腹膜透析相关性腹膜炎239例次致病菌菌谱及药敏分析

目的分析腹膜炎患者致病菌的菌谱分布及药敏情况,指导腹膜透析相关性腹膜炎的用药方案。方法收集腹膜透析中心239例次腹膜透析相关性腹膜炎患者的资料,分析致病菌菌谱分布及本院药敏培养结果。结果 63例次培养结果为阴性,培养阴性率达26.36%;176例次培养结果为阳性,其中革兰阳性菌(以G+表示)102例次,革兰阴性菌(以G-表示)57例次,真菌17例次(7.11%),G+所占比例为42.68%,多见草绿色链球菌(11.71%)、表皮葡萄球菌(6.69%)、金黄色葡萄球菌(5.02%)、溶血葡萄球菌(4.08%),G-菌占23.85%,以大肠埃希菌(12.54%)多见;G+菌普遍耐药率较高,G+菌及G-菌对头孢唑林的耐药率分别达56.52%,55.36%。结论腹膜透析相关性腹膜炎培养阴性率仍偏高,需改进培养方法;G+菌仍为本中心腹膜炎主要致病菌;头孢唑林已不适合作为本中心经验性初始用药,万古霉素可考虑取代其作用。

郴州市区域内致病菌菌谱及抗生素敏感性现状研究

目的研究农村人口中致病菌菌谱及其对常用抗生素的耐药性现状。方法收集郴州市辖区内 12所主要服务于农村人口的医疗机构 ,1999年 1月至 2 0 0 0年 7月期间分离、鉴定的 42 2 6株细菌并作抗生素敏感试验。结果革兰阳性菌 14 2 8株 ,占 33 .8% ,其中球菌 12 76株 ,杆菌 15 2株 ;革兰阴性菌共 2 798株 ,占6 6 .2 % ,其中杆菌 2 441株 ,球菌 35 7株 ;最常见菌种为大肠埃希菌 ,占 2 4.6 % ,其次为凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌属细菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌、志贺菌、变形杆菌等。大部分细菌对青霉素、氨苄青霉素、羧苄青霉素、红霉素、妥布霉素等耐药 ,对头孢唑啉、头孢拉丁、环丙沙星等耐药率达 5 0 %以上 ;淋球菌对青霉素、复方新诺明、四环素等高度耐药。结论农村人群中致病菌谱及其耐药性有其特点 ,对其进行耐药性监测 。

1973份痰液致病菌菌谱及细菌耐药性的动态研究

目的 为了合理使用抗生素，针对不同的细菌和其药敏试验选用抗生素。方法 对我院１９９５ 、１９９６ 、１９９７ 年１９７３ 份痰标本的细菌培养结果和致病菌和耐药情况进行了动态研究。结果 １９９５ 年６５９ 份痰标本共培养出１２３ 株致病菌（ 检出率１８－７ ％ ） ，其中Ｇ＋ 球菌１１ 株，占８－９ ％ ；Ｇ 杆菌１１２ 株，占９１－１％ ；１１２ 株Ｇ 杆菌对一代头孢菌素（ 先锋Ｖ、先锋ＶＩ） 的敏感率为５７－１ ％ （１２８／２２４） ，三代头孢菌素（ 先锋必、菌必治） 的敏感率为７７－７ ％ （１７４／２２４） ；对喹诺酮类的敏感率为７５－３％ （２５３／３３６） ；对氨基糖甙类的敏感率为７２－３ ％ （２４３／３３６） 。１９９６ 年６４２ 份痰标本培养出致病菌１５６ 株（ 检出率２４－３ ％ ） ，其中Ｇ＋ 球菌１３ 株，占８－３ ％ ；Ｇ－ 杆菌对一、三代头孢菌素、喹诺酮类、氨基糖甙类的敏感率分别为２５－５ ％ （７３／２８６） ；５９－４ ％ （１７０／２８６） ；５７－８ ％ （２４８／４２９） ；４７－９ ％ （１３７／２８６） 。１９９７ 年６７２ 份痰标本培养出致病菌１７１ 株（ 检出率２５－４ ％ ） ，其中Ｇ＋ 球菌３５ 株，占２０－５ ％ ；Ｇ－

植物精油纳米乳液对肉源腐败菌和致病菌的抑菌作用研究进展

植物精油是一类天然的抑菌剂,能够有效抑制多种肉源腐败菌和致病菌,在肉类工业中应用前景广泛。纳米乳液作为一种纳米级包埋系统,在改善精油的水溶性、稳定性和抑菌活性方面有明显效果,目前已成为肉类防腐保鲜领域的研究热点。因此,本文介绍了植物精油纳米乳液的构建方法(乳化方式、乳化剂)、基本特性(稳定性和生物利用率),重点探讨了植物精油纳米乳液对肉源腐败菌和致病菌的抑菌活性、影响因素(精油种类、乳化方式、乳化剂、乳液粒径和微生物种类),及其通过靶向结合、持续释放、被动运输等提高纯精油抑菌活性的内在机制,以期为植物精油纳米乳液在肉制品防腐保鲜中的研究及开发利用提供理论参考。

珊瑚藻提取物对食用菌病菌及杂菌的抗菌活性

对珊瑚藻乙醇提取物的抗菌活性进行初步研究,测定了其对圆弧青霉、绿色木霉、黑曲霉菌丝生长的抑制作用。结果表明,浓度为0.001 g/mL的珊瑚藻乙酸乙酯相Rf 0.00条带48 h的抑制率最低,为11.4%;浓度为0.01 g/mL的珊瑚藻Rf 0.92条带部分对圆弧青霉96 h抑制率最高,达到了86.0%。GC-MS分析表明,珊瑚藻乙醇提取物成分以酯类为主。

黄瓜(Cucumis sativus L.)对枯萎病菌抗性超微结构的研究

从超微结构水平上以枯萎病对黄瓜幼根的侵染过程和抗病、感病品种受侵染后细胞内部结构的变化进行研究，并探讨了寄主细胞结构变化与抗病性的关系．得出分生孢子在幼根表皮附着并萌发后，抗病、感病品种的表皮细胞均发生迅速反应．感病品种的表皮细胞壁增厚，细胞器和膜系统亦发生与壁增厚相关的变化；而抗病品种除细胞壁增厚外，表皮下的２—３层细胞的细胞质浓缩成致密状基质．将入侵菌丝包围在内．在感染的寄主组织，病原菌丝周围细胞的细胞器解体，膜结构破坏。

西瓜果斑病菌T2SS分泌蛋白的筛选和功能预测

利用KEGG和STRING数据库分析比较瓜类果斑病菌(西瓜嗜酸菌)(Acidovorax citrulli,Ac)和主要植物病原细菌Ⅱ型分泌系统(T2SS)的基因组成,收集有试验证据的植物病原细菌T2SS分泌蛋白序列信息,与已测序并经注释的果斑病菌AAC00-1菌株基因组进行序列比对,筛选出候选的果斑病菌同源T2SS分泌蛋白。通过对筛选出的分泌蛋白的信号肽、代谢通路、蛋白互作网络及其在植物细胞中的定位进行分析,预测部分分泌蛋白的生物学功能。

梨阿太菌果腐病菌(Athelia bombacina)单核化菌丝制备及其致病力评价

【目的】建立梨阿太菌果腐病菌(Athelia bombacina)单核化菌丝制备方法,并对其致病性进行评价,为后续该病原菌的分子生物学研究奠定基础。【方法】以阿太菌果腐病菌HG-AB20170418为供试菌株,研究了菌龄、酶解时间、裂解酶等对阿太菌果腐病菌原生质体制备的影响,并比较分析了单核体菌丝与原始菌丝之间形态、生长速率以及致病力差异,最后对单核化处理前后菌丝杂合度进行了评估。【结果】以溶壁酶为裂解酶制备的原生质体产量最高,崩溃酶和纤维素酶对菌丝裂解作用极弱。溶壁酶和蜗牛酶裂解时间较短,最佳裂解时间为2.0 h,而崩溃酶和纤维素酶裂解时间较长。培养3 d菌丝经酶解后在显微镜下可观察到大量的原生质体,且在较短时间内菌丝全部裂解。单核化处理后菌丝在PDA上培养呈螺旋状生长,且生长速率显著低于原始菌株。经单核化处理的菌株接种至黄冠梨后,所有果实接种部位均在第3天产生病斑,但不同菌株间致病力差异显著。经单核化处理后菌丝杂合率为0.00%,属于简单基因组。【结论】单核化菌丝最佳制备条件为PDB液体培养3 d的A.bombacina菌丝经1.5%(w,后同)溶壁酶和1.5%蜗牛酶裂解1.5 h,该制备方法的建立为该病原菌的分子致病机制研究提供重要的方法基础。

申嗪霉素和咪鲜胺复配对水稻立枯病菌的增效作用

选用1%申嗪霉素悬浮剂、40%咪鲜胺水乳剂研究申嗪霉素和咪鲜胺及其复配对水稻立枯病菌(尖孢镰刀菌,Fusarium oxysporum)的影响,采用菌丝生长速率法测定申嗪霉素、咪鲜胺及其复配对水稻立枯病菌的毒力,筛选抑制效果较好的复配比例。结果表明,申嗪霉素和咪鲜胺对水稻立枯病菌菌丝生长具有较好的抑制作用,有效抑制中浓度(EC50)分别为0.249 6 mg/L和0.201 9 mg/L;两者不同比例复配表现出明显的增效作用,申嗪霉素∶咪鲜胺为1∶7时,共毒系数为362.849 5,增效作用较强。

西瓜细菌性果斑病菌鞭毛基因fliS的功能分析

【目的】西瓜细菌性果斑病由西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,Ac)引起,是一种严重的世界性病害。细菌的鞭毛通常被认为是细菌的运动器官,在细菌的侵染过程中也起重要作用,已有报道表明这种作用可受鞭毛蛋白基因fliS的调控,目前西瓜细菌性果斑病菌鞭毛蛋白基因fliS的功能及其调控机理尚不清楚,本研究旨在探讨该基因在鞭毛形成和致病性等生物学特性中的作用。【方法】以果斑病菌野生型致病菌株1号基因组DNA为模板,设计一系列引物,PCR扩增敲除基因fliS的上下游片段,通过回收、酶切、连接、转化等步骤构建敲除载体和互补载体,然后采用三亲杂交法,根据同源重组的原理,构建fliS基因缺失突变菌株及其互补菌株,并对其鞭毛的形态特征、致病性、过敏反应、游动性、群体感应、菌膜、生长速率、菌落形态等生物学特性进行测定;进一步提取细菌总RNA,以谷氨酰胺合成酶基因glnA为参照来校正目标基因的表达量,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,比较野生菌株、敲除菌株和互补菌株部分鞭毛蛋白基因flh D、fliE、fliC、flgK、flgM、fliD和fliA的表达量差异。【结果】通过抗性基因Gm的筛选和PCR验证,成功构建了果斑病菌鞭毛蛋白基因fliS缺失突变菌株1-fliS及其互补菌株1-fliShb,并对所得菌株的生物学特性和鞭毛进行观察,结果表明,与野生菌株相比,鞭毛蛋白基因缺失突变菌株的游动性、菌膜形成能力减弱,互补后游动性、菌膜形成能力基本恢复;缺失突变菌株对甜瓜、西瓜幼苗以及西瓜果实的致病性降低,互补后对西瓜、甜瓜幼苗及西瓜果实的致病力完全恢复。电镜测试显示,突变菌株鞭毛变短,长度约为野生菌株的1/3—1/4,互补后鞭毛合成能力基本恢复,鞭毛长度约为野生菌的4/5;光学显微镜下,可观察到在NA平板上的野生菌株菌落周围有明显的由细菌颤泳形成的特殊晕圈,而缺失突变菌株在NA平板上不能形成这种晕圈,互补后晕圈形成能力部分恢复;缺失突变菌株的生长速率比野生菌株慢,互补后生长速率没有恢复;野生菌株、突变菌株和互补菌株在过敏性反应和群体感应方面无差异。qRT-PCR分析结果显示,fliS基因缺失突变后,flh D表达量较野生菌株明显降低,fliE、fliC和flgK表达量较野生菌株明显升高,flgM和fliD表达量略微上升,fliA表达量基本不变;互补菌株中flhD、fliE和fliC表达量部分恢复,flgK、flgM和fliD表达量没有恢复,与突变菌株相同。【结论】鞭毛基因fliS对果斑病菌鞭毛丝的形成、游动性、菌膜形成能力、生长速率、菌落形态、致病性等均有调控作用。

食源性致病菌和腐败菌的快速检测方法研究进展

食源性致病菌和腐败菌污染一直是引发食品安全事件的重要因素。传统的检测方法虽具有较高的准确性,但需培养及生化实验,耗费时间长且操作较复杂,开发高效、快速的检测方法对保障食品安全至关重要。近年来,科学技术的进步使一些新方法、新技术逐渐被运用,比传统培养法检测时间更短、效率更高、特异性更好,具有广阔的应用前景。因此,本文综述了食源性致病菌和腐败菌快速检测方法的最新研究进展,包括纸片法、流式细胞术、阻抗法、腺苷三磷酸荧光法、光谱检测技术、分子生物学检测技术、免疫学检测法及生物传感器检测技术等,着重论述了各种方法的原理、优缺点、应用状况及发展方向,为致病菌和腐败菌引发的食品安全事件的预防及控制提供参考。

新疆蜜脆苹果阿太菌果腐病菌(Athelia bombacina)的分离与鉴定

【目的】明确造成新疆维吾尔自治区博尔塔拉自治州双河市贮藏的蜜脆苹果出现褐色病斑的致病菌种类。【方法】选取具有典型症状的果实,通过单孢分离法获得纯化菌株,利用形态学特征并联合分子生物学,明确菌株的分类地位,基于科赫氏法则明确致病菌种类。【结果】为明确引起该病的病原菌,对比形态学特征结合ITS和LSU基因片段联合分析后,确定菌株XJAU-PG-1为阿太菌果腐病菌(Athelia bombacina)。【结论】研究首次报道了阿太菌果腐病菌能够侵染苹果果实。

康地蕾得对百合镰刀菌枯萎病的室内毒力测定及防治试验

[目的]为康地蕾得的进一步推广使用提供依据。[方法]通过室内毒力测定,明确康地蕾得FG对百合镰刀菌枯萎病菌的EC50、EC70及EC90值,并进行药效防治试验,观察康地蕾得FG对百合镰刀菌枯萎病菌的防治效果。[结果]康地蕾得FG对百合镰刀菌枯萎病菌有较好的抑制作用,通过毒力方程计算出EC50、EC70及EC90值分别为977.00、1423.00、2449.62 mg/L。30.0、37.5、45.0 kg/hm2的康地蕾得FG对百合镰刀菌枯萎病均具有一定的防治效果,药后45 d的防效分别为55.08%、64.41%、68.32%,随着使用剂量的增加,防治效果有所提高,且在速效性、持效性及防治效果等方面优于对照药剂3%多抗霉素WP。[结论]康地蕾得FG对百合镰刀菌枯萎病具有良好的防治效果。

几种抑菌剂对腊肉原料肉的减菌化效应

为了研究几种抑菌剂对腊肉原料肉中腐败菌和致病菌的减菌化效果,选用食用酒精(Edible alcohol,EA)、次氯酸钠(NaClO)、乳酸链球菌素(Nisin)、蛋壳粉末(Eggshell powder,EP)和贝壳碳酸钙(Scallop shell calcium carbonate,SCC)五种抑菌剂对腊肉原料肉进行抑菌实验,研究结果表明抑菌剂的复合使用比单独使用的抑菌效果显著。EA+NaClO+Nisin+EP+SCC组合抑菌效果显著,使菌落总数从5.95lg(cfu·g-1)降至3.35lg(cfu·g-1)(p<0.05)。对大肠杆菌的抑制最显著的是NaClO+Nisin+EP+SCC组合,大肠杆菌数从4.95lg(cfu·g-1)降至2.51lg(cfu·g-1)(p<0.05)。EA+Nisin+EP+SCC组合对单增李斯特菌和酵母菌有很强的减菌化效果,分别从4.53lg(cfu·g-1)和4.20lg(cfu·g-1)降至1.71lg(cfu·g-1)(p<0.05)和1.94lg(cfu·g-1)(p<0.05)。EA+NaClO+EP+SCC组合则具有广谱的抑菌效果,使金黄色葡萄球菌数由4.67lg(cfu·g-1)降至1.74lg(cfu·g-1)(p<0.05),沙门氏菌从4.30lg(cfu·g-1)减少至1.42lg(cfu·g-1)(p<0.05)以及根霉菌从4.13lg(cfu·g-1)降至2.22lg(cfu·g-1)(p<0.05)。因此,和单独使用一种抑菌剂相比,几种抑菌剂复合使用比单独使用抑菌作用显著性增强。

老年下呼吸道感染98例痰菌及药敏资料分析

目的 为了取得老年下呼吸道感染病原菌流行情况和抗生素治疗的经验。方法 对 98例老年下呼吸道感染患者的痰菌培养及药物敏感结果进行统计分析。结果 该组患者共培养出致病菌 1 3种 ,菌株 6 2株。其中Ｇ+球菌占 1 4.84% ,Ｇ- 球菌占 80 .6 4% ,真菌占 4.84%。致病菌药物敏感中显示Ｇ+球菌对头孢唑啉敏感 ,Ｇ- 杆菌对氨基糖甙类、第三代头孢菌素、哌拉西林及喹诺酮敏感。结论 老年人下呼吸道感染中Ｇ- 杆菌感染发生率较高 ,抗生素治疗应根据细菌学指导 ,选择敏感药物。

香蕉枯萎病拮抗菌的鉴定及香蕉组培袋装苗防病试验

采用平板对峙法比较海南省土壤中分离到的5株对香蕉枯萎病有较强拮抗作用细菌,并进行形态特征及16S rDNA序列鉴定。结果表明,菌株S40为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。不同浓度S40的发酵滤液均可抑制病原菌菌丝生长、孢子萌发和生长。该拮抗菌发酵液可明显推迟组培袋装香蕉苗发病和死亡,不同处理的相对防治效果均大于70%。

2013—2014年我院ICU病原菌构成及耐药性分析

目的了解ICU标本中病原菌的构成及其耐药性分布,为临床医生合理使用抗菌药物提供指导,为控制医院感染提供参考依据。方法对2013年1月至2014年12月份离出的ICU病原菌进行细菌鉴定和药物敏感性测定。结果 ICU患者标本共分离病原菌382株,以G-杆菌为主,铜绿假单胞菌居首位,其次为大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌等,革兰阳性菌主要为金黄色葡萄球菌。病原菌普遍存在多重耐药。结论徐州矿务集团第二医院ICU病原菌的耐药性较高,细菌的耐药性分析结果对指导临床医生合理用药及控制医院感染具有重要的指导意义。

音达日-4味汤提取物对小鼠镇痛、解热及抗菌作用研究

目的:研究蒙药音达日-4味汤散乙酸乙酯提取物的解热镇痛作用及对临床常见致病菌的体外抗菌作用。方法:利用背部皮下注射干酵母法建立小鼠发热模型,通过测量其2 h、4 h、6 h、8 h等时间点体温,观察音达日-4味汤提取物对发热的影响;通过热板法测出小鼠痛阈值,观察音达日-4味汤散对镇痛反应的影响;分别采用琼脂平板法及微孔板TTC法测定音达日-4味汤提取物对金黄色葡萄球菌等11种临床常见致病菌的最低抑菌、杀菌浓度。结果:干酵母致小鼠发热实验结果表明,与模型组比较,音达日-4味汤散乙酸乙酯提取物中(42 g·(kg·d)^(-1))(P<0.01)、高(84 g·(kg·d)^(-1))(P<0.01)剂量组小鼠体温分别在造模后8 h、4 h差异最为显著,其解热作用可持续8 h以上;热板致小鼠镇痛实验发现,与模型组比较,蒙药音达日-4味汤乙酸乙酯提取物中(42 g·(kg·d)^(-1))(P<0.05)、高(84 g·(kg·d)^(-1))(P<0.01)剂量组痛阈值均有明显升高,痛反应潜伏期有所延长;此外,音达日-4味汤散乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌等11种临床常见耐药致病菌均表现出了较为普遍的抑菌和杀菌作用。结论:蒙药音达日-4味汤散乙酸乙酯提取物具有较明显的解热及镇痛作用;初步判断乙酸乙酯提取物为音达日-4味汤散解热、镇痛及抗菌作用的有效部位,对金黄色葡萄球菌和肠球菌抑制能力最强。

十一种中草药对两种林木病原菌抑制效果的研究

通过用11种中草药对油松立枯病病原菌(腐皮镰刀菌)和猕猴桃溃疡病(猕猴桃假单孢杆菌)进行了抑菌效果的测定,实验表明:黄柏、大蒜、艾蒿、苦楝、香附子、穿心莲对腐皮镰刀菌有抑制作用;大黄、苦楝、黄芩、黄连组合和艾蒿对猕猴桃溃疡病病原菌有不同程度的抑制作用。对Fusarium solani,24h内的抑菌效果排序为:黄柏>大蒜、穿心莲>苦楝>香附子>艾蒿,它们的最低有效浓度依次为1%、10%、20%、20%、1%、20%。在培养48 h后,抑制效果有所变化,其中黄柏、穿心莲、香附子三种药剂抑制效果增大,即说明此三种药剂稳定性较好,在较长时间内仍能保持药效。对Pseudomonas syringaePV.altinidiae,黄柏、苦楝、黄连、黄芩浓度为10%时对假单孢杆菌有抑制作用;大黄、黄芩浓度为1%和黄连+黄芩、艾蒿浓度为10%时有一定作用,但48 h后抑菌效果减弱。而黄连、黄芩浓度10%时单独作用有效,但以1:1组合后作用减弱。

梨和苹果种质对阿太菌果腐病菌的抗性评价及其防治药剂筛选

为明确不同梨和苹果种质对阿太菌果腐病菌Athelia bombacina的抗性以及筛选防治其有效杀菌剂,采用离体菌丝块有伤接种方法对40份梨种质和154份苹果种质进行病斑直径测定,通过聚类分析法和平均病斑直径法对不同种质进行了抗病性分级,并利用菌丝生长速率法测定了13种常用杀菌剂对阿太菌果腐病菌的毒力。结果表明,根据聚类分析法和平均病斑直径法均可将梨和苹果种质划分为高抗、抗、中抗、感和高感5类。与平均病斑直径法相比,梨和苹果种质分别以欧式距离为14和10作为最佳聚类分割点时进行聚类分析能够更加科学地划分类别,从40份梨种质中筛选出金锤子梨1个高抗种质,仅占总数的2.50%,从154份苹果种质中筛选出垂丝海棠、莫斯科透明、新疆苹果、路边石、伏帅等32个高抗种质,占总数的22.73%。药剂试验结果表明,戊唑醇、腈菌唑、咯菌腈和噻呋酰胺对阿太菌果腐病菌菌丝生长的抑制效果较好,抑制中浓度EC50分别为0.027、0.048、0.054和0.095 mg/L。表明梨和苹果种质均可被阿太菌果腐病菌侵染,但不同种质间抗病性差异明显,戊唑醇是采前防治阿太菌果腐病菌菌丝生长的最佳药剂。