乳牛瘦蛋白基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中瘦蛋白(leptin)基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,由 pMD-18T瘦蛋白所构建的标准曲线线性关系良好,建立的瘦蛋白基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强(可检测出低于10个拷贝／μL的样品),准确可靠。

齐卡兔瘦蛋白基因在不同组织中的表达水平与肉质指标的关联性

选取齐卡兔(N系)为实验材料,利用荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time fluorescence polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术测定齐卡兔在35、70、84和91日龄4个阶段腿肌、肾周脂肪和皮下脂肪中瘦蛋白基因(leptin)的表达水平,并检测腿肌的pH值、熟肉率、滴水损失、肌内脂肪等相关肉品质指标,从而分析齐卡兔在这3种组织中leptin基因表达水平与所测肉品质指标的关联性。结果表明:母兔肾周脂肪和腿肌中leptin基因的表达量高于公兔,而在皮下脂肪中公兔的leptin基因表达量高于母兔。84日龄母兔皮下脂肪中leptin基因的表达量与肌内脂肪含量、熟肉率和屠宰后24 h的pH值的相关系数分别为0.95(P<0.01)、0.83(P<0.05)和0.67(P<0.05);公兔屠宰后24 h的pH值与腿肌中leptin基因表达量的相关系数为-0.85(P<0.01)。根据分析,认为leptin基因在齐卡兔各组织中的表达量与肉质指标具有显著的相关性,可以作为研究家兔肉质的一个候选基因,从而为采用分子遗传标记技术和开展肉兔的遗传改良提供参考。

转人瘦蛋白基因小鼠遗传性的初步研究

对转基因小鼠能否将外源基因遗传给后代以及如果能又将遵循怎样的遗传规律的问题进行了研究。在本研究中 ,2只转基因母鼠与非转基因公鼠交配 ,妊娠足月分娩后分别得到 7只和 8只仔鼠。以DIG标记的人瘦蛋白基因为探针 ,进行Southern杂交 ,结果表明在 2只转基因母鼠生出的仔鼠中各有 3只为含有转基因片段的仔鼠 ,这表明转基因可以遗传给后代。统计分析结果初步表明 。

“瘦蛋白”基因及其在动物体内的作用

“瘦蛋白”基因是近年来发现的一种与肥胖有关的基因， 由它编码的瘦蛋白Ｌｅｐｔｉｎ 是一种分泌型蛋白， 可以调节脂肪代谢。Ｌｅｐｔｉｎ 只有与其受体结合才能发挥作用。受体基因表达时的不同剪切方式影响受体活性， 从而影响与Ｌｅｐｔｉｎ 的结合。随着研究的深入， 其对人类医学将产生深远影响， 而在动物方面，

鸡瘦蛋白受体(OBR)基因内含子8单核苷酸多态性与体脂性状的相关研究

以东北农业大学高低脂双向选择系的第 6世代肉鸡为材料 ,鸡 7周龄时测定体重和腹脂重等屠体性状。根据鸡瘦蛋白受体基因内含子 8的序列 (GenBank登陆号 :AF2 2 2 783 )设计引物 ,用直接测序的方法检测多态性位点 ,用PCR SSCP的方法进行基因型分析 ,建立适合的统计模型对多态性位点产生的基因型与生长和体组成性状进行相关分析。结果表明 ,在第 50 0和 659位碱基同时发生了T—C、G—A突变。经最小二乘分析 ,3种基因型在腹脂重和腹脂率上差异显著 (P <0 0 5) ,BB型个体腹脂重和腹脂率显著高于AB型 (P <0 0 5) ,极显著地高于AA型个体 (P <0 0 1) ;3种基因型在肝重上差异显著 (P <0 0 5) ,且AA基因型个体的肝重显著低于AB和BB基因型个体。初步推断OBR基因可能是影响鸡脂肪性状的主效基因或与主效基因连锁 。

鸡OBR基因g.7851G>A单核苷酸多态性功能性鉴定及分析

瘦蛋白受体(OBR)对脂肪沉积和体重调节有重要影响。基于前期发现鸡(Gallus gallus)OBR基因g.7851G>A单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与鸡腹脂重极显著相关(P=0.0076)。生物信息学分析显示,该SNP位于多个转录因子结合区域,可能与某个或某些转录因子结合,影响OBR基因转录效率,为功能性SNP。为确定SNP功能性,研究该基因在高、低脂两系肉鸡各组织中差异表达;构建含该SNP位点A和G等位基因荧光素酶报告基因载体,利用双荧光素酶报告系统分析转录因子C/EBPα和PPARα对该SNP位点不同等位基因荧光素酶活性的影响。Real-timeRT-PCR结果表明,肝脏和腹部脂肪中,高脂系公鸡OBR基因表达量显著高于低脂系公鸡;在大脑中,高脂系公鸡OBR基因表达量显著低于低脂系公鸡(P<0.05)。报告基因结果表明,A等位基因荧光素酶活性显著高于G等位基因(P<0.05)。此外,转录因子PPAR录对G等位基因荧光素酶活性抑制作用显著强于A等位基因(P<0.05),转录因子C/EBα因对G等位基因荧光素酶活性抑制作用显著弱于A等位基因(P<0.05)。研究表明,OBR基因g.7851G>A可能是功能性SNP位点,确定为优质鸡育种功能性分子标记。研究为深入探讨OBR基因对脂肪代谢分子机制的影响提供试验依据。

瘦蛋白(leptin)自然选择和适应性进化研究概述

瘦素蛋白(leptin)是一种由脂肪组织分泌的激素,在调节食欲、能量消耗以及控制体重方面发挥重要作用.因为瘦素蛋白与肥胖相关,所以瘦素蛋白基因(leptin)的研究对公共卫生和药物干预治疗肥胖有着重要意义.由于其功能上的重要性,leptin基因通常高度保守.但是,一些研究在个别哺乳动物中检测到了快速进化和正选择作用,提示这些物种的leptin的功能可能在它们适应环境的过程中发生了适应性的改变.本文将对leptin的适应性进化及其潜在的功能性改变进行综述,旨在引导将来对该基因的分子进化和功能方面的研究,并为瘦素蛋白的临床应用提供理论基础.

leptin基因在海洋哺乳动物中的进化模式研究取得进展

中科院昆明动物所张亚平院士研究组和云南大学于黎研究员，博士研究生靳伟等测定了海洋哺乳动物——鲸目代表物种的瘦蛋白基因leptin基因，并结合55条网上已有哺乳动物leptin序列进行研究。研究结果表明，在鲸目中的齿鲸亚目祖先枝和食肉目水生鳍脚类中的海豹科祖先枝都发现了正选择作用和正选择位点。