癌蛋白18表达与肺癌抗微管化疗的关系

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中癌蛋白18（stathmin）的表达对抗微管化疗效果的影响。方法收集78例NSCLC患者肺组织蜡块并随访，通过免疫组化检测stathmin蛋白的表达，分析其与临床病理指标及抗微管化疗效果的关系。结果Stathmin只表达于肿瘤细胞且定位于胞浆，阳性率51．3％（40／78例），其中男性、中央型、累及胸膜和死亡患者的阳性率较高（P〈0．05），在年龄、分化程度、淋巴结转移和临床分期等分组中差异不明显。Stathmin的表达对生存曲线的分布有影响，阴性者预后较好（X2=4．348，P〈0．05）。不同化疗方案与未化疗组生存曲线的分布差异无统计学意义。Stath—min阴性者采用长春碱方案生存期较短，但差异无统计学意义（P=0．06）；阳性者中长春碱方案和紫杉醇方案差异无统计学意义。分化程度、淋巴结转移和stathmin表达是影响患者术后生存期的危险因素（P〈0．05）。结论通过免疫组化检测NSCLC手术切除标本中stathmin的表达对患者的预后估计有一定的价值，其中stathmin阴性者预后较好，但对抗微管化疗药物的选择意义不大。分化程度高、无淋巴结转移、stathmin阴性患者的预后较好。

原癌基因蛋白18第38位丝氨酸点突变肝癌细胞系的建立

目的构建人原癌基因蛋白18(oncoproteins 18,Op18)丝氨酸(serine,Ser)38磷酸化位点点突变(S38A)的肝癌细胞系。方法通过重叠延伸聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法定点诱变Op18 S38A,测序鉴定突变结果。采用脂质体转染和抗生素筛选,建立Op18野生型(wild types,wt)和Op18S38A的肝癌细胞株HCCLM6;并用Western blot进行鉴定。结果定点突变构建Op18 S38A的重组质粒经测序证实Op18第38位核苷酸突变由丝氨酸变为丙氨酸。将Op18 wt和Op18 S38A转染肝癌细胞株HCCLM6,抗生素压力筛选建立稳定表达的肝癌细胞株,Western blot结果显示Op18第38位丝氨酸磷酸化(pS38)在Op18 S38A细胞中的表达较Op18 wt和对照组细胞明显下降(P<0.05)。结论建立了稳定表达Op18 S38A的肝癌细胞株,为研究Op18位点磷酸化在肝癌发病中的分子机制提供细胞模型。

癌蛋白p18在细胞中的生物学作用

癌蛋白p18（Stathmin／oncoprotein 18）是一个相对分子质量为19kD的细胞质蛋白，与细胞微管的形成有关，是近来研究较多的微管不稳定蛋白。在细胞周期的不同阶段，癌蛋白p18通过自身的磷酸化和去磷酸化作用调节细胞微管系统的动态平衡。癌蛋白p18通过促进微管的解聚或阻止微管的聚合从而影响有丝分裂纺锤体的形成，影响细胞的增殖与凋亡。

Op18:一个潜在的肝癌诊断标志物

目的探讨人原癌基因蛋白18(Op18)在肝癌细胞和组织中的表达及临床意义。方法应用RT-PCR、Western blot和免疫组化染色法检测常见肝癌细胞和88对配对肝癌组织及癌旁组织中Op18的表达。结果 Hep3B、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6等常见肝癌细胞株中均见Op18表达;配对肝癌及癌旁组织中,RT-PCR发现肝癌组织中Op18阳性率达68.75%(11/16),Western blot发现Op18的阳性率为56.25%(9/16),免疫组化检测发现肝癌组织中Op18的阳性率为65.28%(47/72),P<0.05;Op18的表达与肿瘤大小数目、临床分化、门脉侵犯和TMN分期相关(P<0.05)。结论 Op18可能是一个潜在的肝癌诊断标志物。

Oncoprotein 18在肝癌侵袭转移过程中的作用

目的:探讨原癌蛋白18(Oncoprotein 18,Op18)在肝癌侵袭转移过程中的作用机制.方法:采用R N A干扰,抑制人肝癌细胞HCCLM3中Op18的表达,RT-PCR和Westernb l o t评价干扰效率;通过细胞粘附分析、体外Transwell分析法检测Op18表达缺失后对HCCLM3细胞粘附、运动和侵袭能力的改变;RT-PCR和免疫组织化学分别在48例未伴转移的肝癌组织和48例伴转移的肝癌组织中解析Op18表达与肝癌侵袭转移的关系.结果:RT-PCR和Western blot结果显示:在HCCLM3细胞中行RNAi后Op18表达被有效抑制,抑制率达到80%以上;Op18表达缺失后,在不同时间点(20、40和60 min)实验组细胞粘附能力(0.616±0.057、0.740±0.0713和1.001±0.083)较阴性对照组(0.944±0.068、1.196±0.115和1.441±0.053)明显下降(P<0.05);Transwell实验结果提示:经RNAi后实验组细胞运动、侵袭能力(运动:0.145±0.011,侵袭0.127±0.008)较阴性对照组(运动:0.206±0.008,侵袭:0.168±0.012)显著降低(P<0.01);分别在伴转移和未伴转移的肝癌组织中检测Op18的表达,RT-PCR(Op18与GAPDH相对比值:0.560±0.128vs 0.414±0.086)和IHC(积分吸光度值为:624.771±100.032 vs 413.786±71.833)实验结果均提示Op18在伴转移的肝癌组织中的表达更高(P<0.01).结论:Op18在肝癌的侵袭转移过程中发挥重要作用.

Stathmin蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Stathmin蛋白在乳腺癌中的表达及其与肿瘤病理特征的关系。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测61例乳腺癌组织中Stathmin蛋白的表达,并选取10例癌旁正常组织、10例乳腺纤维腺瘤作为对照。结果 Stathmin蛋白在乳腺癌组织、癌旁组织、纤维腺瘤之间的表达差异有统计学意义(P<0.05),乳腺癌组织表达高于纤维腺瘤(P<0.05)。Stathmin蛋白表达在不同组织学分级中差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺组织中Statmin蛋白表达与Ki-67蛋白表达具有相关性(P<0.05),与雌激素受体、孕激素受体表达无相关性(P>0.05)。结论 Stathmin蛋白过表达在乳腺癌发生发展中起了重要作用,可能成为预测乳腺癌新的生物学及个体化治疗的敏感指标。

Stathmin与子宫蜕膜化关系的研究进展

Stathmin作为一种微管失稳蛋白影响了细胞周期进程,其在人类子宫内膜组织的腺上皮和基质细胞中有所表达。研究表明,stathmin在调节人子宫内膜基质细胞分化过程中的初始阶段起着必不可少的作用,和蜕膜化相关。Stathmin在子宫内膜蜕膜化、蜕膜的分化增殖与凋亡和蜕膜相关细胞的侵袭与黏附方面均起了重要作用。而蜕膜化作为正常着床和妊娠的一个重要特征,与子面滋养层共同构成母胎界面,从而影响正常早期妊娠,并可能与早期自然流产相关。

Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法对58例结直肠癌组织、30例患者癌旁5 cm的正常黏膜组织中Stathmin蛋白的表达进行了检测,两组采用卡方检验连续性校正,以P<0.05有统计学意义。结果 Stathmin蛋白在结直肠癌组织中阳性率为69.0%(40/58),在正常黏膜中的阳性率为33.3%(10/30),Stathmin在癌组织表达明显高于正常黏膜(χ2=6.87,P<0.05);Stathmin蛋白表达与患者年龄、性别以及肿瘤组织的分化程度、浸润深度、是否有淋巴结转移关系不明显(χ2=0.26,P>0.05),与肿瘤的远处转移有关(χ2=9.83,P<0.05)。结论 Stathmin蛋白在结直肠癌组织中呈阳性的表达,除了与远处转移有一定关系,尚不能作为判断其余结直肠癌临床病理特性的依据。

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）中的表达情况，探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义，进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制。方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者，术中从肿瘤中心部位取癌组织（实验组），在肿瘤边缘外1．0cm部位取癌旁正常组织（对照组）。应用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平，冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况。结果RT-PCR结果显示，stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达；经半定量分析，stathminmRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平（t=9.655，P〈0．05）。免疫组织化学发现，stathmin蛋白在26例（26／38，68．4％）患者的喉癌组织呈阳性表达，在13例（13／38，34．2％）患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达；stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率（X^2=8．901，P〈0．05）。同时发现，stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组（t=6．284，）（X^2=5.810，P〈0.05），有颈部淋巴转移组明显高于无转移组（t=9．350,X^2=6．923，P〈0.05）。结论stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织，在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌，并且与颈淋巴转移有关。stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系，并可能与喉癌的预后有关。

小儿神经母细胞瘤蛋白质组的初步探索

目的应用蛋白质组学方法筛选与小儿神经母细胞瘤（NB）相关的差异表达蛋白质。方法收集2011年7～12月解放军总医院小儿外科经穿刺活检病理证实为Ⅳ期NB的标本3例及其化疗后术后切除肿瘤标本3例，患儿平均年龄3．17岁。对化疗前后NB组织全蛋白进行二维凝胶电泳，应用超高效纳升液相色谱一电喷雾串联质谱进行蛋白质斑点鉴定和生物信息学分析。结果成功建立了组织化疗前后双向电泳图谱，应用图像分析软件发现化疗后有7个差异表达明显的蛋白质斑点，其中有2个蛋白质表达上调，分别为Nm23蛋白和神经多肽h3；5个蛋白质表达下调，分别为癌蛋白18、热休克蛋白27、线粒体烯酰脂辅酶A、过氧化物酶1和过氧化物酶3。结论应用二维凝胶电泳和超高效纳升液相色谱一电喷雾串联质谱能鉴定小儿NB化疗前后的差异表达蛋白。