HMGB1在类青光眼引流阀植入术后瘢痕化中的作用机制

目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)在类青光眼引流阀植入术后瘢痕组织中的动态表达,揭示HMGB1在青光眼术后瘢痕化中的作用及其可能的作用机制。方法:将60只新西兰大白兔随机分为空白对照组(n=20)、模型组(n=20,结膜囊下硅胶植入)、模型给药组(n=20,硅胶植入联合5-氟尿嘧啶注射)。分别于术后4、8 wk取球结膜组织,采用HE染色和Masson染色检测结膜组织中成纤维细胞和胶原纤维增生及分布情况;免疫组织化学染色检测结膜组织中HMGB1、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布及变化情况;RT-PCR和Western blot检测结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白的表达。结果:HE染色和Masson染色结果显示,4、8 wk模型组较空白对照组结膜组织中炎症细胞、成纤维细胞及胶原纤维增生明显,而4、8 wk模型给药组结膜组织中成纤维细胞及胶原纤维增生相对于同时期模型组明显减少。免疫组织化学染色结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中可见HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA蛋白表达,呈棕褐色染色,8 wk模型组染色更深,而4、8 wk模型给药组较同时期模型组阳性染色程度下降。4、8 wk模型组结膜组织中HE染色成纤维细胞数与免疫组织化学染色HMGB1的表达水平均呈正相关(r=0.602、0.703,均P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著高于空白对照组(均P<0.05),4、8 wk模型给药组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著低于同时期模型组(均P<0.05)。模型组和模型给药组中HMGB1与TGF-β1、Smad3的mRNA表达水平具有正相关性(均P<0.05)。结论:类青光眼引流阀植入术后随时间延长HMGB1表达升高,HMGB1在青光眼术后具有致瘢痕形成的作用,并可能通过TGF-β/Smad信号通路参与瘢痕化的发生发展。

细胞因子与青光眼滤过手术后滤过通道瘢痕化的相关性研究

青光眼已成为全球首位不可逆致盲疾病,眼压是预防视力丧失唯一可控因素。约20%的患者在药物治疗下眼压控制效果不佳,需行滤过手术,但术后滤过通道瘢痕化会导致眼压再度升高。房水与滤过通道瘢痕化的机制紧密相关,房水中各种细胞因子含量的变化为我们了解青光眼滤过术后滤过通道瘢痕化提供了重要线索。故本文针对细胞因子与滤过手术预后的相关性进行综述和回顾。

利用药物缓释系统抑制青光眼滤过术后瘢痕化的实验研究进展

抗青光眼术后瘢痕化是青光眼滤过术后重要的并发症,也是术后眼压控制失败的重要原因。虽然用于抑制滤过泡瘢痕化的药物较多,但普遍作用时间较短。应用药物缓释技术有延长抑制青光眼滤过术后瘢痕化药物的作用时间、减少用药剂量和次数、降低药物毒副作用等优势,对保护患者的视功能具有重要意义。

青光安对抗青光眼术后滤过道瘢痕化中胶原纤维、α-SMA及FN的影响

目的:观察青光安4种有效组份对抗兔眼青光眼术后滤过道胶原纤维、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN)的影响。方法:将青光安4种有效组份与青光安中药混悬液应用于滤过手术后D组(有效组份1组)、E组(有效组份2组)、F组(有效组份3组)、G组(有效组份4组)、H组(青光安混悬液组),通过与A组(空白对照组)、B组(模型组)和C组(丝裂霉素C组)进行比较,观察青光安4种有效组份与青光安中药混悬液对青光眼术后滤过道瘢痕组织中胶原纤维、α-SMA及FN的影响。结果:C组、E组、F组、H组胶原纤维面积比值、α-SMA的表达、FN的表达与B组比较均有差异(P<0.05)。结论:青光安有效组份2、青光安有效组份3、丝裂霉素C以及青光安混悬液通过抑制胶原纤维、α-SMA及FN的表达,表现出明显的抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用。

青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路相关mRNA的影响

目的:观察青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路相关mRNA的影响,探讨青光安缓释剂对滤过道瘢痕化的效果及作用机制,并判断其安全性。方法:通过高通量中药筛选体系提取4种青光安有效组份,并制成缓释药膜。将48只实验用兔分为8组,每组6只。分别为:A:空白组;B:模型组;C:MMC对照组;D:有效组份1组;E:有效组份2组;F:有效组份3组;G:有效组份4组;H:安慰剂组。除A组外,其余各组兔眼行常规小梁切除+虹膜根部切除术;C组在术中联合应用MMC;D、E、F、G 4组分别在结膜下植入相对应的青光安缓释药膜;H组植入安慰剂膜片。术后各组进行眼部常规检查。用药4周后处死实验用兔,取术眼滤过道巩膜组织,进行HE染和Real-time PCR法检测,并进行统计学分析。结果:(1)术后C、E两组眼压回升缓慢,第4周时两组眼压低于其他各组(P<0.05)。(2)C、E组术后都能维持有效滤过泡,B组滤过泡在术后两周内基本都变为无功能滤过泡或消失,D、F、G、H组在术后第4周都有少量功能性滤过泡存在。(3)HE染色见C、E两组滤过道轮廓清晰,纤维细胞及炎症细胞少,其他各手术组滤过道轮廓消失,被大量纤维细胞和炎症细胞填充。(4)C组Smad3、Smad4的mRNA表达值明显低于其他各组(P<0.01);C组和E组CollagenⅠ的mRNA表达值明显低于其他各组(P<0.01)。结论:青光安有效组份2可能与TGF-β竞争性结合TGF-β受体,或者可能通过影响炎症因子的生成减少TGF-β的产生,使TGF-β/Smad细胞信号传导通路的信号传导减弱,抑制滤过道瘢痕形成。且通过局部给药其不良反应小,安全性优于MMC。

Avastin抑制兔眼小梁切除术后滤过泡瘢痕化的作用

目的:探讨Avastin抑制兔眼小梁切除术后滤过泡纤维瘢痕形成的作用。方法:兔20只40眼随机分为3个不同剂量Avastin实验组、丝裂霉素C(MMC)对照组及空白对照组。对兔眼行常规小梁切除术,Avastin实验组于术毕及术后3,7d术区结膜下分别注射0.5,1及2mg Avastin;MMC对照组术中筋膜囊、巩膜瓣下放置0.2g/LMMC棉片。术后裂隙灯下观察滤过泡形态及角膜、前房等情况;术后7,14d摘除眼球,常规HE染色观察组织形态,在高倍视野中,通过滤过泡腔面在结膜中形成的面积百分比及滤过泡形成区在结膜中面积百分比,评价不同剂量Avastin结膜下注射对滤过泡形成及纤维化的影响。结果:术后7d各组结膜纤维结缔组织中均可见明显的滤过泡形成。术后14d仅注射2mg Avastin实验组及MMC对照组的结膜组织中可见明显滤过泡;1mg Avastin实验组见少量面积微小的滤过泡;0.5mg Avastin实验组及空白对照组滤过泡均消失,纤维组织增生明显。术后7d各组高倍视野下滤过泡腔面在结膜中形成的面积百分比及滤过泡形成区在结膜中面积百分比无明显差异。术后14d,2mg及1mg Avastin实验组滤过泡腔面积在结膜中形成的面积百分比分别为1.0%,0.8%,MMC组为0.9%。2mg及1mgAvastin实验组滤过泡形成区在结膜中面积百分比分别为26.1%,2.9%,MMC组为25.8%。2mg及1mgAvastin实验组的滤过泡腔面及形成区面积与结膜面积的百分比均明显高于空白对照组,单项方差分析结果分别为F=270.10,P=0.00;F=49.99,P=0.00;2mg Avastin实验组的上述滤过泡面积百分比与MMC组无差异。结论:结膜下注射Avastin可有效帮助滤过术后滤过泡的形成与维持,缓解滤过泡的纤维增生。

青光安颗粒对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的抑制作用

目的:探讨青光安颗粒对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的抑制作用。方法:选取2016年4月至2018年9月湖南中医药大学第一附属医院收治的行滤过性手术治疗后滤过泡瘢痕化患者76例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组38例。2组均采用常规小梁切除滤过性手术,对照组术后给予血栓通胶囊,观察组术后给予青光安颗粒,2组均连续治疗2个月。比较2组治疗成功率、手术前后不同时间患眼最佳矫正视力(BCVA)及眼压,记录2组术后并发症发生情况。结果:2组患者术后7 d患眼术区均形成功能性滤过泡,观察组治疗成功率明显高于对照组(P <0. 05)。与术前比较,术后1、2个月2组患眼BCVA及滤过泡高度均明显提高/增加(P <0. 05),且观察组明显高于对照组(P <0. 05); 2组患眼眼压均明显降低(P <0. 05),且观察组明显低于对照组(P <0. 05)。2组总并发症发生率差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:青光眼滤过术后给予青光安颗粒可更明显地提高患眼BCVA,降低眼压,有效抑制滤过泡瘢痕化。

青光眼滤过性手术抗瘢痕化治疗的研究进展

青光眼滤过性手术(glaucoma filtration surgery,GFS)作为抗青光眼的主要术式在临床上得到了广泛应用,但术后滤过泡的瘢痕化是导致手术失败的主要原因。术中及术后使用抗代谢药物如5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和丝裂霉素C(mitomycin-C,MMC)虽然有一定效果,但其具有威胁视力的严重并发症。为进一步提高GFS的成功率,抗瘢痕化治疗成为近年来的研究热点。本文对近年来青光眼滤过性手术的抗瘢痕化药物及新型材料的研究进行了综述,为临床中寻找抗瘢痕化效率高、不良反应少、安全性好的药物或材料提供了新的思路和方法。

Ahmed青光眼阀植入治疗难治性青光眼术后盘周滤过泡瘢痕化的疗效分析

青光眼的主要特征为眼压升高和视神经受损，其中视神经受损是由眼压过高造成的，因此，青光眼治疗的当务之急就是降低眼压［1］。目前，常用的减压方法有药物治疗和手术治疗。青光眼常用小梁切除术进行降低眼压，手术成功率达到70％～90％［2］。但某些难治性青光眼的手术预后仍然较差，针对瘢痕化使用抗代谢药物的应用和导管植入引流术等手段的应用，给难治性青光眼患者带来了希望。本研究通过对 Ahmed 青光眼阀（Ahmed glaucoma valve ，AGV ）植入术治疗的青光眼患者中出现盘周滤过泡瘢痕化的病例进行分析，以期探索影响AGV植入术成功的相关因素，现报告如下。

NFκ-B抑制剂PDTC抑制鼠眼滤过术后瘢痕化的研究

目的探讨NFκ-B抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)在大鼠滤过性手术中抗瘢痕化的作用。方法将24只SD大鼠随机分为阴性对照组、PDTC组、丝裂霉素C(MMC)组3组,双眼均行手术。术后每日观察滤过泡形态及并发症,记录滤过泡存活时间。另取9只SD大鼠,每组3只,单眼手术,7 d后处死,观察滤过泡组织病理学改变。结果滤过泡存活时间,PDTC组为(13.16±2.588)d,MMC组为(13.75±2.352)d,阴性对照组为(10.06±1.806)d,前2组与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。术后角膜混浊,MMC组3眼,PDTC组1眼。病理切片显示术后7 d,对照组见较多纤维母细胞及胶原组织。结论PDTC抗瘢痕作用与MMC类似,无明显不良反应,有望成为青光眼术中抗瘢痕增生的辅助用药。

抗青光眼滤过手术后瘢痕化的研究进展

青光眼滤过手术是目前药物及激光治疗以外重要治疗方式,其目的在于形成功能性滤过通道,从而充分引流房水。但青光眼术后巩膜纤维化和结膜下滤泡瘢痕化是导致手术失败的重要原因。现从青光眼滤过手术后抗代谢药物、植入物应用、靶向机制、新型生物分子材料应用及表观遗传学研究5个方面来综合分析青光眼滤过手术后抗瘢痕化的进展现状。

结膜下注射丝裂霉素C的抗瘢痕化效果和安全性研究

目的 研究结膜下注射丝裂霉素C（mitomycin C,MMC）对兔眼瘢痕化模型的抗瘢痕化效果及对兔眼局部组织的毒副作用,探讨其作为青光眼滤过性手术后抗瘢痕形成辅助用药的可行性及有效性。方法 取18只健康成年新西兰大白兔,随机分为3组,分别为A组、B组和C组,每组12眼,建立实验性瘢痕化模型。A组术后3 d结膜下注射0.4 g·L-1的MMC 0.3 m L,B组术中巩膜瓣下放置浸泡0.4 g·L-1MMC的棉片5 min,C组术后3 d结膜下注射生理盐水（normal saline,NS）0.3 m L。应用结膜印迹细胞学检查观察结膜损伤情况。分别于术后7 d、14 d、28 d分批处死实验兔,摘出眼球,应用免疫组织化学染色检查观察成纤维细胞增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen,PCNA）的表达情况,应用光镜观察手术部位的病理改变。结果术后3组均未出现结膜伤口渗漏,A组、B组角膜上皮点状缺损于术后1周消失,C组无角膜上皮点状缺损。结膜印迹细胞学检查显示A组和B组结膜印迹细胞分级均为2~3级,C组为2级。术后7 d、14 d、28 d光镜下,C组手术区球结膜下炎性细胞、纤维细胞、新生毛细血管增多,纤维组织增生较A组和B组显著。免疫组织化学染色结果显示,术后7 d,A组、B组、C组每高倍视野PCNA阳性细胞计数分别为（12.83±2.08）个、（14.37±3.76）个、（28.12±6.74）个;术后14 d,3组PCNA阳性细胞计数分别为（13.81±1.53）个、（16.28±3.78）个、（25.67±4.45）个;术后28 d,3组PCNA阳性细胞计数分别为（11.96±1.45）个、（13.07±2.04）个、（17.69±3.11）个;相应时间点,A组、B组PCNA阳性细胞计数均较C组少（均为P=0.000）,但A组与B组间差异均无统计学意义（均为P〉0.05）。结论 结膜下注射MMC能有效抑制手术后术区的瘢痕化,与术中常规应用MMC相比,其对结膜的损伤程度无明显差异,对其进一步研究有望为青光眼滤过手术后抗瘢痕化提供一种使用方便、安全、有效的局部用药方式。

滤过道瘢痕化相关信号传导通路及其干扰靶位

青光眼滤过性手术后滤过道的瘢痕化是手术失败的主要原因,它以Tenon’s囊成纤维细胞转化为肌成纤维细胞持续存在并产生大量的细胞外基质为主要特征。多种细胞因子通过TGF-β/Smad,Rho-ROCK,MAPK以及NF-κB等信号通路调控瘢痕化的进程,利用RNA干扰技术和其它方法调节信号传导途径中的关键分子,如Smad,ROCK,P38MAPK等可以减轻或预防滤过道瘢痕化,提高手术成功率。本文综述影响滤过道瘢痕化的主要信号传导通路以及针对不同通路进行干预的化学药物和基因治疗的研究进展。

青光眼滤过手术抗瘢痕化药物和治疗方法的研究进展

青光眼是一种致盲率高、治疗较困难的眼病,滤过性手术仍是目前药物无法控制的青光眼的主要治疗手段,但术后2年内的失败率达15%-25%。目前国内外研究了较多的抗瘢痕形成的药物及方法,笔者就近几年抗青光眼术后瘢痕形成的药物和方法的研究进展综述如下。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白对青光眼滤过泡瘢痕化影响的研究进展

滤过泡瘢痕化是导致青光眼滤过术失败的主要原因。目前,临床上多应用结膜下注射丝裂霉素及5-氟尿嘧啶等抗代谢药物以减少瘢痕化的发生,一定程度上提高了手术成功率,但其伴随的细胞毒性等不良反应不可忽视。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)作为一种基质细胞蛋白在眼内广泛分布,在创伤修复和组织重塑的过程中发挥重要作用。结膜下瘢痕化的小鼠模型中可观察到SPARC表达明显升高。研究表明SPARC可通过多种途径参与并调控滤过泡瘢痕化的形成,有望成为抗瘢痕化治疗的特异性新靶点。

抗瘢痕化治疗在青光眼滤过手术中的研究进展

青光眼是由于眼压升高导致视网膜神经节细胞进行性改变为特征的视神经病变,是全球顽固性失明的主要原因。目前对于晚期青光眼手术治疗是必要的,其中滤过手术是青光眼手术治疗中应用最广泛的一种,可以有效降低眼压,改善病情,但术后随着伤口愈合的进展,结膜下瘢痕和巩膜瓣纤维化导致的滤过功能衰竭往往会导致手术失败。所以研究瘢痕形成的过程、机制以及术中使用安全性高、毒性低的抗瘢痕药物对于提高手术成功率、减少并发症具有重要的意义。本文现对抗瘢痕化治疗的研究进展进行综述。