癌基因c-fos、c-jun蛋白在鳞状细胞癌皮损中的表达及意义

目的 探讨癌基因c fos、c jun的表达与皮肤鳞癌发生和发展的关系。 方法 采用免疫组化法对 6 0例皮肤鳞癌的c fos、c jun的表达情况进行检测 ,并与正常皮肤组织进行对照。 结果 c fos、c jun在正常皮肤组织不表达 ,在皮肤鳞癌中的表达阳性率分别为 6 1.7%和 4 8.3% ,其表达水平与癌组织的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,肿瘤的分化程度越高其表达水平越高。 结论 c fos、c jun的表达水平可作为判定皮肤鳞癌分化的指标。

子宫颈癌中癌基因产物c-Fos、c-Jun的表达及意义

目的 :探讨癌基因c fos、c jun表达产物与子宫颈癌的发生 ,发展及预后的关系。方法 :用免疫组化SABC法 ,以兔抗c fos、c jun抗体标记 6 0例子宫颈癌和 30例子宫颈上皮不典型增生 ,观察其分化程度和组织学类型 ,子宫颈癌的表达及阳性率比较。结果 :c fos、c jun阳性反应见于不典型增生上皮和子宫颈癌组织 ,不典型增生上皮c fos、c jun阳性率分别为 70 0 %和 5 0 0 %癌组织为 5 6 6 %和 4 8 3% ;在子宫颈癌表达的阳性率与癌组织分化程度和组织学类型有关 (P <0 .0 5 )。结论 :提示c fos、c

食管癌中癌基因产物c-fos,c-jun的表达及意义

目的探讨癌基因c-fos、c-jun表达产物与食管癌的发生、发展及预后的关系。方法用免疫组化SABC法,以兔抗c-fos、c-jun抗体标记90例食管癌和30例食管上皮不典型增生。观察其分化程度和组织学类型,食管癌的表达及阳性率比较。结果c-fosc、-jun阳性反应见于不典型增生上皮和食管癌组织,不典型增生上皮c-fos、c-jun阳性率分别为70.0%和50.0%,癌组织为58.8%和48.9%;食管癌表达的阳性率与癌组织分化程度和组织学类型有关(P<0.05)。结论提示c-fos、c-jun过量表达可发生在不典型增生的食管上皮和食管癌组织。

大肠癌中c-Jun激活区结合蛋白1（Jab1）的表达及其意义

目的探讨大肠癌中c‐Jun激活区结合蛋白1（Jab1）的表达及其临床病理指标和预后的关系。方法收集98例大肠癌组织（大肠癌组）和相应癌旁组织标本（对照组），采用免疫组织化学方法检测两组Jab1的表达并比较。结果Jab1在大肠癌组中的阳性表达率为96．9％（95／98），显著高于对照组17．3％（17／98），其差异有统计学意义（ P ＜0．05）；Jab1阳性表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、TNM 分期和淋巴结转移显著相关（ P ＜0．05）；与患者性别、年龄、肿瘤大小无显著相关（ P ＞0．05）；JAB1阳性表达患者1年、3年、5年生存率分别为81．0％、49．6％、31．0％；阴性表达患者1年、3年、5年生存率分别为100．0％、87．5％、75．0％，其差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论 Jab1可能参与了大肠癌的发生、浸润及转移；根据Jab1的表达可判断大肠癌患者的预后。

原癌基因c-fos及c-jun在银屑病皮损中的异常表达

目的为了探索ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ与银屑病的关系。方法运用原位杂交技术并通过图像定量分析，对３６例寻常性银屑病患者及１５例正常人皮肤中ｃｆｏｓ及ｃｊｕｎ的表达进行观察。结果银屑病进行期皮损中，ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ表达全层减少（Ｐ＜０．０１），恢复期皮损中ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ的表达与正常皮肤差异无显著性意义Ｐ＞０．０５）。结论提示ｃｆｏｓ、ｃｊｕｎ可能与银屑病角朊细胞分化受阻及表现型异常密切有关。

凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达与不同临床病理特征的关系及二者在肺癌发生过程中可能存在的相关性。方法:采用免疫组化法的链霉菌抗生物素过氧化酶(S-P)法检测80例NSCLC组织和20例正常肺组织中Survivin、bcl-2蛋白表达情况。结果:非小细胞肺癌组织中Survivin、bcl-2蛋白阳性表达率分别为61.3%、50%,而在肺良性病变组织中阳性表达率分别为0%、10%,两者在两组中的表达均有显著性差异(P<0.05);Survivin蛋白在～期肺癌组织中阳性表达率72.0%显著高于I～II期肺癌组织的43.3%(P<0.05),bcl-2蛋白在鳞癌组的阳性表达率62.2%高于腺癌组的34.3%(P<0.05);Survivin、bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达呈正相关关系。结论:Survivin蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关,Survivin、bcl-2可以作为判断病情和评价预后的指标。

根癌农杆菌胁迫下多花蔷薇(Rosamultiflora‘Inermis4’)的基因表达分析

多花蔷薇无刺4号(Rosamultiflora‘Inermis4’)对根癌病有较强抗性。以根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)接种多花蔷薇无刺4号为目的材料,刺伤处理为对照,采用抑制差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)方法,构建了富集多花蔷薇根癌病抗性相关基因的差减cDNA文库。差异筛选差减cDNA文库后,随机选取增强表达的92个克隆进行测序,去除冗余的cDNA和病菌的基因片段,共得到53个单一序列。利用GenBank数据库进行核酸和蛋白质同源性比较,获得的cDNA片段功能涉及:细胞分裂、生长(22个克隆),逆境防御、信号转导及激素调节(11个克隆)以及初生与次生代谢(10个克隆)。另有10个基因片段功能未知,可能为新的EST。根据测序及比对分析结果,对多花蔷薇无刺4号抗根癌病的分子机理进行了探讨。

DCLK1基因启动子甲基化与口腔鳞癌临床病理特征及预后的关系

目的探讨双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)基因启动子甲基化与口腔鳞癌临床病理特征及预后的关系。方法选取手术切除的129例口腔鳞癌组织和对应癌旁组织,采用甲基化特异性PCR检测DCLK1基因启动子甲基化情况,分析其与临床病理特征之间的关系。RT-PCR和免疫组织化学法分别检测DCLK1 mRNA和蛋白表达水平,并分析DCLK1基因启动子甲基化与DCLK1 mRNA和蛋白表达之间关系。随访3年,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析DCLK1基因启动子甲基化对患者预后的影响。结果口腔鳞癌组织和癌旁组织中DCLK1基因启动子甲基化阳性表达率分别为35.7%和64.3%(P<0.01)。口腔鳞癌组织中DCLK1mRNA水平和蛋白表达均较癌旁组织上升(均P<0.01)。口腔鳞癌组织中DCLK1基因启动子甲基化阳性表达与DCLK1 mRNA和蛋白表达之间均呈负相关(r=-0.767,P<0.01;r=-0.671,P<0.01)。DCLK1基因启动子甲基化状态在口腔鳞癌患者TNM分期、组织分化程度和淋巴结转移方面比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。DCLK1基因启动子甲基化阳性表达患者3年无进展生存率和总生存率均高于阴性表达患者(63.0%vs 43.4%,69.6%vs 47.0%,均P<0.05)。结论DCLK1去甲基化表达异常,与口腔鳞癌临床病理特征相关,影响患者预后。DCLK1去甲基化状态可能通过参与调控DCLK1 mRNA表达和蛋白分泌在肿瘤发生和发展发挥作用。

结直肠癌中c-fos、c-jun的表达及临床意义

结直肠癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一,严重威胁着人类健康。目前认为结直肠癌的发生是一个多基因、多步骤的过程,其中涉及多种癌基因、抑癌基因、错配修复基因以及基因启动子的甲基化等。

胃癌组织中P53及EGFR基因产物的表达

目的探索P53及EGFR基因产物表达与胃癌的关系及其相互关系．方法应用免疫组化技术对40例胃癌标本及对照组中的P53及EGFR基因产物的表达进行分析．结果P53及EGFR基因产物在胃良性病变中均为阴性，而在胃癌中的阳性率分别为52．5％和57．5％．p53基因及EGFR基因产物在高分化腺癌中的表达高于低分化癌（P＜0．05和P＜0．05）；在深度浸润性癌中高于浅表浸润性癌（P＜0．01和P＜0．001）；在伴转移的胃癌中高于无转移者（P＜0．01和P＜0．05）．P53及EGFR基因产物在胃癌中的表达高度相关（r＝0．7482）．结论P53及EGFR基因产物的表达是胃粘膜上皮恶变标志之一，p53基因突变与EGFR基因激活高度同步．

gp96和c-jun在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨糖蛋白96(gp96)和c-jun在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测78例结直肠癌患者术后肿瘤组织及癌旁组织标本中gp96和c-jun的表达。结果 gp96和c-jun在肿瘤组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05)。gp96的表达与肿瘤分化程度、结直肠癌淋巴结转移、侵犯肠壁深度及Dukes分期有关(P<0.05)。c-jun的表达与结直肠癌分化程度有关(P<0.05)。在高分化结直肠癌中gp96和c-jun的表达存在关联(P<0.05)。单因素分析示影响结直肠癌术后总体生存率的因素有肿瘤大小、侵犯肠壁程度、有无淋巴结转移、Dukes分期和gp96的表达状态。结论结直肠癌组织中gp96和c-jun表达显著增高,且在高分化癌中两者可能有协同作用,gp96的表达可判断预后。

大黄提取物对犬肢体枪弹伤后脑神经元c-Jun蛋白表达变化的影响

目的:观察中药大黄治疗后肢体高能量枪弹伤犬脑神经元c-Jun蛋白表达的变化,从分子生物水平上探讨中药大黄治疗肢体火器伤后远达效应的脑保护途径。方法:实验于2001-07/12在解放军第四军医大学西京医院实验外科完成。18只杂种犬,以M-193,5.56mm制式弹射击犬双后肢肌肉丰满处,随机分为对照组、大黄治疗组,每组分伤后2,6,10h3个时间点,每个时间点3只。对照组伤后应用无菌注射用水鼻饲,大黄治疗组应用中药大黄的乙醇及水提液鼻饲,采用免疫组化方法观察两组伤后2,6,10h远隔部位脑组织脑神经元中c-Jun蛋白的表达变化。结果:18只杂种犬均进入结果分析。伤后2,6,10h大黄治疗组脑神经元中c-Jun蛋白显著少于对照组[(8.7±1.2),(14.2±1.7)个/单位面积;(3.7±2.5),(21.6±2.1)个/单位面积;(11.6±1.4),(19.2±1.9)个/单位面积,P<0.01]。结论:中药大黄提取液能够抑制肢体枪弹伤后脑神经元c-Jun蛋白的表达。

大鼠脑震荡后c-jun蛋白表达变化

目的观察实验性大鼠脑震荡后c-jun蛋白的表达变化规律,探索脑震荡后法医病理学的诊断指标。方法将55只大鼠随机分为脑震荡组和对照组。用免疫组织化学SABC法观察大鼠脑震荡后脑内c-jun蛋白表达变化的规律。结果对照组大鼠可见c-jun蛋白的弱阳性表达。脑震荡组损伤后15min可在神经元观察到c-jun蛋白的表达,随着损伤后经过时间的延长,表达c-jun蛋白的细胞数及范围逐渐扩大,损伤后3h表达达高峰。结论c-jun蛋白的检测可作为诊断脑震荡和推断脑震荡后经过时间的一项敏感指标。

siRNA沉默NGAL基因对结肠癌细胞行为的影响

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophils gelatinases-associated lipocalin,NGAL)的基因沉默作用对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法采用转染试剂盒ribo FECTTMCP Transfection Kit负载NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29(转染组),以未转染的HT-29细胞为对照组。实时荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞NGAL mRNA水平和细胞培养上清液中NGAL蛋白水平,采用细胞划痕实验、Promega Cell Proliferation Assay G3580和BD C6流式细胞仪分别检测细胞迁移、增殖和凋亡情况。结果 HT-29细胞转染NGAL siRNA72 h后,转染组NGAL mRNA水平为对照组的0.123(P<0.05);转染48 h后,转染组细胞培养上清液中NGAL蛋白为(0.328±0.055)μg/L,低于对照组的(1.071±0.143)μg/L(t=8.205,P=0.001)。转染48 h后,转染组凋亡率为(18.87±1.65)%,低于对照组的(11.93±1.90)%(t=-4.752,P=0.009)。转染24 h后,转染组细胞迁移率为对照组的(23.35±6.35)%(t=11.930,P<0.01)。转染48 h后,转染组细胞增殖率为对照组的(90.00±5.30)%(t=1.983,P=0.118)。结论 NGAL siRNA可以抑制结肠癌细胞NGAL基因和蛋白的表达,抑制细胞迁移,促进细胞凋亡。

小脑颗粒神经元撤钾凋亡中JNK/c-Jun通路对促凋亡基因Hrk的转录调控

目的研究小脑颗粒神经元(CGNs)撤钾凋亡模型中,BH3-only促凋亡基因Hrk的转录,及JNK/c-Jun通路对Hrk基因转录的调控。方法新生7 d Sprague-Dawley大鼠CGNs在含10%胎牛血清和25 mmol/L KCl培养液中培养。培养第7天,分别用不含胎牛血清的25或5 mmol/L KCl培养液处理2、4、8 h,或5 mmol/L KCl+JNK通路抑制剂处理细胞4 h;或在培养第5天用表达负显性c-Jun突变体的腺病毒载体(Ad-FLAGΔ169)感染CGNs 36 h后,用5mmol/L KCl处理细胞4 h。用RT-PCR方法检测各组CGNs促凋亡基因Hrk mRNA的表达。结果在CGNs撤钾凋亡模型中促凋亡基因Hrk mRNA转录上调;JNK通路抑制剂CEP-11004或SP600125均部分地下调了Hrk的转录;负显性c-Jun突变体抑制了Hrk mRNA的表达。结论在CGNs撤钾凋亡模型中促凋亡基因Hrk转录上调;JNK/c-Jun信号通路介导了Hrk的转录。

胃癌及癌前病变组织中C-erb-B_2蛋白检测的临床意义

目的 :探讨 C- erb- B2 在胃癌前病变、胃癌组织中的表达及对胃癌的发生及其对预后评估的临床价值。方法 :用免疫组化 SP法同步检测 30例轻度慢性浅表性胃炎、35例慢性萎缩性胃炎伴胃粘膜不典型增生、15例肠腺化生及 5 0例胃癌组织切片 ,观察 C- erb- B2 在不同胃粘膜病变中的阳性率。结果 :C- erb- B2 在重度不典型增生、肠腺化生及胃癌组织中均有较高的阳性表达 ,与轻度慢性浅表性胃炎相比 P<0 .0 1,伴淋巴结、肝转移胃癌患者 C- erb- B2 强阳性率明显高于无转移者。结论 :C- erb- B2 与胃癌发生密切相关 ,C- erb- B2 过度表达提示胃癌患者预后不良 ,C- erb- B2 检测在胃癌前病变、胃癌组织中的表达对胃癌的诊断及预后评估具有重要意义。

毛兰素通过JNK/c-Jun信号通路对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用机制研究

目的基于c-Jun氨基末端激酶(JNK)/c-Jun信号通路对氧化应激反应的调控作用,研究毛兰素对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用。方法于2021年10月至2022年2月腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组、毛兰素低剂量组(10 mg/kg)、毛兰素高剂量组(40 mg/kg),及罗格列酮组(1.25 mg/kg)、毛兰素(40 mg/kg)+JNK激活组(5 mg/kg),每组10只,另取正常饲养大鼠10只作为对照组。连续给药6周后,通过血糖仪和胰岛素放射免疫分析试剂盒检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI);天平称取大鼠体质量和肝质量,计算肝脏指数;试剂盒检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肝脏组织病理学变化;western blotting法检测肝脏组织中JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组肝脏指数[(4.26±0.12)g/100 g比(2.24±0.09)g/100 g]、FBG[(21.49±1.78)mmol/L比(5.14±0.45)mmol/L]、FINS[(80.17±6.38)mmol/L比(22.35±2.04)mmol/L]、HOMA-IR[(76.46±6.56)比(5.11±1.12)]、ALT[(138.71±10.21)U/L比(70.29±5.54)U/L]和AST活性[(77.21±5.08)U/L比(40.38±3.27)U/L]、MDA含量[(13.45±1.34)nmol/mg prot比(3.72±0.87)nmol/mg prot]、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高(P<0.05),体质量、ISI[(−7.45±0.18)比(−4.74±0.11)]、SOD[(100.79±11.22)U/mg prot比(223.46±19.86)U/mg prot]和GSH-Px活性[(24.42±1.74)U/mg prot比(56.79±3.18)U/mg prot]明显降低(P<0.05),且肝脏组织病理损伤较为严重;与模型组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素高剂量组和罗格列酮组肝脏指数、FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和AST活性、MDA含量、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显降低(P<0.05),体质量、ISI、SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05),减轻肝脏损伤程度;与毛兰素高剂量组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素+JNK激活组肝脏指数、FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和AST活性、MDA含量、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高(P<0.05),体质量、ISI、SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),肝脏损伤恢复缓慢。结论毛兰素可通过调控JNK/c-Jun信号通路,抑制JNK/c-Jun通路蛋白表达,从而缓解氧化应激反应,改善糖尿病大鼠肝脏损伤。

电针“内关"对急性心肌缺血大鼠心肌c-fos基因表达的影响

目的:探讨电针“内关”改善急性心肌缺血的机制。方法:将96只大鼠随机分为假手术组、心肌缺血模型组、心肌缺血模型加电针组,采用结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血实验模型,造模成功后,电针双侧“内关”。用生化方法检测血清心肌酶活性,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌中c-fos基因的表达。结果:心肌缺血模型组血清心肌酶活性和心肌c-fosmR—NA表达显著高于假手术组(P<0.05),电针后降低,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:电针“内关”改善急性心肌缺血的机制与下调心肌组织c—fosmRNA的表达有关。

胃癌及癌前病变ras P21,P53的表达意义

近年来的研究结果揭示,胃癌的发生是一个涉及多种癌基因、抑癌基因及多阶段累积的复杂过程,其中癌基因rasp21及抑癌基因p53是与胃癌发生有关的癌相关基因。我们采用SP免疫组化法,同步检测ras p21及p53,观察二种基因蛋白产物在胃癌及癌前病变中的表达情况,以探讨ras癌基因及p53基因在胃癌发生中的作用及意义。 1 材料和方法 1.1 材料胃粘膜活检组织经病理诊断的胃癌42例,不典型增生23例,肠上皮化生26例,慢性萎缩性胃炎14例,慢性浅表性胃炎24例,用100mL·L^(-1)福尔马林液固定,常规组织脱水,石蜡包埋,4μm连续切片。鼠抗人ran P21单克隆抗体及鼠抗人P53单克隆抗体均为美国Maxim Biotech公司产品,试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。 1.2 方法应用免疫组化(SP法)染色,测定方法按试剂盒说明书进行。ras P21蛋白阳性表现为细胞质染色呈棕黄色;P53蛋白阳性表现为细胞核染色呈棕黄色至深棕黄色。