miR-21抑制剂对多发性骨髓瘤细胞生长的影响

多发性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）是浆细胞异常增生的B细胞恶性克隆性疾病，以骨髓中异常浆细胞的过度增生、骨损害及免疫缺陷为特征，约占所有恶性血液病的10％。尽管近几年基于信号通路蛋白抑制剂的靶向药物治疗取得了明显进步，但其五年相关存活率仍然较低，仅为35％左右。因此，研究其发病机制对MM诊断、治疗、预后判断至关重要。

SLC22A18基因表达对胶质瘤细胞生长的抑制作用

我们利用基因转染技术，观察SLC22A18（solute carrier family 22，member 18）基因对胶质瘤U251细胞增殖的影响，探讨SLC22A18对胶质瘤的治疗价值。

血管内皮生长因子-siRNA对恶性黑素瘤细胞生长的抑制作用

目的探讨血管内皮生长因子siRNA对恶性黑素瘤细胞株A375增殖和凋亡的影响。方法构建针对血管内皮生长因子的siRNA真核表达载体pU-VEGF-siRNA将其表达载体经电穿孔转染A375细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫酶联吸附实验(ELISA)方法检测转染后的A375细胞VEGF的mRNA和蛋白表达,应用细胞计数比较转染组和对照组A375细胞增殖能力,将含转染组和对照组A375细胞的上清液分别培养人静脉内皮细胞(ECV-304),观察其生长情况,并用流式细胞仪观察转染pU-VEGF-siRNA载体对A375细胞凋亡的影响。结果转染pU-VEGF-siRNA载体后,A375细胞的VEGFmRNA和蛋白表达均较对照组明显下降,并且其生长缓慢,其细胞周期出现亚二倍凋亡峰。用转染pU-VEGF-siRNA的A375细胞上清液培养的ECV-304细胞增殖力较对照组下降。结论通过RNA干扰技术阻断VEGF的表达,可抑制A375和ECV-304细胞增殖,诱导A375细胞凋亡。

p53联合伽玛刀治疗对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用

有研究表明，转染野生型p53基因可以提高恶性胶质瘤的放射治疗敏感性，p53联合伽玛刀（单次大剂量）治疗胶质瘤的研究报道尚少，本实验对此进行了研究。 一、材料和方法 1．材料：C6鼠脑胶质瘤细胞系（经证实无p53突变）；293包装细胞系；野生型p53重组腺病毒载体（Ad-053）及空载腺病毒（Ad-βgal）。

慢病毒介导的shRNA沉默PTTG基因抑制人PRL型垂体腺瘤细胞生长的体外实验研究的护理方式

大型生长激素（ PRL）型垂体腺瘤是一种较为常见的激素分泌性垂体瘤［1］，在此类型中所占的比重约为35％～45％［2］，PRL垂体腺瘤种类中的侵袭性腺瘤具有全切率低、复发率高的特点［3］，成为临床治疗的难点。但是经过医疗科学人员的不懈努力，终于研制出了对抗PRL垂体腺瘤的方式，但是在目前医疗技术水平条件的制约下，手术、放疗、药物等治疗措施仍很难将其彻底根治。经过体外实验研究表明，垂体肿瘤细胞转化基因（ PTTG）成为了垂体腺瘤靶向治疗的重要基因之一，近年来成为垂体腺瘤基础研究的热点。

鼻咽癌畸胎瘤细胞源性生长因子表达及siRNA对HNE-1细胞株增殖的抑制

目的探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)在人鼻咽癌中的表达,研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对鼻咽癌HNE-1细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学的方法检测34例鼻咽癌、20例鼻咽慢性炎症组织中PCDGF蛋白的表达情况。根据PCDGF基因设计合成2条siRNA,利用LipofectamineTM2000转染鼻咽癌HNE-1细胞。通过PT-PCR、Western blot、荧光免疫细胞化学法检测转染后细胞PCDGF mRNA和蛋白表达,采用MTT检测转染后细胞的生长增殖情况,FCM法检测细胞周期分布。结果 34例鼻咽癌组织中PCDGF阳性表达率为85.3%(29/34),20例鼻咽部慢性炎症组织中阳性率为15.0%(3/20),2组间差异有统计学意义(P<0.01)。2条重组质粒均能特异性的抑制PCDGF mRNA和蛋白的表达,其中siRNA-1的沉默效率最高。转染48 h后,HNE-1细胞中PCDGF mRNA和蛋白表达水平分别下调64.7%和69.8%,细胞增殖抑制率为(37.07±12.4)%,siRNA-1组G0/G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少(P<0.05),细胞周期被阻滞于G1期。结论特异性siRNA能够有效沉默PCDGF基因表达,并显著抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖。

畸胎瘤细胞源性生长因子与肿瘤关系的研究进展

0引言PCDGF属于GRN基因家族,又称颗粒素-上皮素前体（granulin-epithelin precurs or,GEP orprogranulin）,颗粒蛋白（acrogranin）。它可与胰岛素样生长因子受体（IGFR）结合促进肿瘤的浸润和转移,更值得注意的是当部分肿瘤细胞在缺乏IGFR时,如果存在PCDGF、

白藜芦醇抑制胆囊癌细胞生长与诱导细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)对胆囊癌细胞(GBC)和正常成纤维细胞(3T3)体外增殖的影响,进而观察Res对GBC和3T3细胞凋亡的影响。方法MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期,检测细胞凋亡;SABC法检测细胞bcl2、cmyc、p53蛋白表达。结果Res呈浓度依赖性抑制GBC细胞的生长与增殖(P<0.01),抑制率最高可达54%。Res能明显诱导GBC细胞凋亡,凋亡率最高为30.52%;处理组较对照组G1期细胞由34.88%上升至55.47±3.95%,S期细胞减少8.41%～17.54%,呈明显的G0/G1期阻滞现象。GBC细胞的bcl2、cmyc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强。结论Res能通过诱导GBC细胞凋亡而抑制其生长与增殖,但对3T3细胞无此作用。

畸胎瘤细胞衍生生长因子在肺癌免疫中的作用和意义

畸胎瘤细胞衍生生长因子(PCDGF)是生长调节因子家族中的成员之一,可通过与其受体结合促进肿瘤的发生、发展,特别是在肺癌中起到了重要的作用。PCDGF参与肺癌的侵袭、转移以及血管生成,在肿瘤微环境中表达异常。分析反义转染PCDGF机制,用抗体中和PCDGF可为肺癌免疫治疗提供新思路。

蛇毒复合酶对人胃癌细胞的抑瘤研究

目的 观察蛇毒复合酶对人胃癌细胞 SGC-790 1的抑瘤作用及机理。 方法 采用体外试验、流式细胞术和细胞形态学检查方法 ,观察人胃癌细胞的生长抑制率 ,以及细胞周期和细胞形态的变化。 结果 蛇毒复合酶对人胃癌细胞有明显的抑瘤作用 ,2 4 h抑瘤率达 6 7.5 % ,接近 5 -Fu阳性对照组 ,并且具有明显的时效和量效关系。细胞镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢、细胞坏死。流式细胞术检测蛇毒复合酶对 S期细胞有明显杀伤作用 ,同时阻滞 G0 / G1期细胞进入 S期。 结论 蛇毒复合酶对人胃癌细胞具有一定体外抑瘤作用 ,其作用机理与直接破坏细胞胞膜和干扰细胞增殖周期有关。

肺癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子、VEGF和TK1水平及临床意义

目的探讨血清畸胎瘤细胞衍生生长因子(PCDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)及细胞质胸苷激酶1(TK1)与肺癌临床病理参数的相关性,判断其在肺癌联合诊断中的价值。方法用ELISA法检测123例肺癌患者、60例肺良性疾病患者和61例体检健康者血清PCDGF、VEGF的含量;酶免疫点印迹化学发光法检测标本中TK1的含量。结果肺癌组血清PCDGF、VEGF、TK1含量分别为18.27(6.24,58.86)ng/mL、1072.73(272.42,2 686.46)ng/mL和1.59(0.21,8.21)pmol/L,均显著高于肺良性疾病组及健康对照组(Z分别为81.349、85.769和18.818,P均<0.05)。血清PCDGF含量与肿瘤分期、淋巴结转移均有统计学意义(Z分别为8.063、2.488,P均<0.05)。VEGF含量对区分不同组织学类型肺癌具有统计学意义(Z=6.634,P<0.05)。经直线相关性分析表明,血清PCDGF与VEGF含量间无相关性(r=0.017,P=0.786)。PCDGF诊断肺癌的敏感性为83.7%,三项联合检测的敏感性最高为95.9%,TK1的特异性最高为90.7%,而三项指标的准确性均较低。结论PCDGF、VEGF、TK1含量在肺癌患者血清中显著增高。PCDGF与肺癌分期、淋巴结转移相关,有望作为肺癌诊断及恶性程度评价的潜在血清标志物。

骨肉瘤中抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白的表达及相关性研究

目的检测抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白在骨肉瘤中的表达并探讨其相关性。方法采用免疫组化SP法检测人骨肉瘤组织中PTEN、Rb、p53蛋白的表达情况。结果60例骨肉瘤组织中,PTEN的失表达率为21.7%(13/60),在血管扩张型及复发型骨肉瘤中,PTEN失表达有增高趋势。Rb的失表达率为60%(36/60)。p53阳性率为23.3%(14/60)。PTEN与Rb、p53之间比较,P>0.05,缺乏相关性。结论PTEN的失表达可能为骨肉瘤细胞生长活跃和复发的机制之一。PTEN与Rb、p53之间可能通过不同的途径参与骨肉瘤细胞生长的调控。

PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌、基底细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PCcell-derived growth factor,PCDGF)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测42例皮肤鳞状细胞癌、30例基底细胞癌和20例正常皮肤组织中PCDGF和VEGF蛋白的表达情况。结果:与正常皮肤相比,PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中表达明显升高(P<0.01),皮肤鳞状细胞癌中PCDGF和VEGF蛋白表达强度又明显高于基底细胞癌(P<0.01)。PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达水平与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与肿瘤的大小、病理分级无关(P>0.05)。PCDGF和VEGF蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达呈正相关(rs=0.765,P<0.01)。结论:PCDGF蛋白和VEGF蛋白的异常表达在表皮恶性肿瘤的发生和发展中发挥重要作用,并与皮肤鳞状细胞癌的侵袭性生长潜能密切相关。

舌鳞状细胞癌中PCDGF和MMP-9蛋白的表达及临床意义

目的：探讨畸胎瘤细胞源性生长因子（PC cell-derived growth factor,PCDGF）和基质金属蛋白酶-9（Matrix metallopro-teinase-9,MMP-9）在舌鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测45例舌鳞状细胞癌和12例正常舌组织中PCDGF和MMP-9蛋白的表达情况。结果：与正常舌组织相比,PCDGF和MMP-9蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达明显升高（P〈0.05）。PCDGF和MMP-9蛋白的表达随舌鳞状细胞癌的浸润深度增加而增加（P〈0.05）,在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组（P〈0.05）,在临床Ⅲ~Ⅳ期的表达高于临床Ⅰ~Ⅱ的表达（P〈0.05）。PCDGF和MMP-9蛋白的表达与患者年龄、性别及组织学分级无相关性（P〉0.05）。PCDGF和MMP-9蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达呈正相关r（s=0.543,P〈0.01）。结论：PCDGF和MMP-9蛋白在舌鳞状细胞癌的发展、浸润和转移中可能起重要作用,且二者之间可能存在协同作用。

卵巢癌细胞PCDGF的表达与意义

目的 研究人卵巢癌细胞PCDGF的表达 ,探讨其与卵巢癌恶性表型的关系。方法 应用半定量RT PCR和Westernblot分别检测 3株卵巢癌细胞中PCDGFmRNA和蛋白表达水平。单层细胞增殖实验测定 3株卵巢癌细胞的增殖能力 ;Boy den小室体外侵袭实验测定不同细胞株的侵袭能力。结果 3株卵巢癌细胞PCDGF转录和翻译水平呈同步变化 (P <0 .0 5 ) ,均为SW 6 2 6最高 ,A2 780稍低 ,Skov 3最低。而其增殖、侵袭能力亦为SW 6 2 6最强 ,A2 780次之 ,Skov 3最弱。结论 3株卵巢癌细胞PCDGFmRNA和蛋白表达水平与其增殖、侵袭能力呈正相关 (前者r1=0 .97,r2 =0 .89,后者r1=0 .85 ,r2 =0 .84 ) ,提示PCDGF在卵巢癌发生演进中可能作为独立因素起多种作用 ,有望成为治疗的新靶点。

RNAi沉默PCDGF基因对喉鳞癌Hep-2细胞生物学特性的影响

目的研究RNAi沉默畸胎瘤细胞源性生长因子(PCDGF)表达对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法 RT-PCR检测喉鳞癌组织中PCDGF的mRNA表达水平;Hep-2细胞分为空白对照组、阴性对照组和PCDGF-siRNA组,Western blot检测转染效果及Bcl-2、Bax、E-cadherin和MUC1蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果喉鳞癌组织中的PCDGF mRNA表达水平显著高于声带息肉组织(t=6.88,P=0.005)。PCDGF在喉鳞癌组织中高表达。PCDGF-siRNA组喉鳞癌Hep-2细胞中PCDGF、Bcl-2、MUCI蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.05),Bax、E-cadherin蛋白表达显著高于空白对照组(P<0.05),细胞增殖率显著低于空白对照组(P<0.05),细胞侵袭数显著低与空白对照组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于空白对照组(P<0.05)。结论抑制PCDGF的表达能够抑制喉鳞癌Hep-2细胞的增殖和侵袭能力,诱导细胞发生凋亡。

双色荧光示踪胶质瘤细胞定植脉络膜丛的生长特征

我们曾在双色荧光示踪胶质瘤脑尾状核移植的裸小鼠模型中偶尔见到为数极少的脉络膜丛上有胶质瘤细胞定植，但难于分析脉络膜丛对胶质瘤细胞生长所起的作用。我们将胶质瘤细胞经脑室注入直接定植于脉络膜丛，制备类似脉络膜乳头状癌的模型，并分析其生长特征。

畸胎瘤细胞源性生长因子反义核酸载体对高度恶性人卵巢癌细胞增殖和侵袭的抑制效应及相关机制

目的观察畸胎瘤细胞源性生长因子（PCDGF）反义核酸载体对高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626和A2780增殖和侵袭的抑制效应，并初步探讨其相关机制。方法采用二苯基溴化四氮唑蓝（Mrrr）法和Boyden小室体外侵袭实验，检测PCDGF反义RNA真核表达载体对Sw626和A2780细胞增殖和侵袭能力的影响。采用Westernblot技术，检测转染PCDGF反义RNA真核表达载体前后Sw626细胞cyclin D1和CDK4蛋白表达的变化。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和明胶酶谱法，分析PCDGF反义RNA真核表达载体对Sw626细胞基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达和活性的影响。结果与空白对照组相比，PCDGF反义核酸载体转染组Sw626和A2780细胞的增殖抑制率分别为72．9％和70．9％，侵袭能力分别被抑制了62．9％和59．0％。转染组Sw626细胞cyclin D1和CDK4蛋白的表达水平分别为0．38±0．08和0．37±0．13，明湿低于空白对照组（0．84±0．11和0．64±0．11，P〈0．01）。与空白对照组（0．89±0．09）相比，转染组Sw626细胞MMP-2mRNA的表达水平（0．66±0．11）虽未见降低（P〉0．05），但MMP-2酶原的活性被明显抑制。结论PCDGF反义核酸可显著抑制高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626和A2780的增殖和侵袭能力，并逆转其部分恶性表型，这可能与其能下调cyclin D1和CDK4蛋白的表达并抑制MMP-2酶原的活性有关；PCDGF可以作为卵巢癌治疗的新靶点。

畸胎瘤细胞源性生长因子和血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨食管鳞癌(ESCC)中畸胎瘤细胞源性生长因子(PCDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与肿瘤临床病理参数之间的关系,明确PCDGF和VEGF在血管生成中的作用。方法以免疫组化方法检测郑州大学第一附属医院2005年7月至2006年5月收治的50例食管鳞癌患者手术切除标本PCDGF与VEGF的表达,并以CD105抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞,计算肿瘤间质微血管密度(MVD)。结果食管鳞癌中PCDGF、VEGF的表达较正常食管上皮明显增加(P<0.01);PCDGF和VEGF与肿瘤的浸润深度、TNM分期和淋巴结转移呈正相关(P均<0.05);PCDGF、VEGF的表达与MVD值呈显著正相关(P<0.01);PCDGF的表达与VEGF的表达呈正相关(P<0.05)。结论PCDGF标记癌组织的敏感性较高,有望成为一种新的食管鳞癌肿瘤标志物。食管鳞癌中PCDGF、VEGF的表达与血管生成关系密切,可能通过促进肿瘤新生血管生成参与肿瘤的生长、浸润和转移。

人脑星形细胞瘤转化生长因子α表达与肿瘤瘤周脑水肿的相关研究

目的探讨人脑星形细胞瘤转化生长因子α(TGF-α)表达及其与肿瘤瘤周脑水肿之间的内在关系。方法用免疫组织化学方法检测50例人脑星形细胞瘤标本中TGF-α蛋白表达;通过测量患者头颅CT影像上瘤周低密度区评估肿瘤瘤周脑水肿程度。结果实验组50例人脑星形细胞瘤中,TGF-α蛋白表达总阳性率64%(32例)。不同程度瘤周脑水肿组,TGF-α蛋白表达强弱不同且与患者瘤周脑水肿程度之间存在等级相关性(rs=0.999,P<0.01)。结论TGF-α在人脑星形细胞瘤中高表达,且可能加重患者瘤周脑水肿的程度。