癌毒清对DEN诱癌大鼠不同时间点凋亡相关基因影响的研究

目的通过分析癌毒清颗粒(AG)干预二乙基亚硝胺(DEN)诱导SD大鼠肝癌(HCC)模型在不同时间肝脏病理,肝组织细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax、Fas/Fasl、Casepase-3、Survivin)的表达,揭示AG防治原发性肝癌的机制。方法 40只雄性SD大鼠,随机均分为预防组和对照组,两组均饲以64 ppm浓度的DEN水溶液16周诱癌,然后饲以纯净水。预防组予AG 0.2 g/100 g灌胃,用药6 d,停药1 d,称重调整用药剂量,干预18周。两组在第4、8、12、16、18周分别随机处死4只大鼠,剖腹取出肝脏,选取阳性部位,HE染色,用于病理研究。PCR检测Bcl-2、Bax、Fas/Fasl、Casepase-3、Survivin基因表达。结果预防组各时间点均高表达Caspase-3 mRNA,低表达Bcl-2 mRNA;Fas/Fasl mRNA在第4周显著表达;Bax mRNA第12周显著表达;Survivin mRNA第8周表达下调。结论 AG干预模型大鼠是通过促进Bax mRNA、Caspase-3 mRNA、Fas mRNA表达来实现促进受损细胞、HCC细胞凋亡。另外AG干预后细胞凋亡相关基因表达在各时间点存在不一致性,提示AG防治HCC是通过多种细胞凋亡途径来实现的。

癌毒清颗粒对肝癌模型小鼠HIF-1α、VEGF、bFGF的影响

目的:研究癌毒清颗粒(AG)对肝癌(HCC)模型小鼠HIF-1α、VEGF、bFGF的影响,探讨AG抗HCC的作用机制。方法:昆明小鼠50只,腋下接种H22肝癌细胞,建立肝癌异位移植瘤模型。于接种24h后,将动物随机分为模型组,AG高、中、低剂量组,氟尿嘧啶组。AG各组给予AG灌胃,氟尿嘧啶组腹腔注射氟尿嘧啶。给药12d后,摘取眼球采血,剥取瘤组织,称取瘤重,瘤组织进行病理组织学检查;ELISA法检测小鼠血清中HIF-1α、VEGF、bFGF的水平。结果:H22肝癌小鼠异位移植瘤模型中,各组体重变化无统计学意义(P>0.05)。AG高、中、低剂量组抑瘤率分别为50.91%,35.25%,20.10%,氟尿嘧啶组为43.99%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),其中AG高剂量组抑瘤效果最佳。与模型组比较,各组小鼠血清HIF-1α、VEGF、bFGF浓度均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。病理组织显示,AG三组肝癌细胞大小不等,肝癌细胞密度减少,肝癌细胞排列较分散,间质新生血管分布较少,肿瘤细胞坏死数量较多,细胞核着色欠均匀。结论:癌毒清颗粒能遏制H22肝癌小鼠异位移植瘤的生长,遏制程度和药物的剂量有关。癌毒清颗粒抗癌作用机制之一可能是通过下调缺氧微环境中血管生成促进因子VEGF、HIF-α、bFGF的表达,遏制肝癌移植瘤微血管生成。

癌毒清对肝癌模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度的影响

目的:观察癌毒清对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度(microvessel density,MVD)的影响。方法:将50只小鼠腋下接种H22肝癌细胞株,建立肝癌异位移植瘤模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组,每组各10只。癌毒清各剂量组给予不同剂量的癌毒清溶液灌胃,氟尿嘧啶组给予氟尿嘧啶腹腔注射,模型组给予等剂量蒸馏水灌胃。给药12 d后,脱颈处死,剥取瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率和病理组织学检查,免疫组织化学法观察MVD。结果:与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组瘤质量降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组抑瘤率分别为50. 91%、35. 25%、20. 10%,氟尿嘧啶组为43. 99%,与模型组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组MVD计数降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:癌毒清的抗癌机制可能是通过降低肿瘤MVD,抑制肝癌微血管生成而实现的。

The association between IgG1,IgG2 subclasses toward human papillomavirus 16-like particles in the serum and cervical intraepithelial neoplasia

Objective:The paper aimed to study the relationship between the expressions of immunoglobulin G(IgG) subclasses toward human papillomavirus 16-like particles(HPV16VLPs) in the serum of patients and different grades of cervical lesions.Methods:The expressions of IgG subclasses in 32 cases of human papillomavirus(HPV) infection,30 cervical intraepithelial neoplasia(CIN I),43 CIN Ⅱ-Ⅲ,and 24 hysteromyoma and chronic cervicitis were examined by ELISA.Results:The absorbance values of HPV16VLPs-IgG,IgG1 increased with the grade of CIN(P < 0.05).The IgG2 dominance(IgG2/IgG1 ratio > 1) from control group was 100%,87.50% for HPV infection group,75% for CIN I group,compared with that from CIN Ⅱ-Ⅲ patients(9.52%)(P < 0.05).The positive rates and absorbance values of HPV16VLPs-IgG,IgG1 and IgG2 from HPV16-DNA positive group were significantly higher than those from non-HPV16-DNA positive group(P < 0.05).There was a moderate correlation between the HPV16-DNA testing and detection of HPV16VLPs-IgG(r = 0.531,P < 0.05).Conclusion:An increase of the expressions of HPV16VLPs-IgG and its subclasses in the serum of the patients with cervical precancerous lesions,especially those with CIN II-III,might be associated with duration of HPV infection and severity of cervical lesions.An increase of the IgG2 dominance(IgG2/IgG1 > 1) in serum from low grade cervical lesions group and normal control group,might indicate the clearance of HPV infection and the regression of cervical lesions.