山苍子精油对痤疮丙酸杆菌生物膜破坏及毒力酶释放的影响

目的研究山苍子精油对痤疮丙酸杆菌的抑菌活性,并深入探究山苍子精油对痤疮丙酸杆菌生物膜破坏以及毒力酶释放的影响。方法通过最低抑菌浓度实验研究精油主要成分的抑菌活性;通过细胞表面疏水性实验、结晶紫染色法实验、DNA与RNA泄露实验、Annexin V-FITC/PI双标记实验及脂肪酶释放量测定实验,研究精油对痤疮丙酸杆菌生物膜形成及毒力酶释放的影响。结果山苍子精油主要成分对痤疮丙酸杆菌的MIC值依次为α-松油醇、β-月桂烯<4-萜烯醇、α-侧柏烯与桧烯<芳樟醇<β-蒎烯<柠檬醛。山苍子精油可抑制细菌生物膜形成,增加细胞膜的通透性,使胞内重要生物大分子泄露,并抑制细菌分泌脂肪酶的能力,降低其引发细胞炎症的风险。结论山苍子精油对痤疮丙酸杆菌有显著抑菌作用,可作为防治痤疮的天然抑菌剂进行开发应用。

新方颠倒散体外抑制痤疮丙酸杆菌实验研究及皮肤毒性测试

目的:研究不同配比新方颠倒散水提物溶液对痤疮丙酸杆菌体外的抑菌作用。方法:配制不同组分新方颠倒散水提物溶液A、C、E、G、I、K,颠倒散水提物溶液(M)为阳性对照,另设阴性对照、空白对照;采用37℃厌氧培养法对痤疮丙酸杆菌进行培养,观察各溶液体外的抑菌效果;并采用单次限量法,取A进行大鼠急性经皮毒性试验。结果:培养48 h后,空白对照无菌落,其余均见菌落,各新方颠倒散水提物溶液分别与阴性对照比较,均有显著统计学意义(P<0.05),与阳性对照比较均无显著统计学意义(P>0.05)。大鼠急性经皮毒性试验:A组、对照组、M组反应平均值分别为0、0、1.2,生理情况正常。结论:不同配比新方颠倒散水提物溶液体外对痤疮丙酸杆菌均有抑制作用,相互比较以及与颠倒散比较均无显著差异,且新方颠倒散溶液无皮肤刺激及中毒反应。

几种外用抗生素对痤疮丙酸杆菌抑菌作用的比较研究

痤疮丙酸杆菌(C.acnes)作为诱发痤疮的重要因素之一,除了其本身会引发炎症外,也可能将葡萄球菌等其他细菌带入皮肤,造成更复杂的感染。进入青春期,很多同学因为痤疮而苦恼,但并不清楚选择何种药物进行治疗。外用抗生素是治疗痤疮的药物之一,哪种外用抗生素的抑菌效果最优?我对此进行了探究,以期为同学们治疗轻中度痤疮提供参考。

86株痤疮丙酸杆菌的耐药性及生物膜成膜能力分析

目的研究临床分离痤疮丙酸杆菌的耐药性及其生物膜成膜能力。方法选取2020年12月—2022年1月长沙市第四医院皮肤科门诊诊治的114例痤疮患者为研究对象。分离出痤疮丙酸杆菌,通过琼脂稀释法检测其对常用抗生素的耐药性;采用结晶紫染色法检测其生物膜形成能力;通过激光共聚焦显微镜观察生物膜结构;选取8株生物膜成膜能力较强的菌株Pa01、Pa02、Pa03、Pa04、Pa05、Pa06、Pa07和Pa08检测体外抗生素的敏感性,随机选取成膜能力阴性菌株(浮游菌)Pa12和成膜能力阳性菌株Pa03进行大鼠实验,复制痤疮丙酸杆菌菌株感染模型。将感染模型大鼠随机分为2组,每组6只,分别皮下注射30 mg/kg的米诺环素(米诺环素组)或1%DMSO(溶媒组),感染后第5天处死大鼠,测量脓肿的面积,并分离脓肿组织进行均浆计数和HE染色。结果本研究共分离出86株痤疮丙酸杆菌,分离率为75.4%。痤疮丙酸杆菌对甲硝唑和夫西地酸的耐药性最高,分别为93.0%和90.7%;对大环内酯类抗生素的耐药率为75.6%~88.4%。对米诺环素和多西环素的敏感性最高,耐药率仅分别为7.0%和8.1%。86株临床分离痤疮丙酸杆菌中,34株(39.53%)生物膜成膜能力阳性,其中,成膜能力强、中和弱的占比分别为9.30%(8/86)、12.79%(11/86)和17.44%(15/86)。不同成膜能力组的生物膜吸光度比较,差异有统计学意义(P<0.05),且成膜能力强、中和弱组的吸光度比成膜能力阴性组均显著升高(P<0.05);对照组与米诺环素实验组(8μg/mL)菌株Pa01、Pa02、Pa03、Pa04、Pa05、Pa06、Pa07和Pa08的生物膜总量比较,差异有统计意义(P<0.05)。成膜能力阴性菌株Pa12中,米诺环素组的脓肿大小较溶媒组降低(P<0.05),米诺环素可显著抑制浮游菌Pa12脓肿的形成;米诺环素组的菌株载量较溶媒组减少(P<0.05),米诺环素能显著降低其脓肿痤疮丙酸杆菌菌株载量。成膜能力阳性菌株Pa03中,溶媒组和米诺环素组的脓肿大小和菌株载量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论痤疮丙酸杆菌对米诺环素和多西环素的敏感性较高,且该菌易形成生物膜导致耐药性增加。

青蒿琥酯对痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞促炎症因子表达的影响

目的:研究青蒿琥酯(Art)对痤疮丙酸杆菌(P.acnes)诱导的人皮脂腺细胞(SZ95)促炎症因子表达的影响。方法:CCK8法检测不同浓度Art对人皮脂腺细胞活力的影响,筛选出适宜浓度的Art;RT-PCR、ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达。结果:Art在25~100μmol/L剂量范围内以剂量依赖关系抑制了痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α、IL-1β mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:Art可抑制痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α和IL-1β。

痤疮丙酸杆菌拮抗菌的筛选、发酵优化及安全性评价

痤疮是一种毛囊皮脂腺单位的皮肤炎症,青少年患病率可达85%,它的发病与痤疮丙酸杆菌的定植有关。获取能够高效拮抗痤疮丙酸杆菌的微生物,丰富痤疮丙酸杆菌拮抗菌的资源库。采用琼脂扩散法从酸菜中筛选出对痤疮丙酸杆菌具有较强抑菌活性的菌株。通过菌落形态、生化鉴定和16S rDNA序列比对进行菌株鉴定。从培养基优化及发酵条件优化两方面提升拮抗菌的抑菌活性。采用体外安全评价方法评估拮抗菌的安全性。筛选得到一株能高效拮抗痤疮丙酸杆菌的菌株HA2,初步鉴定为海恩西芽孢杆菌(Bacillus haynesii)。通过优化菌株HA2的发酵条件,将过膜发酵上清液抑菌圈的直径从38 mm提升至53 mm。根据四环素效价曲线换算,效价从20308.6 U提升至112927.6 U,提升5.56倍。经体外安全评价,初步判断菌株HA2为安全菌株。海恩西芽孢杆菌HA2是一株能高效拮抗痤疮丙酸杆菌,且成功通过体外安全评价的菌株,具有进一步研究的价值。

松油烯-4-醇与α-红没药醇对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌协同抑菌作用研究

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)和α-红没药醇(Bis)对于金黄色葡萄球菌(S.aureus)和痤疮丙酸杆菌(C.acnes)的协同抑菌作用。方法采用微量棋盘稀释法测定T4O、Bis联用时上述两种实验菌的最小抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI)。对两种实验菌各设置MIC组(加入MIC的T4O、Bis)、2×MIC组(加入2倍MIC的T4O、Bis)及阴性对照组(不加T4O、Bis),绘制T4O、Bis联用时两种实验菌各组的时间-杀菌曲线,测定联用时两种实验菌各组的菌株表面Zeta电位(ZP)、细胞内核酸及蛋白质泄漏情况、细菌生物膜破坏情况以及S.aureus的呼吸链脱氢酶活性,透射电镜观察联用对两种实验菌各组菌株形态的影响。结果T4O和Bis联用时S.aureus及C.acnes的FICI<0.5,其中T4O对S.aureus的MIC为0.62 g/L,对C.acnes的MIC为0.31 g/L;时间-杀菌曲线显示,联用可明显抑制两种细菌生长。与阴性对照组相比,联用时两种细菌的ZP均降低,细菌细胞内核酸、蛋白质泄漏增加,菌体丧失正常形态,细菌生物膜被破坏,且S.aureus呼吸链脱氢酶活力降低。结论T4O和Bis对S.aureus及C.acnes具有协同抑菌作用,两者联合可能成为抑菌产品的有效成分。

常山胡柚果皮精油对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用研究

以常山胡柚果皮为原料制备常山胡柚果皮精油(CHEO),分析其成分含量及对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用。结果表明:CHEO含有丰富的D-柠檬烯与松油烯,相对含量分别为30.45%与20.38%。CHEO对痤疮丙酸杆菌的最小抑菌质量浓度(MIC)与最小杀菌质量浓度(MBC)分别为(3.80±0.20)、(11.30±0.50)mg/mL。通过生长曲线发现,1×MIC CHEO在48 h内能明显抑制痤疮丙酸杆菌生长;通过电镜观察发现,用CHEO处理后痤疮丙酸杆菌菌体多有破损、断裂,表明CHEO对痤疮丙酸杆菌有较强的体外抑菌活性。

苦参碱对脂多糖／痤疮丙酸杆菌诱导的小鼠肝炎及产生肿瘤坏死因子的影响

用小鼠致死性肝炎模型和ＴＮＦ体外诱生的方法，研究苦参碱（Ｍａｔ）对脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）诱导的经痤疮丙酸杆菌（ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｔｔｍａｃｎｅｓ，ＰＡ）预刺激的小鼠产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）以及致死性肝炎的影响。结果表明：Ｍａｔ（１０，５０ｍｇ·ｋｇ￣（－１），ｉｐ，ｂｉｄ×３ｄ）可降低血清ＴＮＦ和ＡＬＴ水平及小鼠对ＬＰＳ致死毒性的敏感性，并可在体外抑制ＬＰＳ诱导的经ＰＡ预刺激的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＴＮＦ。提示Ｍａｔ的保肝作用与其抑制ＴＮＦ释放有关。

二氢杨梅素对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱发小鼠肝损伤的保护作用及对中性粒细胞释放白三烯的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对痤疮丙酸杆菌与脂多糖(P.acnes-LPS)诱发小鼠肝损伤的保护作用及对小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯的影响。方法通过对10mg/kgP.acnes负荷5d的小鼠iv3μg/kgLPS建立P.acnes-LPS肝损伤模型,用酶标仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,RP-HPLC法测定小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯B4(LTB4)和白三烯C4(LTC4)的水平。结果与模型组相比,125、250、500mg/kgDMY均能显著抑制由P.acnes-LPS诱发的小鼠血浆ALT活性升高,其抑制率分别为38.7%、45.1%、49.8%,并对小鼠腹腔中性粒细胞LTB4和LTC4的分泌呈剂量依赖性抑制作用。结论DMY对P.acnes-LPS诱发小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其部分作用机制可能与抑制白三烯释放有关。

石榴皮多酚对痤疮丙酸杆菌体外抑菌活性的研究

目的研究石榴皮多酚对痤疮主要致病菌——痤疮丙酸杆菌的抑制作用。方法首先用生长抑制试验(牛津杯法)确定石榴皮多酚醇提物对痤疮丙酸杆菌是否存在抑制作用,然后通过药基琼脂稀释法观察它对痤疮丙酸杆菌的MIC来评价该药物对所测细菌的抑制作用。结果石榴皮多酚醇提物500、300、100 mg/m L对痤疮丙酸杆菌ATCC11827具有较强的抑菌活性,其对痤疮丙酸杆菌的MIC为20 mg/m L。结论石榴皮多酚醇提物在体外具有明确的抑制痤疮丙酸杆菌活性的作用。

姜黄素对痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应的作用

目的:研究姜黄素对痤疮丙酸杆菌诱导的THP-1细胞分泌TNF-α和IL-8的影响,探讨姜黄素调控痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应的作用机制。方法:CCK8法检测姜黄素对THP-1细胞活力的影响;ELISA法检测上清中TNF-α和IL-8表达;实时定量PCR和Western blot检测TLR2及NF-κB p65表达。结果:姜黄素在5、10及15μmol/L浓度培养12 h后,对THP-1细胞活性无明显影响;姜黄素在10和15μmol/L浓度时,能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的TNF-α和IL-8表达;姜黄素能抑制TLR2、NF-κB p65及P-NF-κB p65表达。结论:姜黄素能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的THP-1细胞分泌炎症因子,其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路有关。

姜黄挥发油抗痤疮丙酸杆菌作用的研究

目的:了解姜黄挥发油对痤疮丙酸杆菌的抑制作用,选出新的天然抗痤疮丙酸杆菌药物。方法:采用药物成分钢杯法抑菌实验来验证其效果。结果:痤疮丙酸杆菌对姜黄挥发油中等敏感,强于公认的抗厌氧菌感染药物甲硝唑。结论:姜黄挥发油具有较好的抑制痤疮丙酸杆菌的作用,为临床治疗痤疮提供了一个新的选择。

胸膜肺炎放线杆菌血清型特异的疫苗候选基因的筛选及痤疮丙酸杆菌异源免疫

目的筛选猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型特异的疫苗候选基因,并研究痤疮丙酸杆菌对猪传染性胸膜肺炎的异源免疫。方法采用cDNA代表性差异分析、大肠杆菌核糖体展示、免疫筛选和RT-PCR技术筛选APP1型和5型血清型特异的疫苗候选基因,进行克隆、测序及同源序列分析。并用与APP疫苗候选基因具有同源序列的痤疮丙酸杆菌(PA)免疫小鼠,研究其对APP感染的异源免疫。结果获得血清1型APP6条疫苗候选基因,2条为未知基因,2条与PA同源性为98%,2条与人cDNA有同源性。获得血清5型APP7条疫苗候选基因,其中2条为未知基因,2条与PA同源性分别为93%和100%。用PA全菌免疫小鼠,产生的抗血清可与1型和5型APP发生强的免疫反应,ELISA检测效价达1∶3200;脾淋巴细胞检测结果显示,免疫组CD3+、CD4+T细胞的百分率及CD4+/CD8+比值与对照组相比均升高,两组CD3+T细胞百分率差异有显著意义。以10倍LD501型和5型APP分别感染PA免疫小鼠,小鼠存活率分别为95%和90%,并且在攻毒后第15天体内APP可全部被清除。结论1型与5型APP存在不同的疫苗候选基因,痤疮丙酸杆菌与之存在共同抗原,能够产生交叉免疫应答,对血清1型和5型APP的感染具有预防作用。

中药抑制痤疮丙酸杆菌的研究进展

痤疮丙酸杆菌是痤疮的主要致病因,它寄居于人体皮肤毛囊等处.临床上常用抗生素对抗痤疮丙酸杆菌,但因细菌耐药性的存在,使得痤疮难以得到较好的治疗.相较于抗生素,中药治疗痤疮的疗效是值得肯定的,且少有痤疮丙酸杆菌对中药产生耐药性的报道.主要综述了近年来用以抑制痤疮丙酸杆菌的几种中药及临床疗法,并提出了几点现有方法的不足以及对未来中药抑制痤疮丙酸杆菌的展望.

不同助溶剂作用下桉叶油对痤疮丙酸杆菌的作用

目的观察不同助溶剂作用下桉叶油对痤疮丙酸杆菌的作用,为痤疮的治疗提供一定实验参考,同时为开发利用桉叶油资源提供支撑。方法采用平板牛津杯法及试管法,观察桉叶油在不同助溶剂作用条件下对痤疮丙酸杆菌的抑菌环直径及最低抑菌浓度。结果纯桉叶油(80%浓度)、桉叶油乙醇溶液(40%浓度)及桉叶油丙酮溶液(40%浓度)对痤疮丙酸杆菌能表现出完全抑菌作用,平板上无细菌生长,阳性对照药(16μg/m L红霉素)对痤疮丙酸杆菌平均抑菌圈直径为29.44 mm;助溶剂95%乙醇及丙酮对痤疮杆菌无抑菌作用;空白对照(蒸馏水)对痤疮丙酸杆菌无抑菌作用;当以丙酮为助溶剂时,桉叶油的最低抑菌浓度为浓度0.625%;当以95%乙醇为助溶剂时,桉叶油的最低抑菌浓度为1.25%。结论桉叶油对痤疮丙酸杆菌有较好的抑菌作用;助溶剂95%乙醇、丙酮对痤疮丙酸杆菌无抑菌作用;助溶剂对桉叶油的最低抑菌浓度有一定的影响,丙酮为助溶剂时较95%乙醇为助溶剂时最低抑菌浓度低。

5-氨基酮戊酸光动力疗法对痤疮丙酸杆菌感染金黄地鼠皮脂腺斑影响的研究

目的:观察5-氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)对痤疮丙酸杆菌感染后金黄地鼠皮脂腺斑炎症的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:培养痤疮丙酸杆菌并接种于金黄地鼠皮脂腺,诱导炎症反应产生。以ALA-PDT和单纯红光照射皮脂腺斑,取局部皮肤行组织病理检查,以Western blot检测炎症信号通路相关蛋白核因子(NF)-κB和STAT3蛋白表达情况。结果:与对照组比较,ALA-PDT和单纯红光照射均能减轻痤疮丙酸杆菌感染引起的以单核细胞浸润为主的炎症性改变;同时,ALA-PDT和单纯红光照射后NF-κB蛋白表达水平明显降低,而STAT3蛋白表达升高。ALA-PDT对皮脂腺斑组织的炎症和炎症信号通路相关蛋白表达抑制效果显著强于单纯红光组。结论:ALA-PDT对于痤疮丙酸杆菌感染引起的皮脂腺炎症有良好的抑制效果。

蝎肽抗菌凝胶对痤疮丙酸杆菌的抑制作用

目的研究蝎肽抗菌凝胶对痤疮丙酸杆菌的抑制作用。方法将2种编号的痤疮丙酸杆菌厌氧培养,采用微量稀释法对稀释后的痤疮丙酸杆菌菌株的培养菌液进行药敏试验,向稀释后的菌液中分别加入无菌生理盐水、不同浓度的蝎肽抗菌凝胶和含有氨苄青霉素钠粉针剂的溶液,用酶标仪和显微镜观察其对痤疮丙酸杆菌的抑制作用结果;用平板培养的方法复测蝎肽抗菌凝胶的最小抑菌浓度。结果加入蝎肽抗菌凝胶后的前6组痤疮丙酸杆菌培养溶液和加入含有氨苄青霉素钠粉针剂的溶液中均未发现有痤疮丙酸杆菌的生长,显微镜下也未见有痤疮丙酸杆菌生长,其中蝎肽抗菌凝胶对2种痤疮丙酸杆菌的最小抑菌浓度分别为3.125μg/mL和6.25μg/mL。结论蝎肽抗菌凝胶对痤疮丙酸杆菌有明显的抑制作用,为临床上寻常型痤疮疾病的治疗提供了可靠的实验依据。