瘿痛饮对腺病毒致甲状腺滤泡上皮细胞感染模型细胞焦亡机制

目的:基于细胞焦亡病理表型对升阳清热法瘿痛饮干预腺病毒致甲状腺滤泡上皮Nthy-roi3-1细胞感染模型的机制进行探索。方法:Nthy-roi3-1细胞随机分为6组:空白组,模型组,强的松组,中药低、中、高剂量组,采用腺病毒感染Nthy-roi3-1细胞模拟亚急性甲状腺炎体外模型,培养14 d后分别应用免疫荧光法检测细胞中的Caspase-1蛋白含量,免疫化学发光法测定细胞上清液T3、T4水平,比色法测定细胞上清液LDH,ELISA检测各组细胞上清液IL-1β、IL-18水平,Western blot测定细胞GSDMD-N、Caspase-1、NLRP3、ELAVL-1蛋白表达,Real-time PCR测定细胞Tg、TPO、Caspase-1、NLRP3、ELAVL-1 mRNA表达,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞焦亡水平。结果:与空白组比较,模型组Caspase-1、ELAVL-1、GSDMD-N、NLRP3转录和表达水平,IL-1β、IL-18、T3、T4表达水平,Tg、TPO转录水平,细胞死亡率,以及Annexin V(+)/PI(+)和AnnexinV(+)/PI(-)细胞比例均显著升高(P<0.01)。各药物组上述指标均有不同程度下调(P<0.01),其中,中药低、中剂量组在下调T3、T4、LDH、Caspase-1、ELAVL-1、GSDMD-N、NLRP3表达水平及Tg、TPO、Caspase-1、ELAVL-1、GSDMD-N、NLRP3转录水平,上调Annexin V(+)/PI(+)细胞比例中具有显著疗效。结论:复方瘿痛饮能够抑制腺病毒致Nthy-roi3-1细胞感染的焦亡过程,其机制主要与下调焦亡上游调控分子ELAVL-1表达和转录水平,抑制NLRP3炎症小体活化、下调Caspase-1活化水平、抑制炎症细胞因子IL-1β、IL-18和GSDMD-N的表达有关。