应用快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体

目的 建立快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体 ,并对其敏感性和特异性进行评价。 方法 以胶体金标记纯化的基因工程重组抗原 ,在玻璃纤维上预包被金标记的纯化抗原 (Au -Ag)和鼠IgG ,在硝酸纤维素膜上检测线处包被羊抗人 μ链、羊抗人IgG或重组抗原 ;在对照线处包被羊抗鼠IgG ,组装成检测试纸。在试纸条的玻璃纤维上加待检血清 ,再滴加 2滴反应液。观察金标抗原释放后NC膜上检测线和对照线的反应情况 ,检测线和对照线同时出现红色条带判为阳性 ,仅对照线出现红色条带判为阴性 ,对照线未出现条带为无效试验。结果 间接免疫荧光法IFA检测IgG和金标免疫层析法检测IgM、IgG、总抗体的敏感性分别为 88 1% ,92 3% ,90 9%和 98 6 % ;特异性分别为 96 0 % ,94 7% ,94 7%和93 3%。结论 金标免疫层析法可替代传统方法用于检测恙虫病东方体特异性抗体。

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 。

小儿轮状病毒肠炎特异性抗原抗体检测的临床意义

目的 :探讨特异性血清Rotv -IgM、IgG及大便Rotv -Ag对临床诊断的价值。 方法 :以15 0例轮状病毒肠炎为研究对象 ,采用ELISA法分别测定特异性血清Rotv -IgM、IgG及大便Rotv -Ag。结果 :①血清Rotv -IgM、IgG及大便Rotv -Ag阳性率分别为 70 0 0 %、 71 33%、 89 33% ,三者同时阳性 5 0 6 7%。三者均与病情轻重无关 (P >0 0 5 )。②血清Rotv -lgM在病后 1～ 3d即可产生 ,血液Rotv -IgG比Rotv -IgM出现晚 ,随着病程延长 ,其阳性率逐渐升高。③大便Rotv -Ag在病后 1～ 3d即可存在 ,急性期每天大便都能排毒 ,其检出率较血清Rotv -IgM、IgG高(P <0 0 1)。结论 :血清Rotv -IgM及大便Rotv -Ag检测是诊断轮状病毒肠炎较敏感的方法 ,它们对临床诊断该病提供了有价值的依据。

梅毒特异性抗体分离检测装置的性能验证和初步应用

目的·设计获得梅毒特异性抗体分离检测的免疫亲和层析装置,对其检测性能进行验证,并初步应用于临床。方法·通过亲和层析装置中包被梅毒螺旋体抗原的亲和填料,特异性吸附样品中可能存在的梅毒螺旋体特异性抗体(包括IgG和IgM型),经洗涤、洗脱、脱盐处理后,由羊抗人IgG、IgM金标层析试纸条检测可能存在的梅毒特异性IgG、IgM型抗体。对20例梅毒总抗体检测阴性标本、230例梅毒抗体阳性的临床标本进行检测,并对其中的40例标本进行免疫印迹检测法对比测定。结果·优化获得亲和层析装置标准化操作程序。该装置能有效实现梅毒特异性IgG、IgM型抗体的分离检测。20例梅毒总抗体检测阴性标本经该装置检测的结果均为阴性。230例梅毒抗体阳性的临床标本中,2例标本检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阴性,210例标本检测结果为TP-IgG型抗体阳性、TP-IgM型抗体阴性,10例标本检测结果为TP-IgG型抗体阴性、TP-IgM型抗体阳性,8例标本检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阳性。40例标本检测结果与免疫印迹检测法结果进行比对,其中2例标本亲和层析装置检测结果为TP-IgG、IgM型抗体均阴性,免疫印迹检测法结果均为TP-IgG型抗体阳性、TP-IgM型抗体阴性,但2种方法检测结果的差异无统计学意义(P>0.05)。结论·设计获得的该亲和装置应用于临床样本中梅毒特异性IgM、IgG抗体的分离检测切实可行,对后续临床运用有重要价值。

脑脊液抗结核菌IgM抗体的检测及其临床意义(摘要)

在临床上,特异性Ig抗体的升高能作为近期感染的一个指标,尤其是在中枢神经系统感染时,脑脊液(CSF)特异性IgM抗体的检出能作为早期诊断疾病的一种方法。本文用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CSF特异性抗结核菌IgM抗体,以探讨其对结核性脑膜炎(简称结脑)的诊断价值及其临床意义。

用登革病毒非结构蛋白1抗原检测法诊断登革病毒感染的效果分析

目的 :探讨用登革病毒非结构蛋白1(NS1)抗原检测法诊断登革病毒感染的效果。方法 :选取2018年8月至9月期间广州医科大学附属顺德医院收治的25例登革病毒感染患者作为研究对象。这些患者入院后,均对其进行登革病毒NS1抗原检测、登革病毒特异性IgG抗体和IgM抗体联合检测。然后比较用登革病毒NS1抗原检测法和登革病毒特异性IgG抗体、IgM抗体联合检测法对这些患者的病情进行诊断的准确率。结果 :用血清登革病毒NS1抗原检测法对这25例患者的病情进行诊断的准确率高于用血清登革病毒特异性IgM抗体和IgG抗体联合检测法对其病情进行诊断的准确率(P <0.05)。结论 :用登革病毒NS1抗原检测法诊断登革病毒感染的准确率较高。

严重急性呼吸综合征特异性体液免疫规律调查

目的:调查严重急性呼吸综合征患者特异性体液免疫规律。方法:采用间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法检测SARS患者血清中特异性抗体水平。结果:SARS患者血清特异性抗体IgG水平在住院5周内持续升高,第5周达最高值,5周后逐步下降,第6～7周阳性率为100%。特异性抗体IgM水平在住院3周内持续升高,第3周达到最高值,阳性率为70%,第4周逐步下降。抗SARS病毒核蛋白抗体水平在住院第5周达最高值,5周后略有下降,住院5～18周阳性率达100%。结论:SARS患者血清特异性抗体检测对于SARS临床诊断、康复血浆治疗和流行病学调查具有重要价值。

β_2-糖蛋白I相关抗磷脂抗体与妊娠丢失

目的探讨β2糖蛋白I(β2GPI)相关抗磷脂抗体对于妊娠丢失免疫因素病因的诊断价值。方法通过酶联免疫吸附试验检测59名妊娠丢失患者(实验组)及29名正常妊娠分娩者(对照组)的血清中抗心磷脂抗体(aCL)、β2GPI依赖性aCL、β2-GPI依赖性抗磷脂酰丝氨酸抗体(aPS)及β2GPI非依赖性aCL的IgG水平。结果(1)自然流产史组β2GPI依赖性aPS的阳性率高于对照组(P<0.05),死胎史组β2GPI依赖性aCL和aCL的阳性率均高于对照组(P<0.05);(2)不同自然流产次数组β2GPI依赖性aPS阳性率均高于对照组(P<0.05);(3)各种抗体对于诊断妊娠丢失的敏感性及特异性比较aCL的敏感性最高,为45.3%;β2GPI依赖性aPS和β2GPI依赖性aCL的特异性均为100.0%;(4)各种aPL交叉阳性情况β2GPI依赖性aPS与β2GPI依赖性aCL的交叉阳性率最高,为33.3%,β2GPI依赖性aPS与β2GPI非依赖性aCL交叉阳性率最低,为7.7%。结论β2GPI依赖性aPS与自然流产有关,β2GPI依赖性aCL和aCL与死胎有关,联合检测能增加妊娠丢失患者免疫因素病因诊断的敏感性。β2GPI依赖性aPS及β2GPI依赖性aCL的特异性最高,是诊断妊娠丢失较准确的指标。β2GPI依赖性aPS出现于一次自然流产史组,有统计学意义,其阳性率与流产次数无关。

食物特异性IgG抗体辅助诊断结直肠癌的初探讨

目的:分析食物特异性IgG抗体与结直肠癌(CRC)的相关性,计算其与癌胚抗原(CEA)及糖类抗原CA19-9联合检测的诊断效能,初步探讨食物特异性IgG抗体对结直肠癌是否具有预测、诊断价值可能性。方法:选取30例患者进入癌症研究组,41例患者进入息肉炎症组,35例健康体检者进入正常对照组。分析各组别的年龄、性别资料的差异;统计各组别血清中食物特异性IgG抗体的总阳性率的差异;比较各组血清中14项食物特异性IgG抗体水平;对比各组血清的CEA、CA19-9水平;通过受试者工作特征曲线比较单独检测与联合检测之间的潜在诊断性能,以确定其诊断效能。结果:三组的年龄与性别比分别为64.10和19/11、58.0和24/17、58.4和19/16,差异无统计学意义。癌症研究组、息肉炎症组、正常对照组的食物特异性IgG抗体检测的总阳性率分别为63.33%、53.66%、31.43%,差异有统计学意义。进行14项食物特异性IgG抗体水平三组间的差异比较,有差异的过敏原项目为鸡肉、玉米、螃蟹、蘑菇、大米、虾、大豆与西红柿8项(均P<0.05)。三组CEA与CA19-9水平差异均有统计学意义(均P<0.001)。筛选后鸡肉、螃蟹、蘑菇、虾、西红柿这5个过敏原项目与CEA项目、CA19-9项目单独及联合诊断CRC性能比较,七项目联合诊断均大于单独诊断。七项目联合诊断诊断性能较优(AUC=0.925 0,灵敏度=98.68%,特异度=73.33%,Y1=0.720 2)。结论:引入食物特异性IgG抗体项目联合CEA、CA19-9能提高CRC的诊断效能的作用。对于食物不耐受人群来讲,避免相应过敏性食物的摄入,有可能会减低患CRC的风险。

先天性感染日本血吸虫家兔攻击感染后血清抗体动态的进一步研究

目的运用日本血吸虫成虫抗原和虫卵抗原检测日本血吸虫先天性感染仔兔攻击感染后的血清特异性 IgG、IgM 抗体并观察其动态变化,探讨仔兔先天性感染后的体液免疫应答。方法 10只怀孕晚期母兔分为三组:4只孕免人工感染700条日本血吸虫尾蚴/只,所产仔免为先天性感染组(G1);3只孕免人工感染700条日本血吸虫尾蚴/只,所产仔兔于出生后第55天攻击感染20条尾蚴/只,该组仔兔为先天性感染且攻击感染组(G2);3只孕兔不感染,正常分娩的健康同龄仔兔感染20条尾蚴/只作对照 C 组三组仔兔分别于出生后第53、67、81、95天采血收集血清,分别运用 AWA-ELISA 及 SEA-ELISA 法检测血清特异性 IgG、IgM 抗体,观察动态变化。结果仔兔先天性感染率为66.7%(10/15);G2组和 C1组10只先天性感染仔兔相比较,血清特异性 IgG、IgM 抗体动态规律均比较接近,无论是AWA-ELISA 还是 SEA-ELISA 检测,出生后第95天仔兔 IgG、IgM 抗体 OD 均值在两组间差异均没有显著性(P>0.05);对照组仔兔血清 IgG、IgM 出生后第95天检测几乎全部呈阳性,抗体阳性仔兔数明显多于同期 G1、G2组,且 OD 均值也显著高于同期 G1、G2组(P<0.05)。结论先天性感染日本血吸虫的仔兔血清抗体呈低免疫反应状态(hypo-responsiveness),可能存在免疫耐受,攻击性感染不能诱导仔兔免疫系统产生明显的保护性免疫。

特应性皮炎和湿疹患者血清金黄色葡萄球菌肠毒素B特异性抗体的检测及其意义

目的探讨特应性皮炎(AD)和湿疹患者血清金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)特异性抗体水平及其意义。方法采用多中心、随机双盲、对照法,将118例AD和207例湿疹患者分为莫匹罗星治疗组和对照组,于治疗前和治疗28d取血清行间接酶联免疫吸附测定法测定抗SEB特异性IgG、IgM水平,采用链霉亲和素-生物素法检测抗SEBIgE水平。结果治疗前,抗SEBIgE水平AD组显著高于正常人对照组(P=0.019)和湿疹组(P=0.048),湿疹组与正常人对照组之间差异无统计学意义(P=0.883);抗SEBIgM水平AD组(P=0.012)和湿疹组(P=0.000)均显著高于正常人对照组,AD组与湿疹组之间差异无统计学意义(P=0.088);抗SEBIgG水平各组间均差异无统计学意义(P=0.897)。临床症状评分与抗SEBIgE水平之间AD组(P=0.842)和湿疹组(P=0.134)均无显著相关性。治疗28d后,抗SEBIgM水平AD组显著下降(P=0.003),湿疹组亦显著下降(P=0.000),但治疗组与对照组间AD组(P=0.331)和湿疹组(P=0.815)差异均无统计学意义。结论AD和湿疹患者血中抗SEBIgM、IgE升高,反映皮损处近期金黄色葡萄球菌定植并参与了皮肤变应性炎症性反应。

针对SARS患者的特异性抗体检测结果不容乐观

在中华医学会检验学分会主任委员丛玉隆教授组织召开的“四省市SARS实验诊断学术研讨会”、“北京SARS诊断管理和学术研讨会”及“全国五省市SARS实验诊断学术研讨会”上,检验学界的专家们专门就目前SARS实验室诊断方面存在的问题进行了探讨、分析和总结。 专家们一致认为,对SARS的诊断至今仍以临床为主,但其确诊或疑似标准并不完善,急需用实验诊断的方法发现病原的证据,以进行SARS的确诊和鉴别诊断。目前,确定诊断的方法主要有病毒培养、免疫学检测及分子诊断法。病毒培养通常对实验室要求很高,检验医学科难以进行;分子诊断法目前还很不完善;免疫学测定有免疫荧光实验(IFA)和酶联免疫吸附实验(ELISA)。IFA测定特异性强,但灵敏度较低并需要有固定的SARS病毒颗粒,更适合检验医学科应用的是ELISA法。然而遗憾的是,经过临床验证,ELISA的检测结果不尽如人意。问题出在哪里?如何解决?

接受核酸检测应做好哪些准备等4题

问:抗体检测和核酸检测的区别是什么?专家解答:新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。在感染一段时间以后,一般是7~10天之后,人体会产生针对病毒的特异性抗体。最先出现的是IgM抗体,随后会出现IgG抗体,所以使用免疫学检测方法能够检测这些特异性抗体,判断人体是否感染过病毒。