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瘀胆血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化 被引量:5
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作者 李伟 汪林 +1 位作者 曾杰 陈仿 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第6期771-776,共6页
背景:在一定的条件下,骨髓间充质干细胞可发生分化,是肝细胞的重要来源之一,多种因子会对其产生诱导作用。目的:探讨瘀胆血清在骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的诱导作用。方法:制备瘀胆动物模型,获得瘀胆血清。将分离的大鼠骨髓间充... 背景:在一定的条件下,骨髓间充质干细胞可发生分化,是肝细胞的重要来源之一,多种因子会对其产生诱导作用。目的:探讨瘀胆血清在骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的诱导作用。方法:制备瘀胆动物模型,获得瘀胆血清。将分离的大鼠骨髓间充质干细胞分为3组,分别利用无血清肝细胞培养液、无血清肝细胞培养液+瘀胆血清、无血清肝细胞培养液+正常血清进行培养。结果与结论:无血清肝细胞培养液+瘀胆血清组的甲胎蛋白阳性表达率、角蛋白18阳性表达率和白蛋白质量浓度均显著高于无血清肝细胞培养液组和无血清肝细胞培养液+正常血清组(P<0.05)。表明瘀胆血清具有一定的诱导作用,可以诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞进行分化。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 肝细胞 干细胞移植 骨髓间充质干细胞 细胞分化 瘀胆血清 细胞诱导
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瘀胆血清体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究 被引量:2
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作者 钟晓琳 万居易 +2 位作者 王忠琼 李昌平 胡莲 《西南军医》 2010年第1期24-27,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导其分化为肝细胞的可行性。方法分离、纯化并鉴定大鼠骨髓MSCs,制备正常及瘀胆大鼠血清,取第3代MSCs分组培养:A组:DMEM+10%FBS;B组:肝细胞生长培养基(HGM)+5%FBS;C组:HGM+5%正常大鼠血清;D组:HGM... 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导其分化为肝细胞的可行性。方法分离、纯化并鉴定大鼠骨髓MSCs,制备正常及瘀胆大鼠血清,取第3代MSCs分组培养:A组:DMEM+10%FBS;B组:肝细胞生长培养基(HGM)+5%FBS;C组:HGM+5%正常大鼠血清;D组:HGM+5%瘀胆大鼠血清;E组:HGM+5%瘀胆大鼠血清+25μg/L HGF。观察各组细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,采用RT-PCR检测甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白18(CK18)的表达,溴甲酚绿法检测上清液中白蛋白(ALB)的含量。结果培养过程中,D、E组出现多角形及双核细胞,A、B、C组细胞形态无明显变化。生长曲线显示细胞生长速度C组最快,D、E组均较B组快(P<0.05)。D、E组于诱导第7,14天出现AFP mRNA阳性表达,第14,21天出现CK18 mRNA阳性表达,D、E组上清液中白蛋白浓度随诱导时间延长逐渐升高,且E组高于D组(P<0.05)。A、B、C组未见AFP、CK18表达及白蛋白浓度变化。结论正常大鼠血清能明显促进MSCs的增殖;瘀胆血清对MSCs有一定促增殖作用,且能有效诱导其向肝细胞分化,联合使用HGF能提高分化率。 展开更多
关键词 瘀胆血清 肝细胞生长因子 间充质干细胞 肝细胞
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胚胎干细胞体外分化为功能性肝细胞过程中肝细胞生长因子诱导系统中瘀胆血清的促进作用(英文)
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作者 闵军 方天翎 +5 位作者 陈亚进 邓小耿 商昌珍 刘璐 曹君 陈积圣 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第42期8610-8614,共5页
背景:目前各种诱导胚胎干细胞(ESC)分化为肝细胞的方法中,大多忽略了对分化细胞功能的诱导与鉴定。是否表达肝细胞功能应作为ESC向肝细胞分化的鉴定指标之一。目的:观察在肝细胞生长因子(HGF)体外诱导小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化的体系... 背景:目前各种诱导胚胎干细胞(ESC)分化为肝细胞的方法中,大多忽略了对分化细胞功能的诱导与鉴定。是否表达肝细胞功能应作为ESC向肝细胞分化的鉴定指标之一。目的:观察在肝细胞生长因子(HGF)体外诱导小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化的体系中,瘀胆血清病理环境对分化细胞表达肝细胞功能的作用。设计:观察对比,体外细胞学实验。单位:中山大学附属第二医院肝胆外科。材料:实验于2004-10/2007-02在中山大学附属第二医院医学研究中心完成。小鼠E14ESC系由中山大学干细胞与组织工程中心提供;SD大鼠20只,鼠龄2周,购自中山大学动物实验中心。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学要求。方法:对SD大鼠施以胆总管结扎切断手术,制作瘀胆模型,饲养10d后取全血制备瘀胆血清。用悬滴培养ESC发育5~7d的拟胚体,将其离散细胞种植于不同的分化体系,分别进行自主分化、20μg/L肝细胞生长因子、5%瘀胆血清+20μg/L肝细胞生长因子诱导分化。主要观察指标:①倒置显微镜下动态观察细胞形态变化。②分化4周时进行白蛋白、甲胎蛋白、CK18/19、糖原及吲哚氰绿和荧光二乙酯染色。③采用相应试剂盒每3天检测细胞合成白蛋白、三酰甘油及尿素氮功能。结果:①ESC自主分化难以控制,分化为3个胚层的细胞。肝细胞生长因子促进ESC向内脏内胚层和中胚层(心肌)分化,但两者仅能表达低水平的肝细胞特异性功能。②引入瘀胆血清的肝细胞生长因子诱导体系中ESC能分化为较为形态均一的多角形细胞,其糖原、吲哚氰绿和荧光二乙酯染色均为阳性;白蛋白、三酰甘油和尿素氮合成能力显著高于自发分化和肝细胞生长因子诱导结果(P<0.05~0.01)。结论:采用瘀胆血清体外模拟病理性微环境可促进HGF诱导的ESC源性肝细胞表达高水平的肝特异性代谢功能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 肝细胞生长因子 瘀胆血清 肝细胞 功能
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A STUDY ON DETECTION OF SERUM FASTING TOTAL BILE ACID AND CHOLOYGLYCIN IN NEONATE FOR CHOLESTASIS 被引量:2
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作者 郭文 吴明昌 +2 位作者 裴学义 关德华 徐洛 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1996年第4期244-247,共4页
Enzyme-linked colorimetric analysis and adioimmunoassay were employed to detect serum fasting total bile acids(FBA) and choloyglycin (CG) respectively in cases of 32 neonatal hepatitis , 33 cases of neonatal unconjuga... Enzyme-linked colorimetric analysis and adioimmunoassay were employed to detect serum fasting total bile acids(FBA) and choloyglycin (CG) respectively in cases of 32 neonatal hepatitis , 33 cases of neonatal unconjugated hyperbilirubinemia and 34 cases of breast milk jaundice(BMJ). FBA and CG in acute period of neonatal hepatitis were obviously elevated and decreased gradually in convalescent and recovered period. The difference was significant for each stage as compared with controls. Acute FBA correlated strongly with the course. Both neonatal unconjugated hyperbilirubinemia and BMJ differed significantly from controls in FBA and CG. The results suggested that serum FBA and CG were helpful in Judging the course and state of neonatal hepatitis, and cholestasis might existed in neonatal unconjugated hyperbilirubinemia. 展开更多
关键词 NEONATE bile acid CHOLESTASIS
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