毒科（Coronaviridae）。冠状病毒的宿主范围较广,包括鸟类、人以及其它哺乳动物[1]。

一例犬冠状病毒病的诊治与体会

犬冠状病毒(Canine coronavirus, CCV)是冠状病毒的1个种,属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronaviurs),冠状病毒Ⅰ群[1]。CCV已确定有2个基因型,即CCV-Ⅰ和CCV-Ⅱ。犬冠状病毒病是由CCV感染犬引起的一种高度接触性传染病,以急性出血性胃肠炎为主要症状,具有很高的病死率。

简述犬的冠状病毒病

当前出现的人类新型冠状病毒(COVID-19)病给整个社会生活和人民健康带来了巨大的影响。犬也会患冠状病毒病,犬冠状病毒病会不会传染给人呢?于此,就犬冠状病毒病做一个简要的论述。一、冠状病毒病的前世今生冠状病毒按病毒学分类属于尼多病毒目、冠状病毒科、冠状病毒亚科。之所以称为冠状病毒是因为其电镜外形类似皇冠样。

猪急性腹泻综合征冠状病毒致病机理的研究进展

猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)又名猪肠道α冠状病毒(Porcine enteric alphacoronavirus,PEAV)/猪肠道甲型冠状病毒(Swine enteric alphacoronavirus,SeACoV),属于套式病毒目冠状病毒科冠状病毒亚科α冠状病毒属成员,是2017年初在中国广东省新发现的一种新型致病性肠道冠状病毒^([1-3])。

新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂临床试验要求解析

我国新型冠状病毒感染的肺炎病例首先在湖北省武汉市发现。新型冠状病毒属于巢病毒目冠状病毒科正冠状病毒亚科,基因组为单股正链RNA。该病毒的传染源主要为新型冠状病毒感染的患者,传播途径主要为呼吸道飞沫和密切接触传播。人群普遍易感。

博尔纳病毒与精神性疾病

1885年,在德国萨克森州博尔纳镇一大群战马中,突然爆发一种以精神、行为异常为特征的脑炎,造成大量马匹死亡,并将该病命名为博尔纳病（Borna Disease,BD）。随后研究者们从病马脑组织中分离出致病病原体,即博尔纳病毒（Borna Disease Virus,BDV）。该病毒是一种具有包膜的非节段性嗜神经病毒,属于单分子负链RNA病毒目,博尔纳病毒科,博尔纳病毒属。但由于受到地域的限制以及典型病例的长期缺失，博尔纳病毒很长一段时间未受到科学界的关注。

什么是冠状病毒

冠状病毒属于套式病毒目、冠状病毒科、冠状病毒属,是一类具有包膜、基因组为线性单股正链的RNA病毒,是自然界广泛存在的一大类病毒。病毒基因组5′端具有甲基化的帽状结构,3′端具有poly(A)尾,基因组全长27~32kb,是目前已知RNA病毒中基因组最大的病毒。

冠状病毒

冠状病毒在系统分类上属套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具囊膜(envelope)、基因组为线性单股正链的RNA病毒,是自然界广泛存在的一大类病毒。2019新型冠状病毒(2019-n CoV,引发新型冠状病毒肺炎COVID-19)是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒,其余6种分别是HCoV-229E、HCoV-0C43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV(引发重症急性呼吸综合征)和MERS-CoV(引发中东呼吸综合征)。

猪的凸隆病毒感染

凸隆病毒(Torovirus)是一类新属,分类归冠状病毒科(Coronaviridae)巢穴病毒目(Nidovirales)。目前只发现两种:感染牛的凸隆病毒(BpTV)命名为布雷达病毒(Breda);感染马(ETV)的叫伯尔尼病毒(Berne),均是以首次发现病毒的地点命名。该病毒引起家畜的严重腹泻。最近荷兰学者A·Kro-

何为“冠状病毒”

冠状病毒为不分节段的单股正链RNA病毒,属于巢病毒目、冠状病毒科、正冠状病毒亚科。冠状病毒是一类主要引起呼吸道、肠道疾病的病原体,1937年首次从家禽体内分离,最早在人体内发现是在1965年。在电子显微镜下,这类病毒颗粒的表面有许多规则排列的突起,整个病毒颗粒就像一顶中世纪欧洲帝王的皇冠,因此被命名为“冠状病毒”。

2022年宁波市南美白对虾主要病原流行病学调查

为了解虾肝肠胞虫(EHP)、十足目虹彩病毒1(DIV1)、白斑综合征病毒(WSSV)和致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp AHPND)在宁波地区养殖南美白对虾中的致病途径和流行规律,采用PCR方法检测了该地区不同养殖模式下南美白对虾及其周边环境和生物中这4种病原的感染情况。结果显示:南美白对虾样本中,WSSV在整个养殖过程中未检出,Vp AHPND阳性率最高,为14.6%,其次是EHP和DIV1,阳性率分别为10.2%和2.9%;土塘养殖模式下对虾病原检出率最高,为61.3%,其次为小棚模式和帆布池模式,病原检出率分别为26.3%和22.2%,大棚养殖的南美白对虾中未检出病原;水样中检出WSSV、EHP、Vp AHPND、DIV1阳性批次数分别为1、14、8、6;底泥样品中未检出病原;周边环境生物中,仅1个批次的脊尾白虾检出EHP阳性。结果表明:4种病原在夏季有较强的流行趋势,需要针对性地加强防控;大棚养殖模式的抗风险能力要高于其他养殖模式,在该模式下水质相对稳定,受外界因素影响较小;病原在底泥和周边环境生物中检出率较低,而在养殖水体中检出率较高,养殖水体可能在南美白对虾感染病原的过程中起着重要的传播媒介作用。因此,在养殖过程中加强水体调控十分重要。

猪繁殖与呼吸障碍综合征NADC30类毒株研究进展

猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）在20世纪80年代末以临床暴发急性繁殖障碍而被首次报道,以母猪繁殖障碍,尤其是母猪怀孕100 d后出现流产、死胎、木乃伊胎、新生仔猪死亡,以及各阶段猪出现呼吸道疾病为特征。1996年中国首次报道从疑似PRRS流产胎儿中分离到猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）。