一种新型腺病毒突变体的抗肿瘤实验研究

研究观察了腺病毒突变体dl152 0诱导 p53缺陷的肿瘤细胞的凋亡作用和对荷瘤小鼠的抗瘤效应 .结果表明 ,腺病毒突变体dl152 0感染具有 p53基因突变或缺失的肿瘤细胞后 ,能引起肿瘤细胞的凋亡 ;而对具野生型 p53的肿瘤细胞 ,则基本上不导致肿瘤细胞的凋亡 .同时细胞周期分析表明dl152 0使p53缺陷肿瘤细胞的细胞周期明显改变并阻止于G1期 .荷瘤小鼠实验表明 ,荷瘤小鼠在注射腺病毒突变体dl152 0后 ,致使肉瘤绝大部分坏死 ,并持续萎缩 ,直至最终完全消退 .上述结果提示腺病毒突变体dl152 0在治疗人的 p53缺陷肿瘤方面有着良好的应用前景 .

湖南专家完成猪圆环病毒突变株疫苗研究工作

病毒学类国际权威杂志《普通病毒学》（Journalof General Virology）近日报道称,由湖南农业大学动物医学院教授杨毅领衔的动物疫苗研究团队研究发现,当前全球市场上猪圆环病毒疫苗无法有效应对该病毒突变所引起的病症。目前,该团队已完成新的猪圆环病毒疫苗的研究工作,正处于临床实验动物阶段。猪圆环病毒为已知最小的动物病毒之一,其与巨噬细胞/单核细胞、组织细胞和胸腺巨噬细胞相伴随,

单纯疱疹病毒突变体HF10治疗癌症的临床试验

我们回顾了我们使用单纯疱疹病毒突变体HF10的临床试验。我们对2003年来使用HF10治疗复发性乳腺癌的安全性和有效性进行了评价，并从2005年起将HF10应用于无法切除的胰腺癌。突变体HF10属于溶瘤细胞单纯疱疹病毒1型，已成功分离，其抗癌功效在同源免疫活性小鼠模型中进行了评价。

狂犬病病毒GX074株P蛋白48~78位区域氨基酸联合M蛋白突变株的构建及特性研究

为探究广西狂犬病病毒街毒GX074株P蛋白联合M蛋白对生物学特性的影响,实验以构建的弱毒疫苗株rRC-HL感染性cDNA克隆质粒pRC-HL为基础,将GX074株P蛋白的48~78位区域氨基酸及M蛋白联合替换到pRC-HL相同位置,进行突变病毒的拯救,经间接免疫荧光实验及序列测定获得突变体rRC-HL(GX074P 48~78 M)。结果表明,突变体病毒rRC-HL(GX074P 48~78 M)基因组稳定,拯救后的荧光灶小于亲本弱毒rRC-HL株,大于亲本强毒GX074株及CVS-11株;在细胞中的复制能力表现出与rRC-HL株相似的特点,多步生长曲线显示突变体病毒滴度略低于rRC-HL,而稍高于GX074株及CVS-11株。说明突变体毒株rRC-HL(GX074P 48~78 M)相较于亲本弱毒rRC-HL株复制能力有所降低,比亲本强毒GX074株复制能力略高。

番木瓜抗病突变体阻碍环斑病毒体内运转

应用RT PCR一步法检测了PRSVYs株系在感病番木瓜及其抗病突变体植株体内的运转动态 ,结果表明 :在感病植株中 ,接种后 48hr接种叶的未接种部位可检出病毒 ,第 4天部分接种叶柄可检出病毒 ,第 6天植株各部位均能检出病毒 ;而在抗病植株中 ,接种后可以而且仅能在接种部位检出病毒 ;因而认为抗病突变体能够阻碍病毒从接种部位运出及 (或 )

衣壳蛋白缺失突变登革病毒的制备与鉴定

目的制备登革2型病毒中国分离株(DEN2-43)的衣壳蛋白缺失突变病毒。方法在DEN2-43株病毒感染性全长cDNA克隆的基础之上,利用融合PCR技术构建衣壳蛋白基因缺失的全长cDNA,将其线性化并体外转录成RNA后,经电穿孔法导入宿主细胞获得衣壳蛋白缺失突变病毒。结果序列比对表明,所获得的恢复病毒带有与预期一致的缺失突变。结论成功制备衣壳蛋白缺失突变病毒,为进一步研究衣壳蛋白基因突变对登革病毒生物学特性的影响奠定了基础。

衣壳蛋白缺失突变对登革病毒致病性及免疫原性的影响

在登革2型病毒中国分离株(DEN2—43)的感染性全长cDNA克隆的基础之上,利用融合PCR技术构建衣壳蛋白基因缺失的全长cDNA．将其线性化并体外转录成RNA后,经电穿孔法导入宿主细胞获得缺失突变病毒,对其致病性和免疫原性进行了观察．结果显示,随着衣壳蛋白缺失氨基酸残基数目的增加,病毒在敏感细胞中的增殖能力逐渐减弱,而衣壳蛋白第3个α螺旋序列缺失的突变体则完全丧失感染性．突变病毒对乳鼠的致病性也随之减弱,缺失10个氨基酸残基使病毒几乎完全丧失乳鼠致病力．同时缺失突变病毒可诱导小鼠产生高水平IgG抗体．表明登革病毒衣壳蛋白具有功能灵活性,可作为减毒突变的靶位点．该结果为深入探讨登革病毒基因组结构与功能的关系及研制新型登革减毒疫苗奠定了基础．

低硒与柯萨奇病毒B_(3/0)毒性突变

目的 : 体外观察低硒培养柯萨奇病毒非致病株 B3 / 0 ( CVB3 / 0 )的毒性突变。方法 : 筛选低硒胎牛血清 ,制备低硒细胞培养基 ,利用 CVB3 致病株和非致病株感染人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)后结局不同 ,先于体外连续传代观察的毒性突变情况 ,然后于敏感动物体内鉴定突变株的致病性。结果 : CVB3 / 0 在低硒细胞培养液中培养的脐静脉内皮细胞 2 0次传代后 ,可出现细胞病变效应 ,该突变株接种 Balb/C小鼠后可使其心肌组织出现损伤。结论 : CVB3 / 0 非致病株不仅在低硒小鼠内可突变为致病株 ,在体外相对低硒 + H2 O2 培养基中培养的人脐静脉内皮细胞中也可发生。

我国学者发现新型寨卡病毒突变

据中国科学报报道，5月18日《自然》发表的一篇论文称，研究人员发现了一种寨卡病毒突变，寨卡病毒在近来的疫情中传播速度较快，可能源于这种突变。在此前已知的一种会影响蚊子感染黄病毒（黄病毒包括寨卡病毒和登革热病毒等）的蛋白质里，研究人员发现了所述突变。

重组腺病毒低氧诱导因子1α三突变体基因对兔缺血后肢血流灌注及血管渗透性的影响

目的研究重组腺病毒低氧诱导因子1α三突变体基因(Ad-HIF-1α-trip)对兔缺血后肢血管渗透性的影响。方法 18只新西兰大白兔建立左侧后肢急性缺血模型,随机分成3组,分别为生理盐水组、腺病毒空载体组(Ad-Null组)、Ad-HIF-1α-trip组,每组6只,分别在术后即刻肌注生理盐水、Ad-Null及Ad-HIF-1α-trip。在术后即刻及基因转染后7、14和28 d进行血管超声检查。术后7 d、14 d和28 d通过血管超声计算缺血侧髂内动脉血流量标化值,评价兔缺血后肢血流灌注改善情况。基因转染后28 d采用伊文思蓝(EB)染色法测定各组缺血肌肉组织中EB含量,评价Ad-HIF-1α-trip对缺血组织新生血管渗透性的影响。结果 Ad-HIF-1α-trip组缺血侧髂内动脉血流量标化值增加大于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05);Ad-HIF-1α-trip组缺血肌肉组织的EB含量略高于Ad-Null组及生理盐水组,但组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Ad-HIF-1α-trip能有效改善缺血肌肉组织的血流灌注,同时并未明显增加新生血管的渗透性。

黄瓜花叶病毒卫星RNA人工突变体的构建及其侵染性测定

从1个369nt的黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)卫星RNA的cDNA出发,采用DNA改组技术构建人工突变体,经过体外转录,将其与不携带卫星RNA的黄瓜花叶病毒株进行假重组,鉴定突变体的生物活性,结果显示所获得的4个卫星RNA的点突变子MS1、MS5、MS6和MS11中,只有MS11仍然具有复制能力;而其他3个点突变子,尽管均只有1个位点的替换,却不能在辅助病毒作用下复制。序列比较分析发现MS11的突变位点位于卫星RNA变异区内,发生的突变与自发突变一致,其他3个突变子的突变位点发生在卫星RNA的高度保守区。而且通过侵染性试验证实突变子MS11与野生型Yi没有明显的差异。由此可推测卫星RNA序列中的高度保守区与卫星RNA的生物活性密切相关,个别碱基的突变会导致RNA二级结构的改变,进而引起其复制能力或稳定性的完全丧失。

鼠肉瘤病毒癌基因突变非小细胞肺癌靶向治疗 研究进展

鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)突变是非小细胞肺癌中最常见的驱动基因突变之一,尽管在几十年前就已经发现KRAS基因突变,但由于其独特的生物特性,靶向治疗KRAS基因突变非小细胞肺癌一直面临瓶颈。然而新型KRAS G12C抑制剂的面世打破了这一僵局,使KRAS基因突变非小细胞肺癌靶向治疗得到进一步发展。目前国内外靶向KRAS突变非小细胞肺癌的研究机制主要是抑制膜定位、直接抑制KRAS基因、靶向抑制KRAS下游信号及抑制KRAS突变协同致死基因等。本综述概述KRAS基因突变非小细胞肺癌靶向治疗的研究进展,以便于临床医师更加深入了解这一特殊类型非小细胞肺癌的靶向治疗。

鼠肉瘤病毒致癌基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征和预后的相关性分析

目的分析鼠肉瘤病毒致癌基因(KRAS)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的突变状况及其与NSCLC患者的临床病理特征和预后关系,为NSCLC临床治疗提供数据支撑。方法收集郑州大学附属肿瘤医院2015年1月至2016年12月收治的经组织病理学确诊并行二代测序技术检测(NGS)的551例NSCLC患者的临床资料,随访至2018年12月31日,排除其中随访丢失的患者数据,共计356例患者入组此研究,讨论KRAS基因突变状态及其与临床病理特征、预后的关系。结果356例NSCLC患者中,42例患者KRAS基因突变,包括2号外显子突变的患者36例和3号外显子突变的患者6例其中2例为合并表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的患者,与KRAS基因野生型比较,KRAS基因突变多见于≥60岁、男性、吸烟的NSCLC患者(χ^2=13.199,P<0.001;χ^2=12.926,P<0.001;χ^2=22.423,P<0.001),而TNM分期、病理类型则对KRAS基因突变无明显影响(χ^2=0.521,P=0.914;χ^2=1.777,P=0.183)。KRAS基因突变NSCLC患者的中位疾病无进展生存时间和中位总生存时间分别为5.5个月和10.7个月,均显著低于KRAS基因野生型NSCLC患者的10.2个月和18.6个月,差异均有统计学意义(P=0.001;P=0.001)。亚组分析显示删除2例含EGFR、KRAS基因双突变的患者,KRAS基因2号外显子突变NSCLC患者与3号外显子突变NSCLC患者的中位疾病无进展生存时间比较差异无统计学意义(P=0.795)。对于KRAS基因突变患者,化疗治疗组中位总生存时间为10.4个月,长于未治疗组的2.2个月,差异有统计学意义(P<0.001)。结论NSCLC患者KRAS基因突变状态可能与患者年龄、性别、吸烟史有关,KRAS基因突变预示着NSCLC患者更差的预后,而化疗能延长其生存时间。

血清甘胆酸、甲胎蛋白联合乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变检测在肝细胞肝癌中的临床价值

目的:探讨血清甘胆酸、甲胎蛋白(α-fetoprotein, AFP)和乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变的关系及对肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)诊断的意义。方法:收集2020年12月—2022年2月在我院诊疗的HCC患者200例,分为乙肝肝癌组(100例)和非乙肝肝癌组(100例)。采用免疫比浊法检测血清甘胆酸、双抗体夹心法检测血清AFP、PCR-反向点杂交法检测HBV前C区/BCP区突变,通过SPSS 22.0软件进行联合分析。结果:乙肝肝癌组的血清AFP水平显著高于非乙肝肝癌组的血清AFP(P<0.05);在乙肝肝癌组中,HBV基因突变组血清AFP高于HBV基因未突变组(P<0.05),其中BCP区突变组AFP水平高于BCP区未突变组(P<0.05)。结论:血清AFP水平与HCC类型和HBV突变类型有潜在相关性,对HCC的发病机制了解和诊断有重大参考价值。

甲状腺穿刺液基细胞学诊断后的BRAF突变检测问题及对策

甲状腺癌B超引导下细针穿刺细胞学病理诊断后,利用剩余液基细胞进行分子病理v-raf鼠肉瘤病毒癌基因(v-raf murine sarcoma viral oncogene,BRAF)V600E突变检测以进行辅助诊断。该文分析了临床甲状腺穿刺进行细胞和分子病理诊断中遇到的若干问题,探讨发生的原因,给出解决问题的参考答案,对临床病理、内分泌和普外科医生都具有重要的参考价值。