穴位注射疗法对脊髓损伤大鼠原癌基因Bcl-2表达的影响

目的探讨穴位注射疗法治疗脊髓损伤的机制。方法采用改良的Allen’s造模方法复制大鼠脊髓损伤模型,随机分为正常对照组、模型组、甲基强的松龙治疗组和穴位注射治疗组。应用免疫组织化学方法和图像定量分析法检测脊髓损伤早期原癌基因Bcl-2免疫阳性细胞的表达。结果治疗7天后,穴位注射治疗组和甲基强的松龙治疗组的脊髓损伤组织中原癌基因Bcl-2的表达明显优于模型组(P<0.01),而以上两组比较无差异(P>0.05)。结论本实验提示脊髓损伤早期采用穴位注射疗法可以上调原癌基因Bcl-2的表达,提高Bcl-2免疫阳性细胞数,对脊髓损伤早期细胞凋亡具有一定的抑制作用,能够促进神经损伤的修复。

子宫内膜癌bcl-2癌基因的持续性表达及其临床意义

目的：研究子宫内膜癌ｂｃｌ－２癌基因的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法检测增生期、分泌期、单纯型增生、复合型增生及不典型增生子宫内膜共２６份，子宫内膜癌４９例的ｂｃｌ－２癌基因蛋白表达及雌、孕激素受体（ＥＲ、ＰＲ）的表达。结果：正常增生期子宫内膜、增生的子宫内膜存在ｂｃｌ－２的表达，与ＥＲ相关，分泌期子宫内膜ｂｃｌ－２表达下降；４９例子宫内膜癌中２６例ｂｃｌ－２表达阳性，占５３％，２９例ＥＲ表达阳性，占５９％，２５例ＰＲ表达阳性，占５１％。７２％ｂｃｌ－２表达阳性者ＥＲ阳性，７５％ｂｃｌ－２表达阴性者ＥＲ阴性（Ｐ＜０．０１）。６８％ｂｃｌ－２表达阳性者ＰＲ阳性，６２％ｂｃｌ－２阴性者ＰＲ阴性（Ｐ＜０．０５）。子宫内膜癌Ｇ１、Ｇ２级ｂｃｌ－２的表达率为６６％，显著高于Ｇ３级者（２１％）（Ｐ＜０．０５）。ｂｃｌ－２的表达与肌层浸润、手术分期无关，ｂｃｌ－２表达阳性及阴性者生存率统计差异无显著性。结论：子宫内膜ｂｃｌ－２的持续性表达与卵巢激素相互作用可能在子宫内膜癌发生。

癌基因bcL—2在非何杰金淋巴瘤的瘤组织、骨髓及外周血中的表达及其与临床的相关性研究

本文采用多聚酶链反应(PCR)的方法检测了21例非何杰金淋巴瘤病人的瘤组织16份,骨髓26份和外周血25份中的癌基因bcl—2mRNA,并对bcl—2的阳性表达与病人的临床特征进行了相关性研究。结果:疗前9例细胞淋巴瘤的5份肿瘤组织、骨髓和外周血各9份中bcl—2均阴性。疗前11例B细胞淋巴瘤的肿瘤组织中7例阳性(63.6％),其中5例滤泡型4例阳性(80％);6例弥漫型3例阳性(50％);12例骨髓中5例阳性(41.7％),滤泡型和弥漫型的阳性率分别为40％(2/5)和42.9％(3/7),疗前12例外周血4例bcl—2阳性(33.3％),滤泡型和弥漫型的阳性率分别为20％(1/5)和42.9(3/7);对疗前阳性骨髓5例和外周血4例化疗后复查骨髓和外周血各有2例阴转,其余仍呈阴性表达。通过与临床特征的相关比较表明肿瘤组织中bcl—2mRNA阳性表达与临床分Ⅰ期及疗效间无明显相关性(P>0.05),骨髓和外周血的阳性率与临床分期偏晚有关(P<0.05)。结论:结合文献,本文提示,癌基因bcl—2可作为B细胞淋巴瘤的分子标记物,尤其是滤泡型,对早期诊断有意义,通过对B细胞淋巴瘤的骨髓及外周血的bcl—2检测,可能对分期和疗效监测有重要意义。

前列腺增生组织细胞凋亡及bcl-2癌基因表达的作用与前瞻性研究

目的探讨检测良性前列腺增生组织中细胞凋亡和增殖变化,研究与相关癌基因表达的关系。方法采用脱氧核苷酸末端转移生物素标记脱氧尿嘧啶和mRNA原位杂交方法,对30例良性前列腺增生患者的前列腺组织病理染色,观察凋亡细胞和bcl-2癌基因表达的分布状况。结果在前列腺增生组织中,大量的凋亡细胞为腺上皮细胞,bcl-2mRNA高达表在增殖的间质中。结论良性前列腺增生组织腺上皮细胞凋亡增加,这种凋亡的腺上皮细胞增多和间质增生提示可能与bcl-2癌基因表达有一定关系。

EB病毒早期基因BHRF1—Bcl-2的病毒性同源基因

BHRF1是近年来得到确认的EBV新的致癌基因,在结构上和功能上与细胞原癌基因Bcl-2相似,属Bcl-2家族成员。由于其抑制细胞凋亡和细胞转化作用而受到广泛关注,本文就BHRF1的作用特点、与bcl-2的关系以及应用前景作一综述。

内皮抑素对裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的通过内皮抑素对裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2、Bax表达影响的实验研究,探讨内皮抑素可能的作用机制。方法建立人乳腺癌裸鼠模型。接种乳腺癌细胞悬液后第1周于种植部位皮下注射内皮抑素,隔天1次,共用7周。第8周颈椎脱位处死裸鼠,完整剥离肿瘤,检测肿瘤细胞Bcl-2表达、Bax表达。结果对照组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组肿瘤细胞的Bcl-2表达度分别为(0.90±0.10)、(0.70±0.21)、(0.41±0.09),以上各项数据,组间差异有显著性(P<0.05);Bax表达度分别为(0.51±0.10)、(0.53±0.10)、(0.55±0.09),组间数据无统计学意义(P>0.05)。从以上数据看出内皮抑素下调裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2表达,对Bax表达无影响,从而改变凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax在肿瘤细胞的比例促进肿瘤细胞凋亡。结论内皮抑素促进乳腺癌细胞凋亡的分子机制之一是下调肿瘤细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。

bcl-2基因在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨星形细胞瘤组织中bcl-2基因表达情况及其与肿瘤细胞凋亡的相关关系。方法:采用免疫组织化学SABC法和原位末端标记的TUNEL技术分别检测了60例患者星形细胞瘤组织中bcl-2基因的表达情况和凋亡细胞密度。结果:60例患者的肿瘤组织中bcl-2基因表达阳性率为50%,不同恶性级别的肿瘤之间差异不显著(P>0.05),但其表达强度在不同级别肿瘤之间却有显著差异(P<0.05),高度恶性肿瘤bcl-2基因表达较强;随着星形细胞瘤恶性程度的升高其细胞密度呈逐渐降低趋势,其中星形细胞瘤组织中凋亡细胞密度显著高于胶质母细胞瘤(P<0.01),并且凋亡细胞密度与bcl-2基因表达强度呈显著负相关(r=-0.992,P<0.01)。结论:星形细胞瘤组织中bcl-2基因高度表达可能是细胞凋亡受抑的重要原因,bcl-2基因表达上调可能对肿瘤的生长及进一步间变起着关键作用。

53例原发于皮肤滤泡中心淋巴瘤BCL-2基因重排的诊断与预后意义

t（14；18）（q32；q21）易位是淋巴结滤泡性淋巴瘤的特征性改变，其中BCL-2原癌基因与免疫球蛋白重链（IgH）之间的相互易位，导致BCL-2蛋白的过表达。

胃癌前病变癌基因与浊毒的相关性研究

目的:探讨大鼠胃癌前病变与浊毒相关研究,制造浊毒症模型,寻找浊毒的致病机理,为浊毒理论临床研究提供实验依据。方法:清洁级5周龄健康雄性Wistar大鼠30只,采用随机数字表法分为3组:正常对照组(A组)、湿热胃癌前病变组(B组),模拟浊毒胃癌前病变组(C组)。对照组正常喂养,另两组采用高糖加辛辣刺激食物综合造模,并每日自由饮用200μg/mL的MNNG(塑料瓶用黑色塑料袋严密包裹避光)溶液,并且采用0.03 g/mL的雷尼替丁溶液灌胃,制造胃癌前病变湿热证和模拟浊毒证型。分别测定各组大鼠肛温变化及Bcl-2、c-erbB-2、c-myc 3种癌基因的前后阳性表达率。结果:第1周各组大鼠肛温波动差别不明显,与A组比较差异不明显(P>0.05),8周后造模组与A组比较肛温均升高(P<0.05),10周后C组与B组比较,肛温较B组升高,差异有显著性(P<0.05)。3种癌基因Bcl-2、c-erbB-2、c-myc的阳性表达率与A组比较均明显升高(P<0.01),C组较B组升高(P<0.05)。结论:胃癌前病变大鼠癌基因的阳性表达率升高与浊毒的形成成正比关系。

热休克蛋白70、NF-κB和Bcl-2的表达与人乳头瘤病毒感染的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子NF-κB和癌基因Bcl-2分别在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达,以及与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织、24例尖锐湿疣组织和26例正常宫颈组织进行HSP70、NF-κB和Bcl-2基因蛋白检测;用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行了检测。结果:HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.05);宫颈癌组HPV和HPV16/18的检出率显著高于正常对照组,尖锐湿疣组HPV和HPV6/11的检出率显著高于正常对照组(P<0.05);HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在HPV阳性组中的表达率显著高于阴性组(P<0.05),但它们的表达率在高危型和低危型的HPV感染组间差异无显著性(P>0.05)。结论:HSP70、NF-κB、Bcl-2的表达与宫颈癌、尖锐湿疣的发病及HPV的感染有密切关系,但与HPV的高、低危型无显著关系。

Survivin、p53和bcl-2在脑星形细胞肿瘤中的表达及相关性研究

背景与目的:近年来发现胶质瘤生长、分化有着其特定的分子机制,胶质瘤恶性程度与特定基因的突变、丢失或扩增表达有密切的关系。本研究探讨凋亡抑制基因Survivin、抑癌基因p53和癌基因bcl-2在人脑星形细胞肿瘤中的表达、相互关系及其意义。方法:按制定的人组标准选择45例脑星形细胞肿瘤标本,应用免疫组化技术检测Survivin、p53、bcl-2在不同级别脑星形细胞瘤中的表达。结果:45例脑星形细胞肿瘤标本中33例表达Survivin蛋白,阳性率为73.3%,并随星形细胞肿瘤病理分级的增加而增高(P<0.05);胶质母细胞瘤的p53阳性水平要高于星形细胞瘤:bcl-2阳性水平星形细胞瘤显著高于胶质母细胞瘤;Survivin表达与 p53表达密切相关,与bcl-2表达无相关性。结论:Survivin高表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关;Survivin的表达与脑星形细胞瘤中p53异常表达密切相关。

胃癌及其癌前病变中细胞凋亡及其调控基因的表达

目的 :通过观察胃癌及其癌前病变中细胞凋亡及其调控基因p5 3、bcl- 2、c-myc的表达 ,探讨其在胃癌恶性转化进程中的作用。方法 :利用DNA末端标记技术 (TdT -mediateddUTP -biotinnickendlabeling ,TUNEL法 )和免疫组织化学 (streptavidin/peroxidase ,S -P法 ) ,原位观察了 46例胃癌、2 0例癌前病变、2 4例正常粘膜中的凋亡细胞和p5 3、bcl- 2、c-myc的表达。结果 :癌前病变和胃癌中凋亡指数显著高于正常粘膜 (P <0 0 1) ,癌前病变组高于胃癌组 (P <0 0 1)。p5 3、bcl- 2、c -myc蛋白在胃癌中阳性率分别为 6 0 9%、6 7 4%、73 2 % ,均高于正常粘膜组(P <0 0 1) ;在癌前病变中 3种蛋白阳性表达率分别为 40 %、95 %、5 8 8% (P <0 0 1)。胃癌中p5 3、bcl- 2蛋白阳性细胞凋亡指数分别低于阴性组 (P <0 0 5 ) ,c -myc蛋白阳性组细胞凋亡指数高于阴性组 (P <0 0 1)。结论 :细胞凋亡调控异常在胃癌发生中可能起重要作用。p5 3、bcl- 2蛋白分别抑制细胞凋亡 ,c -myc蛋白在胃癌中促进细胞凋亡。

凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在糖尿病骨骼肌病变中的变化及意义

目的:探讨糖尿病骨骼肌凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化及意义。方法:选用Wistar大鼠24只,随机分成正常对照组、单纯缺血组、糖尿病组和糖尿病缺血组,每组6只。以四氧嘧啶50mg/kg尾静脉注射制造糖尿病模型。造模后2周结扎右股动脉制造缺血模型。10周后,以免疫组化方法观察腓肠肌中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达情况。结果:糖尿病组骨骼肌表现为普遍性萎缩,肌纤维变性坏死。与对照组比较糖尿病可使骨骼肌凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05),Bax表达增高(P<0.05)。缺血可使骨骼肌Bax蛋白表达增高(P<0.05),但对Bcl-2表达的影响与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病与缺血对骨骼肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响无交互作用(P>0.05)。结论:糖尿病骨骼肌病变可能与Bcl-2与Bax蛋白比例下降促进细胞凋亡有关。

SAg作用的银屑病T细胞对表皮c-myc bcl-2及P53蛋白的影响

目的探讨链球菌超抗原与银屑病的关系,揭示银屑病患者外周血T细胞的特殊活性。方法将银屑病患者和正常人外周血T细胞及链球菌超抗原(SAg)刺激的银屑病和正常人T细胞分别与皮肤组织共同培养,免疫组化法检测不同T细胞对表皮cmyc,bcl2及P53蛋白的影响。结果正常人皮肤、银屑病患者未受累皮肤受银屑病患者T细胞作用后,表皮cmyc,bcl2及P53蛋白与正常人T细胞作用组比较有显著性差异(P均<0.05);受SAg刺激的银屑病患者T细胞对表皮cmyc,bcl2及P53蛋白的影响与未受SAg刺激组比较差异无显著性(P均>0.05),SAg非特异性活化的正常人T细胞对表皮cmyc,bcl2及P53蛋白不能产生显著影响(P均>0.05)。结论银屑病患者T细胞在外周血已处于活化状态,其活性与链球菌超抗原多克隆激活的正常人T细胞在功能上有本质区别,这一特殊的活性,可能在诱导表皮动力学紊乱及银屑病发病中发挥重要的作用。

Bcl-2及bFGF在维拉帕米诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡中的表达

目的探讨维拉帕米(verapamil,Ver)对体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的凋亡作用,观察凋亡过程中原癌基因蛋白质(Bcl2)和碱性成纤维细胞生长因子(baic fibroblast growth factor,bFGF)的表达变化。方法应用80mg·L-1Ver作用于体外培养的人RPE细胞12h、24h、48h,吖啶橙(acridineorange,AO)荧光染色及透射电镜观察RPE细胞凋亡;逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测Bcl2mRNA和bFGFmRNA表达变化。结果经Ver作用的体外培养的人RPE细胞具有典型的凋亡形态学特征:核染色质浓染、边集;细胞体积缩小。同时RPE细胞Bcl2mRNA表达下降;而bFGFmRNA表达随着作用时间延长,呈增高趋势。结论Ver可诱导体外培养人RPE细胞凋亡,凋亡过程中Bcl2表达逐渐下降,而bFGF表达增强。

雌激素对MPP+诱导的PC12细胞损伤后Bcl-2蛋白含量的影响

目的:观察雌激素在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPP+)引起PC12细胞损伤的过程中对凋亡抑制蛋白Bcl-2的影响,从而阐明雌激素对帕金森病的保护作用。方法:实验于2004-03在华中科技大学同济医学院神经科实验室完成。①细胞分组:对照组;雌激素组;雌激素+MPP+组;MPP+组。②帕金森病细胞模型的建立:用250μmol/L的MPP+处理细胞,造成细胞凋亡的帕金森模型。③应用SABC法检测PC12细胞内的Bcl-2蛋白表达,反转录-聚合酶链反应检测Bcl-2基因表达产物的mRNA的水平,Westernblot检测Bcl-2蛋白的水平。结果:①雌激素组Bcl-2阳性PC12细胞平均吸光度(0.438±0.065)明显高于空白对照组(0.216±0.067),雌激素+MPP+组(0.283±0.036),MPP+组(0.112±0.034),SABC显色明显增强(P<0.05)。②雌激素组Bcl-2基因表达产物的mRNA的水平(1.30±0.19)明显高于空白对照组(0.70±0.15),雌激素+MPP+组(0.66±0.26),MPP+组(0.29±0.08)(P<0.05)。③雌激素组Bcl-2蛋白的水平(129±19)明显高于空白对照组(81±23),雌激素+MPP+组(72±12),MPP+组(48±11);雌激素+MPP+组与空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:在MPP+对PC12细胞损伤的过程中,雌激素通过促进凋亡抑制蛋白Bcl-2的增高,对神经细胞起保护作用。

所谓肺硬化性血管瘤组织中Cox-2、bcl-2蛋白表达及意义

目的:探讨Cox-2、bcl-2在所谓肺硬化性血管瘤(So-called pulmonary sclerosing hemangioma,PSH)组织中的表达及其相互关系。方法:应用免疫组化S-P法,检测35例所谓肺硬化性血管瘤、8例肺炎性假瘤(pulmonary pseu-dotumor,PP)、8例正常肺组织(normal lung tissue,NL)中Cox-2的bcl-2的蛋白表达。结果:Cox-2和bcl-2蛋白在35例PSH组织中的阳性表达率分别为14.29%(5/35)和31.43%(11/35),在8例PP组织中的阳性表达率分别为0%(0/8)和12.5%(1/8),而8例NL组织中均呈阴性表达。Cox-2、bcl-2蛋白在PSH、PP、NL三种组织中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。在PSH中,Cox-2与bcl-2蛋白表达之间存在相关关系。结论:bcl-2与Cox-2蛋白表达并不直接参与PSH的发生发展;PSH中bcl-2与Cox-2之间存在着相关性表达,即bcl-2与Cox-2蛋白在PSH发生、发展中可能存在一定的协同调控作用关系。

bcl-2和PCNA在皮肤混合瘤中的表达特点及意义

目的探讨原癌基因蛋白质(bcl-2)和增殖细胞核抗原(PCNA)在皮肤混合瘤中的表达特点及意义。方法采用免疫组化Envision二步法检测10例皮肤混合瘤标本中的bcl-2和PCNA的表达情况。结果10例患者标本中均见bcl-2和PCNA阳性染色。肿瘤巢内,衬于囊腔和导管样结构内侧的肿瘤细胞示PCNA阳性,而上皮样细胞示bcl-2阳性。结论皮肤混合瘤中bcl-2、PCNA的异常表达似与此肿瘤的发生有关。

新城疫病毒对体外培养人膀胱癌EJ细胞凋亡作用机制研究

目的探讨新城疫病毒(NDV)对体外肿瘤细胞的抑制作用机制。方法以人膀胱癌EJ细胞株为靶细胞,观察NDV对人膀胱癌EJ细胞的作用。结果NDV病毒能作用于体外培养膀胱癌细胞,光镜下细胞的贴壁率和生存率显著下降,电镜下可见到凋亡典型形态结构,TUNEL方法检测膀胱癌细胞有大量凋亡,新城疫病毒作用膀胱癌细胞24h凋亡细胞阳性指数(AI)为9.9%,48h凋亡细胞阳性指数(AI)为17.8%。免疫组化检测膀胱癌细胞有p53、bax、Fas、Fas-L及细胞因子TGFβ1表达增加而原癌基因bcl-2的表达降低从而诱导膀胱癌细胞凋亡。结论NDV病毒是一种有效抗肿瘤细胞的病毒,在体外具有明显的抑制肿瘤细胞作用。