胃癌及癌前组织中端粒酶活性及端粒限制性片段长度的检测及其临床意义

采用ＴＲＡＰ法检测了１７６例不同病变胃粘膜组织端粒酶活性（ＴＡ），同时采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测了３５例胃癌及其相应的１９例癌旁和１３例手术切缘组织端粒限制性片段（ＴＲＦ）长度。结果显示：①１７６例不同胃粘膜病变中，慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）、肠上皮化生（ＩＭ）、异型增生（Ｄｙｓ）及胃癌（ＧＣ）ＴＡ阳性检出率分别为２４．６％、３８．５％、３７．５％及９２．３％，而正常组织（Ｎ）未检出ＴＡ，明显低于以上各组（Ｐ＜０．０１～０．０５），癌组织ＴＡ阳性率亦明显高于ＣＡＧ、ＩＭ及Ｄｙｓ组（Ｐ＜０．０１），ＴＡ阳性检出率与患者临床病理指标无明显相关性；②ＴＲＦ长度随Ｎ→ＣＡＧ→ＩＭ→Ｄｙｓ→ＧＣ有逐渐缩短的趋势，但仅Ｎ及ＣＡＧ组较ＧＣ组明显延长（Ｐ＜０．０１），与癌旁和（或）手术切缘组织比较，肿瘤组织ＴＲＦ缩短者占２０（５７．１％），无变化和延长者占１５（４２．９％），二者比较差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），ＴＲＦ长度与性别、肿瘤大小、分化程度、临床分期及ＴＡ无明显相关性，但与年龄有一定的关系。ＴＡ不仅在胃癌组织中可以检测到，而且在胃粘膜癌前病变或疾病中亦有表达，提示ＴＡ的检测在胃粘膜癌变的早期诊断和预测方面具?

EGF及EGFR在胃癌及癌前组织中的表达和意义

作者采用免疫组化ＬＳＡＢ法对８２例正常胃粘膜、胃癌前病变及胃癌组织进行ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的检测。结果：ＥＧＦ及ＥＧＦＲ在正常胃粘膜无表达；在癌前组织中阳性率分别为８．３％和４１．７％；在胃癌中表达率分别为３５．５％和４５．２％。ＥＧＦ及ＥＧＦＲ的表达与胃癌的分化程度、浸润及淋巴结转移有关；ＥＧＦ和ＥＧＦＲ在胃癌中的表达存在相关性。结果表明，ＥＧＦ－ＥＧＦＲ系统在胃癌的发生、发展中起着一定作用，两者可作为反映胃癌生物学行为的指标。

胃癌及癌前组织中端粒酶活性的检测及其临床意义

目的探讨端粒酶在胃癌及癌前组织中的活性表达。方法采用端粒酶反复扩增法（ＴＲＡＰ）检测了１７６例不同病变胃粘膜组织端粒酶活性，其中慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）５７例、肠上皮化生（ＩＭ）１８例、异型增生（Ｄｙｓ）８例及胃癌（ＧＣ）６５例（包括３例早期胃癌）。结果ＣＡＧ、ＩＭ、Ｄｙｓ及ＧＣ端粒酶阳性检出率分别为２４．６％、３８．５％、３７．５％及９２．３％，而正常组织（ＮＴ）未检出端粒酶活性，明显低于以上各组（Ｐ＜０．０１～０．０５）。癌组织端粒酶阳性率亦明显高于ＣＡＧ、ＩＭ及Ｄｙｓ组（Ｐ＜０．０１）；端粒酶阳性检出率与患者性别、肿瘤大小、浸润深度、大体类型、分化程度、有无淋巴结转移及临床分期无明显相关性。结论端粒酶不仅在胃癌组织中可以检测得到，而且在胃粘膜癌前病变或疾病中亦有表达。

子宫内膜癌前病变组织中端粒酶活性表达及临床意义

目的:探讨端粒酶激活在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法:采用原位杂交法检测子宫内膜癌、癌前病变组织和正常子宫内膜组织端粒酶催化亚单位编码基因(catalytic protein subunit mRNA)的表达;结果:10例正常子宫内膜端粒酶阳性率为10％,12例癌前病变内膜中5例端粒酶阳性率为41.67％,36例子宫内膜癌中阳性率为80.56％,端粒酶活性在内膜癌、癌前病变与正常内膜中差异有显著性;端粒酶活性与子宫内膜癌的病理分级,临床分期有关。结论:子宫内膜癌前病变组织端粒酶激活可望成为子宫内膜癌的分子生物学标志物。

环氧酶-2在人舌鳞癌及癌前病变组织中的表达

目的 探讨环氧酶 2 (COX 2 )在口腔癌前病变和舌癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组化法(IHC)检测 6 0例人舌鳞状细胞癌和 2 0例癌前病变石蜡标本的COX 2表达。结果 COX 2在正常舌粘膜上皮组织中仅有 1例 (1/ 10 )弱表达 ,在舌粘膜上皮异常增生及舌癌组织中的阳性率分别为 6 5 0 %、78 3% ,舌癌组织中的表达强度明显高于舌粘膜上皮异常增生组织 (P =0 0 2 17)。结论 COX 2在舌癌及其癌前病变中有不同程度的高表达 。

胃癌、癌前病变组织中p53蛋白表达的临床意义

目的 探讨胃癌及癌前病变组织中p5 3蛋白表达的临床意义。方法 采用间接免疫荧光标记染色和流式细胞术 ,检测并比较 10例正常胃粘膜、13例浅表性胃炎、10例肠上皮化生、11例不典型增生及 16例胃癌组织中 p5 3蛋白的表达水平。以DNA指数、增殖指数 (PI)、荧光指数 (FI)为分析指标。结果 胃癌、不典型增生及肠上皮化生的FI值分别为 1.86 6± 0 .0 96、1.14 3± 0 .0 6 0、1.0 5 0± 0 .0 74,与正常胃粘膜 ( 0 .6 0 2± 0 .0 77)比较 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,与浅表性胃炎 ( 0 .898± 0 .0 5 2 )比较 ,也有显著性差异 (P <0 .0 5 )。胃癌组织的FI值高于不典型增生及肠上皮化生 (P <0 .0 5 )。不典型增生组织 p5 3蛋白阳性率为 2 5 .0 %( 2 /8) ,胃癌为 6 8.4% ( 13/19) ,在不典型增生及胃癌组织中 ,其异倍体的FI值、PI值和p5 3蛋白阳性率与二倍体者比较 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 胃癌组织 p5 3蛋白的表达水平高于癌前病变及正常胃粘膜组织 ;随病变向恶性转化 ,p5 3蛋白表达水平、PI值及异倍体率均增高。因此 ,检测 p5 3蛋白表达水平对胃癌的诊断具有一定意义。

幽门螺杆菌感染对胃癌及其癌前病变组织中胃泌素和CCK-B receptor表达的影响

目的:分析幽门螺杆菌(H pylori)感染对胃黏膜癌变过程中胃泌素及受体CCK—BR基因转录和蛋白表达的影响,探讨H pylor在胃癌发生中的作用. 方法:采用快速尿素酶试验、Giemsa染色及Warthin-Starry 银染色检测H pylori;应用免疫组织化学和RT—PCR技术检测萎缩性胃炎51例,18例肠上皮化生18例,异型增生15 例和胃癌组织37例中的胃泌素及受体CCK—BR蛋白和mRNA表达情况. 结果:胃泌素mRNA和蛋白在H pylori阳性的萎缩性胃炎中的表达显著低于H pylori阴性的萎缩性胃炎(0.32±0.09 vs 0.51±0.12,26.79±3.61 vs 32.80±2.24,P<0.01),CCK—BR mRNA在H pylori阳性的萎缩性胃炎、肠化生、异型增生及胃癌中的表达与H pylori阴性组比较无明显变化. 结论:H pylori感染可以抑制萎缩性胃炎组织中的胃泌素mRNA和蛋白表达,这可能是H pylori感染导致慢性胃炎的重要机制之一.H pylori感染在胃癌发生过程中,主要作用于胃癌发生的早期阶段-萎缩性胃炎,可能起着启动因子的作用.

胃癌及癌前病变组织CD44v6的表达

目的 探讨CD44v6在胃癌及癌前病变组织中的表达。方法 运用免疫组化方法检测30例浅表性胃炎、34例中重度萎缩性胃炎、34例胃粘膜不典型增生患者活检胃粘膜及64例胃癌患者手术切除病理组织中CD44v6的表达。 结果 CD44v6表达阳性率在浅表性胃炎、中重度萎缩性胃炎、不典型增生及胃癌分别为3.33%(1/30)、14.71% (5/34)、44.12%(15/34)及60.94 % (39/64)。不典型增生及胃癌患者阳性率高于浅表性胃炎与中重度萎缩性胃炎患者 (均P<0.01) ,中重度萎缩性胃炎与浅表性胃炎患者差别无显著性意义 ;CD44v6表达与胃癌远处转移有关 (P<0.05) ,与淋巴转移、不同性别、肿瘤长径是否大于5cm及发生部位、大体类型、组织类型、分化程度和浸润深度无明显关系。 结论 胃活检组织CD44v6检测可能有助于胃癌早期诊断和推测远处转移趋势。

胃癌及癌前病变组织中p53、c-erbB-2基因表达

目的 :探讨p5 3、c -erbB - 2基因表达与胃癌及癌前病变生物学行为之间的关系。方法 :采用免疫组化ABC法检测胃粘膜病变中的p5 3、c -erbB - 2蛋白表达。结果 :慢性浅表性胃炎组织中p5 3、c -erbB - 2蛋白无表达 ;慢性萎缩性胃炎p5 3、c -erbB - 2蛋白表达率分别为 10 %、2 0 % ;早期胃癌组织中分别为 5 0 %、4 1% ;进展期胃癌中的表达率分别为 73%、76 .7%。结论 :p5 3、c -erbB -

HPV16感染与端粒酶hTERT、P21^(waf)、Ki67表达在宫颈鳞状细胞癌及其癌前病变组织中的关系及意义

目的:探讨HPV16感染与端粒酶hTERT、Ki67、P21waf表达在人类宫颈鳞癌及其癌前病变中的关系及其意义。方法:利用组织芯片技术结合原位杂交技术和免疫组织化学方法研究130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样变组织和宫颈鳞癌组织中HPV16感染以及端粒酶hTERT、Ki67、P21waf表达的情况。结果:①在8/22CINⅠ、7/11CINⅡ、11/13CINⅢ、4/6原位癌,41/52宫颈鳞癌中为HPV16杂交信号阳性,CINⅢ、浸润性鳞癌与正常宫颈组织相比HPV16杂交信号阳性率差异有显著统计学意义(P均<0.05);②从CINⅡ、CINⅢ到浸润癌hTERT表达与正常组织相比,差异皆有显著统计学意义(P均<0.05),且细性程度逐渐增加。hTERT表达在各级癌及癌前病变组织中与HPV16型的感染率之间也呈现出正相关性(P<0.05,r=0.339);③P21waf在癌组织中的阳性率及强度都低于正常宫颈组织(P<0.05),且P21waf的表达与HPV16感染、hTERT表达之间具有负相关性(P<0.05,r=-0.337;P<0.05,r=-0.248);④与正常宫颈组织相比从CINⅡ到宫颈浸润性鳞癌Ki67的表达,其差异有显著统计学意义(P<0.05),但Ki67的表达与HPV16的感染不具有相关性(P>0.05),与hTERT表达之间具有相关性(P<0.05,r=0.398),与P21waf呈现出负的相关性(P<0.05,r=-0.446)。结论:HPV16感染与hTERT、P21waf、Ki67互相作用,共同影响宫颈鳞癌的发生发展。这些指标利于阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供依据。

宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16 E2蛋白的表达及其意义

本研究选取了2012年4月-2013年4月我院收治的16例正常宫颈患者、26例宫颈上皮内瘤变（CIN）、60例浸润性宫颈癌患者作为研究对象,采用免疫组化SP法对患者宫颈组织的HPV16 E2蛋白进行检测,对比宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16 E2蛋白表达的差异。结果与正常宫颈组织相比,Ⅲ期宫颈上皮内瘤变及浸润性宫颈癌组织中的HPV16 E2蛋白表达阳性率明显降低,且差异具有统计学意义（P〈0.05）。29例低分化宫颈癌组织的HPV16 E2阳性率为55.2%,19例中分化宫颈癌组织的HPV16 E2阳性率为47.3%,12例高分化宫颈癌组织的HPV16 E2阳性率为50.0%,在不同分化程度的宫颈癌组织中,HPV16E6蛋白的表达无显著性差异（P〉0.05）。HPV16 E2蛋白表达与宫颈组织的恶性程度呈负相关,与宫颈癌组织的分化程度无明显联系。HPV16 E2蛋白检测对宫颈癌及其癌前病变的治疗和研究具有重要意义。

MG_7抗原在癌前病变组织中的表达及其与胃癌关系的探讨

应用第四军医大学研制的胃癌单克隆抗体MG7,采用ABC免疫酶标记技术,结合粘液组织化学染色,对胃癌癌前病变组织中MG7抗原（MG7—Ag）的分布和意义进行探讨,以期研究肠化生、异型增生和胃癌三者之间的关系。全部标本均由胃镜取材。

原位逆转录PCR检测胃癌及癌前组织中端粒酶RNA及其临床意义

目的 研究胃癌及癌前病变胃粘膜端粒酶RNA的检测及其临床意义。方法 选取经病理组织学证实的胃粘膜活检标本 15 0例 ,包括慢性浅表性胃炎 3 2例、肠上皮化生 3 6例、不典型增生 3 4例、胃癌 48例 ,采用原位逆转录PCR、端粒重复序列扩增 (TRAP)法检测上述胃粘膜端粒酶RNA与端粒酶活性。结果 原位逆转录PCR技术检测胃粘膜活检标本端粒酶RNA阳性率为 5 5 .3 % (83 / 15 0 ) ,显著高于TRAP法检测端粒酶活性阳性率 (4 0 .0 % ,60 / 15 0 ) ,P <0 .0 5。端粒酶RNA在胃癌及癌前病变 (包括肠上皮化生与异型增生 )中检出率显著高于浅表性胃炎 (P <0 .0 5 ) ,胃癌中端粒酶RNA检出率亦显著高于肠上皮化生及不典型增生 (P <0 .0 5 ) ,但后两者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。端粒酶RNA主要分布于胃粘膜癌细胞及癌前病变上皮细胞的胞核内。结论 端粒酶RNA与胃癌的发生密切相关。原位逆转录PCR技术检测胃粘膜端粒酶RNA对胃粘膜癌变的早期诊断和预测有重要价值 。

胃癌及癌前病变组织中环氧合酶-2表达及其意义

目的 研究环氧合酶-2蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达，旨在探讨阿司匹林等非甾体类抗炎药在胃癌高危人群中的预防作用。方法 应用免疫组化方法检测胃癌80例，胃息肉50例，慢性萎缩性胃炎94例，慢性非萎缩性胃炎76例和60例正常胃粘膜组织中的环氧合酶-2蛋白表达情况。结果 不同病变胃粘膜组织中COX-1表达无明显变化。而慢性萎缩性胃炎、肠化生、异型增生到胃癌COX-2表达呈递增趋势，分别为49．5％、51.1％，58．0％、72．5％，胃息肉占62％，与慢性非萎缩性胃炎比较（P〈0．01）.慢性非萎缩性胃炎和正常胃粘膜纽织未见COX-2表达。结论 在癌前病变期选用选择性COX-2抑制剂罗非昔布．塞采昔布，可防止或减少胃癌的发生，为胃癌的预防开辟一条新途径。

食管癌及癌前病变组织中hTERT基因的表达

目的:探讨肿瘤相关基因端粒酶逆转录酶(hTERT)基因在食管癌及癌前病变组织中的表达及与细胞增生核抗原Ki-67的关系;探讨hTERT基因对食管癌早期诊断及食管癌预后判定的价值.方法:采用原位杂交法检测食管癌组织42例、不典型增生组织37例及正常食管组织12例中hTERTmRNA的表达;用免疫组化S-P法检测Ki-67抗原表达.结果:在正常食管黏膜、不典型增生、食管癌组织中,hTERTmRNA的阳性表达率分别为0%,48.6%,83.3%;Ki-67抗原的阳性表达率分别为0%,56.8%,88.1%;癌组织与不典型增生组织中hTERTmRNA与Ki-67抗原阳性表达率较正常食管黏膜差异有显著性(P<0.01);癌组织中hTERTmRNA与Ki-67抗原阳性表达率较不典型增生组织差异有显著性(P<0.01);食管癌组织中hTERTmRNA与Ki-67抗原表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);结果还显示hTERTmRNA和Ki-67抗原表达具有显著相关性(P<0.05).结论:端粒酶逆转录酶基因的异常表达在食管癌的发生、发展过程中具有重要作用,hTERTmRNA的表达与细胞增生活性有关;hTERT基因表达的检测有助于食管癌的早期诊断以及食管癌预后的判定.

胃癌和癌前病变组织p63、p73蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的:探讨胃癌和癌前病变组织p63、p73蛋白的表达及细胞凋亡情况。方法:选择104例手术切除和经电子胃镜活检存档蜡块标本的胃癌及癌前病变组织,用免疫组织化学法检测各组织中p63、p73蛋白的表达,同时用Tunel法检测组织中的细胞凋亡情况。结果:胃癌组织p63、p73蛋白表达率显著高于癌前病变组织(P(0.05),而细胞凋亡指数明显低于癌前病变组织(P<0.05)。结论:p63、p73蛋白在胃癌中高表达;细胞凋亡障碍可能是胃癌增生失控的基础。