甲状腺乳头状癌p53基因突变及其与p21^(WAF1/CIP1)蛋白定量表达的关系

目的 初步探讨甲状腺乳头状癌 (PTC)中 p5 3基因突变及其与 p2 1WAF1 /CIP1 蛋白定量表达的关系。 方法 采用 PCR- SSCP、DNA序列分析、免疫组织化学、图像分析等技术 ,检测 4 1例 PTC和 10例甲状腺滤泡性腺瘤标本组织中 p5 3基因突变情况和 p2 1蛋白染色状况。 结果 (1)伴 p5 3基因突变 ( 组 )和不伴突变 ( 组 ) PTC的原发肿瘤 (T)、淋巴结转移 (N)及远处转移 (M)差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 、 和 之间 , 和 、 和 、 和 的平均积分光密度值 (D)差异具有显著性意义 (P<0 .0 1)。 结论 (1) PTC的演进和 p5 3基因突变与否无直接关系 ,p5 3蛋白的空间构象可能发挥关键作用。 (2 )在 PTC的发生、发展中存在依赖野生型 p5 3蛋白诱导P2 1WAF 1

p21 ras蛋白表达在胰腺癌中的临床意义

为探讨癌蛋白p2 1ras在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌的临床和病理特征的关系 ,笔者采用 p2 1ras的单克隆抗体和免疫组织化学EnVision方法分别检测石蜡包埋的 3 7例胰腺癌、17例胰腺癌远处淋巴结转移组织、5例正常胰腺组织共 5 9例标本中的p2 1ras蛋白表达情况 ,所有被检标本均经病理诊断证实。结果 :胰腺癌中 ,p2 1ras蛋白在胰腺癌中的表达率为 78.3 8% (2 9/3 7) ;胰腺癌远处淋巴结转移组织中的表达率为 47.0 6% (8/17) ;正常胰腺中未发现该蛋白表达。胰腺癌患者年龄、性别、症状、肿块大小、肿瘤部位、病理分级、临床分期和淋巴结转移各因素之间p2 1ras蛋白表达率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。提示用免疫组织化学方法检测 p2 1ras蛋白是了解胰腺癌中K ras基因改变的非常敏感、特异的方法。该蛋白的检测有助于胰腺癌诊断。

肾癌组织中ras基因产物p21表达和K－ras基因点突变分析

目的研究ｒａｓ基因激活在肾癌发生中的意义。方法应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和免疫组织化学检测肾癌组织Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变及其基因产物ｐ２１蛋白的表达水平。结果４２例肾癌中６例Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变，１９例ｐ２１蛋白阳性表达，正常肾组织和癌旁组织均阴性。ｐ２１表达与肿瘤分期和分级有关。ｐ２１阳性患者的手术后生存率明显低于ｐ２１阴性患者。结论肾癌Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变并不常见，ｐ２１表达可能成为肾癌恶性程度和预后评价的指标。

雌激素受体α、β及细胞周期蛋白D1、癌基因蛋白质P21在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的探讨雌激素受体α(ERα)、β(ERβ)及细胞周期调控因子CyclinD1、P21在子宫内膜癌组织中的蛋白表达水平及相关的临床意义。方法选取徐州市中心医院2016年1月至2017年12月65例子宫内膜癌组织、30例子宫内膜不典型增生组织以及30例正常子宫内膜组织,利用免疫组织化学染色检测各组组织中ERα、ERβ、CyclinD1和P21的蛋白表达水平。结果ERα、ERβ、CyclinD1和P21蛋白在子宫内膜癌(47.69%、32.31%、76.92%、49.23%)、子宫内膜不典型增生(90.00%、46.67%、43.33%、66.67%)和正常子宫内膜(73.33%、63.33%、13.33%、96.67%)三组间的阳性表达率均差异有统计学意义(P<0.05)。ERα在子宫内膜不典型增生组织中阳性表达率最高,ERβ和P21在正常子宫内膜组织中阳性表达率最高,CyclinD1在子宫内膜癌组织中阳性表达率最高。在子宫内膜癌组织中,ERα在Ⅲ?Ⅳ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2以及有淋巴结转移的组织中阳性表达率降低(P<0.05);ERβ在Ⅲ?Ⅳ期组织中的阳性表达率低于Ⅰ?Ⅱ期病人(P<0.05);CyclinD1在低分化和肌层浸润深度≥1/2的组织中具有较高的阳性表达率(P<0.05);而P21在Ⅰ?Ⅱ期、高中分化以及肌层浸润深度<1/2的组织中具有较高的阳性表达率。结论ERα和ERβ可能在子宫内膜癌形成及进展过程中发挥不同的作用,CyclinD1在子宫内膜癌中可能发挥促进癌症形成及进展的作用,P21在子宫内膜癌中则可能发挥抑制癌症形成及进展的作用。

胰腺癌组织中p21ras蛋白表达与微血管密度的关系及其临床意义

目的检测胰腺癌组织中p21ras蛋白的表达及微血管密度(MVD)计数,探讨两者的关系及其临床意义。方法选择病理证实为胰腺导管腺癌的48例患者的石蜡切块标本,应用EnVision显色系统免疫组织化学方法进行p21ras蛋白检测和MVD计数。结果p21ras蛋白表达率胰腺癌组织为60·41%,癌旁组织为37·5%(P<0·05)。MVD计数p21ras表达阳性组为22·207±5·815,p21ras阴性组为18·053±5·502(t=3·597,P<0·01)。结论胰腺癌组织中p21ras的表达与MVD计数相关,提示ras基因突变可能促进肿瘤微血管的形成。

肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和CDK4蛋白的影响

目的检测肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和细胞周期依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)蛋白表达的影响。方法肉桂醛(3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10 g/L)作用肝癌HepG2细胞后,MTT比色法检测HepG2细胞增殖活性和半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。流式细胞术检测肉桂醛对HepG2细胞凋亡影响。免疫荧光法检测HepG2细胞p21和CDK4蛋白的表达。结果肉桂醛能抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性,24小时、48小时和72小时IC_(50)值分别为0.68、0.45、0.35 g/L(P<0.01)。肉桂醛组(0.900、0.450、0.225 g/L)肝癌HepG2细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。肉桂醛能增加p21蛋白和降低CDK4蛋白在HepG2细胞中的表达,各浓度肉桂醛组的p21、CDK4蛋白表达与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论肉桂醛可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,可能与调节p21和CDK4的蛋白表达有关。

PTEN、p21基因在新疆哈萨克族食管癌中的表达

目的研究PTEN、p21基因在哈萨克族食管癌中的表达。方法采用RT-PCR法检测PTEN、p21基因在48例哈萨克族食管癌组织及远端无癌组织中的表达,并分析其表达与肿瘤分化、TNM分期、临床分期、淋巴结转移的关系。结果 PTEN基因在癌组织和远端无癌组织中的表达阳性率分别为75%、45.8%,癌组织高于远端无癌组织(χ2=8.537,P<0.05);p21基因在癌组织和远端无癌组织中表达的阳性率分别为95.8%、97.9%,差异无统计学意义(χ2=0.344,P>0.05)。PTEN和p21表达与食管癌分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移均无相关性。结论 PTEN、p21基因可能均不是哈萨克族食管癌的主要致病基因。

P21基因rsi059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌发病风险相关性

【目的】研究 p21基因 rs1059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌之间的相关性。【方法】通过测序及PCR-RFLP方法，对263例子宫内膜癌患者（观察组）及315例健康人群（对照组）的外周血DNA的 p21基因 rs1059234位点进行基因型分型，并分析分型与子宫内膜癌之间的相关性。【结果】观察组中 rs1059234位点C等位基因频率较对照组明显升高（P ＝0．039）。rs1059234位点 CC基因型频率在观察组中与对照组相比呈明显升高趋势（0．335vs 0．219，P＝0．045），CC基因型增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．589，95％ CI：1．010～2．502），但是经回归分析校正后，CC 基因型并不增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．623，95％ CI：0．720～3．659，P＝0．243）。【结论】在东北地区汉族女性中，p21基因 rs1059234位点的多态性与子宫内膜癌的发生风险无明显关联。

甲状腺乳头状癌中p21ras蛋白、转化生长因子β_1和ki-67的表达

目的 观察 p2 1ras蛋白、转化生长因子 (TGF)β1 和 ki- 6 7在甲状腺良恶性乳头状增生性疾病中的表达情况 ,探讨它们的表达对甲状腺乳头状癌 (PTC)发病机制的意义。 方法 采用免疫组织化学的方法对 10 3例PTC、5 7例良性乳头状增生性疾病 (包括 2 7例滤泡性腺瘤和 30例甲状腺肿组织 )进行 p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7表达的检测。 结果 (1) p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7在 PTC组中的表达显著高于滤泡性腺瘤组、甲状腺肿组及癌旁正常甲状腺组织 (P<0 .0 1)。 (2 ) PTC组中 ,p2 1ras蛋白、TGFβ1 和 ki- 6 7的表达在晚期患者、伴淋巴结转移的患者中分别显著高于早期患者、无淋巴结转移的患者 (P<0 .0 1)。 结论 在 PTC的发生、发展过程中 ,p2 1ras蛋白和 TGFβ1 的高表达起了重要的作用 ,它们共同促进 PTC的生长、浸润和转移。ki- 6 7能较可靠地反映细胞的增殖活性 ,可作为甲状腺良恶性乳头状增生性疾病的鉴别诊断及

男性乳腺癌雌、孕激素受体和癌基因P_(21)、P_(53)的表达及意义

目的研究雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及癌基因P21、P53在男性乳腺癌中的表达及与临床分期、病理分级及生存期的关系。方法对33例男性乳腺癌(MBC)组织用免疫组化法进行ER、PR及癌基因P21和P53的检测。结果MBC的ER、PR、P21和P53阳性率分别为57.6%(19/33)、51.5%(17/33)、84.8%(28/33)和34.6%(12/33);男性乳腺增生症的P21和P53均无阳性表达;MBC的ER和PR同时表达率51.5%(17/33);P21和P53同时表达率30.3%(10/33)。结论MBC的ER和PR表达率与其病理分级和生存期有关(分别P<0.01、P<0.05),P21高表达者生存期短,死亡率高。

P21蛋白和生存素在美伐他汀诱导人非小细胞肺癌凋亡中的作用

目的研究P21蛋白和生存素(survivin)在美伐他汀诱导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法应用MTT法检测美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的抑制作用,应用流式细胞仪、透射电镜研究美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,应用流式细胞仪和RT-PCR检测P21蛋白、P21mRNA、生存素mRNA的表达。结果MTT试验表明美伐他汀对A549、NCI-H520增殖有明显的抑制作用;流式细胞仪检测显示美伐他汀诱导A549、NCI-H520细胞G0/G1期阻滞;AnnexinV结果证实美伐他汀可诱导A549、NCI-H520细胞凋亡,而且凋亡率随剂量的增加而增加。美伐他汀对A549、NCI-H520细胞P21mRNA及P21总蛋白的表达无影响,但可使P21胞膜蛋白的表达下降。美伐他汀作用后生存素mRNA表达下降。加入甲羟戊酸可完全逆转美伐他汀的上述作用。结论美伐他汀通过甲羟戊酸途径诱导NSCLCG0/G1期阻滞,抑制增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制P21蛋白异戊二烯化和下调生存素mRNA表达有关。

浅谈抑癌基因p21与大肠癌

大肠癌为消化道常见的恶性肿瘤之一。其发病率和病死率在我国排名三、四位。大肠癌的发生是一个涉及多基因、多因素、多阶段致癌的复杂过程,抑癌基因的异常在大肠癌的发生发展中起重要作用。抑癌基因点突变、重组、

反义p21^(WAF1/CIP1)基因转染对肾癌细胞凋亡抑制作用的影响

目的 探讨 p2 1WAF 1 /CIP1基因在顺铂诱导的 GRC- 1肾癌细胞凋亡过程中的作用 .方法 使用脂质体转染方法将正义 p2 1WAF 1 /CIP1基因及反义 p2 1WAF 1 /CIP1基因分别导入 GRC- 1肾癌细胞系中 ,对所获转染细胞进行形态学观察和流式细胞仪检测 .结果 在正义 p2 1WAF 1 /CIP1基因转染后 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导细胞凋亡的作用增强 ;在反义 p2 1WAF 1 /CIP1基因转染后 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导细胞凋亡的作用受到抑制 .结论 在 GRC- 1肾癌细胞中 ,顺铂诱导的细胞凋亡至少部分是通过 p2 1WAF 1 /CIP1基因发挥作用 .p2 1WAF 1

氧自由基对胃癌细胞MGC-803的P53、P21ras蛋白表达的影响

目的:观察氧自由基对人胃癌细胞系MGC-803细胞的P53、P21ras蛋白表达的影响,探讨氧自由基在胃癌发生发展中的作用。方法:通过细胞培养、采用硫代巴比妥酸反应物质法检测细胞内氧自由基中间产物丙二醛(MDA)的含量,应用免疫组织化学技术检测MGC-803细胞内不同浓度的氧自由基对P53、P21ras蛋白表达的影响。结果:氧自由基含量升高可增强MGC-803细胞内P53、P21ras蛋白表达(P<0.01),氧自由基水平降低则P53、P21ras蛋白表达减弱(P<0.01)。结论:胃癌细胞系MGC-803内氧自由基水平的改变可影响其P53、P21ras蛋白表达。

肝细胞肝癌中脆性组氨酸三联体和p21蛋白的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白和p21蛋白的表达及临床意义。方法:用Western blot方法检测36例HCC、32例癌旁和14例正常肝组织中FHIT蛋白和p21蛋白的表达,并结合临床病理指标进行分析。结果:FHIT蛋白在HCC中的表达(0.934±0.622)低于癌旁(2.298±1.050)和正常对照组(2.457±0.958),差异有统计学意义(P<0.01);p21蛋白在HCC中的表达(2.604±0.316)高于癌旁(1.241±0.547)和正常对照组(1.056±0.186),差异有统计学意义(P<0.05)。在高、中、低分化HCC中FHIT蛋白表达逐渐减低;而p21蛋白在上述组织中表达逐渐增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。门静脉癌栓组中FHIT表达低于无门静脉癌栓组;p21在门静脉癌栓组中表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。在HCC中FHIT和p21的表达呈负相关(r=-0.329,P=0.027)。结论:FHIT的低表达与p21高表达和HCC的病理分型和侵袭转移有关,FHIT基因的突变或缺失可能通过上调p21基因的转录而导致恶性肿瘤的发生。

雌、孕激素受体和p53,p21蛋白在胆囊癌中的表达及其相互关系

目的 探讨雌激素受体 (ER) ,孕激素受体 (PR)和 p5 3,p2 1在胆囊癌的发生发展中的生物学意义及其相互关系。 方法 采用即用型一抗加nvision微波加热免疫组化法对 12例胆囊癌进行ER ,PR和 p5 3,p2 1表达及分析。 结果 ( 1)胆囊癌细胞内存在ER ,PR ,其阳性表达率分别为 83.3%和 75 .0 % ;( 2 )胆囊癌p5 3,p2 1阳性表达率均为 6 6 .6 % ,ER ,PR与p5 3,p2 1阳性表达一致率为5 8.3% ;( 3)癌细胞分化越差、浸润越深 ,ER ,PR和 p5 3,p2 1阳性表达率越高。 结论 ER ,PR和 p5 3,p2 1阳性表达与胆囊癌的分化程度和浸润深度有关 ,这对运用内分泌治疗的疗效观察及预后判断有重要意义。ER ,PR过度表达可能会诱发 p5 3,p2 1基因突变 。

重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)对胃癌细胞HGC27生长抑制作用的研究

目的:了解重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)对胃癌细胞株HGC27的作用,为进一步研究p21wif1的生物学作用以及肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:采用RT-PCR技术,构建表达p21蛋白的重组细小病毒H-1(rhH1△/p21),并将其转染胃癌细胞HGC27,观察细胞形态学改变,用Western blot检测转移基因蛋白在胃癌细胞中的表达,用MTT法检测其对HGC27细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析其对细胞周期的影响。结果:成功构建重组细小病毒H-1(rhH1△/p21),所得病毒滴度达到3.5×107PFU/mL,在胃癌HGC27细胞中成功过表达转移基因蛋白p21,使胃癌细胞株细胞周期比例改变,G1期含量明显增加,并抑制其增殖。结论:重组细小病毒H-1(rhH1△/p21)可诱导胃癌细胞株HGC27细胞G1期阻滞,抑制细胞增殖,该基因疗法可有效抑制体外胃癌细胞的生长。。

p53,p21在乳癌中的表达及意义

目的 探讨p5 3 ,p2 1蛋白在乳癌中表达的临床意义。方法 用免疫组化SP法对 2 0例癌旁乳腺组织和 6 9例乳癌组织中p5 3和p2 1蛋白进行半定量检测。结果 癌旁乳腺组织中p5 3和p2 1表达阴性 ;乳腺癌组织中p5 3和p2 1阳性率分别为 47.8%和 43 .5 % ;随细胞分化程度降低 ;p5 3表达阳性率明显升高 ,p2 1表达的阳性率明显降低。p2 1表达的阳性率在有、无淋巴结转移组差异显著 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性、p2 1阴性组术后 5年无瘤生存率明显低于p5 3阴性、p2 1阳性组 (P <0 .0 5 ) ;在乳癌组织中p2 1表达与p5 3明显相关(P <0 .0 5 )。结论 p5 3和p2

肺癌组织中癌基因ras和c-myc蛋白产物的免疫组织化学研究

目的］探讨肺癌组织中癌基因ｒａｓ和ｃｍｙｃ蛋白产物Ｐ２１，Ｐ６２表达特征以及临床病理意义．［方法］应用免疫组织化学方法（ＳＰ法）检测６９例肺癌组织标本中Ｐ２１和Ｐ６２蛋白表达．［结果］Ｐ２１和Ｐ６２在肺癌中的阳性表达率分别为６８％，７１％；在肺癌癌旁支气管粘膜和腺体中的阳性表达率分别为１８％和２９％，与肿瘤区相比较差异非常显著．Ｐ２１和Ｐ６２蛋白之间的阳性率无统计学差异．６９例肺癌中２１例（３０％）同时有Ｐ２１和Ｐ６２共同表达．肺腺癌Ｐ２１蛋白表达高于肺鳞癌．Ｐ２１和Ｐ６２蛋白表达与肺癌病人性别、年龄、肿瘤分期及肺癌分化程度无关．［结论］ｒａｓ和ｃｍｙｃ癌基因突变是肺癌的早期事件。

胃癌及癌前病变ras P21,P53的表达意义

近年来的研究结果揭示,胃癌的发生是一个涉及多种癌基因、抑癌基因及多阶段累积的复杂过程,其中癌基因rasp21及抑癌基因p53是与胃癌发生有关的癌相关基因。我们采用SP免疫组化法,同步检测ras p21及p53,观察二种基因蛋白产物在胃癌及癌前病变中的表达情况,以探讨ras癌基因及p53基因在胃癌发生中的作用及意义。 1 材料和方法 1.1 材料胃粘膜活检组织经病理诊断的胃癌42例,不典型增生23例,肠上皮化生26例,慢性萎缩性胃炎14例,慢性浅表性胃炎24例,用100mL·L^(-1)福尔马林液固定,常规组织脱水,石蜡包埋,4μm连续切片。鼠抗人ran P21单克隆抗体及鼠抗人P53单克隆抗体均为美国Maxim Biotech公司产品,试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。 1.2 方法应用免疫组化(SP法)染色,测定方法按试剂盒说明书进行。ras P21蛋白阳性表现为细胞质染色呈棕黄色;P53蛋白阳性表现为细胞核染色呈棕黄色至深棕黄色。