癌旁组织差异蛋白组学在子宫内膜癌发生中的作用及其机制的初步研究

子宫内膜癌是女性生殖道常见的三大恶性肿瘤之一,早期一般不易被发现,仅在普查或因其他原因检查时偶然发现。对于子宫内膜癌而言,II-III期患者5年生存率约50~70%,晚期患者5年生存率约10~20%。所以,肿瘤发现得越晚,治疗效果越差。因此,开展早期诊断对提高子宫内膜癌患者生存质量尤为重要。有学者认为癌旁组织差异蛋白组学可作为前者血液生物标志物用于癌症疾病的早期诊断。故本文将从癌旁组织差异蛋白组学的概况以及与子宫内膜癌的相关性进行综述。

人肺鳞癌组织及癌旁组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析

背景与目的:肺鳞癌的发生发展是一个多因素、多步骤的过程,虽然从基因和转录水平已对肺癌进行了许多成功的研究,但其癌变机制仍不十分明确,目前尚缺乏有效的用于肺鳞癌早期诊断和预后监测的特异性分子标志物。本研究的目的是利用蛋白质组学方法,建立分辨率高和重复性好的人肺鳞癌组织及其癌旁正常支气管上皮组织的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定其差异表达的蛋白质。方法:利用固相pH梯度(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE),分离人肺鳞癌组织及癌旁正常支气管上皮组织的总蛋白质,用图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪(massspectrometry)得到相应的肽质指纹图谱(peptidemassfingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:(1)建立双向凝胶电泳图谱:癌组织和癌旁正常支气管上皮组织3块凝胶的平均蛋白质点数分别为1349±67和1297±73,平均匹配的点数分别为1235±48和1183±56,匹配率达91.5%和91.2%;同一癌组织的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(Isoelectricfocusing,IEF)方向的偏差是(0.873±0.125)mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE方向上的偏差为(1.025±0.213)mm。(2)肽质指?

胃癌癌旁组织中p53、p16和bcl-2蛋白表达及其关系的探讨

目的：研究胃癌癌旁组织中抑癌基因和抗凋亡基因蛋白的表达及其内在关系。方法：胃镜及外科手术中取４０例 胃癌患者的癌组织和癌旁组织各两块，石蜡包埋，切片ＨＥ染色作病理及免疫组织化学检查ｐ５３、ｐ１６和ｂｃｌ－２基因蛋 白表达。结果：ｐ５３在胃癌组织中阳性表达率４２．５％，癌旁组织１２．５％，有显著性差异（Ｐ＜０．０１），其表达强度也有显著 性差异（Ｐ＜０．０１）；ｐ１６在癌旁组织阳性表达率为６０％，显著高于胃癌组织３７．５％（Ｐ＜０．０５），其表达强度也有显著性差 异（Ｐ＜０．０５）；ｂｃｌ－２在胃癌组织和癌旁组织阳性表达率无显著性差异（６７．５％比４７．５％，Ｐ＞０．０５），其表达强度也无显 著性差异（ｐ＞０．０５）。ｐ５３与ｐ１６、ｐ１６与ｂｃｌ－２表达之间均无显著相关性（Ｐ＞０．０５），而ｐ５３与ｂｃｌ－２表达之间存在显著相 关性（Ｐ＜０．０５）。结论：在胃癌发生发展过程中，抑癌基因（ｐ５３、ｐ１６）４抗凋亡基因（ｂｃｌ－２）之间存在既独立又协同的作 用。

肝癌及癌旁组织中P^(53)基因第七外显子转录水平的表达差异及临床意义

目的 :研究启东区肝癌中 P53基因第七外显子转录水平的表达及其与患者临床病理特征间的关系。方法 :通过 RT- PCR确定 P53基因第七外显子在 47对肝癌标本中的表达 ,并分析其与肝癌患者临床病理特征间的关系。结果 :P53基因第七外显子在肝癌及其癌旁组织中均显示差异表达 ,其中 1 7例为上调表达 ,30例为下调表达 ,上下调表达之间差异显著 ;女性、年龄≥ 45岁、AFP( + )、HBs Ag( + )、癌栓 ( + )、肝硬化、病理 Edmondson's 级的病例中 P53基因第七外显子均呈显著下调表达 ;Edmondson's I级病例肝癌组织中 P53基因的 EI显著高于 Edmondson's 级病例。结论 :启东肝癌中 P53基因第七外显子转录水平上存在表达差异 。

FXR在肝细胞癌组织和癌旁正常组织中的差异表达

肝细胞癌（HCC）占原发性肝癌的90%。每年大约有67万新发病例,在全世界恶性肿瘤中,发病率占第五位,而死亡率则排第三,严重危害人民的健康。HCC的发生和发展是一个涉及多因素、多基因和多步骤的复杂过程,其具体机制仍在不断探索之中。近年来,越来越多的证据显示长期高水平胆汁的刺激、脂肪肝等机体代谢失调与HCC的发生有关。

RNA-seq技术分析宫颈癌与癌旁组织差异表达基因效果

目的:探讨基于RNA-seq技术分析宫颈癌与癌旁组织差异表达基因的应用效果,明确宫颈癌发病机制。方法:选取2019年7月—2020年6月本院收治的3例确诊为宫颈癌的患者为分析对象,通过RNA-seq技术对宫颈癌与癌旁组织予以转录组测序,应用生物信息方法分析差异基因本体及通路富集性。结果:在宫颈癌及癌旁组织中总共发现差异表达基因1746个,其中表达上调基因754个,表达下调基因992个。功能富集性分析结果显示,差异基因主要富集在DNA损伤、细胞黏附相关的信号通路上。并且在宫颈癌及癌旁组织中存在RAB22A-BCASI融合基因。结论:RAB22A-BCASI融合基因、细胞黏附信号通路同宫颈癌发病机制存在相关性,可能是导致发生宫颈癌的原因。

TGF-β1和smad4mRNA在慢性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁组织的表达及意义

目的:转化生长因子TGF-β1信号转导通路具有重要的细胞调节功能,包括细胞的生长、分化、黏附、转移、细胞外基质的形成及免疫调节等.通过检测慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁病理组织TGF-β1和smad4mRNA的表达, 探讨TGF-β/smad通路在肝纤维化形成、发展中的关系及作用机制. 方法:应用免疫组化和原位杂交方法,对照肝组织10例, 肝癌癌旁肝组织17例,慢性病毒性肝炎肝硬化肝穿组织70 例的TGF-β1蛋白和smad4mRNA表达进行检测. 结果:TGF-β1和smad4mRNA在慢性病毒性肝炎中度及肝硬化组织中的表达明显增强,阳性率分别为83.3%,87.0% 和87.5%,87.0%,明显高于对照组(20.0%,20.0%),差异均有显著性(b3P<0.01,)X2=12.3980;b4P<0.01,)X2=14.0609; 和b1P<0.01,X2=14.6953;b2P<0.01,X2=14.0609);而癌旁肝组织二者的表达均低下,与对照组无明显差异;随着肝纤维化的发展TGF-β1和smad4mRNA的表达呈逐渐增强趋势,S3期达高峰,S4期有所回落;二者表达呈正相关(X2=4.5 064,P=0.0336,r=0.2668);肝组织病理可见TGF-β1和smad4mRNA的阳性细胞在肝组织切片上的分布基本一致,大多集中于汇管区、肝窦及纤维条索周边. 结论:TGF-β/smad信号传导通路在肝纤维化的形成和发展中具有重要的促进作用,TGF-β1和smad4mRNA的组织定位检测能准确的评价肝纤维化形成状况及发展趋势.

鼻咽癌及颈淋巴结转移灶组织中p53的表达及其相关性

大量文献报道，鼻咽癌组织p53的表达率显著高于癌旁组织和转移灶，在鼻咽原位癌和转移癌中均发现p53蛋白过表达且功能失活．说明p53蛋白的改变与鼻咽癌发生发展密切相关。但由于临床上难以同时获得同一患者的鼻咽癌原发灶和颈部淋巴结转移灶的组织的标本．因此p53在鼻咽癌原发灶和自身颈部淋巴结转移灶中表达意义尚未见文献报道。为此，我们应用免疫组化方法检测p53在同一个患咽癌患者鼻咽部原发灶及颈部淋巴结转移灶中表达差异。

高迁移率族蛋白A1在前列腺癌及癌旁组织中的差异表达

我们从mRNA水平和蛋白水平半定量检测高迁移率族蛋白A1（HMGA1）在前列腺癌组织及其相应的癌旁正常前列腺组织中的表达，探讨HMGA1的表达与前列腺癌发生、发展的相关性。

葡萄胎发病新基因F10在不同肿瘤组织的表达

目的研究葡萄胎差异表达新基因F10在不同组织的表达情况及其与恶性肿瘤之间的关系。方法采用原位杂交方法检测不同肿瘤组织和正常组织的F10基因mRNA表达。结果F10基因在卵巢腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、肝癌、胃癌等腺癌中阳性表达,不同腺癌之间阳性表达差异无显著性(P>0.05)。子宫内膜、宫颈上皮等正常组织、肝癌癌旁组织中F10基因阴性表达。结论葡萄胎差异表达新基因F10不仅与滋养细胞肿瘤密切相关,可能还在某些腺癌发生发展中起重要作用。

非小细胞肺癌组织、癌旁组织和正常组织微小RNA-18a、微小RNA-24和let-7b差异表达分析

我们筛选3种在肺癌和对照样本间差异表达的微小RNA（miRNA,miR）-24、miR-18a、let-7b,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测肺癌手术过程中获取的癌组织、癌旁组织与正常组织中的表达水平.

乳腺癌和癌旁组织中p53、VEGF与MVD的差异表达及其临床意义

目的 检测抑癌基因p5 3 ,血管内皮生长因子 (VEGF)和微血管密度 (MVD)在乳腺癌及乳腺癌旁组织中的表达 ,探讨其相关性及其在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法 采用免疫组织化学SP法检测 110例乳腺癌及其癌旁乳腺组织中p5 3 ,VEGF表达水平 ,比较MVD的大小。结果 VEGF ,p5 3在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为 90 0 % ( 99/ 110 ) ,42 7% ( 4 7/ 110 ) ;癌旁乳腺组织中阳性表达率则分别为 3 5 5 % ( 3 9/ 110 ) ,4 5 % ( 5 / 110 ) ,两者间具有高度显著性差异 (P <0 0 1)。乳腺癌组织微血管密度MVD均值为 ( 16 4± 12 3 ) ,癌旁乳腺组织则为 ( 7 3± 6 8) ,两者间具有高度显著性差异 (P <0 0 1)。MVD值在p5 3、VEGF阳性表达的组织中明显高于p5 3、VEGF阴性表达的组织 ,二者比较差异显著 (P <0 0 1、P <0 0 5 )。结论 联合检测p5 3、VEGF和MVD的表达可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。

IGF-Ⅱ和IGF-Ⅰ R在大肠癌中的表达

目的研究胰岛素样生长因子-(IGF-)和胰岛素样生长因子受体(IGF-R)在国人大肠癌中的表达情况及其与临床病理的关系。方法应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法(S-P)对40例大肠癌患者的大肠癌组织、距大肠癌原发灶1cm癌旁组织、距大肠癌原发灶10cm以上大肠组织和10例非肿瘤患者的正常大肠组织标本,进行IGF-和IGF-R的抗原染色。结果1大肠癌组织和癌旁组织中IGF-和IGF-R的表达率显著高于切缘组织和正常大肠组织的表达率(P<0.05)。癌组织和癌旁组织中IGF-和IGF-R的表达率无显著性差异(P>0.05)。切缘组织和正常大肠组织中IGF-和IGF-R的表达率无显著性差异(P>0.05)。2在有淋巴结转移和Dukes分期C期及浸透全层组中IGF-和IGF-R的表达率分别显著高于无淋巴结转移组和Dukes分期A、B期及未浸透全层组中GF-和GF-R的表达率(P<0.05)。结论IGF-、IGF-R的高表达与大肠癌的发生发展和侵袭转移密切相关。

粘着斑激酶在胃癌中的表达及临床意义

目的观察粘着斑激酶(FAK)在胃癌及癌旁组织表达的差异,探讨FAK与胃癌临床病理参数的关系。方法应用免疫组化SP法检测61例胃癌组织及其癌旁组织FAK的表达。结果FAK在胃癌及其癌旁组织阳性表达率分别为86.8%(53/61)和75.4%(46/61),差异无显著性(P>0.05);但FAK较强阳性/强阳性(即++/+++)的表达率分别为59%、26.2%,差异有显著性(P<0.05),且其表达水平与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期呈正相关。结论在胃癌组织中FAK(++/+++)的表达水平较正常组织明显增高,提示FAK参与胃癌的发病,并与胃癌的浸润、转移关系密切。

大肠黏膜癌变过程中PGE_2,Bcl-2及Bax表达相关性

目的:探讨PGE2,Bcl-2及Bax在大肠黏膜癌变过程中表达相关性.方法:采用免疫组织化学DAB法检测了正常结肠黏膜15例、慢性结肠炎20例、大肠癌旁组织50例、腺瘤样息肉30例及大肠癌组织50例中PGE2,Bcl-2及Bax蛋白的表达.分析PGE2、Bcl-2及Bax的表达与各种临床病理特征的关系及三者的相关性.结果:PGE2在正常结肠黏膜,慢性结肠炎,大肠癌旁组织,腺瘤样息肉及大肠癌组织中的表达阳性率分别是6.67%,10.0%,40.0%,56.7%,90.0%,呈递增趋势.Bcl-2在5组中的表达阳性率分别为6.67%,10.0%,38.0%,46.7%,76.0%,呈递增趋势.Bax在5组中的表达阳性率分别为86.67%,75.0%,78.0%,76.7%,82.0%,五组之间阳性率比较均无显著性差异(P>0.05),但其阳性表达程度在正常组织,腺瘤样息肉,大肠癌三组之间呈递减趋势(P<0.05).3者在大肠癌中的表达与患者性别、年龄、肿块大小无明显差异(P>0.05).PGE2和Bcl-2、Bax和Bcl-2在大肠癌组织中阳性反应呈显著正相关(r=0.532,P<0.05;r=0.653.P<0.05).PGE2、Bcl-2及Bax在大肠癌高、中分化组中的表达率分别为100%,88.9%,85.2%,明显高于低分化组中的79.3%、60.9%、78.3%;在大肠癌Duke’sA,B期中Bcl-2表达却显著高于C,D期.结论:PGE2及Bcl-2在正常结肠黏膜、慢性结肠炎、大肠腺瘤样息肉、大肠癌组织中的表达均呈递增趋势,而Bax在正常结肠黏膜、大肠腺瘤样息肉、大肠癌组织中的阳性表达程度呈递减趋势提示PGE2及Bcl-2表达上调和Bax表达下调与大肠黏膜癌变过程有关.PGE2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度有关,Bcl-2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度、Duke’s分期有关.PGE2与Bcl-2的表达呈正相关.

转录因子Sox2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨转录因子Sox2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法使用免疫组化(SP)检测30份非小细胞肺癌癌组织和30份距肿瘤边缘5 cm以上癌旁正常组织的Sox2的变化情况,同时分析其与临床病理特征的关系。结果 (1)免疫组化发现Sox2在癌组织的阳性表达率为70%,远高于癌旁正常组织的阳性表达率9.8%(P<0.05)。(2)Sox2蛋白在不同分化程度的肺癌组织中阳性表达率有统计学差异(P<0.05),随着分化程度的逐渐升高Sox2的阳性率逐渐上调。在无淋巴结转移样本的阳性率表达具有统计学差异(P<0.05),存在淋巴结转移的患者Sox2水平较高;在鳞癌中的阳性率明显高于腺癌,差异有统计学意义(P<0.05)(3)Sox2的表达水平与年龄、性别无明显相关。结论非小细胞肺癌上调Sox2的表达,其与组织分化程度、淋巴结转移关系密切,可将改变Sox2的表达水平作为治疗非小细胞肺癌的靶方向。

宫颈癌中耐药相关基因的表达及临床研究

目的:探讨宫颈癌组织中,多项耐药相关基因(P- gp、GST- π,TOPO )的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化链霉菌素-生物素(S- P)法对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的5 6例宫颈癌及癌旁组织,30例正常宫颈组织行P- gp,GST- π,TOPO 检测。结果:宫颈鳞癌与腺癌中各耐药基因的表达差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,在不同分化程度及有无转移的宫颈癌中表达差异有显著性(P<0 .0 5 ) ,在癌组织、癌旁组织及正常宫颈组织中表达差异有显著性(P<0 .0 1) ,其中P- gp与GST- π在宫颈癌中的表达差异有极显著性(P<0 .0 1)。结论:宫颈癌中多药耐药相关基因的表达是癌的发生、分化程度及转移行为的生物学表现。临床上对3种以上耐药相关因子的综合检测意义重大,有助于指导临床对宫颈癌的化疗。

结肠癌与癌旁正常肠组织的蛋白质组学比较研究

随着生物技术的发展，基因组学和蛋白质组学技术已广泛用于肿瘤的诊断和治疗。目前已有一些蛋白质组学技术应用于结肠癌研究的报道。本研究以发现结肠癌早期诊断生物标志物为目的，初步筛选结肠癌与癌旁正常肠组织中的差异表达蛋白。

环氧合酶-2高表达与肝癌临床病理特征的关系

目的探讨COX2在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学方法(SP法)检测COX2在34例肝癌中的表达。结果COX2在肝癌中的表达率为82.4%(28/34),主要为肝癌组织的表达,而在癌旁正常组织中无表达。20例阳性表达COX2的肝癌中,分化良好的22例COX2表达水平为8.25±0.86,分化中等和分化差的6例COX2表达水平为6.11±1.02,比较差异显著(P<0.05),COX2的高表达水平与肝癌细胞分化程度有关,而与AFP高低、来源细胞及有无肝内转移无关。结论肝癌中COX2的高度表达与肝癌分化程度有关,COX-2可能是肝癌发生的早期事件之一。

p53蛋白在直肠腺癌及癌旁组织中表达及其意义

为研究p53基因蛋白在直肠腺癌、癌旁组织中的表达及其意义，采用免疫组化SP法检测56例直肠腺癌及癌旁组织p53蛋白表达。正常组织p53蛋白表达阴性．癌旁组织阳性表达率7％，直肠腺癌阳性表达27例，阳性率48％(P<0．01)。溃疡型42例，阳性率45％；巨块息肉型8例，阳性率37％；浸润型6例，阳性率33％，差异无统计学意义。高分化型11例，阳性率36％；中分化型25例，阳性率48％；低分化型20例，阳性率55％，差异无统计学意义，但有随分化程度降低阳性率增高的趋势。结果表明，p53基因在直肠腺癌的发生过程中起重要作用。癌前病变时期已有p53改变，p53与直肠腺癌的生长方式无关，与分化程度成反比，可做为判定恶性程度及预后的指标。