癌症易感基因及其所致肿瘤综合征的防治策略

癌症易感基因是近几年研究的热点之一。癌症易感基因异常所致的肿瘤综合征具有遗传性及伴有其他器官病变等特性。不同类型的癌症易感基因突变可引起不同的肿瘤综合征。通过对病人肿瘤发生的家族史的了解、遗传学咨询、遗传学试验等措施可以对不同的遗传性肿瘤综合征提出相应的防治策略。

研究揭示新癌症易感基因

由英国癌症研究院领导的一个研究小组在新研究中发现：一种称作PPM1D的基因的罕见突变与乳腺癌和卵巢癌发生风险增高有关联。这些突变并不遗传，新发现有可能揭示癌症形成的一种新机制。研究论文发表在12月16日的《自然》（Nature）杂志上。

硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

目的研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7(CASC7)对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组。Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体。对照组正常培养,实验组给予48μmol·L^(-1)的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L^(-1)的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再给予48μmol·L^(-1)的硫利达嗪处理。转染前将对数期的T24细胞调整浓度为每毫升5×10^(4)个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%~85%时,使用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine;2000转染试剂将阴性对照载体、CASC7过表达载体、shRNA control、CASC7 shRNA转染进细胞。以实时定量反转录聚合酶链反应检测CASC7表达水平;以细胞计数试剂盒-8实验检测细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡情况;以分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性。结果对照组、Vector组、CASC7组CASC7基因表达水平分别为1.00±0.12,1.01±0.08和2.24±0.14;细胞存活率分别为(100.00±6.36)%,(99.89±9.27)%和(64.12±4.24)%;细胞凋亡率分别为(5.10±0.33)%,(4.90±0.58)%和(17.47±1.25)%;Caspase-3活性分别为1.00±0.09,0.97±0.06和1.99±0.17。上述指标,CASC7组与对照组、Vector组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组T24细胞中CASC7基因表达水平分别为1.00±0.09,1.83±0.11,1.75±0.17和0.92±0.07;细胞存活率分别为(100.00±6.60)%,(53.08±4.67)%,(50.82±6.00)%和(75.98±10.96)%;细胞凋亡率分别为(4.99±0.40)%,(20.71±1.30)%,(21.47±1.71)%和(9.91±1.12)%;Caspase-3活性分别为1.00±0.08,2.58±0.18,2.51±0.22和1.58±0.13。上述指标,实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组+sh-CASC7组与实验组+sh-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论硫利达嗪通过上调CASC7抑制膀胱癌细胞增殖并促进细胞凋亡。

癌症易感候选基因15在肿瘤中的作用

人类基因组中长链非编码RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)占比90%以上,包括了大部分非编码信息,具有调节包括转录、翻译以及基因表达变异在内的多种细胞功能。癌症易感候选基因15(cancer susceptibility 15, CASC15)是一种定位在6p22.3高度活跃的长链非编码RNA,最早是在黑色素瘤的发生与转移中被发现。之后,lncRNA CASC15被证实在包括神经母细胞瘤、消化系统癌症等癌症中高度表达。本文综述了lncRNA CASC15在人类癌症中的表达情况、在癌症发生发展中的调节作用以及lncRNA CASC15肿瘤标志物或治疗靶标的可能作用。

CASC19低表达对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨癌症易感候选基因19(CASC19)低表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法常规培养人口腔角质细胞NOK及OSCC细胞SCC9、HSC3、CAL-27,并用实时荧光定量PCR法确定SCC9细胞作为实验细胞。取对数生长期SCC9细胞并随机分组,用脂质体法将CASC19过表达对照质粒(pcDNA)、CASC19过表达质粒(pcDNA-CASC19)、CASC19抑制表达对照质粒(si-NC)、CASC19抑制表达质粒(si-CASC19)、miR-802阴性对照质粒(miR-NC)、miR-802模拟物(miR-802)分别转染至pcDNA组、pcDNA-CASC19组、si-NC组、si-CASC19组、miR-NC组、miR-802组;将si-CASC19与miR-802抑制剂阴性对照质粒(anti-miR-NC)、miR-802抑制剂(anti-miR-802)共转染至si-CASC19+anti-miR-NC组、si-CASC19+anti-miR-802组,用实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-802、CASC19表达确认转染效率。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA CASC19与miR-802的靶向关系,Western blotting法检测细胞内细胞周蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CASC19与miR-802存在结合位点。与pcDNA组比较,pcDNA-CASC19组miR-802相对表达量低(P<0.05);与si-NC组比较,si-CASC19组miR-802相对表达量高。细胞培养48、72 h,与si-NC组比较,si-CASC19组OD值低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达低,p21、Bax蛋白表达高(P均<0.05)。与si-NC组比较,si-CASC19组培养48、72 h细胞增殖活力低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量低,p21、Bax蛋白相对表达量高(P均<0.05);与si-CASC19+anti-miR-NC组比较,si-CASC19+anti-miR-802组培养48、72 h细胞增殖活力高,细胞凋亡率低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量高,p21、Bax蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论CASC19低表达可抑制OSCC细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与靶向调控miR-802表达有关。

预测性遗传检查——个性化医疗的重要基石

基因挑战医学，基因渗入医学 21世纪的基因组科学和基因组医学（genomic medicine）将给人类的医疗保健卫生事业带来革命性的变革。这场深层次的变革起始于基因组挑战医学——从基因水平上认识和研究疾病，受惠于基因渗入医学——从基因水平上诊断、预防和治疗疾病。目前在数千种疾病中，已克隆了已知多个致病基因，遗传医学不但早就被列为医学的25个专科之一，而且渗入到内科，

长链非编码RNA CASC19在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)是一种转录本长度更长的非编码RNA,其长度超过200个核苷酸,可以调节基因表达。因为lncRNA缺乏开放阅读框,所以不具有编码蛋白质的功能。已有一些报道说明了lncRNAs主要在表观修饰、转录、转录后水平调控基因表达,以此来影响肿瘤的进展,被认为是肿瘤的重要调节因子。LncRNA CASC19 (癌症易感基因19)在不同癌症中的表达增加已有不少报道,例如结直肠癌、肺癌和胰腺癌等多种恶性肿瘤。较多学者研究表明CASC19的高表达水平与肿瘤进展、预后以及放疗敏感性密切相关。本文概述了CASC19对不同肿瘤的影响和潜在临床效用的最新研究进展。LncRNA CASC19非常有希望成为治疗肿瘤的有效靶点和潜在的生物标志物,为肿瘤的治疗贡献一份力量。

结直肠癌长链非编码RNA CASC11和原癌基因c-myc的表达及其与复发转移的关系

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CASC11和原癌基因c-myc在结直肠癌中的表达及其与复发转移的相关性。方法:收集2016年2月至2018年7月河北省唐山市协和医院收治的90例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养正常结肠上皮细胞株CCD841及结直肠癌细胞株SW480、SW620、HCT116、HT29、DLD-1。以癌组织中CASC11或c-myc mRNA相对表达量的均值为界,将患者分为CASC11或c-myc高表达者和低表达者。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平。以CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平最高的细胞株进行后续细胞实验。分析CASC11、c-myc mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系;采用Pearson相关检验分析患者癌组织中CASC11和c-myc mRNA水平的关系。采用JASPAR软件分析CASC11与c-myc基因是否有结合位点;构建野生型、突变型CASC11重组质粒,采用双荧光素酶报告基因实验验证c-myc与CASC11间的关系。向CASC11、c-myc表达水平最高的细胞株转染载有c-myc干扰序列质粒(Sh-c-myc组)或载有其阴性对照序列质粒(Sh-NC组),另设常规培养的空白对照组(NC组);采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖情况,采用Tanswell实验检测各细胞侵袭、迁移能力,采用qRT-PCR及蛋白质印迹法分别检测各组细胞中CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,癌组织中CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与CCD841细胞比较,各结直肠癌细胞株CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中SW480细胞株CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平最高,选取其进行后续细胞实验。Pearson相关性分析结果显示,癌组织中CASC11 mRNA和c-myc mRNA表达水平呈正相关(r=0.494,P<0.05)。淋巴结转移者癌组织中CASC11、c-myc mRNA高表达率高于无淋巴结转移者[73.7%(28/38)比26.9%(14/52)、84.2%(32/38)比23.1%(12/52)],TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者癌组织CASC11、c-myc mRNA高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期者[76.0%(38/50)比10.0%(4/40)、72.0%(36/50)比20.0%(8/40)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。JASPAR在线软件分析显示,CASC11启动子区与c-myc基因存在结合位点;双荧光素酶报告基因实验结果显示,与共转染Sh-NC和载有野生型CASC11质粒的SW480细胞比较,共转染Sh-c-myc和载有野生型CASC11质粒的SW480细胞启动子相对活性低(P<0.05)。与NC组、Sh-NC组比较,Sh-c-myc组SW480细胞CASC11 mRNA表达水平及侵袭、迁移细胞数低,细胞增殖抑制率高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:CASC11、c-myc mRNA在结直肠癌组织及细胞株中均高表达,CASC11启动子区存在与c-myc基因结合位点。二者表达具有相关性,下调c-myc可能通过抑制CASC11表达而抑制结直肠癌细胞侵袭和迁移。

CASC11通过调控miR-641的表达对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的作用机制研究

目的 探讨长链非编码RNA癌症易感候选基因11(Long non-coding RNA cancer susceptibility candidate gene 11,lncRNA CASC11)通过调控微小核糖核酸(MicroRNA,miR)-641的表达对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的作用机制。方法 逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测脑胶质瘤细胞株U251,U87,MGR3,UWR7和A172中CASC11表达水平及小干扰RAN CASC11(Small interfering RNA CASC11,si-CASC11)转染U87细胞后CASC11,miR-641表达水平;在人脑胶质瘤细胞U87中敲除CASC11后用四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、侵袭小室实验(Transwell assay)和细胞划痕实验检测U87细胞增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因验证CASC11和miR-641之间的靶向关系。结果 在U87细胞中CASC11表达水平最高,故选U87细胞进行后续实验;敲除CASC11后可抑制U87细胞增殖、侵袭和迁移能力,降低U87细胞中的CASC11 mRNA相对表达水平,升高miR-641 mRNA相对表达水平;CASC11和miR-641之间存在靶向关系。结论 敲除CASC11后可靶向负调控miR-641表达,抑制脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的恶性生物学行为,可能是脑胶质瘤的分子靶点。