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基于Penton蛋白禽腺病毒血清4型间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 李鹏 雷梦瑶 +9 位作者 冯丽丽 王振伟 管春晓 郑洪双 王俊茹 王利平 李炎锦 吴欣媛 刘兴友 金前跃 《河南农业科学》 北大核心 2024年第7期133-141,共9页
Penton蛋白是构成禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)衣壳的主要结构蛋白,具备高度保守性与良好的免疫原性。以纯化的Penton蛋白为包被抗原,建立一种基于禽腺病毒血清4型Penton蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,... Penton蛋白是构成禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)衣壳的主要结构蛋白,具备高度保守性与良好的免疫原性。以纯化的Penton蛋白为包被抗原,建立一种基于禽腺病毒血清4型Penton蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,Penton蛋白最佳包被质量浓度为2μg/mL,血清稀释倍数为200倍,酶标抗体稀释倍数为1∶5000,阳性临界值为0.222,敏感性可达到1∶6400,与鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒均无交叉反应,特异性良好,批间批内重复性变异系数均<10%,在100份临床血清中阳性检出率为77%,与商品化试剂盒检出符合率可达98%。综上,建立的ELISA抗体检测方法可以用于禽腺病毒4型临床抗体检测。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 Penton蛋白 间接ELISA 抗体检测
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禽腺病毒血清4型Hexon蛋白的转录组学功能分析
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作者 冯慧霞 刘梦渊 +5 位作者 王晨阳 李炜 孙子龙 席义博 张鼎 杨勃 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1281-1290,共10页
禽腺病毒血清4型(FAdV-4)是引起禽肝炎-心包积液综合征的重要病原,严重危害我国养禽业的发展。研究表明,FAdV-4六邻体(Hexon)蛋白是决定病毒毒力和致病性的重要因素之一。为了进一步探究Hexon蛋白在FAdV-4感染中的重要作用,本试验以鸡... 禽腺病毒血清4型(FAdV-4)是引起禽肝炎-心包积液综合征的重要病原,严重危害我国养禽业的发展。研究表明,FAdV-4六邻体(Hexon)蛋白是决定病毒毒力和致病性的重要因素之一。为了进一步探究Hexon蛋白在FAdV-4感染中的重要作用,本试验以鸡肝癌细胞(LMH)为研究模型,利用转录组测序技术对外源表达Hexon所诱导的差异表达基因进行筛选。结果显示,与对照组相比,外源表达Hexon试验组共筛选到445个差异基因表达上调,36个差异基因表达下调。其中,BAG3、JUN、IL8L1、CCL4和THBS1等基因之前已被报道与FAdV-4感染相关,但HSPB9、HSP90AA1、HSPA8、HSPA2、DCN、ELOVL3和SBK2等基因在FAdV-4感染中的作用还未被揭示。GO富集分析结果显示,下调的差异基因主要与早期内体和蛋白酶体附属复合体相关,而上调的差异基因主要与质膜、细胞外表面区域和超分子纤维相关。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因主要富集在MAPK、Wnt和VEGF等信号通路。此外,通过蛋白质相互作用网络分析发现,HSP90AA1、HSPA8、JUN和DCN等多个关键蛋白位于整个网络中心且已被报道与多种病毒复制密切相关。综上所述,本研究通过转录组测序筛选出一系列由外源表达Hexon诱导的差异表达基因,为控制FAdV-4感染提供了新的靶点和理论依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 六邻体蛋白 鸡肝癌细胞 转录组测序
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禽腺病毒血清4型感染的LMH细胞mRNA表达谱分析
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作者 杨筱竹 冯慧霞 +3 位作者 候晓兰 席义博 段利强 杨勃 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期56-63,共8页
禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,L... 禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,LMH)细胞后差异表达的mRNA,以探究mRNA在FAdV-4感染过程中的作用及其调控机制。结果显示,与对照组相比,FAdV-4感染48 h共筛选到2604个上调的差异表达基因,2883个下调的差异表达基因。其中,GNB3、NECTIN4、SFRP4、FABP2、PLPP3、GALR1L和MBL 2等基因之前并没有被报道过与FAdV-4感染相关。通过GO和KEGG分析得知,差异表达基因主要富集在从细胞表面位点和信号受体结合至细胞周期调节、MAPK信号通路、细胞黏附分子作用等;其中,显著下调的差异基因还富集到多种代谢途径中,提示病毒感染会影响宿主细胞的代谢水平。本研究为深入解析FAdV-4感染宿主细胞的致病机制提供了相关的理论基础及科学依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 LMH细胞 高通量测序 MRNA
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化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清的效果
4
作者 李晓格 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第5期88-90,共3页
确定研究对象为乙肝病毒血清,分析化学发光法与酶联免疫法效果。方法 研究对象:患者(确诊乙肝,430例);收治时间:2022.01-2023.05。收集血液标本,共430份,平均分为2份。分别用2种方式检验,分别为化学发光法(H组)、酶联免疫法(M组)。结果... 确定研究对象为乙肝病毒血清,分析化学发光法与酶联免疫法效果。方法 研究对象:患者(确诊乙肝,430例);收治时间:2022.01-2023.05。收集血液标本,共430份,平均分为2份。分别用2种方式检验,分别为化学发光法(H组)、酶联免疫法(M组)。结果 ①检出率,H组vsM组=45.81%>30.23%(=22.150,P<0.05)。②阳性检出率,HBsAb、HBcAb、HBeAb、HBsAg、HBeAg,H组>M组(=9.671/7.839/10.153/9.107/8.401,,P<0.05)。结论 HBV检测中,与酶联免疫法相比,化学发光法检验准确性更高,可行。 展开更多
关键词 化学发光法 酶联免疫法 乙肝病毒血清 检测效果
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禽腺病毒血清型4通过JAK/STAT信号通路调控鸡胚心脏成纤维细胞炎症反应的研究
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作者 冯孝傲 尹德晶 +4 位作者 朱二鹏 宋春 文明 岳筠 程振涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1038-1044,共7页
为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF... 为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用western blot检测FAd V-4感染后CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;以40μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂Ruxolitinib预处理CEF细胞2 h后,将FAd V-4按MOI 5感染CEF细胞,在感染后不同时间分别收集细胞和上清,采用western blot检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;采用q PCR检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用ELISA检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果显示,与不感染FAd V-4的空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后IL-6和IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),IL-1β基因的转录水平在后期显著上调(P<0.05),TNF-α基因的转录水平在前期无变化,后期极显著上调(P<0.01);western blot结果显示,与空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后p-JAK2蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01),且48 h p-JAK2蛋白的表达水平最高。Western blot结果显示,与FAd V-4感染组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞及Ruxolitinib处理的CEF中p-JAK2蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01),Ruxolitinib组与空白对照组无显著差异;q PCR结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),TNF-α基因的转录水平显著上调(P<0.05);ELISA结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-8分泌水平极显著上调(P<0.01),TNF-α分泌水平显著上调(P<0.05)、IL-1β和IL-6分泌水平无显著变化,与转录水平结果基本一致。本研究上述结果首次证实FAd V-4可以诱导鸡胚心脏CEF细胞产生强烈的炎症反应,并激活了该CEF细胞中的JAK/STAT信号通路,该研究结果为深入阐明FAd V-4感染心脏细胞的致病机制提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清型4 JAK/STAT信号通路 炎症反应 心脏成纤维细胞
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禽腺病毒血清4型中国流行株fiber2蛋白单克隆抗体制备与鉴定
6
作者 田开月 曲信芹 +4 位作者 韩城昊 尹坤 杨盼盼 黄玉波 赵军 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第11期104-109,共6页
旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂... 旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经过5次亚克隆,获得2株分泌抗fiber2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2C3和7B4。以制备的2C3和7B4腹水进行亚型鉴定、反应原性、特异性以及中和活性测定。结果显示,成功制备了抗FAdV-4 fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,获得的单克隆抗体均为IgM亚型,可特异性识别FAdV-4及其fiber2蛋白,为FAdV-4的免疫检测和fiber2蛋白功能研究提供了研究材料。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 fiber2蛋白 单克隆抗体
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化学发光与酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的应用对比 被引量:2
7
作者 令海英 《智慧健康》 2023年第23期13-16,21,共5页
目的对比ECLIA(ECLIA)与ELISA(ELISA)用于临床乙肝病毒血清学检验中的价值。方法选择2021年1月—2022年12月本院治疗的乙肝患者100例作为研究对象,分别通过ECLIA、ELISA检验进行乙肝病毒血清学检验,记录两种检验方式乙肝五项指标检测结... 目的对比ECLIA(ECLIA)与ELISA(ELISA)用于临床乙肝病毒血清学检验中的价值。方法选择2021年1月—2022年12月本院治疗的乙肝患者100例作为研究对象,分别通过ECLIA、ELISA检验进行乙肝病毒血清学检验,记录两种检验方式乙肝五项指标检测结果,对比组间统计学差异。计算两种检验方式检测乙肝五项指标阳性率。结果ECLIA与ELISA检验乙肝五项指标中HbsAb、HbcAb值组间比较差异无统计学意义(P>0.05),ECLIA检测乙肝五项指标中HbeAg、HbsAg及HbeAb结果均高于酶联免疫吸附法(P<0.05)。计算结果显示,ECLIA检测乙肝五项指标中HbeAg、HbsAg及HbeAb阳性率明显高于ELISA(P<0.05)。结论临床可通过ECLIA与ELISA方法进行乙肝病毒血清学检验工作,具有较高的准确性,二者相比,ECLIA准确率更高,能提供更准确的数据参考,值得运用推广。 展开更多
关键词 ECLIA ELISA 乙肝 病毒血清学检验
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禽腺病毒血清2型分离鉴定及感染SPF鸡发病模型建立
8
作者 胡鑫宇 孙敏华 +3 位作者 曾庆航 谢梓民 袁朝霞 廖明 《广东农业科学》 CAS 2023年第7期146-155,F0002,共11页
【目的】建立禽腺病毒血清2型(FAdV-2)的发病模型,为评价FAdV-2的免疫原性和疫苗有效性提供参考。【方法】对疑似禽腺病毒感染的样品进行分离鉴定,对分离株Fiber基因和Hexon基因序列进行遗传演化分析,使用DNAStar和MEGA7.0软件对分离株... 【目的】建立禽腺病毒血清2型(FAdV-2)的发病模型,为评价FAdV-2的免疫原性和疫苗有效性提供参考。【方法】对疑似禽腺病毒感染的样品进行分离鉴定,对分离株Fiber基因和Hexon基因序列进行遗传演化分析,使用DNAStar和MEGA7.0软件对分离株和其他FAdV代表株进行核苷酸和氨基酸同源性比较。在确定分离到的病毒为FAdV-2后,通过动物实验分析分离株在不同感染途径和不同感染剂量下对6周龄SPF鸡的致病性,筛选出建立FAdV-2血清型发病模型的最佳感染方式和最佳感染剂量。【结果】从发病鸡组织样品中成功分离得到1株FAdV-2血清型毒株,命名为KM株。遗传演化分析表明,KM株和GX01株同属于禽腺病毒Ⅰ群D种中的FAdV-2血清型;同源性分析结果显示,KM株和GX01株的Fiber基因和Hexon基因核苷酸序列同源性分别为98.9%和99.3%,推导出氨基酸同源性分别为98.9%和98.8%。KM株静脉注射感染途径的致病性高于肌肉注射,试验鸡出现明显的心包积液-肝炎综合征;KM株发病模型的感染途径为静脉注射,感染剂量为108.0 TCID50,感染后鸡群死亡率为50%,剖检病死鸡可见明显的病理变化,鸡群感染后1 d泄殖腔排毒阳性。【结论】首次验证了FAdV-2能引发心包积液-肝炎综合征,建立了FAdV-2感染SPF鸡的发病模型,可为药物研发和疫苗评价提供一定参考,将有效预防和减少FAdV-2传播。 展开更多
关键词 禽腺病毒 动物模型 分离鉴定 禽腺病毒血清2型(FAd V-2) 致病性 心包积液-肝炎综合征
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化学发光免疫分析法检测乙肝病毒血清学标志物的应用价值分析
9
作者 赵晶 《现代诊断与治疗》 CAS 2023年第22期3405-3407,共3页
目的探讨化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙肝病毒(HBV)血清学标志物的应用价值。方法选择就诊的80例疑似乙型肝炎患者,均接受CLIA、酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR检查。以实时荧光定量PCR检查结果作为“金标准”,分析CLIA、E... 目的探讨化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙肝病毒(HBV)血清学标志物的应用价值。方法选择就诊的80例疑似乙型肝炎患者,均接受CLIA、酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR检查。以实时荧光定量PCR检查结果作为“金标准”,分析CLIA、ELISA检测乙型肝炎的价值。结果80例疑似患者经实时荧光定量PCR检查确诊为乙型肝炎49例(61.25%),其中HBsAb阳性11例、HBsAg阳性7例、HBeAb阳性13例、HBcAb阳性9例、HBeAg阳性9例。CLIA检测诊断乙型肝炎的敏感度、阴性预测值与准确度均高于ELISA检测(P<0.05);两种检查方式检测乙型肝炎阳性预测值、特异度及对各项血清学标志物阳性检出率无明显差异(P>0.05)。结论CLIA检测乙肝病毒血清学标志物的准确度、敏感度和阴性预测值较高,可提高乙型肝炎检出率,指导临床治疗。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙肝病毒血清学标志物 酶联免疫吸附试验 化学发光免疫分析法
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化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附检验在乙肝病毒血清学检验中的检测效果
10
作者 林艳 周鹏 付安 《当代医学》 2023年第2期151-153,共3页
目的探究化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附检验在乙肝病毒血清学检验中的检测效果。方法选取2018年12月至2020年6月本院收治的50例疑似乙肝患者作为研究对象,入院后均采用化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附检验进行乙肝病毒血清学... 目的探究化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附检验在乙肝病毒血清学检验中的检测效果。方法选取2018年12月至2020年6月本院收治的50例疑似乙肝患者作为研究对象,入院后均采用化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附检验进行乙肝病毒血清学检验。以实时荧光定量PCR检验结果作为金标准,比较两种检测方法乙肝病毒检出情况、乙肝病毒血清学检验结果。结果化学发光免疫分析技术乙肝病毒阳性率为54.00%,高于酶联免疫吸附检验的34.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。化学发光免疫分析技术乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)阳性检出率均高于酶联免疫吸附检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论化学发光免疫分析技术应用于乙肝病毒血清学检验中的检验效果优于酶联免疫吸附检验,可提高乙肝病毒阳性检出率,为后续临床制订合理诊疗计划提供可靠依据,且对临床疗效具有较高预测价值,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 乙肝病毒血清 化学发光免疫分析技术 酶联免疫吸附检验
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探讨乙肝病毒血清标志物检查在儿童入园体检中的意义
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作者 范晶 《中国科技期刊数据库 医药》 2023年第9期21-24,共4页
分析乙肝病毒血清标志物检查在儿童入园体检中的意义。方法 选择2022年1月至2022年12月于我院进行体检的入园儿童共20例,均进行乙肝病毒血清标志物检查,分析检查的阳性率、男女阳性的情况。结果 20例儿童当中,有2名阳性,检出率是10.0%... 分析乙肝病毒血清标志物检查在儿童入园体检中的意义。方法 选择2022年1月至2022年12月于我院进行体检的入园儿童共20例,均进行乙肝病毒血清标志物检查,分析检查的阳性率、男女阳性的情况。结果 20例儿童当中,有2名阳性,检出率是10.0%。而不同性别当中,男女各有1例检出,占比无显著差异(P>0.05)。结论 建议在幼儿入园体检的时候,对乙肝病毒血清标志物进行检测,能够筛选出HBsAg阳性的儿童,并进行积极治疗,从而有效地阻止乙肝病毒的水平传播。除此之外,还要加强宣传,尽早对婴幼儿进行HBV免疫接种,可有效防止HBV感染。所以,要加强卫生保健人员和全国人民对儿童免疫接种的了解,并加强对乙肝病毒和乙肝疫苗免疫的宣传,才能有效地阻止乙肝病毒在儿童间的传播。 展开更多
关键词 乙肝病毒血清标志物检查 儿童入园体检 意义
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乙型肝炎病毒相关肾炎临床与病毒血清学特点关联研究 被引量:19
12
作者 王朝晖 陈楠 +4 位作者 徐正义 任红 傅秀兰 张文 陆志檬 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期674-677,共4页
目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV)感染与肾小球肾炎的关系 ,探讨HBV复制在HBV相关肾炎发病中的作用。方法 对 338例经肾穿刺证实的肾炎患者的临床病理表现和病毒血清学特点进行分析。结果 HBV相关肾炎占肾炎总数的 5 .3%。在血HBsAg(+)... 目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV)感染与肾小球肾炎的关系 ,探讨HBV复制在HBV相关肾炎发病中的作用。方法 对 338例经肾穿刺证实的肾炎患者的临床病理表现和病毒血清学特点进行分析。结果 HBV相关肾炎占肾炎总数的 5 .3%。在血HBsAg(+)的肾炎患者中 ,HBV相关肾炎发病与血HBeAg相关 (P <0 .0 5 ) ,与血清HBVDNA含量 (bDNA)显著相关 (P <0 .0 1)。分支链DNA(bDNA)阳性率明显高于HBeAg阳性率 (P <0 .0 5 )。结论 bDNA是反映HBV复制的最佳指标。HBV相关肾炎与体内HBV复制程度密切相关 ,HBV在体内大量复制 ,可能通过循环中的病毒抗原沉积于肾脏和肾脏中该抗原原位表达而致病。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 肾炎 病毒复制 分支链DNA 病毒血清
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禽腺病毒血清4型纳米PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:14
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作者 王利丽 郑丽 +6 位作者 李富强 李秀丽 任卫科 路超 张莉 董志民 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期701-704,共4页
为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽... 为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽常见病原及国内报导的FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11等5个主要血清型病毒的扩增结果均为阴性,仅FAdV-4检测结果为阳性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对FAdV-4的最低核酸检出量为54.0拷贝/μL,较常规PCR方法高10倍,敏感性较高。应用该方法和病毒分离培养法同时对87份临床样品进行检测,二者均检出14份阳性样品,总体符合率为100%。以上结果表明本研究建立的Nano PCR方法特异性好、敏感性高,可以用于FAdV-4的临床检测和分子流行病学调查。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 五邻体基因 NanoPCR检测
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郑州地区儿童急性呼吸道感染的病毒血清学研究 被引量:9
14
作者 沈照波 曲文华 吴惠 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期292-294,共3页
为了解郑州地区儿童急性呼吸道感染人群中病毒感染状况。采用酶联免疫法对1180例急性呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(AdV)、巨细胞病毒(HCMV)和单纯疱疹病毒(HSV_1)的IgM抗体测定,同时设440例非感染病例和289例正常儿... 为了解郑州地区儿童急性呼吸道感染人群中病毒感染状况。采用酶联免疫法对1180例急性呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(AdV)、巨细胞病毒(HCMV)和单纯疱疹病毒(HSV_1)的IgM抗体测定,同时设440例非感染病例和289例正常儿童为健康对照,并对年龄、性别、城乡和季节的感染情况进行分析。结果:观察组RSV、AdV、HCMV、HSV_1的阳性率分别为31.86%、14.7%、20.59%和20.9%与对照组比较差异显著(P<0.01)。提示郑州地区儿童急性呼吸道感染人群中RSV、AdV、HCMV和HSV_1的感染率较高,临床上应重视急性呼吸道感染的病原学研究。 展开更多
关键词 急性呼吸道感染 儿童 病毒血清 ELISA
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乙肝病毒血清标志物与HBV DNA载量及肝功能指标的关联性 被引量:17
15
作者 王斌 黄汉菊 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期214-219,共6页
目的探讨外周血中乙肝病毒血清标志物(hepatitis B virus serum markers,HBV-M)、HBV DNA载量和反映肝损伤的肝功能指标之间的关联性。方法回顾分析2014年3月~2016年3月同济医院483例慢性乙型肝炎患者资料,HBV-M采用微粒子化学发光技术... 目的探讨外周血中乙肝病毒血清标志物(hepatitis B virus serum markers,HBV-M)、HBV DNA载量和反映肝损伤的肝功能指标之间的关联性。方法回顾分析2014年3月~2016年3月同济医院483例慢性乙型肝炎患者资料,HBV-M采用微粒子化学发光技术定量检测;HBV DNA采用实时荧光定量PCR检测;谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)采用紫外连续监测法检测。结果 HBsAg的含量与HBV DNA载量、ALT异常比例(>41U/L)和AST异常比例(>35U/L)之间均无关联性(均P>0.05);HBeAg的含量与HBV DNA载量和ALT异常比例之间均无关联性(均P>0.05),但与AST异常比例有关联,关联程度不密切(r=0.21,P<0.01);抗-HBe的含量与HBV DNA载量和AST异常比例之间有关联性,但关联程度不密切(r=0.16,P<0.05;r=0.19,P<0.01),与ALT异常比例之间无关联性(P>0.05);抗-HBc的含量与HBV DNA载量、ALT异常比例和AST异常比例之间均有关联性,但关联程度不密切(r=0.25,P<0.01;r=0.29,P<0.01;r=0.29,P<0.01);HBV DNA载量的对数值与ALT和AST呈正相关,但线性相关程度较弱(r=0.24;r=0.29)。结论乙肝病毒血清标志物定量检测和HBV DNA定量检测,二者相互补充但不能取代,同时联合肝功能各项指标的检测,更有助于了解肝组织的受损程度。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 乙肝病毒血清标志物 HBV DNA 谷丙转氨酶 谷草转氨酶
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人为操作因素对酶联免疫吸附法检测乙肝病毒血清标志物影响的探讨 被引量:11
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作者 丁文 薛庆欢 +3 位作者 吴文金 吴小佳 曾广旦 李阳 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第7期1019-1022,共4页
目的研究探讨在检验日常工作中,人为操作因素对酶联免疫吸附法(ELISA法)检测乙肝病毒((HBV)血清标志物的影响情况。方法用ELISA法检测HBV血清标志物中具有代表性的表面抗原(HBSAG)及核心抗体(HB-CAB),对加样后加酶结合物间隔时间、终止... 目的研究探讨在检验日常工作中,人为操作因素对酶联免疫吸附法(ELISA法)检测乙肝病毒((HBV)血清标志物的影响情况。方法用ELISA法检测HBV血清标志物中具有代表性的表面抗原(HBSAG)及核心抗体(HB-CAB),对加样后加酶结合物间隔时间、终止反应后延时比色时间、洗板次数、反应温度等四个人为操作条件对结果的影响情况进行分析。结果 HBCAB随着加入样本后再加入酶结合物间隔时间的延长,无论是阴性对照、质控品还是血清样本的吸光度均呈下降趋势,假阳性率增加;HBSAG随着终止反应后比色时间的延长,其吸光度呈下降趋势,虽然幅度不大,但延时30分钟与立即比色相比,结果有统计学意义;从洗板次数来看,洗板4次、5次与6次的吸光度值随着洗板次数增加而降低,且各组间差异均呈在统计学意义;HBSAG在25℃反应温度时的吸光度明显要低于37℃反应温度时的吸光度,且强阳性的标本吸光度下降幅度更加明显。结论人为操作因素对ELISA法检测乙肝病毒血清标志物的影响很大,甚至会直接影响阴阳性结果的判断。为避免这种人为误差,在日常操作过程中各实验室应根据所用试剂的说明书编写各实验室的标准操作程序文件(SOP),并要求各操作人员严格执行,以尽量避免假阳性或假阴性结果的出现。 展开更多
关键词 人为操作因素 酶联免疫吸附法 乙肝病毒血清标志物
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禽腺病毒血清4型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:3
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作者 卢清侠 金前跃 +4 位作者 冯丽丽 柴永笑 郭振华 邢广旭 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2022年第12期131-138,共8页
为建立禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4)临床检测方法,根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物,将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体,构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon,同时对Hexon基因进行分析,选取高度保... 为建立禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4)临床检测方法,根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物,将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体,构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon,同时对Hexon基因进行分析,选取高度保守区域,设计荧光定量检测引物,建立FAdV4 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。该方法扩增产物长度为95 bp,最低检测下限为7.1×102拷贝/μL,且与其他禽源病毒无交叉反应,批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%,具有良好的特异性和重复性。将建立的检测方法应用于检测FAdV4在鸡肝癌细胞(Leghorn male hepatocellular cells,LMH)上的增殖特性,并与TCID50法测定的病毒滴度进行比较,结果显示,2种检测方法具有良好的相关性。综上,本研究建立的检测方法可用于FAdV4的临床早期快速检测。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 Hexon基因 荧光定量PCR 检测
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成都市新都区乡镇医院乙肝病毒血清标志物检测现状调查 被引量:2
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作者 刘冰 许颖 +3 位作者 袁红 陈华根 陈宇宁 宋强 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第15期2959-2960,2966,共3页
[目的]了解成都市新都区乡镇医院乙肝病毒血清标志物(HBV-M)检测现状。[方法]采取现场调查和发放HBV-M定值血清检测并对检测结果进行统计分析。[结果]所调查20家乡镇医院,均具有移液器、温育箱和冰箱,空调安装率35%(7/20),无一配备洗板... [目的]了解成都市新都区乡镇医院乙肝病毒血清标志物(HBV-M)检测现状。[方法]采取现场调查和发放HBV-M定值血清检测并对检测结果进行统计分析。[结果]所调查20家乡镇医院,均具有移液器、温育箱和冰箱,空调安装率35%(7/20),无一配备洗板机和酶标仪。从事HBV-M检测的43人中,大专毕业19人(44%),中专毕业18人(42%),中学毕业6人(14%);所学专业,检验专业19人(44.2%),非检验专业24人(55.8%);专业技术职称,检验技师14人(33%),检验士20人(46%),无专业技术职称9人(21%)。对酶联免疫吸附试验(ELISA)原理、试剂组成、操作步骤及其控制要点、质量控制概念及其方法和HBV-M的临床意义的了解率依次为:55.8%(24/43)、51.2%(22/43)、65.1%(28/43)、27.9%(12/43)、51.2%(22/43)。对所发HBV-M定值血清检测,回报结果按CAP能力测试要求评判,平均PT成绩为78%,总体合格率为78%。[结论]乡镇医院HBV-M检测现状存在设施设备配置不足;人员素质有待提高;没有建立和实施质量保证体系。应引起各级主管部门重视,予以改善和提高。 展开更多
关键词 医院 乙肝病毒血清标志物 检测 调查
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时间分辨荧光免疫法定量检测乙肝病毒血清标志物的临床意义 被引量:12
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作者 覃小梅 曾显媛 秦丽容 《临床和实验医学杂志》 2011年第10期775-776,共2页
目的探讨时间分辨荧光免疫法用于定量检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时对196例患者HBV血清标本进行5项指标检测。结果 TRFIA法检测患者标本乙型肝炎病毒表面抗原... 目的探讨时间分辨荧光免疫法用于定量检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时对196例患者HBV血清标本进行5项指标检测。结果 TRFIA法检测患者标本乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的阳性率分别为59.7%、24.5%、25.5%、29.1%、78.6%。ELISA法检测患者标本HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb的阳性率分别为52.1%、18.4%、21.4%、23.5%、67.9%。TRFIA法检测的阳性率均显著高于ELISA法(P<0.05)。结论 TRFIA法测定乙肝病毒血清标志物的相对灵敏度高,的可为临床疗效观察及乙肝疫苗的接种提供科学依据。 展开更多
关键词 乙肝病毒血清标志物 时间分辨荧光免疫法 酶联免疫吸附试验
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国产和进口全自动化学发光分析系统检测乙型肝炎病毒血清学标志物比较 被引量:4
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作者 张翠 张小丽 +4 位作者 张学东 王文静 李传巍 王瑞玲 杨晓莉 《武警医学》 CAS 2014年第8期831-833,共3页
我国是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染高发地区,病毒携带者达全国总人口的10%左右[1].HBV 血清标志物是流行病学筛查HBV感染的重要指标,近年来发展起来的化学发光磁微粒免疫分析法(CMIA)由于灵敏度高、分析方法简单快捷... 我国是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染高发地区,病毒携带者达全国总人口的10%左右[1].HBV 血清标志物是流行病学筛查HBV感染的重要指标,近年来发展起来的化学发光磁微粒免疫分析法(CMIA)由于灵敏度高、分析方法简单快捷、线性范围宽及检测时间短,目前已在医学检验中得到了广泛应用[2-5].但目前我国大型医疗机构使用的多为价格较高的进口化学发光诊断试剂.本研究拟通过对国产全自动磁微粒化学发光分析系统,与国外主流雅培全自动磁微粒化学发光分析系统平行测定乙型肝炎病毒血清学标志物结果进行对比,探讨国产全自动磁微粒化学发光分析系统的应用价值. 展开更多
关键词 磁微粒化学发光 乙型肝炎病毒血清学标志物 国产试剂 进口试剂
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