雌激素受体α、β及细胞周期蛋白D1、癌基因蛋白质P21在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的探讨雌激素受体α(ERα)、β(ERβ)及细胞周期调控因子CyclinD1、P21在子宫内膜癌组织中的蛋白表达水平及相关的临床意义。方法选取徐州市中心医院2016年1月至2017年12月65例子宫内膜癌组织、30例子宫内膜不典型增生组织以及30例正常子宫内膜组织,利用免疫组织化学染色检测各组组织中ERα、ERβ、CyclinD1和P21的蛋白表达水平。结果ERα、ERβ、CyclinD1和P21蛋白在子宫内膜癌(47.69%、32.31%、76.92%、49.23%)、子宫内膜不典型增生(90.00%、46.67%、43.33%、66.67%)和正常子宫内膜(73.33%、63.33%、13.33%、96.67%)三组间的阳性表达率均差异有统计学意义(P<0.05)。ERα在子宫内膜不典型增生组织中阳性表达率最高,ERβ和P21在正常子宫内膜组织中阳性表达率最高,CyclinD1在子宫内膜癌组织中阳性表达率最高。在子宫内膜癌组织中,ERα在Ⅲ?Ⅳ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2以及有淋巴结转移的组织中阳性表达率降低(P<0.05);ERβ在Ⅲ?Ⅳ期组织中的阳性表达率低于Ⅰ?Ⅱ期病人(P<0.05);CyclinD1在低分化和肌层浸润深度≥1/2的组织中具有较高的阳性表达率(P<0.05);而P21在Ⅰ?Ⅱ期、高中分化以及肌层浸润深度<1/2的组织中具有较高的阳性表达率。结论ERα和ERβ可能在子宫内膜癌形成及进展过程中发挥不同的作用,CyclinD1在子宫内膜癌中可能发挥促进癌症形成及进展的作用,P21在子宫内膜癌中则可能发挥抑制癌症形成及进展的作用。

甲状腺乳头状癌p53基因突变及其与p21^(WAF1/CIP1)蛋白定量表达的关系

目的 初步探讨甲状腺乳头状癌 (PTC)中 p5 3基因突变及其与 p2 1WAF1 /CIP1 蛋白定量表达的关系。 方法 采用 PCR- SSCP、DNA序列分析、免疫组织化学、图像分析等技术 ,检测 4 1例 PTC和 10例甲状腺滤泡性腺瘤标本组织中 p5 3基因突变情况和 p2 1蛋白染色状况。 结果 (1)伴 p5 3基因突变 ( 组 )和不伴突变 ( 组 ) PTC的原发肿瘤 (T)、淋巴结转移 (N)及远处转移 (M)差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 、 和 之间 , 和 、 和 、 和 的平均积分光密度值 (D)差异具有显著性意义 (P<0 .0 1)。 结论 (1) PTC的演进和 p5 3基因突变与否无直接关系 ,p5 3蛋白的空间构象可能发挥关键作用。 (2 )在 PTC的发生、发展中存在依赖野生型 p5 3蛋白诱导P2 1WAF 1

肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和CDK4蛋白的影响

目的检测肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和细胞周期依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)蛋白表达的影响。方法肉桂醛(3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10 g/L)作用肝癌HepG2细胞后,MTT比色法检测HepG2细胞增殖活性和半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。流式细胞术检测肉桂醛对HepG2细胞凋亡影响。免疫荧光法检测HepG2细胞p21和CDK4蛋白的表达。结果肉桂醛能抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性,24小时、48小时和72小时IC_(50)值分别为0.68、0.45、0.35 g/L(P<0.01)。肉桂醛组(0.900、0.450、0.225 g/L)肝癌HepG2细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。肉桂醛能增加p21蛋白和降低CDK4蛋白在HepG2细胞中的表达,各浓度肉桂醛组的p21、CDK4蛋白表达与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论肉桂醛可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,可能与调节p21和CDK4的蛋白表达有关。

胰腺癌组织中p21ras蛋白表达与微血管密度的关系及其临床意义

目的检测胰腺癌组织中p21ras蛋白的表达及微血管密度(MVD)计数,探讨两者的关系及其临床意义。方法选择病理证实为胰腺导管腺癌的48例患者的石蜡切块标本,应用EnVision显色系统免疫组织化学方法进行p21ras蛋白检测和MVD计数。结果p21ras蛋白表达率胰腺癌组织为60·41%,癌旁组织为37·5%(P<0·05)。MVD计数p21ras表达阳性组为22·207±5·815,p21ras阴性组为18·053±5·502(t=3·597,P<0·01)。结论胰腺癌组织中p21ras的表达与MVD计数相关,提示ras基因突变可能促进肿瘤微血管的形成。

PTEN、p21基因在新疆哈萨克族食管癌中的表达

目的研究PTEN、p21基因在哈萨克族食管癌中的表达。方法采用RT-PCR法检测PTEN、p21基因在48例哈萨克族食管癌组织及远端无癌组织中的表达,并分析其表达与肿瘤分化、TNM分期、临床分期、淋巴结转移的关系。结果 PTEN基因在癌组织和远端无癌组织中的表达阳性率分别为75%、45.8%,癌组织高于远端无癌组织(χ2=8.537,P<0.05);p21基因在癌组织和远端无癌组织中表达的阳性率分别为95.8%、97.9%,差异无统计学意义(χ2=0.344,P>0.05)。PTEN和p21表达与食管癌分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移均无相关性。结论 PTEN、p21基因可能均不是哈萨克族食管癌的主要致病基因。

P21基因rsi059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌发病风险相关性

【目的】研究 p21基因 rs1059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌之间的相关性。【方法】通过测序及PCR-RFLP方法，对263例子宫内膜癌患者（观察组）及315例健康人群（对照组）的外周血DNA的 p21基因 rs1059234位点进行基因型分型，并分析分型与子宫内膜癌之间的相关性。【结果】观察组中 rs1059234位点C等位基因频率较对照组明显升高（P ＝0．039）。rs1059234位点 CC基因型频率在观察组中与对照组相比呈明显升高趋势（0．335vs 0．219，P＝0．045），CC基因型增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．589，95％ CI：1．010～2．502），但是经回归分析校正后，CC 基因型并不增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．623，95％ CI：0．720～3．659，P＝0．243）。【结论】在东北地区汉族女性中，p21基因 rs1059234位点的多态性与子宫内膜癌的发生风险无明显关联。

男性乳腺癌雌、孕激素受体和癌基因P_(21)、P_(53)的表达及意义

目的研究雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及癌基因P21、P53在男性乳腺癌中的表达及与临床分期、病理分级及生存期的关系。方法对33例男性乳腺癌(MBC)组织用免疫组化法进行ER、PR及癌基因P21和P53的检测。结果MBC的ER、PR、P21和P53阳性率分别为57.6%(19/33)、51.5%(17/33)、84.8%(28/33)和34.6%(12/33);男性乳腺增生症的P21和P53均无阳性表达;MBC的ER和PR同时表达率51.5%(17/33);P21和P53同时表达率30.3%(10/33)。结论MBC的ER和PR表达率与其病理分级和生存期有关(分别P<0.01、P<0.05),P21高表达者生存期短,死亡率高。

P21蛋白和生存素在美伐他汀诱导人非小细胞肺癌凋亡中的作用

目的研究P21蛋白和生存素(survivin)在美伐他汀诱导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法应用MTT法检测美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的抑制作用,应用流式细胞仪、透射电镜研究美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,应用流式细胞仪和RT-PCR检测P21蛋白、P21mRNA、生存素mRNA的表达。结果MTT试验表明美伐他汀对A549、NCI-H520增殖有明显的抑制作用;流式细胞仪检测显示美伐他汀诱导A549、NCI-H520细胞G0/G1期阻滞;AnnexinV结果证实美伐他汀可诱导A549、NCI-H520细胞凋亡,而且凋亡率随剂量的增加而增加。美伐他汀对A549、NCI-H520细胞P21mRNA及P21总蛋白的表达无影响,但可使P21胞膜蛋白的表达下降。美伐他汀作用后生存素mRNA表达下降。加入甲羟戊酸可完全逆转美伐他汀的上述作用。结论美伐他汀通过甲羟戊酸途径诱导NSCLCG0/G1期阻滞,抑制增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制P21蛋白异戊二烯化和下调生存素mRNA表达有关。

甲状腺乳头状癌中p21ras蛋白、转化生长因子β_1和ki-67的表达

目的 观察 p2 1ras蛋白、转化生长因子 (TGF)β1 和 ki- 6 7在甲状腺良恶性乳头状增生性疾病中的表达情况 ,探讨它们的表达对甲状腺乳头状癌 (PTC)发病机制的意义。 方法 采用免疫组织化学的方法对 10 3例PTC、5 7例良性乳头状增生性疾病 (包括 2 7例滤泡性腺瘤和 30例甲状腺肿组织 )进行 p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7表达的检测。 结果 (1) p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7在 PTC组中的表达显著高于滤泡性腺瘤组、甲状腺肿组及癌旁正常甲状腺组织 (P<0 .0 1)。 (2 ) PTC组中 ,p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7的表达在晚期患者、伴淋巴结转移的患者中分别显著高于早期患者、无淋巴结转移的患者 (P<0 .0 1)。 结论 在 PTC的发生、发展过程中 ,p2 1ras蛋白和 TGFβ1 的高表达起了重要的作用 ,它们共同促进 PTC的生长、浸润和转移。ki- 6 7能较可靠地反映细胞的增殖活性 ,可作为甲状腺良恶性乳头状增生性疾病的鉴别诊断及

反义p21^(WAF1/CIP1)基因转染对肾癌细胞凋亡抑制作用的影响

目的 探讨 p2 1WAF 1 /CIP1基因在顺铂诱导的 GRC- 1肾癌细胞凋亡过程中的作用 .方法 使用脂质体转染方法将正义 p2 1WAF 1 /CIP1基因及反义 p2 1WAF 1 /CIP1基因分别导入 GRC- 1肾癌细胞系中 ,对所获转染细胞进行形态学观察和流式细胞仪检测 .结果 在正义 p2 1WAF 1 /CIP1基因转染后 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导细胞凋亡的作用增强 ;在反义 p2 1WAF 1 /CIP1基因转染后 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导细胞凋亡的作用受到抑制 .结论 在 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导的细胞凋亡至少部分是通过 p2 1WAF 1 /CIP1基因发挥作用 .p2 1WAF 1

氧自由基对胃癌细胞MGC-803的P53、P21ras蛋白表达的影响

目的:观察氧自由基对人胃癌细胞系MGC-803细胞的P53、P21ras蛋白表达的影响,探讨氧自由基在胃癌发生发展中的作用。方法:通过细胞培养、采用硫代巴比妥酸反应物质法检测细胞内氧自由基中间产物丙二醛(MDA)的含量,应用免疫组织化学技术检测MGC-803细胞内不同浓度的氧自由基对P53、P21ras蛋白表达的影响。结果:氧自由基含量升高可增强MGC-803细胞内P53、P21ras蛋白表达(P<0.01),氧自由基水平降低则P53、P21ras蛋白表达减弱(P<0.01)。结论:胃癌细胞系MGC-803内氧自由基水平的改变可影响其P53、P21ras蛋白表达。

雌、孕激素受体和p53,p21蛋白在胆囊癌中的表达及其相互关系

目的 探讨雌激素受体 (ER) ,孕激素受体 (PR)和 p5 3,p2 1在胆囊癌的发生发展中的生物学意义及其相互关系。 方法 采用即用型一抗加nvision微波加热免疫组化法对 12例胆囊癌进行ER ,PR和 p5 3,p2 1表达及分析。 结果 ( 1)胆囊癌细胞内存在ER ,PR ,其阳性表达率分别为 83.3%和 75 .0 % ;( 2 )胆囊癌p5 3,p2 1阳性表达率均为 6 6 .6 % ,ER ,PR与p5 3,p2 1阳性表达一致率为5 8.3% ;( 3)癌细胞分化越差、浸润越深 ,ER ,PR和 p5 3,p2 1阳性表达率越高。 结论 ER ,PR和 p5 3,p2 1阳性表达与胆囊癌的分化程度和浸润深度有关 ,这对运用内分泌治疗的疗效观察及预后判断有重要意义。ER ,PR过度表达可能会诱发 p5 3,p2 1基因突变 。

胃癌及癌前病变ras P21,P53的表达意义

近年来的研究结果揭示,胃癌的发生是一个涉及多种癌基因、抑癌基因及多阶段累积的复杂过程,其中癌基因rasp21及抑癌基因p53是与胃癌发生有关的癌相关基因。我们采用SP免疫组化法,同步检测ras p21及p53,观察二种基因蛋白产物在胃癌及癌前病变中的表达情况,以探讨ras癌基因及p53基因在胃癌发生中的作用及意义。 1 材料和方法 1.1 材料胃粘膜活检组织经病理诊断的胃癌42例,不典型增生23例,肠上皮化生26例,慢性萎缩性胃炎14例,慢性浅表性胃炎24例,用100mL·L^(-1)福尔马林液固定,常规组织脱水,石蜡包埋,4μm连续切片。鼠抗人ran P21单克隆抗体及鼠抗人P53单克隆抗体均为美国Maxim Biotech公司产品,试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。 1.2 方法应用免疫组化(SP法)染色,测定方法按试剂盒说明书进行。ras P21蛋白阳性表现为细胞质染色呈棕黄色;P53蛋白阳性表现为细胞核染色呈棕黄色至深棕黄色。

肿瘤DNA含量与p53,p21,p16,Rb基因异常表达的肿瘤生物学特性(英文)

背景:p53,Rb,p16和p21蛋白是肿瘤相关基因产物,其异常表达在细胞周期的不同阶段直接或间接影响着肿瘤的形成和发展,DNA倍体异常也是肿瘤细胞周期频发事件,而肿瘤细胞DNA倍体与P53,Rb,P16和P21蛋白异常表达关系间的研究鲜见报道。目的:研究流式细胞仪(FCM)检测肿瘤组织DNA倍体与多种癌相关基因蛋白p53,Rb,p16和p21异常表达的意义。设计:以诊断为依据设立对照的前瞻性研究。地点和对象:实验地点:江苏省肿瘤防治研究所,实验对象:30例女性癌症患者,其中卵巢癌10例,乳腺癌20例,平均年龄55岁。干预:对30例卵巢癌和乳腺癌瘤体中心灶进行3点取样,应用FCM检测DNA倍体及p53,Rb,p16和p21异常表达。主要观察指标:肿瘤组织DNA倍体及p53,Rb,p16和p21蛋白阳性细胞百分率。结果:瘤灶多点取样法可检测出90%(27/30)的异倍体;不同倍性的肿瘤普遍存在程度不同地p53,Rb,p21和p16基因蛋白异常表达。96.7%(29/30)的肿瘤存在至少一种以上癌相关基因(p53,Rb,p16,p21)异常表达。结论:DNA异倍体与多种癌相关基因蛋白异常表达均是肿瘤恶性指标,FCM同步检测这些指标,为快速了解肿瘤细胞生物学特性、把握患者临床治疗及预后提供了良好途径。

P21^(ras)、P16在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨癌基因P21^(ras)及抑癌基因P16与大肠癌的关系。方法应用免疫组化SP法分析、研究了P21^(ras)蛋白、P16蛋白在80例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常大肠组织中的表达。结果①P21^(ras)在前二者中的阳性表达率分别为70.1％(57/80)和65％(13/20),明显高于在正常组织中的30％(6/20),其比较具有显著性差异(x^2=17.66、P<0.005;x^2=5.23、P<0.05);P16在大肠癌中的阳性表达率为36.3％(29/80)低于在腺瘤及正常组织中的65％(13/20)和75％(15/20),其比较亦具有显著性差异。②P21^(ras)、P16的阳性表达率在大肠癌患者的年龄、性别及肿瘤大小方面无显著性差异,而与肿瘤的临床Dukes分期(x^2=6.20、P<0.025;x^2=6.25、P<0.05)、有无淋巴结转移及术后5a生存率密切相关。③P21^(ras)在不同的大肠癌组织病理类型中,其表达率无显著性差异;P16的阳性表达率随着肿瘤浸润深度的增加有下降趋势,但无统计学意义。④在80例大肠癌患者中,P21^(ras)阳性而P16阴性者比率高于其他三者,而且这类大肠癌患者的术后5a生存率下降。结论大肠癌的发生、发展,是由包括癌基因、抑癌基因在内的多种因素作用的结果;在临床工作中联合检测P21^(ras)及P16蛋白在大肠癌中的表达水平,对我们估计患者的病情、推测其预后有指导性意义。

p21^(waf1)基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

目的 :构建人 p2 1waf1 基因的原核表达载体并在大肠杆菌 JM10 9中高效表达。方法 :从人肝细胞中分离总 RNA,经逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)得到 p2 1waf1 全基因。用原核细胞表达载体构建了 p BV 2 2 0 / p2 1waf1 重组质粒 ,经 DNA测序确认后 ,将其转化到大肠杆菌 JM10 9进行表达、初步纯化。结果 :SDS- PAGE凝胶电泳分离显示在分子量 2 10 0 0处有一诱导蛋白带 ,薄层扫描显示表达产物在诱导 5 h时可达细菌总蛋白的 38% ,Westernblotting证明表达产物与抗人 P2 1waf1 单克隆抗体有特异性免疫反应。结论 :成功构建出 p2 1waf1 表达载体 ,诱导产生蛋白经检测证实为 P2 1waf1 蛋白。

洛伐他汀对NB4细胞ras基因p21^(Ras)膜结合作用影响的体外试验

目的 :探讨洛伐他汀 (LOV)对人白血病NB4细胞的作用及其机制。方法 :以MTT比色法首先观察LOV对NB4细胞增殖的影响 ;利用逆转录 -聚合酶链反应半定量测定LOV作用于NB4细胞不同时间H -ras、K -ras、N -ras癌基因mRNA表达水平 ;同时采用流式细胞术测定NB4细胞p2 1Ras总蛋白、膜蛋白的表达。结果 :①LOV抑制NB4细胞增殖 ,IC5 0为 12 5 9μmol/L。②NB4细胞H、K、N -ras基因表达均为阳性。③LOV处理不同时间的NB4细胞H、K、N -ras基因转录水平无明显变化 ;p2 1Ras总蛋白水平也无变化 ,而细胞膜表面p2 1Ras蛋白水平随时间进行性下降。结论 :LOV抑制NB4细胞增殖。LOV靶向HMG -CoA还原酶 ,抑制p2 1Ras蛋白异戊二烯化、阻滞p2 1Ras蛋白与细胞膜结合 ;不影响ras癌基因以及p2 1Ras总蛋白的表达。

端粒酶、p21、p53与原发性胆囊癌关系

目的 探讨端粒酶、p2 1和 p53在原发性胆囊癌的发生、转移和浸润中的作用及相互关系。方法 我们应用 TRAP- PCR和免疫组织化学方法对原发性胆囊癌中端粒酶、p2 1和 p53表达进行检测。结果 1原发性胆囊癌端粒酶、p2 1和 p53阳性表达率为 84.8%、47.8%和 71 .7%。 2端粒酶、p2 1和 p53在胆囊癌旁粘膜阳性表达率为 4.6%、94.5%和 94.5%。 3癌细胞浸润越深 ,端粒酶 p2 1和 p53阳性表达率越高。 4淋巴结转移 ,端粒酶阳性表达率为 1 0 0 % ,而 p2 1和 p53为 2 2 .7%和 63.6%。结论 端粒酶、p2 1和 p53阳性表达与胆囊癌的浸润及在胆囊癌形成和对周围组织浸润 。

Smad4及TβRⅡ和P21^(waf1)在食管鳞癌的表达及意义

目的 :探讨食管鳞癌中Smad4、TβRⅡ及P2 1waf1的表达特点及其意义。方法 :80例食管鳞癌样本常规石蜡切片行Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1免疫组织化学染色。结果 :Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1的表达在食管癌组织学分级Ⅰ级、癌细胞未浸至深肌层和淋巴结无转移的组织样本中阳性率明显高于组织学分级Ⅲ级、癌细胞浸至深肌层或浆膜层和淋巴结有转移的组织样本 ,差异均有显著或极显著意义 (P <0 .0 5 )。结论 :Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1与食管鳞癌的发生发展及生物学行为有关 ,随病理分期、细胞分级增高阳性表达率降低。