CIN和子宫颈鳞癌的HPV16/18感染与p53、MDM2蛋白表达的关系

目的研究子宫颈鳞癌及C IN的HPV感染、p53蛋白和M DM 2蛋白的表达及三者之间的相互关系。方法选取子宫颈鳞癌61例、C IN 47例、正常子宫颈组织54例,分别采用原位杂交技术检测HPV 16/18感染,用免疫组化技术S-P法检测p53蛋白和M DM 2蛋白。结果HPV 16/18感染率鳞癌组为62.3%(38/61),C IN组为70.2%(33/47),对照组为16.7%(9/54)。C IN组和鳞癌组的HPV 16/18的感染率均显著高于对照组(P值均<0.05)。而C IN组与鳞癌组的HPV 16/18感染率差异无显著性(P>0.05)。C IN组、鳞癌组、对照组的p53阳性率分别为19.1%(9/47)、26.2%(16/61)、3.7%(2/54)。C IN组、鳞癌组、对照组的M DM 2阳性率分别为14.9%(7/47)、26.2%(16/61)、7.4%(4/54)。C IN组和鳞癌组的p53阳性率均显著高于对照组(P值均<0.05),C IN组与鳞癌组比较差异无显著性(P>0.05)。M DM 2阳性率鳞癌组显著高于对照组(P<0.05),而在C IN组和鳞癌组之间、C IN组和对照组之间差异均无显著性(P值均>0.05)。在本实验各组中,p53与M DM 2之间的阳性率均无统计学相关(P值均>0.05)。p53阳性率和HPV 16/18感染之间差异无显著性(P值均>0.05),而M DM 2的阳性率与HPV 16/18感染仅在子宫颈鳞癌组呈正相关(P<0.05)。结论C IN及子宫颈鳞癌与HPV 16/18感染关系密切;p53和M DM 2均参与子宫颈癌及癌前病变的发生,但p53的突变、M DM 2的扩增和过表达均不占主导地位。

戊型肝炎病毒开放读码框3蛋白抑制肿瘤坏死因子-α介导肝细胞p65的核转移

目的:研究Ⅰ型和Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框3蛋白(ORF3)对肝细胞系L02核因子-kap-pa B(Nuclear Factor kappa B,NF-κB)通路的影响。方法:分别用未转染质粒、转染Ⅰ型和Ⅳ型ORF3真核表达质粒及空载质粒的L02细胞,48小时后加入TNF(肿瘤坏死因子)-α刺激,采用免疫荧光观察细胞内p65的核转运,并用western blot检测p65蛋白的表达。结果:未转染质粒的L02细胞加入TNF-α刺激后,p65由胞浆转入胞核;转染空载的L02细胞加入TNF-α刺激后,与未转染的L02相似,p65由胞浆转入胞核;表达Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白的细胞,加入TNF-α刺激后,p65未见明显核转移。结论:Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白可抑制TNF-α介导的p65核转移。

非小细胞肺癌组织中NF-kB和c-myc及p73的表达与意义

目的:探讨NF-κB(p65)、c-myc和p73蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及相互关系。方法:用免疫组化二步法检测60例NSCLC组织标本中p65、c-myc和p73蛋白的表达,并进行相关分析。结果:p65、c-myc和p73蛋白在肺癌组织中的表达分别与在肺支气管上皮组织的表达比较差异有统计学意义,P<0.05。p65和c-myc蛋白在淋巴结转移癌组织中的表达与肺支气管上皮组织中的表达差异无统计学意义,P>0.05;p73蛋白在上述两组的表达差异有统计学意义,P<0.05。p65、c-myc和p73蛋白在肺癌高、中与低分化阳性表达的比较,差异均无统计学意义,P>0.05。伴有淋巴结转移的肺癌组织中蛋白阳性表达与无淋巴结转移比较:p65和c-myc差异无统计学意义,P>0.05;p73差异有统计学意义,P<0.05。肺癌组织中p65与c-myc具有相关性,R=0.5514,P<0.01;c-myc与p73具有相关性,R=0.6537,P<0.01;未发现p65与p73有明显相关性,R=0.1735,P>0.05。结论:p65、c-myc和p73表达上调均可能是NSCLC发生的重要因素;在肺癌发生发展中p65与c-myc、c-myc和p73可能在诱导细胞增生与抑制细胞凋亡中起协同作用;p73上调可能促进肺癌的侵袭与转移,可作为肺癌恶化进展及癌转移的动态监控标志。

P21^(ras)、P16在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨癌基因P21^(ras)及抑癌基因P16与大肠癌的关系。方法应用免疫组化SP法分析、研究了P21^(ras)蛋白、P16蛋白在80例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常大肠组织中的表达。结果①P21^(ras)在前二者中的阳性表达率分别为70.1％(57/80)和65％(13/20),明显高于在正常组织中的30％(6/20),其比较具有显著性差异(x^2=17.66、P<0.005;x^2=5.23、P<0.05);P16在大肠癌中的阳性表达率为36.3％(29/80)低于在腺瘤及正常组织中的65％(13/20)和75％(15/20),其比较亦具有显著性差异。②P21^(ras)、P16的阳性表达率在大肠癌患者的年龄、性别及肿瘤大小方面无显著性差异,而与肿瘤的临床Dukes分期(x^2=6.20、P<0.025;x^2=6.25、P<0.05)、有无淋巴结转移及术后5a生存率密切相关。③P21^(ras)在不同的大肠癌组织病理类型中,其表达率无显著性差异;P16的阳性表达率随着肿瘤浸润深度的增加有下降趋势,但无统计学意义。④在80例大肠癌患者中,P21^(ras)阳性而P16阴性者比率高于其他三者,而且这类大肠癌患者的术后5a生存率下降。结论大肠癌的发生、发展,是由包括癌基因、抑癌基因在内的多种因素作用的结果;在临床工作中联合检测P21^(ras)及P16蛋白在大肠癌中的表达水平,对我们估计患者的病情、推测其预后有指导性意义。

Cyclin D_1和p16在青年妇女早期子宫颈鳞癌诊断中的表达及意义

目的探讨Cyclin D1、p16在青年妇女子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia CIN）及子宫颈早期鳞状上皮癌中的表达意义。方法观察Cyclin D1、p16在CINⅠ级40例、CINⅡ及CINⅢ级各20例、早期浸润癌30例的免疫组织化学表达,设立30例正常子宫颈及慢性炎性反应子宫颈上皮作对照组。结果Cyclin D1、p16在正常子宫颈组织中低表达,在CINⅡ~Ⅲ级组和早期浸润癌组中表达升高,且有递增的趋势（P〈0.01）。Cyclin D1在正常子宫颈组与CINⅠ组,CINⅡ组与子宫颈癌组之间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。p16在正常子宫颈组和CINⅡ组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。CINⅠ级组中p16表达亦较低,与子宫颈癌组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。在早期浸润癌中Cyclin D1与p16的表达无明显相关性（P〉0.05）。结论Cyclin D1和p16与CIN及癌变有密切关系,可作为恶性转化的指标之一。

乳腺癌组织中p33^(ING1b)和p^(53)及C-erbB-2表达对预后评估的意义

目的:探讨p33ING1b,p53,原癌基因C-erbB-2在乳腺癌的发生发展中的生物学特征及其对预后评估的意义。方法:应用EVISION免疫组化法,检测了80例乳腺癌标本中C-erbB-2,p33ING1b,p53的表达,及13例癌旁正常组织p33ING1b的表达。结果:乳腺癌组及对照组中p33ING1b均阳性表达,乳腺癌组织中表达犤65%(52/80)犦有明显下降,两组之间差异有显著性意义(χ2=25.138,P<0.01),p33ING1b,p53,C-erbB-2在乳腺癌组织中表达阳性率分别为65%,60%,61%。其中p33ING1b的表达与雌激素受体和孕激素受体水平呈正相关(r=0.371,r=0.537,P<0.05)p33ING1b,p53与肿瘤大小、腋窝淋巴结有无转移呈负相关(r=-2.09,r=-0.537,P<0.05)。C-erbB-2与组织学分级,淋巴结有无转移呈正相关(r=0.371,P<0.05),与雌、孕激素受体水平呈负相关(r=-0.387,r=-0.440,P<0.05)。结论:p33ING1b基因的表达可能需要p53基因的协同,两者共同作用于细胞的生长、凋亡和转化,保证机体发挥正常的功能,抑制肿瘤的发生。ING1是抑癌基因,其蛋白p33ING1b在乳腺癌中低表达,对乳腺癌的发生发展可能起重要作用,p33ING1b,p53,C-erbB-2可作为判断乳腺癌恶性程度及预后的重要指标。

千金藤素调控肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的实验研究

目的探讨千金藤素对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡的影响和机制。方法2020年1—6月,从上海通派生物科技有限公司购入肝癌细胞HepG2,用千金藤素(20µmol/L)处理肝癌细胞HepG2,MTT方法测定增殖活性,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。用NF-κB信号激活剂和千金藤素联合处理肝癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡变化。结果千金藤素处理后的肝癌细胞增殖活性下降,细胞G_(0)/G_(1)期比例[(65.81±3.73)%比(50.61±4.17)%]升高,细胞凋亡率[(13.47±1.58)%比(2.18±0.12)%]升高,细胞中p21、Bax、cleaved-caspase-3蛋白水平升高,cyclin D1蛋白水平下降,NF-κBp65蛋白水平(0.19±0.02比0.36±0.05)降低。NF-κB信号激活剂处理可以提高千金藤素条件下肝癌细胞增殖活性(0.46±0.03比0.35±0.04),减少G_(0)/G_(1)期比例,降低细胞凋亡率,降低细胞中p21、Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达水平,提高细胞中cyclin D1和NF-κBp65蛋白水平。结论千金藤素抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,作用机制与抑制NF-κB信号激活有关。

大鼠脑组织经反复高加速度暴露后bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶的表达(英文)

背景:反复高正加速度(+Gz)暴露可引起脑损伤,但其病理机制尚不清楚。目的:了解反复高正加速度(+Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶基因的表达变化,探讨细胞凋亡在反复高+Gz暴露所致脑损伤中的病理作用。设计:以SD大鼠为研究对象的随机对照实验研究。单位:一所医院的航空医学研究中心。材料:选用体质量为180～220g健康雄性SD大鼠26只,随机分成对照组和+Gz暴露组,其中对照组4只,+Gz暴露组22只。干预:将大鼠固定于动物离心机的转臂上,头朝向离心机轴心,+Gz暴露组条件为G值+14Gz,增长率1.5G/s,峰值持续时间45s,共作用3次,两次中间间歇0.5h。对照组大鼠亦在动物离心机上经历类似实验步骤,所承受的G值为+1Gz。分别于暴露后0.5,6.0,24.0和48.0h断头取脑。用半定量反转录聚合酶链反应方法检测对照组和+Gz暴露后0.5,6.0,24.0和48.0h大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平,并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中凋亡细胞。主要观察指标:各组大鼠+Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平。结果:+Gz重复暴露后6h,大鼠脑组织bcl-2mRNA表达水平(0.32±0.08)明显低于对照组(0.69±0.15),bax,p53和ICEmRNA表达水平犤(.55±0.09),(

睾丸精原细胞瘤中p27^(kip1)、p21^(ras)、p16的表达及其临床意义

目的 探讨 p2 7kip1、p2 1ras、p16在精原细胞瘤中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化 S- P法检测 4 6例精原细胞瘤组织、10例正常睾丸组织 p2 7kip1、p2 1ras、p16蛋白的表达情况。同时用 PCR法检测 2 7例精原细胞瘤组织 p16和 p2 1基因的缺失情况。结果 p2 7kip1在精原细胞瘤组织中的阳性表达率为 4 8.9% (2 2 / 4 5 ) ,显著低于正常睾丸组织的 90 .0 % (P<0 .0 5 ) ,p2 7kip1蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达与淋巴结和远处器官转移相关 (P<0 .0 5 ) ,与组织学分型无关 ;p2 1ras、p16蛋白在精原细胞瘤组织中的阳性表达率分别为 4 2 .2 % (19/ 4 5 )和 6 0 .0 % (2 7/4 5 ) ,与正常睾丸组织比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 p16、p2 1ras蛋白在精原细胞瘤组织中的表达与组织学类型及淋巴结转移无相关性 (P>0 .0 5 )。p2 1基因无纯合子缺失。p16基因纯合子缺失率为 4 4 .4 % (12 / 2 7) ,其缺失率与精原细胞瘤的组织学类型、淋巴结和远处器官转移无关。p2 7kip1、p2 1ras及 p16阳性表达率之间有相关性 (P<0 .0 5 )。结论 p2 7kip1蛋白的低表达或缺失可能与精原细胞瘤的发生、浸润转移有关 ,可作为估计精原细胞瘤预后的良好指标。 p16基因的缺失和表达下降可能是精原细胞瘤发生的早期事件。

p65和nm23-H1在喉癌中的表达及意义

目的探讨p65和nm23-H1蛋白在喉癌组织中的表达及临床意义。方法在正常喉黏膜组织11例、喉癌40例患者的标本中,用免疫组织化学二步法检测p65和nm23-H1蛋白的表达,并将结果进行相关分析。结果 p65在喉癌组织中的表达比正常喉黏膜组织的表达高,差异有统计学意义(P<0.01);nm23-H1蛋白在淋巴结转移癌组织中的表达比正常喉黏膜组织中的表达低,差异有统计学意义(P>0.05);nm23-H1蛋白在喉癌高和中分化组比低分化组阳性表达高,差异有统计学意义(P<0.01);伴有淋巴结转移的喉癌组织比无淋巴结转移的喉癌组织nm23-H1蛋白阳性表达低,差异有统计学意义(P<0.01);喉癌中p65与nm23-H1蛋白的表达未发现相关性(P>0.05)。结论 p65在喉癌组织中表达上调,提示可能通过抑制喉癌细胞凋亡,对喉癌的发生和发展起重要促进作用;nm23-H1蛋白在伴转移的喉癌组织和淋巴结转移癌组织中的表达降低,提示nm23基因参与喉癌的浸润和转移。

丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对肝癌细胞c—myc和p53蛋白表达的影响

目的 探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白4B（HCV-NS4B）对c-myc和p53蛋白在肝癌细胞表达的影响.方法 采用构建好的HCV-NS4B表达载体,以脂质体转染法转染HepG2细胞.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,琼脂糖凝胶电泳证实HCV-NS4B在HepG2细胞稳定表达.随后采用细胞免疫化学法半定量分析c-myc和p53蛋白在HepG2细胞的表达.结果 转染HCV-NS4B后,NS4B转染组c-myc平均光密度值为0.53±0.17,较空白对照组及空白载体组显著升高（P＜0.05）.NS4B转染组p53蛋白平均光密度值为0.28 ±0.13,较空白对照组及空白载体组显著下降（P＜0.05）.结论 HCV-NS4B可诱导肝癌细胞中c-myc/p53失衡,促进细胞增殖,与肝癌发生有关.

乳腺癌中组蛋白乙酰化与p21^WAF1的表达研究

目的探讨乳腺癌中乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1的表达变化及其意义。方法采用HE染色鉴定乳腺癌的病理形态变化；应用免疫组织化学法检测p21^WAF1在80例乳腺癌组织与80例正常乳腺组织中的表达；免疫印迹法检测乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1蛋自在80例乳腺癌组织及80例正常乳腺组织中的表达。结果·HE染色可见，与正常的乳腺组织相比，乳腺癌组织结构及细胞形态有明显的异型性。免疫组化结果显示：p21^WAF1。在80例乳腺癌组织中有49例阳性表达（61．25％）；而80例正常乳腺组织中只有3例弱阳性表达（3．75％），两种组织中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫印迹法结果表明，p21^WAF1蛋白在乳腺癌中的表达高于正常组织，乳腺癌组为0．78±0．095、正常乳腺组为0．65±0．055；乙酰化的组蛋白H3、H4在正常乳腺组织中的表达比乳腺癌组织高，其中乙酰化的组蛋白H3正常乳腺组为2．35±0．340、乳腺癌组为1．07±0．067，乙酰化的组蛋白H4正常乳腺组为3．44±0．202、乳腺癌组为1．11±0．086，两者表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论组蛋白乙酰化与p21^WAF1蛋白的表达变化与乳腺癌的发生发展有关。

NF-κB/p65在鼻NK／T淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨NF-κB／p6S在鼻NK／T淋巴瘤表达及其与细胞凋亡和预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法和TUNEL法，检测23例鼻NK／T淋巴瘤和14例良性淋巴结病变中NF-κB／p6S的表达水平和细胞凋亡。结果NF-κB／p65在鼻NK／T淋巴瘤表达的阳性率为43．5％（10／23）；凋亡指数与NF-κB／p65呈负相关（r=-0．631，P〈0．05）。NF-κB/p65阳性表达者的平均生存时间明显短于阴性者（P〈0．05）。结论NF-κB／p65表达而引起的凋亡抑制可能在鼻NK／T淋巴瘤的发生发展中有重要作用并可作为预后不良的参考指标。

儿童小脑髓母细胞瘤几种标记物的免疫组化表达分析

目的 :研究儿童髓母细胞瘤的组织发生和Ki67、p5 3、C erbB 2与其发生及预后的关系。方法 :采用SP免疫组化法检测 7例正常小脑、2 2例髓母细胞瘤Ki67、p5 3、C erbB 2、GFAP和NSE的表达。结果 :髓母细胞瘤中GFAP、NSE表达率分别为 45 5 %、5 9 1%。髓母细胞瘤中Ki67、p5 3和C erbB 2的表达率显著高于正常小脑 ,P <0 0 5。未分化组、经典型、肿瘤直径 >5cm组髓母细胞瘤Ki67、p5 3高表达 ,P <0 0 5 ;C erbB 2则与肿瘤坏死和肿瘤大小有关 ,P <0 0 5。结论 :髓母细胞瘤起源于原始神经外胚叶组织 ,具有双向分化潜能。Ki67、p5 3和C erbB

p21和p53在肾间质纤维化大鼠中表达的研究

目的动态观察p21和p53在单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠模型中的表达，以及依那普利对其表达的调节。方法将SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）、单侧输尿管结扎组（UUO组）和依那普利治疗组（EnT组），每组30只。用Masson染色的方法动态观察梗阻侧肾脏病理变化，用RT—PCR的方法检测梗阻肾皮质p21mRNA和p53mRNA的变化；并观察依那普利对肾皮质p21和p53表达的调节。结果在UUO大鼠模型早期，肾皮质p21mRNA和p53mRNA的表达即有明显增高，随着梗阻时间的延长，p21和p53的表达逐渐增强，二者具备相关性；依那普利能明显抑制p21和p53的表达。结论p21和p53在UUO大鼠肾皮质呈高表达，依那普利可抑制其表达。p21可能通过p53参与介导了。肾小管间质纤维化的发病过程。