基于网络药理学和大鼠移植性肝癌模型探讨癌痛消颗粒防治肝癌的分子作用机制

目的:利用网络药理学方法探讨癌痛消颗粒(ATXF)防治肝癌的物质基础和作用靶点,并结合大鼠移植性肝癌模型进行初步的验证。方法:通过TCMSP数据库收集癌痛消颗粒各中药活性成分及其潜在作用靶点,在GeneCards、OMIN、Drugbank、TTD数据库获取肝癌疾病靶点,取两者交集获得ATXF防治肝癌的潜在作用靶点。使用Cytoscape 3.8软件构建ATXF各成分与肝癌作用靶点的相互作用网络,并对其结果进行可视化分析。使用STRING平台分析ATXF防治肝癌靶点的互作网络,并运用CytoNCA分析各节点之间的拓扑关系,利用中位数筛选获得ATXF防治肝癌的核心靶点。通过Metascape数据分析平台,对获得的核心靶点进行GO、KEGG通路富集分析。采用大鼠腹水癌Walker-256细胞株建立SD大鼠移植性肝癌模型,经ATXF灌药干预15 d后取出瘤块。采用Western blot检测比较治疗组与对照组移植瘤内AKT、pAKT、p53、p-p53、ERK1/2以及p-ERK1/2的蛋白表达水平。结果:从ATXF中筛选得到257种活性成分,作用于294个靶点,与7993个肝癌疾病靶点相映射得到潜在作用靶点231个。进一步筛选获得AKT1、IL6、TP53、MAPK3、TNF、JUN、CASP3、MAPK1、MYC、PTGS2、MMP9等11个核心靶点,GO及KEGG分析结果显示以上核心靶点富集于HBV、TNF和癌症相关信号通路。大鼠移植瘤实验结果表明,ATXF可显著下调移植瘤内AKT、pAKT、pERK1/2的表达水平,同时显著上调p-p53蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:运用网络药理学方法分析发现癌痛消颗粒可作用于多条肿瘤信号通路,并运用大鼠移植瘤实验初步证实ATXF对于AKT、p53以及ERK1/2蛋白具有显著的调控作用,其机制可能是通过调控以上信号通路而发挥抗肝癌作用。

癌痛消颗粒联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌的疗效及其对白介素12、白介素10、γ干扰素的影响研究

背景肝动脉化疗栓塞术(TACE)为中晚期原发性肝癌(PLC)患者的重要治疗手段,但仍有部分患者在TACE治疗后发生近期疾病进展,生存质量、生活能力较低。癌痛消颗粒是广西中医药大学第一附属医院韦艾凌教授自拟药方,经临床证实治疗PLC有效,而癌痛消颗粒与TACE联合应用的临床疗效及其对自然杀伤细胞(NK细胞)相关免疫因子[白介素(IL)-12、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)]的影响尚不明确。目的探究癌痛消颗粒联合TACE治疗PLC的疗效,并观察其对IL-12、IL-10、IFN-γ的影响。方法本研究为随机对照的单盲、单中心试验。选取2014年6月-2016年2月于广西中医药大学第一附属医院就诊的符合研究标准的PLC癌患者86例,采用随机数字表法将其分为对照组和试验组,各43例。另选取同期本院健康体检者20例为健康组。患者均给予低脂优质蛋白饮食和保肝治疗,对照组采用TACE治疗,试验组在对照组的基础上给予癌痛消颗粒,1剂/d。患者均治疗1个疗程(8周)。随访截至2018-03-05。比较对照组和试验组患者临床疗效,治疗前及治疗后7 d、4周、8周的中医证候积分,治疗前及治疗后8周血清IL-12水平、血清IL-10水平、血清IFN-γ水平、欧洲癌症治疗研究组织的生存质量测定量表(EORTC QLQ-C30)评分,预后情况[总生存时间(OS)和疾病进展时间(TTP)]和毒副作用。结果试验组患者治疗后总有效率(ORR)为83.72%(36/43),高于对照组的65.12%(28/43)(χ~2=3.909,P=0.048)。试验组患者治疗后4、8周中医证候积分均低于对照组(P<0.05);治疗后7 d、4周、8周对照组和试验组患者中医证候积分均低于本组治疗前(P<0.05)。对照组与试验组治疗前、治疗后8周血清IL-10水平均高于健康组,血清IL-12、IFN-γ水平低于健康组(P<0.05);试验组治疗后8周血清IL-10水平低于对照组,血清IL-12、IFN-γ水平高于对照组(P<0.05);治疗后8周对照组与试验组血清IL-10水平低于本组治疗前,血清IL-12、IFN-γ水平高于本组治疗前(P<0.05)。试验组治疗后8周EORTC QLQ-C30中功能领域评分高于对照组,症状领域评分低于对照组(P<0.05);治疗后8周对照组与试验组患者EORTC QLQ-C30中功能领域评分高于治疗前,症状领域评分低于治疗前(P<0.05)。对照组患者中位OS、TTP分别为17(10,30)、11(6,15)个月,试验组患者中位OS、TTP分别为26(14,30)、15(11,22)个月;试验组患者死亡风险、疾病进展风险低于对照组[HR=0.529,95%CI(0.309,0.919),P=0.019;HR=0.568,95%CI(0.361,0.893),P=0.006]。结论癌痛消颗粒联合TACE治疗PLC具有较好的临床疗效,能够显著减轻患者临床症状,有效调节免疫因子水平,并改善患者的远期预后。

癌痛消颗粒治疗原发性肝癌血瘀毒结兼正虚证疗效分析

目的:探讨癌痛消颗粒对原发性肝癌(以下简称肝癌)的临床疗效。方法:严格遵循诊断标准、病例纳入标准、排除标准等,观察27例肝癌患者,口服癌痛消颗粒,进行治疗前后AFP、中医症状体征、Karnofsky评分指标的检查与分析。结果:临床观察27例原发性肝癌患者中用癌痛消颗粒治疗,肿瘤体积疗效有效率88.89%;中医证候总有效率为21/27(77.78%);用药前后中医证候积分差值为(10.31±4.71),差异有显著性意义(P<0.01);AFP用药前后的差值为(316.31±62.74),差异有显著性意义(P<0.01);用药前后生活质量(卡氏评分)有明显变化,评分前后差值为(11.15±5.65),差异有显著性意义(P<0.01)。结论:癌痛消颗粒治疗原发性肝癌血瘀毒结正虚证患者的肿瘤体积疗效有效率88.89%;中医证候总有效率为21/27(77.78%),能明显降低原发性肝癌患者的AFP水平,改善患者的生活质量。

癌痛消颗粒调节大鼠移植性肝癌VEGF和MVD表达的实验研究

目的:用大鼠walker-256移植性肝癌模型研究癌痛消颗粒对肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的影响,以探讨该药癌痛消颗粒抗肝癌作用的机制。方法:将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组,即癌痛消颗粒高剂量组(A组)、癌痛消颗粒低剂量组(B组)、5-Fu组(C组)、生理盐水组(D组),于造模后第8天对癌痛消治疗组及生理盐水组灌胃给药,5-Fu组腹腔注射给药,连续用药14天后停药24h,处死大鼠,取出瘤块,用免疫组化法检测瘤块中VEGF和MVD的表达情况。另设正常饲养组(E组)大鼠10只,不进行造模及给药,供实验结束时作空白对照用。结果:造模各组(A、B、C、D组)VEGF及MVD的表达水平均明显高于正常组(E组)(P<0.01);两者的表达均以D组最高;和D组比较,A、B、C组均可明显降低VEGF及MVD的表达(P<0.01),A组比B组作用更为明显(P<0.05)。结论:癌痛消颗粒可下调大鼠移植性肝癌VEGF和MVD的表达,以高剂量组作用更为明显。

癌痛消颗粒影响大鼠移植性肝癌细胞凋亡的研究

目的:探讨癌痛消颗粒对实验大鼠肝癌细胞的影响。方法:采用Walker-256瘤株进行SD大鼠的移植型肝癌的造模,造模结束后药物治疗,最后处死动物取标本,检测细胞周期及细胞凋亡。结果:癌痛消颗粒组的肝细胞主要停留在细胞周期的G0/G1期,在S期的细胞明显减少,与模型组相比,差异均有非常显著性意义(P<0.01);癌痛消组细胞凋亡率明显提高,与模型组、正常组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:癌痛消颗粒能使肝癌细胞周期停留在G0/G1期,阻止其进入S期;显著提高癌细胞凋亡率,促使癌细胞凋亡。

正交实验法优选肿痛消颗粒的成型工艺

目的:通过正交实验优选肿痛消颗粒的成型工艺。方法:以吸湿率为指标考察所用辅料的种类及配比;以吸湿率和成型率指标优选肿痛消颗粒的最佳成型工艺条件,并考察该颗粒的休止角、吸湿率。结果:辅料蔗糖粉/糊精以2∶1为最好;浸膏与辅料的混匀比例为1∶1,润湿剂体积分数为60%,干燥温度为60℃,依此制得的颗粒流动性好。结论:本成型工艺合理、可行,可为该颗粒的大量生产提供科学依据。

癌痛消颗粒醇提工艺的正交实验研究

目的优化癌痛消颗粒醇提工艺。方法采用正交设计对癌痛消颗粒醇提工艺的提取方法进行优化,以不同工艺所提总浸出物、总黄酮及野黄芩苷质量分数作为综合评价指标。结果最佳工艺为用80%乙醇回流提取3次,每次加80%乙醇10倍/次,回流1.5 h次/。结论该工艺条件作为癌痛消颗粒醇提工艺是合理的。

经痛消颗粒中芍药苷含量测定

为建立经痛消颗粒中芍药苷含量测定方法 ,以薄层色谱———比色法 ,采用薄层色谱法将复方制剂经痛消颗粒中的芍药苷与其他成分分离 ,然后用紫外分光光度法测定其含量。结果 :能消除其他成分的背景干扰 ,芍药苷平均回收率为98 74 % ,RSD为 1 4 1% ,在一定浓度范围内线性良好。提示薄层色谱———比色法可用作该制剂的定量分析。

筋骨痛消颗粒治疗膝骨性关节炎(血瘀寒凝证)116例临床研究

目的观察筋骨痛消颗粒治疗膝骨性关节炎有效性和安全性。方法采用随机化分组,试验组与对照组按1¨1分配,以筋骨痛消丸为对照药物,采用双盲双模拟临床试验方法。观察安全性检测指标和主要症状、体征、膝关节X线检查疗效性指标。结果两组总有效率、控显率,两组间的治疗前、中、后病情总积分,两组中医证候疗效总有效率、控显率,两组主要症状体征的总有效率,两组治疗前后的膝X线检查变化,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论筋骨痛消颗粒治疗膝骨关节炎能有效缓解关节疼痛、晨僵、屈伸不利等临床症状,安全性好。同丸剂相比,在疗效与安全性方面差异均无显著性意义,保持了原剂型的效果。

肿痛消颗粒治疗急性软组织损伤的实验研究

目的观察肿痛消颗粒对急性软组织损伤实验动物模型的治疗作用。方法通过对小鼠扭体实验、小鼠耳廓炎症肿胀的影响和小鼠皮下血肿吸收实验,观察肿痛消颗粒与三七伤药片治疗急性软组织损伤的作用对比。结果肿痛消颗粒大、中剂量组在镇痛、消肿及血肿吸收方面与三七伤药片组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论肿痛消颗粒大、中剂量具有显著的活血化瘀、消肿止痛之功效,具有较好的治疗急性软组织损伤的作用。

肿痛消颗粒的制备工艺

目的:建立肿痛消颗粒的最佳制备工艺条件。方法:通过正交试验对肿痛消颗粒制备过程中的影响条件(即醇沉浓度、浸膏相对密度、烘干温度等因素)进行考察分析,同时对颗粒粒度、水分含量、生产效率等进行检验分析。优选该颗粒剂的最佳制备生产工艺。结果:综合分析试验中的各项指标,肿痛消颗粒的最佳制备工艺是醇沉浓度为含醇量60%,相对密度为1.26～1.36,烘干温度为55～65℃。结论:该工艺条件稳定,可为生产提供理论依据。

肛肠炎痛消颗粒的镇痛与消炎机理研究

目的:观察肛肠炎痛消颗粒的镇痛与抗炎的作用机制。方法:将小鼠分为空白对照组、阳性对照组、肛肠炎痛消颗粒低剂量组、肛肠炎痛消颗粒高剂量组。通过观察二甲苯所致小鼠耳廓肿胀实验、小鼠腹腔毛细血管通透性实验、巴豆油致大鼠肛门肿胀模型实验,考查肛肠炎痛消颗粒的抗炎作用;通过小鼠热板致痛实验、醋酸致小鼠疼痛实验,观察肛肠炎痛消颗粒的镇痛作用。结果:肛肠炎痛消颗粒能够明显减少小鼠耳廓肿胀,降低毛细血管通透性,减少小鼠肛门肿胀,对热刺激和化学物质刺激致痛动物均有显著的镇痛作用。结论:肛肠炎痛消颗粒具有消炎镇痛作用。

癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌细胞凋亡及Bcl-2表达影响的研究

目的:观察癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌细胞凋亡及Bcl-2表达的影响。方法:采用Walker-256瘤株进行SD大鼠的移植性肝癌的造模,造模成功后随机分为4组,癌痛消颗粒高剂量组、癌痛消颗粒低剂量组、5-Fu组、模型组,每组10只,分别给予相应药物治疗,最后处死大鼠,取出瘤块,用免疫组化法检测瘤块中Bcl-2的表达情况,应用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率;另设正常组大鼠10只,不进行造模及给药,供实验结束时取肝脏组织作空白对照用。结果:和正常组比较,模型组大鼠的细胞凋亡率下降、Bcl-2升高,运用癌痛消颗粒或5-Fu治疗后细胞凋亡率升高、Bcl-2下降。结论:癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌细胞具有诱导凋亡作用,其机理与下调Bcl-2基因蛋白的表达有关。

痹痛消颗粒治疗腰椎间盘突出症(LDP)的实验研究

目的 :研究痹痛消治疗腰椎间盘作用的机制。方法 :将小鼠分为生理盐水组、阿司匹林组、痹痛消低、中、高剂量组 ,观察痹痛消的镇痛作用和对小鼠耳廓肿胀的影响 ;将大鼠分为生理盐水组、阿司匹林组、痹痛消中高剂量组 ,观察痹痛消对大鼠足跖肿胀的影响 ;将大鼠分为正常对照组、空白对照组、阿司匹林组、痹痛消颗粒组 ,在不同时间观察痹痛消对化学性神经根炎模型的影响。结果 :痹痛消镇痛明显 ,能抑制小鼠耳廓肿胀和大鼠足跖肿胀 ,作用持久显著 ,可抑制化学性神经根炎模型大鼠炎性肉芽肿的形成 ,降低模型大鼠的全血粘度、血浆粘度、红细胞聚积指数。结论 :痹痛消颗粒是通过抗炎、镇痛。

经痛消颗粒剂的定性鉴别研究

本文采用薄层层析、薄层扫描法对方中所含主要有效成分芍药甙、延胡索乙素、阿魏酸、桂皮醛进行了定性的鉴别实验研究，为该制剂质量标准的制订提供了可靠数据。

癌痛消颗粒对小鼠急性毒性实验研究

以癌痛消颗粒的水溶剂对小鼠灌胃,观察小鼠死亡情况及相关指标的变化情况来评价其安全性。半数致死量实验以不同浓度的药液及饱和药液对小鼠灌胃,观察2周未见小鼠死亡,无法测出半数致死量。进行最大耐受量实验,以饱和溶液1天内对小鼠灌胃3次。灌胃后小鼠心、肝、脾、肺、肾、睾丸/卵巢等与体重的比值较对照组差异无显著性意义(均P>0.05);血常规及肝肾功能指标值差异亦无显著性意义(均P>0.05)。灌入药物总量相当于7.95g生药,折合成人临床日用量为164.6倍,符合临床应用及推广要求,对长期毒性实验剂量的设计和药物Ⅰ期临床实验起始剂量的选择具有重要参考价值。

肿痛消颗粒治疗急性软组织损伤60例疗效观察

目的:观察肿痛消颗粒治疗急性软组织损伤的临床疗效。方法:将80例急性软组织损伤患者随机分为治疗组60例和对照组20例,治疗组采用肿痛消颗粒治疗,对照组采用三七伤药片治疗。结果:治疗组治愈率为53.3%,总有效率为95%;对照组治愈率为25%,总有效率为85%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论:肿痛消颗粒治疗急性软组织损伤有一定的疗效。

六味乳痛消颗粒剂的制备及临床应用

目的:研制六味乳痛消颗粒剂,并观察其临床疗效。方法:根据临床经验自拟处方并制备六味乳痛消颗粒剂,并治疗乳腺增生症患者50例。结果:制备方法简便可行,治疗总有效率96.0%。结论:本制剂组方合理,临床疗效满意。

癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的干预作用

目的观察癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌血管内皮因子C(VEGF-C)表达的影响。方法将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组,即癌痛消颗粒高剂量组(A组)、癌痛消颗粒低剂量组(B组)、5-Fu组(C组)、模型对照组(D组),并设正常对照组(E组)。于造模后第8天开始给药,连续用药14d后停药24h,处死大鼠,取出瘤块,测量体积、免疫组化法检测瘤块中VEGF-C的表达情况。结果 A、B、C、D组VEGF-C均高于E组,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中以D组VEGF-C表达最高。A、B、C组VEGF-C均低于D组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。A组VEGF-C低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的表达有抑制作用,且以高剂量组作用更为明显。

癌痛消颗粒对移植性肝癌大鼠VEGF-C的影响

目的:观察癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌血管内皮因子C(VEGF-C)表达的影响。方法:将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组,即癌痛消颗粒高剂量组(A组)、癌痛消颗粒低剂量组(B组)、5-Fu组(C组)、模型组(D组)。于造模后第8天对癌痛消颗粒治疗组灌胃给药,5-Fu组腹腔注射给药,连续用药14天后停药24h,处死大鼠,取出瘤块,用免疫组化法检测瘤块中VEGF-C的表达情况。另设正常对照组(E组)大鼠10只,不进行造模及给药,供实验结束时作空白对照用。结果:造模各组(A、B、C、D组)VEGF-C均高于正常对照组(E组),差异均有统计学意义(均P<0.05),其中以D组VEGF-C表达最高。A、B、C组VEGF-C均低于D组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。A组VEGF-C低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的表达有干预作用,且以高剂量组作用更为明显。