癌-睾丸抗原MAGE-A1、A3、A4在视网膜母细胞瘤中的表达

目的了解视网膜母细胞瘤(RB)组织癌—睾丸抗原(CTA)基因MAGE-A1、A3、A4的表达,探讨这些基因成为RB特异性免疫治疗靶抗原的可能性。方法人RB组织15例,对照组为12例非肿瘤病变视网膜组织及22例正常眼部组织。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测上述组织MAGE-A1、A3、A4的mRNA表达情况,并根据肿瘤病理分级、肿瘤大小、临床分期等临床指标进行统计学分析。结果 15例RB组织中,MAGE-A1、A3、A4的表达率分别为33.33%(5/15)、46.67%(7/15)和33.33%(5/15),有73.33%(11/15)的RB组织至少表达一种MAGE基因,33.33%(5/15)的RB组织至少表达两种MAGE基因。12例非肿瘤病变视网膜组织及22例正常眼部组织三种MAGE基因均不表达。结论 MAGE-A1、A3、A4基因在RB组织中有一定频率的表达,MAGE-A1、A3、A4的表达率与病人的性别、年龄和临床分期,肿瘤大小及病理分级均无相关性(P>0.05)。MAGE-A1、A3、A4有希望成为RB特异性免疫治疗的靶抗原。

膀胱移行细胞癌中肿瘤-睾丸抗原基因的表达情况

目的:研究4种肿瘤-睾丸抗原(CT)基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测49例膀胱移行细胞癌患者癌组织(新鲜标本,Ta-T1期28例,T2-T4期21例;G120例,G216例,G313例)及其中15例患者癌旁组织的cTAGE-1、cTAGE-2、MAGE-A1及NY-ESO-1等4种CT基因mRNA的表达。结果:49例膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A1表达最高,其次为cTAGE-1,cTAGE-2及NY-ESO-1,分别为59%(29/49),55%(27/49),51%(25/49)及47%(23/49)。15例癌旁组织表达均阴性。膀胱移行细胞癌组织中肿瘤不同分期、不同分级之间4种CT基因表达的差异均无统计学意义(Pearsonχ2检验法,P>0.05)。结论:CT基因在膀胱移行细胞癌组织中有较高表达,而在癌旁组织无表达,可以进一步研究作为膀胱移行细胞癌特异性免疫治疗靶基因的可行性。

癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测癌-睾丸抗原SSX1-5 mRNA在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,探讨其用于HCC免疫治疗的可能性.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测61例HCC组织及52例配对的HCC癌旁组织中SSX1-5 mRNA,结合临床相关指标进行统计学分析.随机抽取PCR阳性产物进行DNA测序.结果:SSX1、SSX2、SSX4和SSX5 mRNA在HCC中的表达率分别为42.6%(26/61)、8.2%(5/61)、39.3%(24/61)和6.6%(4/61);未检测到SSX3的表达.在癌旁组织中,未检测到SSX1-5 mRNA;HCC组织中,至少表达1个SSX基因者达50.8%(31/61);表达2个或2个以上者达32.8%(20/61),表达3个或3个以上者达9.8%(6/61),同时表达4个者达3.3%(2/61).SSX的表达与临床相关指标关系的分析结果显示:门静脉癌栓形成与SSX1的表达、患者的年龄与SSX4的表达均具有显著性差异(P<0.05);DNA测序证实PCR阳性产物为目的基因.结论:SSX1、SSX2、SSX4和SSX5在HCC组织中表达频率不尽相同,但具有较强的特异性,提示有可能成为HCC免疫治疗的靶抗原.

肿瘤-睾丸抗原SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在胰腺癌中的表达及其生物学意义

目的检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在正常胰腺组织、慢性胰腺炎以及胰腺癌中的表达情况,寻找胰腺肿瘤中高表达的CTA。方法应用免疫组织化学SP法检测8例正常胰腺组织、15例慢性胰腺炎组织、52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达。Western blotting检测52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达。结果正常胰腺组织、慢性胰腺炎中SSX、MAGE-A1和NY-ESO-1均不表达,SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在52例胰腺癌的阳性表达率分别为48.08%(25/52)、7.69%(4/52)、5.77%(3/52);经相关分析,SSX、NY-ESO-1和MAGE-1的阳性表达与患者的年龄、性别、病变部位、分化程度均未见明显相关关系(P>0.05);SSX的表达与肿瘤的浸润转移呈负相关(r=-0.306,P=0.028);52例胰腺癌病例中55.77%(29/52)有1种以上的CTA表达。结论不同种类的CTA在胰腺癌中的表达存在显著差异,SSX的阳性表达率最高;胰腺癌中SSX的高表达与肿瘤的转移呈明显的负相关关系;CTA在胰腺癌中的表达呈现簇生现象。

肿瘤-睾丸抗原MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4在胰腺癌中的表达及意义

目的:检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)黑色素抗原A(Melanoma Antigen-A,MAGE-A)在胰腺癌中的表达情况,寻找胰腺癌中高表达MAGE亚型。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对52例胰腺癌组织及癌旁正常组织中MAGE亚型MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4的表达情况进行检测。结果:癌旁正常组织中无MAGE亚型的表达,MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4在52例胰腺癌的阳性表达率分别为5.77%(3/52)、44.23%(23/52)、23.08%(12/52);经相关分析,MAGE-A1、MAGE-A4的阳性表达与患者的年龄、性别、病变部位、分化程度无明显相关关系(P>0.05);MAGE-A3的阳性表达与肿瘤的分化程度呈负相关(r=-0.294,P=0.034),而与患者的年龄、性别、病变部位无明显相关关系(P>0.05)。结论:胰腺癌中MAGE亚型中MAGE-A3表达率最高,其阳性表达与肿瘤的分级呈负相关关系;MAGE-A3有望成为胰腺癌免疫治疗特异性的靶点。

肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因mRNA在肝细胞癌中的表达及HLA-A2限制性CTL表位的预测

目的:检测肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因在肝细胞癌(HCC)中的表达,预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.为HCC的免疫治疗寻找新的靶位.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCC患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(肝硬化和正常肝组织)中的SPANX-C基因mRNA进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行序列测定;用超基序法和量化基序法联合预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.结果:在所检测的115例HCC组织中有70例(60.9%)表达SPANX-C基因mRNA,癌旁组织和20例对照肝组织均不表达.SPANX-C基因的表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度、血清甲胎蛋白(AFP)水平等临床指标无相关性(P>0.05).用基序预测法筛选出5个HLA-A2限制性CTL表位(9肽),其中SPANX-C51-59(LVVRYRRNV)与HLA-A2分子具有较高结合力.结论:SPANX-C基因mRNA在HCC组织中呈高频率特异性表达,并存在HLA-A2限制性CTL表位,有望用于HCC的免疫治疗.

肝细胞癌中癌-睾丸抗原SSX2与SCP-1mRNA表达的研究

目的检测癌-睾丸抗原滑膜肉瘤X断裂点2(SSX2)与联会复合体蛋白1(SCP-1)在肝细胞癌组织中的表达。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对45例肝细胞癌组织和相应癌旁肝组织中SSX2与SCP-1的mRNA进行检测。结果在肝细胞癌组织中SSX2 mRNA表达阳性率28.9%(13/45),SCP-1mRNA表达阳性率22.2%(10/45),相应的癌旁肝组织均无表达,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。SSX2与SCP-1的mRNA表达与AFP阳性率、HbsAg阳性率、肿瘤大小、有无肝硬化情况和病理分级等无相关性(P>0.05)。SSX2 mRNA与SCP-1 mRNA表达的相关性分析提示两者无相关性(P>0.05)。结论 SSX2与SCP-1在HCC中呈低频率的表达。

癌-睾丸抗原基因在神经胶质瘤干细胞中的表达

背景:癌-睾丸抗原基因在胶质瘤干细胞表达还不甚清楚。目的:检测癌-睾丸抗原基因在神经胶质瘤干细胞中的表达。方法:通过神经球培养的方法而分离干细胞。以半定量PCR及实时荧光定量PCR检测癌-睾丸抗原基因在母细胞、干细胞与分化细胞中的表达。结果与结论:以神经球培养方式从胶质瘤细胞系中可分离出肿瘤球,将肿瘤球培养在含血清的培养基中,它的形态呈贴壁分化,且与母细胞没有区别。半定量PCR及实时荧光定量PCR检测发现与母细胞和分化细胞相比,癌-睾丸抗原基因在干细胞中的表达最高。提示癌-睾丸抗原基因可能为肿瘤干细胞的表面抗原。

肿瘤-睾丸抗原SSX_1和SSX_4 mRNA在肝细胞癌中的表达

目的检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)SSX1和SSX4mRNA在肝细胞癌(HCC)及外周血中的表达,探讨CTA抗原SSX1和SSX4在HCC中表达有无特异性。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对35例HCC患者癌组织和相应的癌旁组织SSX1和SSX4基因表达进行检测,对其中6例RT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定;HCC确诊后第2周对30例患者外周血中SSX1基因进行检测。结果35例HCC患者中,SSX1和SSX4的表达率分别为77.1%(27/35)和65.7%(23/35);癌旁组织、12例肝硬化和15例正常肝组织未检测到SSX1和SSX4的表达。6例DNA序列测定结果显示RT-PCR产物为SSX1和SSX4的cDNA。SSX1和SSX4的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、血清甲胎蛋白(AFP)水平、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染无相关关系(均P>0.05)。外周血中未检测到SSX1表达。结论SSX1和SSX4在HCC中呈高度特异性表达,是制备HCC疫苗理想的靶向分子,多种CTA联合表达为多效价疫苗治疗HCC提供了理论基础。

癌-睾丸抗原SSX-3的HLA-A2/A3限制性CTL广谱表位的预测

目的:预测基于癌-睾丸抗原SSX-3的HLA-A2/A3限制性CTL广谱表位。方法:采用MULTI-PRED在线预测系统分别针对HLA-A2超型和HLA-A3超型对SSX-3序列进行CTL表位预测,其中对两种超型分值均较高的表位被初步认定为广谱表位;然后,运用NetCTL1.2在线预测系统对初步认定的广谱表位进行蛋白酶体裂解和TAP转运效率预测进一步筛选。结果:共预测出9个SSX-3抗原的HLA-A2/A3限制性广谱表位。结论:MULTIPRED与NetCTL1.2在线预测系统相结合可以高效的预测广谱CTL表位;本报道为SSX-3的广谱CTL表位的实验研究提供了重要的理论依据。

癌-睾丸抗原SSX2在肝细胞癌中的表达研究

目的检测癌-睾丸抗原SSX2在肝细胞癌组织中的表达。方法应用RT-PCR技术,对40例肝细胞癌的癌组织及相应癌旁组织进行SSX2基因的mRNA检测。结果肝细胞癌组织中SSX2mRNA表达阳性率为27.5%(11/40),而相应的癌旁组织无SSX2 mRNA表达阳性率为0(0/40),两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。统计学分析显示SSX2表达与AFP阳性率、HbsAg阳性率、病理分级、肝细胞癌肿瘤大小、肝细胞癌是否伴有肝硬化的情况等相关的临床指标均无关(P>0.05)。结论 SSX2在HCC中呈低频率的表达。

癌-睾丸抗原与胶质瘤

目前对胶质瘤的传统治疗手段未能提高患者的生存率。免疫治疗作为一种辅助治疗手段具有一定的发展前景。寻找特异性的肿瘤抗原是开展肿瘤免疫治疗的前提。癌-睾丸抗原非常适用于肿瘤特异性免疫治疗。本文对癌-睾丸抗原在胶质瘤中表达规律、表达机理等作一综述,并对其应用于胶质瘤免疫治疗的前景作了展望。

癌-睾丸抗原NY-ESO-1在视网膜母细胞瘤中的表达

目的了解视网膜母细胞瘤(RB)组织癌-睾丸抗原(CTA)基因NY-ESO-1的表达,探讨这些基因成为RB特异性免疫治疗靶抗原的可能性。方法选15例人RB组织和12例非肿瘤病变视网膜组织及22例正常眼部组织(对照组),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究上述组织NY-ESO-1的mRNA表达情况,并根据肿瘤病理分级、肿瘤大小、临床分期等临床指标进行统计学分析。结果 15例RB组织中,NY-ESO-1的表达率分别为40%(6/15);NY-ESO-1基因在12例非肿瘤病变视网膜组织及22例正常眼部组织中均不表达。结论 NY-ESO-1基因在RB组织中有一定频率的表达,NY-ESO-1的表达率与病人的性别、年龄和临床分期,肿瘤大小及病理分级均无相关性(P>0.05)。NY-ESO-1有希望成为RB特异性免疫治疗的靶抗原。

QGY-7701肝癌细胞株中癌-睾丸抗原GAGE-1基因的表达

目的研究癌-睾丸抗原GAGE-1基因mRNA在QGY-7701肝癌细胞株中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应技术检测肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因mRNA的表达,并与正常肝组织比较。结果肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因呈阳性表达,正常肝组织中GAGE-1基因呈阴性表达。结论 GAGE-1基因具有作为诊断肝癌的分子标记和免疫治疗肝癌的特异性靶位的潜在价值。

癌-睾丸抗原基因在肿瘤诊断与免疫治疗中作用的研究进展

肿瘤一直是人类医疗健康领域的巨大难题,其早期诊断和治疗是解决这一难题的关键。癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类多功能蛋白家族,在男性精子细胞及肿瘤细胞中特异性表达,而在其他健康体细胞中无表达。研究发现CTA参与肿瘤的发生发展,且部分CTA具有免疫原性,为肿瘤免疫治疗提供了可能。临床试验中已针对CTA家族中黑色素瘤相关抗原1(MAGE1)和纽约食管鳞状上皮细胞癌1(NY-ESO-1)抗原进行多种肿瘤疫苗研究,展现了一定的临床疗效及良好的生物安全性;CTA在正常组织和肿瘤细胞中的表达差异及功能研究有利于推动肿瘤标志物的筛选及新的免疫疗法的开发。本文主要综述了CTA的生物学特性及其在肿瘤诊断和免疫治疗中作用的研究进展。

癌-睾丸抗原MAGE-A1在视网膜母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的检测癌-睾丸抗原MAGE-A1在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)组织中的表达情况,探讨其成为RB特异性免疫治疗靶抗原的可能性。方法采用RT-PCR技术研究人RB组织、非肿瘤病变视网膜组织及眼部正常组织中MAGE-A1基因的表达情况;采用免疫组织化学技术对RB组织和正常视网膜组织中MAGE-A1蛋白的表达进行分析。结果MAGE-A1基因在RB组织中的表达率为33.33%;在所有非肿瘤病变视网膜组织及眼部正常组织中则无表达;MAGE-A1基因的表达与患者的各临床指标间无显著相关性(P>0.05)。MAGE-A1蛋白在RB组织中的表达率为20%,在正常视网膜组织中则不表达;MAGE-A1蛋白的表达率与患者年龄相关,年龄≤2岁的患者有表达增高的倾向(P<0.05);眼内期有表达增高的倾向(P<0.01);MAGE-A1蛋白的表达与RB患者的性别、肿瘤的分化程度和大小无显著相关性(P>0.05)。结论MAGE-A1在RB组织中有一定量的表达且具有较强的特异性,提示有可能成为RB特异性免疫治疗的靶抗原。

DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响

目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3b)以及针对DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT3a+3b)转染HepG2细胞,并以使用5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-Aza-dC)处理的细胞作为阳性对照,采用RT-PCR、实时定量PCR和Western blotting检测细胞中DN-MT及癌-睾丸抗原的表达情况,并采用甲基化特异PCR(MSP)检测部分癌-睾丸抗原基因启动子的甲基化状态。结果经siRNA干扰后,细胞中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达量均明显降低。癌-睾丸抗原CT10和SSX1在转染DNMT1+3a和DNMT1+3b的细胞中出现再表达,而MAGE1及MAGE3在各siRNA转染细胞中均有表达,且无明显差异。CT10的启动子区发生了去甲基化,但MAGE1启动子区处于非甲基化状态。结论在HepG2细胞中,干扰DNMT可使癌-睾丸抗原基因的启动子区发生去甲基化,后者可使由甲基化导致的不能表达的癌-睾丸抗原基因发生再表达。