非临床药物安全性评价中毒性病理学评价基本要素

毒性病理学是结合病理学和毒理学原理的科学,关注化合物潜在的毒性作用。毒理学研究中的组织病理学评价经毒性病理学家的长期实践已形成标准技术规程,在药物风险评估过程中起重要作用。本文针对非临床药物安全性评价中毒性病理学评价中病理学家的资质和职责、镜检前病理学家应获取的资料和信息、毒性病理学评价的一般流程、影响毒性病理学评价准确性和一致性因素等国际公认的基本要素进行了简要的阐述,同时说明按照标准技术规程进行非临床药物毒理学试验组织病理学评价可以减少诊断偏差,获得高质量的病理学报告,为病理学家、毒理学家以及监管机构的审查人员提供重要的数据和信息。

药物非临床发育神经毒性研究的神经病理学评价策略

神经病理学评价是药物非临床发育神经毒性评价的重要组成部分和金标准,本文从发育神经毒性神经病理学评价的实验动物设计、优选的动物年龄、神经系统解剖和组织处理、以及病理结果的解释方面概述了标准化的发育神经毒性神经病理学评价原则和方法。介绍了药物非临床发育神经毒性研究神经病理学评价相关国际指导原则要求,为减少我国和其它国家及地区间实验程序的差异,为我国从事药物非临床发育神经毒性研究的病理学家提供一定参考。

实验动物黏膜相关淋巴结组织改良组织病理学评价方法研究进展

近年来,世界各国药品管理机构都非常重视药物引起免疫系统损伤的毒性病理学评价。2006年,美国STP在"免疫系统常规病理学评价最佳操作指南(2005)"岗位说明的基础上,发表了"淋巴器官改良的组织病理学评价"的方法,其作为能够运用的一种工具可协助毒性病理学工作者辩识评价免疫调制作用药物。现对黏膜相关淋巴结组织的组织结构、生理功能、形态学特征、改良的组织病理学诊断要点以及评价方法进行了归纳和概括性介绍,为相关领域的科研人员提供参考。

脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验病理学评价方法的探讨

目的探讨脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验病理评价方法。方法采用恒河猴双侧丘脑内注射给药,观察21 d后进行解剖,完整取出脑和脊髓,经修切后脱水包埋,切片经HE染色和没食子蓝染色后在光镜下观察,对神经组织病变进行评分,根据分值对病变严重程度进行判定。本研究涉及12批实验中的240动物。结果本方法对左右大脑包括针迹在内的不同部位、中脑、小脑、脑桥、延髓、颈膨大、腰膨大进行取材,参照脊髓法神经毒力试验病理学评价的半切面评分方法,对双侧脑干、颈髓和腰髓的病变进行评价并计分,根据平均分值并结合具体病变情况分别判定此3个部位的病变程度。本研究中特异性的神经系统病变的发生率15%。各型疫苗病变发生率相似,轻微病变出现的比例最高。较严重的病变主要见于Ⅲ型疫苗。结论在脑内法神经毒力试验中,用半切面评分方法对病变进行评分,较客观地反映了神经系统病变的情况,方法简便易行,实用性较强,利于判断标准的统一,可作为脊髓灰质炎疫苗脑内法神经毒力试验病理学评价方法的参考。

可控性大鼠急性脑局部缺血模型的建立及CT灌注成像与病理学评价

目的 建立稳定、可控的脑局部缺血动物模型 ,并通过CT灌注成像和病理学方法对其进行评价。方法 雄性Wistar大鼠 2 8只 ,随机分为 4组 (假手术组、脑梗死 15min组、脑梗死 3 0min、再灌注 1h组及低灌注 6h组 ) ,每组 7只鼠。在激光多普勒血流仪监测下采用改良的线栓法制作可控性脑局部缺血动物模型。利用CT灌注成像对各组动物模型的缺血状态进行观察 ,并与光学显微镜、电子显微镜结果以及红四氮唑 (TTC)染色标本对照。结果 脑梗死 15min组在激光多普勒血流仪监测下将局部脑血流量 (rCBF)控制为 5 %～ 2 2 % ,CT灌注成像显示 7只大鼠局部脑血流量均下降 ,TTC染色呈浅红色 ,未见明确梗死病灶 ,病理学检查显示部分神经元变性和星形细胞肿胀。脑梗死3 0min再灌注 1h组在激光多普勒血流仪监测下将rCBF控制为 4%～ 2 3 % ,病理学检查显示 7只大鼠脑缺血灶内星形细胞肿胀明显 ,可见大量神经元变性 ,标本TTC染色所示的白色梗死区与CT灌注成像异常区域一致。在低灌注 6h组 ,由于rCBF下降程度较小 (为 3 8%～ 5 5 % ) ,病理学显示 7只大鼠星形细胞肿胀明显而神经元变性轻微 ,TTC染色未见明确梗死病灶。假手术组 7只大鼠均未见上述各种异常表现。结论 可控性大鼠急性脑局部缺血模型稳定可靠 。

猴体神经毒力实验组织病理学评价方法的建立

目的:建立一种猴体神经毒力实验的组织病理学评价方法,用于疫苗猴体神经毒力非临床安全性评价。方法:通常采用猴丘脑内和脊髓腰椎段注射给予疫苗。给药结束后,猴体经解剖,取材,脱水,包埋,切片,HE染色后在光镜下观察神经组织病理学改变。病变按规定的神经毒性诊断标准打分后用Ridit方法进行组间比较检验,最终对所观察到的神经组织病变的统计结果进行分析和评价。结果:本方法中,脑组织取材包括左右两侧大脑在内的14个切面以及小脑、脑桥1个切面和延髓2个切面;脊髓取材包括颈髓5个切面、胸髓3个切面和腰髓6个切面。以上所取切面涵盖了神经组织的基本结构功能区域,操作简单且实用。组织病理学检查将神经组织病变分类为神经元变性、坏死,嗜神经现象,神经胶质细胞增多,小胶质细胞结节,围管浸润和针迹反应等。这些病变按病变数目和病灶面积进行等级划分,从"0"分到"4"分共分为5个等级。结论:神经系统的形态学评价要求病理实验人员熟悉大脑的结构和功能,掌握解剖及病理制片技能。因此,神经组织病理制片的科学性和一致性以及操作人员的技术水平影响神经毒性组织病理学评价的可靠性和准确性。本研究建立的神经毒力组织病理学评价方法除适用于疫苗猴体神经毒力非临床安全性评价实验外,还可应用于一般神经毒性实验、神经组织退行性疾病动物模型以及脑、脊髓损伤动物模型的评价中,是一项系统、规范、实用的神经毒性组织病理学评价方法。

乳腺癌新辅助化疗的临床意义和病理学评价

一、乳腺癌新辅助化疗的定义 自1990年以来，国内肿瘤外科医师借鉴国外乳腺癌治疗的先进经验，开始对可手术的乳腺癌治疗方案进行改革，在术前先行化疗，再施行改良根治术，这种新的治疗模式大大减少了乳腺癌根治术的使用，也降低了手术对患者身体的创伤程度，提高了患者的生活质量。从广义上说，

药物安全性研究中免疫系统的病理学评价

免疫系统是一个复杂的、涉及多个器官的系统,自身易受年龄、性别、环境等多个因素的影响,其正常的生理变异较大,因此在临床前安全性研究中评估药物所致的免疫毒性是一个巨大的挑战。目前,免疫系统的组织形态学评价是确定免疫毒性公认的基石。就免疫系统病理学评价相关的指导原则,以及胸腺、脾脏、淋巴结等重要免疫器官的病理学评价进行简要论述,以帮助毒性病理学家准确和一致性评价免疫系统中预期的或意外的药物所致的毒性改变。

注射用奥沙利铂对比奥沙利铂脂质体Beagle犬的解剖病理学评价

目的:比较注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体对Beagle犬毒性作用的解剖病理学改变,为抗癌药物脂质体制剂的临床前安全性评价提供重要的形态学参考数据。方法:Beagle犬分为阴性对照组、空载体脂质体组、注射用奥沙利铂组、奥沙利铂脂质体低、高剂量组。静脉滴注每2周给药1次,共4次,恢复期1个月。解剖动物进行组织病理学检查。结果:与脂质体、注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体相关的组织病理学变化分别为多组织器官的泡沫细胞聚集;睾丸生精细胞数量减少,附睾精子减少症和胸腺、脾脏萎缩;肝脏小肉芽肿,胸腺、脾脏萎缩。结论:通过以上同一抗癌药物不同剂型对Beagle犬的解剖病理学评价比较,为抗癌药物脂质体剂型临床前安全性评价提供了重要的形态学参考数据。

恶性胸膜间皮瘤胸膜外肺切除术的病理学评价和预测因素

美国休斯顿德克萨斯大学安德森癌症中心解剖病理学科的研究人员总结了56例恶性胸膜间皮瘤（MPM）患者接受胸膜外肺切除术（EPP）的情况，结果发表在Am J ClinPathol上。肿瘤以WHO胸膜瘤的分类标准为依据进行分类，研究人员分析了EPP之后的切片标本，评价了EPP标本病理类型和临床诊断（DP）报告之间的一致性。病理和临床参数以临床结果相互关联。

病理学指导下的非小细胞肺癌个体化免疫治疗

在肺癌个体化免疫治疗时代,如何有效地筛选程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)免疫检查点抑制剂潜在获益人群成为免疫治疗时代面临的新挑战。病理科医师通过免疫组织化学检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中PD-L1的表达水平,可为预测PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂治疗晚期NSCLC的疗效和预后提供准确可靠的依据。此外,病理科医师可通过传统病理学方法观察主要病理学缓解(major pathological response,MPR)程度,进一步评价早中期肺癌免疫新辅助治疗的效果。对目前病理学诊断指导下的NSCLC个体化免疫治疗的进展以及未来的发展方向进行综述。

应用全切片图像进行毒性病理学同行评议的研究进展

全切片图像是通过数字切片扫描仪将整个组织切片扫描生成的二维图像,近年来已广泛应用于病理学教学、组织切片讨论、科研等领域。参照美国毒性病理学会(STP)对全切片图像在诊断中的应用建议、经济合作与发展组织(OECD)和美国食品药品管理局(FDA)关于使用全切片图像进行病理学同行评议的指导原则,对药物非临床研究质量管理规范(GLP)条件下应用全切片图像进行毒性病理学同行评议的工作流程、内容和要求进行相关总结。同时结合中国合同研究组织(CRO)采用全切片图像开展毒性病理学评价进行概述,以期提升我国毒性病理学评价和病理学同行评议工作的规范性与专业水平。

在药物安全性评价中毒性病理的操作流程及重要性

临床前安全性评价的目的是提供新药对人类健康危害程度的科学依据,预测上市新药对人类健康的危害程度。临床前安全性评价研究的质量直接关系到人类用药的安全,GLP的建立就是为了确保实验资料的真实、完整和可靠。毒性病理学是毒理学中最为重要的组成部分,也是临床前安全性评价工作中最基本的环节。从毒性病理的整个流程及其重要性方面进行综述。

清肠温中方对三硝基苯磺酸诱导的实验性结肠炎大鼠肠黏膜作用的研究

目的研究清肠温中方对三硝基苯磺酸诱导的实验性结肠炎大鼠结肠黏膜的作用。方法以三硝基苯磺酸灌肠诱导大鼠急性结肠炎,造模成功后连续以清肠温中方高、中、低剂量混悬液及柳氮磺吡啶(salazosulfapyridine,SASP)混悬液灌胃治疗10天,取结肠,进行疾病活动指数(disease activity index,DAI),结肠黏膜损伤指数(colonic mucosa damage index,CMDI)和结肠组织病理学(histological score,HS)评价。结果药物干预10天后,模型组DAI、CMDI、HS明显高于正常组(P<0.05);SASP组DAI及CMDI均较模型组有明显的下降(P<0.05);清肠温中方各剂量组DAI、CMDI、HS水平较模型组均明显下降(P<0.05),其中清肠温中方高、中剂量组炎细胞侵润的程度明显低于模型组(P<0.05)。结论清肠温中方对三硝基苯磺酸诱导的结肠炎大鼠肠黏膜有保护作用,且能有效改善结肠组织炎细胞侵润。

LEEP:宫颈病变诊疗的一把“双刃剑”

LEEP（loop electrosurgical excision procedure）即环形电切术，也称LLETZ（1arge loop excision of transformationzone）。南于阴道镜检查及活检对细胞学异常妇女的诊断有一定的局限性，1984年，Cartier使用很小的loop环获取宫颈活检组织。1986年，Prendiville等报道用大的loop环切除宫颈移行带，以评估巴氏涂片结果异常的妇女，这就在切除宫颈病变的同时，获得了用于病理学评价的大块组织标本。

恶性肿瘤研究动态

SPINK1在ETS非重排前列腺癌中的作用；放疗或加用化疗的头颈部局限性晚期鳞癌的局部无复发生存的预治疗预后因素；循证病理学及胸腺瘤的病理学评价：跨被囊侵袭并非显著的预后特征；

GLP实验室管理初探

GLP是药物非临床研究中的一项规范，我国非常重视此项“基本建设”，从国家到各省、市和有关部门均已投入大量财力，设点建立符合GLP要求的实验室。在构建中建立合理的管理制度、确保实验用动物的质量、选择合理的实验评价指标等是关键。但我国GLP实验室建设还非常薄弱，尤其是在诊断标准、病理学检查技术、动物病理学研究等方面的工作需要加强。

病理诊断在直肠癌新辅助治疗后等待观察策略中的指导作用

研究表明,局部进展期直肠癌患者新辅助放化疗(nCRT)后,会发生临床完全缓解(cCR)。部分精心挑选的患者经等待观察后,获得很好的疗效。这种保留器官的方法,有助于患者避免手术及其相关的发病率和死亡率。nCRT会导致肿瘤细胞的退变和残留肿瘤细胞的不均匀分布。由于假阴性率高,活检的可靠性在等待观察策略中仍不尽如人意。因此,对病理组织学检查阴性的患者,也应严格随访。今后,免疫微环境和分子标记、源于患者的类器官培养、循环肿瘤细胞(CTC)和血浆游离DNA(cfDNA)等技术,可能有助于等待观察患者的筛查和监测。

家兔鼻腔病理标本制备及组织结构解析

目的研究家兔鼻腔的解剖学和组织学结构,为吸入性毒性研究提供有效的病理学评价方法。方法采集正常成年家兔的鼻腔,经10%中性福尔马林溶液固定,三氯甲烷脱脂,甲酸溶液脱钙后,从鼻腔顶端开始连续切片,HE染色,对其中具有标志性的解剖学和组织学结构部位的4个切面的主要上皮类型和组织结构进行评价。结果切面Ⅰ在紧靠门齿后修取,主要排列有鳞状上皮带有少量密集的变移上皮,该部位仅适用于灌注给药试验的毒性病理学评价。第一个腭脊处修取切面II,主要排列有变移上皮和呼吸上皮。紧靠第一个上前臼齿前修取切面III,紧靠第一个上臼齿前修取切面IV,切面III和切面IV排列有呼吸上皮和嗅上皮,通常还分布有鼻相关性淋巴组织。与大鼠、小鼠、狗、猴相比,家兔鼻腔的相对体积与人类似。结论通过家兔明显的颅骨解剖标志物确定鼻腔的4个组织切面,可完整涵盖所有鼻腔内的组织结构特征,这为临床前药物安全性评价中鼻腔的科学性评估提供支持和帮助。

毒理试验中骨髓组织切片制作方法的对比

近年来．世界各旧药品管理机构都一直非常重视生物技术药物引起免疫系统损伤的毒性病理学评价。骨髓检查在新药研发GLP毒理实验中一直处于很重要的地位，包括骨髓涂片和骨髓切片.