马立克氏病血清I型致瘤株病毒感染的早期检测

马立克氏病 (MD)是养禽业最重要的疫病之一 ,一直缺少有效的早期诊断方法。根据血清I型马立克氏病毒(MDV1)meq基因的核酸序列设计了一对寡苷酸核引物 ,分别对MDV1致瘤株 (京 - 1株 )、非致瘤株 (MD11/ 75C株、CV1988株 )、MDV2 (SB 1株 )、HVT(Fc 12 6株 )的核酸进行扩增。结果表明 :京 - 1株扩增到约 1 15kb核酸片段 ,MD11/ 75C株和CVI988株扩增到约 1 0kb核酸片段 ,而SB 1株、Fc 12 6株没得到任何扩增产物。PCR产物Dotblot结果显示 ,京 - 1株、MD11/ 75C株和CVI988株的扩增产物都与Digoxigenin标记的meq基因探针杂交 ,说明都是特异性的扩增产物。对MSB1细胞DNA及MDV感染鸡的血液及肝、肾肿瘤等DNA扩增都得到 1 15kb条带。将京 - 1株和CVI988株感染的细胞DNA混合再扩增 ,同时得到 1 15kb和 1 0kb的核酸条带 ,所以根据扩增产物大小可以区别致瘤株京 - 1株及非致瘤株CV1988株 ,这表示可从CVI988株病毒免疫鸡体内检测到MDV强毒 ,适于早期确诊强毒感染。

黄芩茎叶总黄酮对小鼠肉瘤S_(180)瘤株体内增殖的抑制作用

目的:初步分析黄芩茎叶总黄酮的抗肿瘤药效。方法:采用小鼠肉瘤S180模型,观察黄芩茎叶总黄酮腹腔注射给药对移植瘤重量的影响。结果:2次重复实验,3个剂量的黄芩茎叶总黄酮皆可抑制移植肉瘤S180瘤株的体内增殖,量效关系较显著,其中,100～200mg/kg黄芩茎叶总黄酮的抑瘤率>30%,与对照组比较差异有高度显著性和显著性(P<0.01,P<0.05),但其活性低于50mg/kg环磷酰胺(平均抑瘤率达90.50%)。结论:黄芩茎叶总黄酮具有高效低毒的抗肿瘤活性,有可能开发成为新的抗肿瘤药物。

李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响

目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找最佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:李氏5号方在0.125～0.75 g*L-1浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率.与正常对照组相比,加药组SY5Y细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT代谢率升高、LDH漏出率降低. 结论:李氏5号方具有营养神经细胞、促进神经细胞存活的作用.

经脾与经肝种植VX2瘤株建立兔肝转移瘤模型的影像学比较

目的通过经肝及经脾种植VX2瘤株建立兔肝转移瘤模型,分别观察模型建立情况、CT扫描肝内病变数目及强化情况、CT灌注扫描肝内病变与周围正常肝组织灌注参数(BF值、BV值)差值的比较以及数字减影血管造影(DSA)肝内病变数目及染色情况,探讨更为合理实用的方法和更接近人肝转移瘤模型的建立方法。方法将50只大白兔随机分为两组,每组25只。A组暴露肝脏,注入VX2细胞悬液1 ml;B组暴露脾脏,注入VX2细胞悬液1 ml。术后第14天行CT灌注扫描,第15天行DSA。分别观察CT扫描表现(肝内病变数目及强化特点)、血管造影表现(肝内病变数目及染色情况)及CT灌注扫描参数[肝内病变处与周围正常肝组织血流量(BF)和血容量(BV)差值]变化。结果 A组25只、B组21只动物成功建模。两组均有20只动物完成CT灌注扫描及DSA,A组中16只为单个病灶,4只为2个以上病灶,19只可见强化,1只未见强化;B组3只为单个病灶,17只为2个以上病灶,19只可见强化,1只未见强化。A组肝内病变部位与周围正常肝组织BF值和BV值差值分别为(264.58±59.132)ml/min和(19.541±4.030 0)ml/100 g,B组分别为(199.60±32.237)ml/min和(15.869±2.891 3)ml/100 g,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。DSA显示,A组中13只为单个病灶,6只为2个以上病灶,1只未见明显病灶,19只可见肿瘤染色,1只未见明显肿瘤染色;B组中1只为单个病灶,19只为2个以上病灶,全部可见肿瘤染色。结论经肝种植VX2细胞悬液建模的成功率为100%,高于经脾种植VX2细胞悬液(84%)法,后者肝内病变多为多个病灶,大部分有强化,多为环形染色,更接近人肝转移瘤的影像表现。

救脑益智胶囊水提物对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响

目的 :通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 ,探讨此药促进神经细胞生长的可能机理。方法 :以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型 ,分为正常对照组和加药组。收集对照组及加药组细胞裂解物 ,取上清用Lowry法进行蛋白定量 ,将总蛋白量相等的样品进行免疫沉淀Westernblot分析。 结果 :与正常对照组比较 ,加药组SY5Y细胞蛋白激酶B(proteinkinaseB ,Akt/PKB) ,cAMP反应元件结合蛋白 (cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)、磷酸化的CREB (phosphorylatedCREB ,P CREB)表达增加 ,细胞色素C(cytochromeC ,cytC1)表达减少。结论 :救脑益智胶囊的生药水提取液能促进SY5Y神经母细胞存活信号通路中Akt/PKB ,P CREB的表达 。

体外瘤株嗜银蛋白染色法与MTT法化疗敏感性的对比研究

应用SPC－A1等三株人体肿瘤细胞株，以MTT法及核仁组成区嗜银蛋白染色（AgNOR）法，对长春新碱等六种化疗药物的敏感性进行了研究。结果发现两种方法有良好的符合率，且后一种方法经济、简便，可排除非肿瘤细胞的干扰，弥补了前一方法之不足。

叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用

目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800μg/L)组,进行细胞形态观察、细胞计数分析以及测定各组细胞的噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率。结果与对照组相比,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组的细胞计数和MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率降低(P<0.05),在细胞形态上,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组明显好于对照组,表现为细胞胞体饱满、存活细胞数目增多、贴壁良好、突起延长。结论叶酸、维生素B12能促进神经细胞生长,降低神经细胞死亡率,从而达到保护神经元的作用。

人消化道癌裸鼠移植瘤株及体外细胞系的建立

目的 利用裸鼠建立人消化道癌的移植瘤株。利用荷瘤鼠皮下移植瘤组织建立人消化道癌的细胞系。方法 将手术切除的新鲜肿瘤组织剪碎后植入BALB/C裸鼠皮下成瘤。将荷瘤鼠皮下的肿瘤组织取出剪碎后移入培养瓶中,用含15～20％胎牛血清的1640培养基进行培养,建立体外细胞系。结果 建成消化道移植瘤株6株,其中直肠癌2株,结肠癌1株,直肠癌肝转移灶1株,胃癌1株,肝细胞癌1株。建成二例细胞系,分别为直肠癌细胞系(HRC-00)和肝细胞癌细胞系(HHC98)。结论 建成的消化道癌移植瘤株和细胞系均具有人原发癌的结构特点及生物学行为,可作为人消化道癌的体内外研究对象。

哥纳香醇甲类似物对KB瘤株的抑制作用的构效关系研究

目的研究哥纳香醇甲的抗肿瘤活性构效关系。方法 经MTT法筛选了55个哥纳香醇甲类似物及中间体对KB瘤株的抑制作用。研究了以α-D-葡庚糖酸-δ-内酯为原料经9-10步合成的55个哥纳香醇甲类似物的抗KB瘤株活性与结构的关系。结果化合物9、11、21、25、34、38、44、49对KB瘤株的抑制作用强于哥纳香醇甲。结论哥纳香醇甲类似物8R构型、不饱和内酯及8位芳香酯为其活性的关键构型和基团。5,7-位的环状结构有利于增强活性。

SO-Rb50人视网膜母细胞瘤株抗癌基因及癌基因的检测

以SO-Rb50第327代细胞,提取其基因组DNA,以正常人血细胞为对照,检测其Rb抗癌基因和c-myc癌基因。结果表明,该细胞株Rb基因完全缺失,c-myc原癌基因扩增3倍。此为以该细胞株在体外进一步研究肿瘤生长调控和逆转提供依据。

人喉癌裸鼠移植瘤株的建立及初步鉴定

我们自1990年起先后将14例人喉鳞癌细胞移植于裸鼠,1例获成功并传代,现已传至15代,将传代肿瘤组织冻存,1月后复苏,其成功率达100%。建立了人喉鳞癌裸鼠移植瘤株,命名为HLC14,现报道如下。1 建株过程:标本来源于1例声门上型中等度分化喉鳞癌手术切除的新鲜组织,接种于BALB/C裸小鼠皮下。

铜绿假单胞菌注射液对肝癌瘤株细胞体外杀伤作用的研究

目的:研究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA vaccine PA)对肝癌瘤株细胞的体外杀伤作用,并观察其对肝癌瘤株细胞的体外增殖影响及杀伤作用的剂量依赖性。方法:采用MTT比色法观察不同剂量PA对肝癌瘤株细胞生长抑制作用和杀伤作用的影响;扫描电镜观察PA与肝癌瘤株细胞的结合过程及肝癌瘤株细胞的凋亡过程;双染色流式细胞术观察不同剂量铜绿假单胞菌注射液对肝癌瘤株细胞的凋亡影响。结果:PA能结合肝癌瘤株并进入细胞内部,诱导细胞凋亡,从而抑制肝癌瘤株细胞增殖和生长,产生杀伤作用,且杀伤作用随着用药浓度增加而加强。结论:铜绿假单胞菌注射液有直接杀伤肝癌瘤株细胞的作用,且这种作用存在剂量依赖性。

不同转移力瘤株对宿主NK细胞活性影响的动态观察

本文对两株荷瘤６１５小鼠的自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴细胞分裂原反应进行了动态观察，结果显示，同源但不同淋巴道转移力的两株瘤细胞免疫原性具有一定差异，且与其浸润。

小鼠胰腺泡细胞癌瘤株长期保种传代探讨

目的 以昆明种小鼠胰腺腺泡细胞癌瘤株作为动物模型 ,对小鼠胰腺腺泡细胞癌做长期保种传代。方法 经细胞瘤株复苏后移植接种于小鼠腋部皮下 ,并对冻存的瘤细胞前后进行了生物学特性的比较研究。结果 延续保种传代达到 2 2 0代 ,癌细胞的生物学特殊性与原代细胞比较没有丢失和改变。结论 本文方法证明该瘤株细胞可移植性强。

用免疫缺陷型小鼠研究L615瘤株的继承性免疫和瘤苗免疫的原理

利用不同免疫缺陷小鼠研究转输正常脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的部分机理和瘤苗自动免疫的免疫细胞基础。结果表明:转输脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的有效脾细胞成分是T和/或NK细胞,似只有在受体鼠体内有T细胞的条件下才可使其产生免疫预防效应。还表明:MMC-L_(615)瘤苗诱导受体鼠产生的自动免疫保护效应,是通过体内T细胞介导实现的,T细胞可能是效应细胞。

不同单位小鼠肝癌H_(22)瘤株蛋白质组成比较研究

从三个单位引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 ,昆明小鼠腹腔传代 ,制备瘤细胞 ,用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)和免疫组化法 ,比较研究小鼠肝癌H2 2 瘤株细胞蛋白质表达的异同。结果发现三单位H2 2 瘤株细胞的电泳条带数和染色强度不同 ,其中有五个条带染色强度差异明显 ,提示相应蛋白质含量有明显不同 ;免疫组化染色测定H2 2 瘤株细胞PDGF -A、TrkA、Gai、CDk2、NFκBp6 5蛋白表达 ,其中CDK2阳性率两两单位间无显著差异 ,Gai阳性率两两单位间均有差异显著 (p <0 .0 1) ,PDGF -A、TrkA、NFκBp6 5阳性率反应不一。可见三单位H2 2

小鼠肝癌H_(22)克隆细胞株H2D8与其原瘤株武汉H_(22)的基本特性比较研究

用细胞克隆的方法获得武汉大学典型培养物保藏中心保存的小鼠肝癌H2 2 瘤株 (武汉H2 2 )的克隆细胞株H2D8。比较武汉H2 2 及H2D8对血清的依赖性、致瘤性、病理特征和对环磷酰胺 (CTX)的敏感性。结果发现H2D8细胞株对血清的依赖性 ,和对小鼠致瘤性及肿瘤病理学特性与武汉H2 2 细胞无明显差异 ;H2D8细胞对CTX治疗的敏感性更高。说明H2D8克隆株在体外培养、致瘤性和病理特征方面能保持原瘤株的细胞特性 ;

甘肃猫儿眼提取物对S_(180)瘤株毒性作用

给予S180荷瘤小鼠不同剂量的甘肃猫儿眼提取物后,对瘤体、胸腺和脾脏重量以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响进行测定分析。结果为,给予甘肃猫儿眼提取物20.0g/kg体质量/d,po,10d后测定,甘肃猫儿眼提取物对S180生长抑制率为42%;对小鼠碳粒廓清指数、免疫器官的重量、血清溶血素值增高等均有促进作用,组织病理学观察,给药组S180瘤体均见坏死灶,坏死面积与给药剂量呈正相关。提示,甘肃猫儿眼提取物对S180细胞增殖具有明显的抑制作用,其作用机制与提高荷瘤小鼠免疫功能有关.

裸小鼠可移植性人肺癌瘤株的建立及其生长特性和微细结构的观察(简报)

本实验是用人肺腺癌细胞系(LTEP-a-2)在NiH-nu/nu裸小鼠背部皮下接种,成功地建立了一株可移植性瘤株模型。以1×10~6和1×10~7瘤细胞悬液接种于动物皮下,先后2次共接种16只裸小鼠,结果有11只动物发生肿瘤,瘤发生率为68.8％。以生长良好的肿瘤进行传代,各代均利用其上一代皮下生长的实体瘤的瘤小块或瘤细胞悬液进行移植,历时2年共传15代。实验共用62只裸小鼠,肿瘤总发生率为(54/62)87.1％。第1代肿瘤的潜伏期较长(26～117天);经传代后潜伏期逐渐缩短,第5代以后趋于稳定。