苦参碱对脂多糖／痤疮丙酸杆菌诱导的小鼠肝炎及产生肿瘤坏死因子的影响

用小鼠致死性肝炎模型和ＴＮＦ体外诱生的方法，研究苦参碱（Ｍａｔ）对脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）诱导的经痤疮丙酸杆菌（ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｔｔｍａｃｎｅｓ，ＰＡ）预刺激的小鼠产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）以及致死性肝炎的影响。结果表明：Ｍａｔ（１０，５０ｍｇ·ｋｇ￣（－１），ｉｐ，ｂｉｄ×３ｄ）可降低血清ＴＮＦ和ＡＬＴ水平及小鼠对ＬＰＳ致死毒性的敏感性，并可在体外抑制ＬＰＳ诱导的经ＰＡ预刺激的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＴＮＦ。提示Ｍａｔ的保肝作用与其抑制ＴＮＦ释放有关。

痤疮丙酸杆菌对痤疮作用研究进展

痤疮丙酸杆菌(P.acnes)被广泛认为是痤疮的病因之一。近年来,随着对P.acnes研究的深入,发现其与痤疮患者的皮脂分泌、角化过度和炎症等病理过程有密切关联,表明其在痤疮发病机制中并不是独立的致病因素。本文综述了P.acnes在痤疮中的作用机制和研究进展,旨在为进一步诊治痤疮提供更深入的研究思路。

二氢杨梅素对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱发小鼠肝损伤的保护作用及对中性粒细胞释放白三烯的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对痤疮丙酸杆菌与脂多糖(P.acnes-LPS)诱发小鼠肝损伤的保护作用及对小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯的影响。方法通过对10mg/kgP.acnes负荷5d的小鼠iv3μg/kgLPS建立P.acnes-LPS肝损伤模型,用酶标仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,RP-HPLC法测定小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯B4(LTB4)和白三烯C4(LTC4)的水平。结果与模型组相比,125、250、500mg/kgDMY均能显著抑制由P.acnes-LPS诱发的小鼠血浆ALT活性升高,其抑制率分别为38.7%、45.1%、49.8%,并对小鼠腹腔中性粒细胞LTB4和LTC4的分泌呈剂量依赖性抑制作用。结论DMY对P.acnes-LPS诱发小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其部分作用机制可能与抑制白三烯释放有关。

青蒿琥酯对痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞促炎症因子表达的影响

目的:研究青蒿琥酯(Art)对痤疮丙酸杆菌(P.acnes)诱导的人皮脂腺细胞(SZ95)促炎症因子表达的影响。方法:CCK8法检测不同浓度Art对人皮脂腺细胞活力的影响,筛选出适宜浓度的Art;RT-PCR、ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达。结果:Art在25~100μmol/L剂量范围内以剂量依赖关系抑制了痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α、IL-1β mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:Art可抑制痤疮丙酸杆菌诱导的人皮脂腺细胞分泌促炎症因子TNF-α和IL-1β。

5-氨基酮戊酸光动力疗法对痤疮丙酸杆菌感染金黄地鼠皮脂腺斑影响的研究

目的:观察5-氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)对痤疮丙酸杆菌感染后金黄地鼠皮脂腺斑炎症的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:培养痤疮丙酸杆菌并接种于金黄地鼠皮脂腺,诱导炎症反应产生。以ALA-PDT和单纯红光照射皮脂腺斑,取局部皮肤行组织病理检查,以Western blot检测炎症信号通路相关蛋白核因子(NF)-κB和STAT3蛋白表达情况。结果:与对照组比较,ALA-PDT和单纯红光照射均能减轻痤疮丙酸杆菌感染引起的以单核细胞浸润为主的炎症性改变;同时,ALA-PDT和单纯红光照射后NF-κB蛋白表达水平明显降低,而STAT3蛋白表达升高。ALA-PDT对皮脂腺斑组织的炎症和炎症信号通路相关蛋白表达抑制效果显著强于单纯红光组。结论:ALA-PDT对于痤疮丙酸杆菌感染引起的皮脂腺炎症有良好的抑制效果。

松油烯-4-醇与α-红没药醇对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌协同抑菌作用研究

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)和α-红没药醇(Bis)对于金黄色葡萄球菌(S.aureus)和痤疮丙酸杆菌(C.acnes)的协同抑菌作用。方法采用微量棋盘稀释法测定T4O、Bis联用时上述两种实验菌的最小抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI)。对两种实验菌各设置MIC组(加入MIC的T4O、Bis)、2×MIC组(加入2倍MIC的T4O、Bis)及阴性对照组(不加T4O、Bis),绘制T4O、Bis联用时两种实验菌各组的时间-杀菌曲线,测定联用时两种实验菌各组的菌株表面Zeta电位(ZP)、细胞内核酸及蛋白质泄漏情况、细菌生物膜破坏情况以及S.aureus的呼吸链脱氢酶活性,透射电镜观察联用对两种实验菌各组菌株形态的影响。结果T4O和Bis联用时S.aureus及C.acnes的FICI<0.5,其中T4O对S.aureus的MIC为0.62 g/L,对C.acnes的MIC为0.31 g/L;时间-杀菌曲线显示,联用可明显抑制两种细菌生长。与阴性对照组相比,联用时两种细菌的ZP均降低,细菌细胞内核酸、蛋白质泄漏增加,菌体丧失正常形态,细菌生物膜被破坏,且S.aureus呼吸链脱氢酶活力降低。结论T4O和Bis对S.aureus及C.acnes具有协同抑菌作用,两者联合可能成为抑菌产品的有效成分。

5-氨基酮戊酸光动力疗法对痤疮丙酸杆菌体外抑制的实验研究

目的评估5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)在体外对痤疮丙酸杆菌的抑制效应。方法试验分为ALA-PDT组、ALA组、细菌组、细菌红光组,使用半导体固态冷光源照射,采用厌氧盒培养法与倾注培养法培养,观察2.5 g/L、3.6 g/L、5.0 g/L等ALA-PDT组照光后,培养琼脂中痤疮丙酸杆菌生长情况。结果 5.0 g/L ALA-PDT组已可完全抑制各浓度痤疮丙酸杆菌的生长,2.5 g/L ALA-PDT组各浓度痤疮丙酸杆菌可继续生长,3.6 g/L ALA-PDT组除107CFU/m L浓度组细菌外,其余浓度组痤疮丙酸杆菌的生长已被完全抑制。结论同一细菌浓度下,ALA的抑菌作用与其浓度呈正相关。

痤疮丙酸杆菌通过激活NLRP3/caspase-1信号通路对大鼠髓核细胞退变的影响及机制研究

目的初步探索痤疮丙酸杆菌(P.acnes)低毒性感染对大鼠髓核细胞(NPCs)退变的作用效应与Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)信号通路之间的关系。方法离体培养大鼠NPCs。将实验细胞分为空白组(0.9%氯化钠溶液预处理)、P.acnes组(2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理)、si-NC+P.acnes组(si-NC质粒转染+2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理)和si-NLRP3+P.acnes组(si-NLRP3质粒转染+2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理),各组细胞培养48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定4组细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测4组细胞NLRP3、caspase-1、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)的mRNA及蛋白表达情况。结果P.acnes组IL-1β、IL-18的表达水平较空白组显著上升(均P<0.05);si-NLRP3+P.acnes组IL-1β、IL-18的表达水平较si-NC+P.acnes组显著下降(均P<0.05)。P.acnes组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达水平较空白组显著上升,Aggrecan的mRNA与蛋白表达水平较空白组显著下降(均P<0.05);si-NLRP3+P.acnes组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达水平较si-NC+P.acnes组显著下降,Aggrecan的mRNA与蛋白表达水平较si-NC+P.acnes组显著上升(均P<0.05)。结论P.acnes低毒性感染可以激活NLRP3/caspase-1信号通路,诱发细胞炎症反应和细胞外基质(ECM)降解重构,对NPCs退变具有促进效应;而阻断NLRP3炎性小体可减轻由P.acnes感染诱导的NPCs退变。

脂多糖对家蚕幼虫Toll样受体基因BmToll9-2表达的影响

【目的】Toll样受体是昆虫Toll信号传导途径的一个重要组成成员,对激活昆虫机体对入侵病原微生物的先天免疫应答起着至关重要的作用。本研究旨在探究脂多糖对家蚕Bombyx mori幼虫中Toll样受体基因BmToll9-2基因表达的影响。【方法】利用RT-PCR分析BmToll9-2基因在家蚕大造品系4龄和5龄幼虫表皮、脂肪体、马氏管、中肠、神经、丝腺、胸部肌肉共7种组织中的表达特征;将脂多糖和大肠杆菌Escherichia coli注射到5龄幼虫体腔内,诱导其免疫系统响应,采用实时荧光定量PCR分析注射后不同时间BmToll9-2基因在中肠中的表达水平。【结果】RT-PCR结果表明,BmToll9-2基因在家蚕4龄幼虫的脂肪体、马氏管、神经和丝腺中高度表达,在5龄幼虫脂肪体、中肠、马氏管和神经中均有较高表达。实时荧光定量PCR结果显示,注射脂多糖能诱导5龄幼虫中肠中BmToll9-2基因转录,在注射后6 h时的诱导效果最好;注射大肠杆菌也能诱导BmToll9-2基因转录,在注射后3和6 h时的诱导效果最好。【结论】家蚕幼虫BmToll9-2基因在脂多糖和大肠杆菌处理后上调表达,提示BmToll9-2受体可能参与昆虫Toll样受体对脂多糖和细菌的识别过程。

消炎祛痘方对痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应抑制作用研究

目的观察消炎祛痘方对痤疮丙酸杆菌诱导的人急性单核细胞(THP-1细胞)分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1α(interleukin-1 alpha,IL-1α)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的影响,探讨其调控痤疮丙酸杆菌诱导的炎症反应机制。方法采用细胞计数试验盒-8检测消炎祛痘方对THP-1细胞活力的影响;采用ELISA法观察消炎祛痘方对THP-1细胞上清中TNF-α、IL-1α、IL-8水平的影响;采用qRT-PCR和Western blot法分别检测Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)及核因子-κB p65(nuclear factor-kappa B p65,NF-κB p65)mRNA和蛋白的表达水平。结果25μg/mL消炎祛痘方对THP-1细胞活性无明显影响,12.5、25μg/mL消炎祛痘方均能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的TNF-α、IL-1α、IL-8表达水平,但25μg/mL消炎祛痘方对3种细胞因子表达的抑制作用更强。12.5、25μg/mL消炎祛痘方均能抑制TLR2 mRNA的表达,并且两组TLR2 mRNA表达水平的差异无统计学意义。消炎祛痘方能有效降低痤疮丙酸杆菌诱导的TLR2表达水平,25μg/mL消炎祛痘方降低TLR2的作用更明显。25μg/mL消炎祛痘方能显著抑制NF-κB p65的表达。结论消炎祛痘方能抑制痤疮丙酸杆菌诱导的THP-1细胞分泌炎症因子,其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路有关。

痤疮丙酸杆菌致病机制的研究进展

痤疮是由多因素引起的一种慢性炎症性皮肤疾病,现在主流观点认为其发病机制主要包括遗传因素、皮脂分泌过度、毛囊皮脂腺导管角化过度、皮肤炎症反应、痤疮丙酸杆菌致病和雄激素分泌过度等。其中,痤疮丙酸杆菌作为重要的致病因素多年来被广泛关注,随着研究的深入,逐渐发现痤疮丙酸杆菌在痤疮中并非以独立的病因而存在。本文就痤疮丙酸杆菌的致病机制和最新进展做一综述,以期为痤疮的临床治疗及今后的研究方向提供科学思路。

浅谈5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗痤疮的影响因素

痤疮是一种累及颜面、前胸和后背的毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病,皮脂腺功能亢进和痤疮丙酸杆菌的增多是其发病的重要原因。治疗方法虽较多,但是对中重度结节性囊肿性痤疮仍缺乏有效的治疗手段。

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗痤疮过程中炎症因子的动态检测

目的利用兔耳痤疮模型探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗痤疮过程中不同时间点炎症因子表达水平的动态变化。方法皮内注射痤疮丙酸杆菌(C.acnes)于兔耳皮肤,构建兔耳痤疮模型。成功构建的模型兔耳给予ALA-PDT治疗。通过组织HE染色评价痤疮炎症的变化;提取兔耳组织RNA并以Real-time PCR检测ALA-PDT治疗前及治疗后4、24 h及7 d的炎症因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、NF-κB(p65)m RNA的相对表达水平。结果通过评估组织HE结果发现,ALA-PDT治疗后4～24 h皮损区炎症逐渐加重,治疗后7 d组织炎症细胞浸润明显减轻。Real-time PCR发现,与治疗前相比,ALA-PDT治疗后4、24 h的IL-1α、IL-1β和IL-6 m RNA的相对表达水平上升,但差异无统计学意义(P>0.05),而IL-8、p65 m RNA相对表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后7 d,所有炎症因子相对表达水平均较治疗前显著下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 ALA-PDT早期可能通过上调IL-8和p65放大炎症反应,随后抑制炎症因子改善组织炎症反应,最终有效治疗痤疮。

美他环素胶囊与维胺脂胶囊治疗脓疱型痤疮疗效对比

目的 探讨盐酸美他环素胶囊和维胺脂胶囊对脓疱型痤疮的疗效。方法 将 2 0 4例脓疱型痤疮患者随机分为两组 ,治疗组用盐酸美他环素胶囊 ,0 .3gbid ;对照组用维胺脂胶囊 ,2 5mgtid ;均 14d为一疗程。结果 盐酸美他环素胶囊疗效优于维胺脂胶囊 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 盐酸美他环素胶囊治疗脓疱型痤疮优于维甲酸。

白介素-1β及NOD样受体蛋白3在痤疮炎性反应中的作用

目的:探讨痤疮的发病机制,为痤疮的非抗生素治疗提供新思路。方法:分别使用感染复数(multiplicity ofinfection,MOI)为0,10,20,30的痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激正常人表皮角质形成细胞(normalhumanepidermal keratinocyte,NHEK)12,24,36h后,使用ELISA,real-timePCR检测NHEK中IL-1β的蛋白及mRNA的表达。另设3组:空白对照组,未进行任何预处理的NHEK;阳性对照组,仅使用MOI为30的痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激NHEK;siRNA组,使用特异性小干扰RNA(siRNA)预处理以后再使用MOI为30的痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激NHEK,使用蛋白质印迹法检测3组中NOD样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor containing pyrin domain 3,NLRP3)炎性小体的表达情况,使用ELISA,real-time PCR检测3组NHEK中IL-1β蛋白及mRNA的表达。结果:不同浓度痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激NHEK后,IL-1β表达量较空白对照组均有不同程度的升高,升高程度呈时间及剂量相关性(P<0.05)。siRNA预处理NHEK后,NLRP3炎性小体以及IL-1β的表达量明显降低,但仍高于空白对照组(P<0.05)。结论:痤疮丙酸杆菌刺激NHEK分泌IL-1β可能需要NLRP3炎性小体的参与;可通过抑制NLRP3炎性小体的活性来抑制由痤疮丙酸杆菌导致的炎性反应,从而减少抗生素的使用。

双歧杆菌四联活菌片联合甘草酸二铵肠溶胶囊治疗非酒精性脂肪性肝病的疗效

目的探究双歧杆菌四联活菌片联合甘草酸二铵肠溶胶囊治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的疗效及对患者血清核转录因子κB(NF-κB)、脂多糖(LPS)水平的影响。方法将153例NAFLD患者根据治疗方法的不同分为观察组(78例)和对照组(75例)。对照组给予甘草酸二铵肠溶胶囊治疗,观察组在对照组治疗的基础上予以双歧杆菌四联活菌片治疗,2组均连续治疗4周。观察2组治疗后的疗效,检测并比较2组治疗前、后的血清肝功能指标、血脂、NK-κB、LPS、白细胞介素-6(IL-6)水平及肠道菌群变化情况,统计2组治疗期间的不良反应发生情况。结果治疗后,观察组的总有效率为89.7%,高于对照组(75.3%,P<0.05)。治疗后,观察组血清总胆固醇(TC)水平、血清三酰甘油(TG)水平低于对照组(P<0.05);血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于对照组(P<0.05);血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TBiL)、血清谷氨酰转肽酶(GGT)、血清NK-κB、血清LPS、血清IL-6水平均低于对照组(P<0.05);乳酸菌、双歧杆菌水平高于对照组(P<0.05);大肠杆菌、肠球菌水平低于对照组(P<0.05)。治疗期间,观察组不良反应发生率为19.2%,与对照组(18.7%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌四联活菌片联合甘草酸二铵肠溶胶囊治疗NAFLD可有效降低患者血清NK-κB、LPS、IL-6水平,改善患者肠道屏障功能、肝功能及血脂代谢,抑制机体炎症反应,并提高临床疗效,安全性良好。

5-氨基酮戊酸光动力对大鼠痤疮模型免疫功能的影响

目的:探讨5-氨基酮戊酸光动力(5-aminolevulinicacid photodynamic therapy,5-ALA-PDT)对大鼠痤疮模型局部免疫功能的影响及相关机制。方法:将痤疮丙酸杆菌接种大鼠耳部,建立大鼠痤疮炎症模型,给予5-ALA-PDT治疗。对组织进行HE染色,采用免疫组化法检测大鼠巨噬细胞CD68、CD163、Toll样受体2(Toll-like receptor-2,TLR2)、髓样分化因子88(My D88)的表达。结果:痤疮丙酸杆菌接种于大鼠耳部可建立大鼠痤疮炎症模型,HE染色见大量炎性细胞弥漫性浸润。CD68、CD163、TLR2、My D88在大鼠耳部皮肤炎症细胞质内表达,空白组较少,接种P.acnes后表达增高,加激动剂Pam3CSK4后表达更高,5-ALAPDT治疗后较P.acnes组低。结论:大鼠耳部毛囊皮脂腺及周围可少量表达TLR2,接种痤疮丙酸杆菌后,表达显著增加,导致巨噬细胞等免疫细胞向毛囊皮脂腺周围聚集。5-ALA-PDT治疗后TLR2表达减少,减弱机体对细菌的免疫反应,从而减轻炎症。

丹参多糖对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎的保护作用

目的探讨丹参多糖Salvia miltiorrhiza polysaccharides(SMPS)对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎模型的影响。方法昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、SMPS高剂量组(300 mg/kg)、SMPS中剂量组(200 mg/kg)与SMPS低剂量组(100 mg/kg)。用尾静脉注射痤疮丙酸杆菌和脂多糖方法构建小鼠肝炎模型,比较SMPS对模型小鼠脏器系数、血清转氨酶及白三烯LTB4和LTC4的影响;检测肝组织匀浆中肿瘤坏死因子α、白介素1β的含量。结果 SMPS可显著改善肝炎小鼠的胸腺、肝脏、脾脏系数,降低血清中ALT、AST、LTB4和LTC4的活性以及肝组织匀浆中TNF-α、IL-1β的含量。结论 SMPS对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎有显著的保护作用。

从牛樟芝菌丝体分离的中性多糖对疮疱丙酸杆菌-脂多糖诱导的小鼠肝损伤的肝保护作用

牛樟芝（拟）Antrodia cinnamomea Chang TT ＆WN Chou是薄孔菌属真菌一新种，已报道该真菌热水提取物有肝保护作用，但有效成分不知。作者从该提取物中分离和精制了一种中性多糖ACN2α，检测了该多糖对疮疱丙酸杆菌Propionibacterium aches-脂多糖（LPS）诱导肝毒性的肝保护作用。