柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注肠组织半胱氨酰白三烯受体1表达和病理的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)保护作用和机理。方法:30只大鼠分为3组,假手术对照组、I/R模型组和中药治疗组各10只。通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变。结果:1与对照组比较,中药治疗组大鼠肠道组织的病理改变均明显减轻。2肠I/R时肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R肠道组织的病理损害,并能抑制大鼠肠黏膜抑制肠组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肠组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肠黏膜细胞凋亡的影响

目的研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法 30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肠组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察小肠病理改变,检测小肠重量变化,TUNEL-方法检测小肠黏膜细胞凋亡。结果 (1)与对照组比较,中药组大鼠肠组织的病理改变均明显减轻(均P<0.05);与对照组比较,模型组小肠含水量明显增加(P<0.05),而中药组小肠含水量显著降低(P<0.01);(2)肠I/R时肠组织CysL.TR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与模型组比较,中药组小肠黏膜细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)小肠黏膜中CysLTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、黏膜病理损伤、小肠含水量呈正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论柴芍承气汤能减轻肠I/R肠组织的病理损害和降低小肠黏膜细胞凋亡,并能抑制肠黏膜组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

温肺合剂对闭塞性细支气管炎模型大鼠肺组织纤维化和半胱氨酰白三烯受体1表达的影响

目的:探讨温肺合剂对闭塞性细支气管炎(BO)模型大鼠肺组织纤维化和半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR-1)表达的影响。方法:将200只大鼠随机分为正常组、模型制备组,BO造模结束后将模型制备组大鼠随机分为模型组、温肺合剂低、中、高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组。正常组、模型组按大鼠处死时间点分为第7天、第14天、第21天、第28天,药物干预组按处死时间点分为第14天、第21天、第28天,每个亚组10只大鼠。比较各组大鼠肺系数变化情况判断肺纤维化情况;采用HE染色观察大鼠肺组织炎症及纤维损伤结果;采用蛋白质免疫印迹法观察肺组织CysLTR-1表达水平。结果:温肺合剂中、高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组肺系数显著低于模型组(P<0.01)。HE染色观察肺组织病理发现,药物干预各组实验前期病理表现与模型组类似,后期温肺合剂中、高剂量组纤维化程度小于温肺合剂低剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组。模型组CysLTR-1表达水平显著高于正常组(P<0.01)。温肺合剂高剂量组和地塞米松+孟鲁司特钠组各时间点CysLTR-1表达水平均显著低于模型组(P<0.01),且两者之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:温肺合剂可抑制闭塞性细支气管炎模型大鼠肺组织CysLTR-1的表达,阻断CysLTs介导的炎症及纤维化。

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肝组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肝细胞凋亡的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)继发肝损伤的保护作用及其机制。方法:30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肝组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,Cys LTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察肝脏病理改变,TUNEL方法检测肝细胞凋亡。结果:(1)与对照组比较,模型组有大鼠肝脏病理损伤,中药组大鼠组肝脏组织的病理改变明显减轻(均P<0.05);(2)肠I/R时肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与对照组比较,模型组肝细胞凋亡指数升高;与模型组比较,中药组肝细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)肝组织中Cys LTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、肝脏组织病理损伤正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R继发肝脏损伤的病理损害和降低肝细胞凋亡,并能抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达,柴芍承气汤可能通过抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达和抑制肝细胞凋亡减轻肠I/R继发肝损伤。

支气管肺发育不良早产儿外周血清5-脂氧合酶激活蛋白、白三烯C4合成酶及半胱氨酰白三烯受体1的表达研究

目的:探讨新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)及支气管肺发育不良(bronchopul-monary dysplasia,BPD)患儿血清中5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase activating protein,FLAP)、白三烯C4合成酶(leukotriene C4 synthase,LTC4S)及半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)水平变化的意义,旨在寻找BPD早期敏感的生物学指标。方法:收集2015年8月—2017年12月在南京医科大学第一附属医院儿科收治入院的胎龄<37周、出生体重<2 500 g的新生儿病例。待其出院后根据患儿完整住院信息将病例整理为无肺部疾病的早产儿65例(对照组),不合并BPD的NRDS早产儿60例(NRDS组),BPD早产儿49例(BPD组)。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测新生儿生后3、7、14 d血清中FLAP、LTC4S、CysLTR1水平。比较3组各时间点各指标的浓度水平,采用方差分析、t检验及卡方检验等进行统计学分析。结果:生后3 d BPD组血清FLAP、CysLTR1水平均高于对照组和NRDS组(P均<0.05)。生后7 d BPD组血清FLAP、LTC4S、CysLTR1水平均高于对照组(P均<0.05),BPD组血清FLAP和CysLTR1水平分别高于NRDS组(P <0.05)。生后14 d BPD组仅血清LTC4S水平高于对照组(P <0.05)。结论:生后3 d血清PLAP、CysLTR1水平,生后7 d血清FLAP、LTC4S和CysLTR1水平,生后14 d血清LTC4S水平可作为BPD早期诊断的生物学指标。

白三烯D_4和白介素13对人肺成纤维细胞白三烯受体1 mRNA表达及嗜酸粒细胞趋化因子产生的影响

探讨白三烯D4(LTD4)和白介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞白三烯受体(CysLT1R)表达和eotaxin产生的影响。采用培养人肺成纤维细胞株(MRC-5),以不同浓度的IL-13进行刺激,用实时定量RT-PCR法测定CysLT1R mRNA表达的变化。再以不同浓度的LTD4和IL-13刺激,用ELISA法测定上清液中eotaxin的浓度,并观察Montelukast对eotaxin的产生是否有抑制作用。结果显示,培养的人肺成纤维细胞上存在着CysLT1R mRNA的低表达,以10 ng/ml IL-13刺激时,随着刺激时间延长,CysLT1R mRNA表达逐渐增高,48 h达高峰,较未刺激时表达增加(18.56±7.41)倍(P<0.01)。当以10 ng/ml和100 ng/ml的IL-13浓度刺激48 h时,较未刺激细胞CysLT1R mRNA表达分别增加(17.33±3.81)倍和(20.11±5.05)倍(P<0.01)。IL-13也能促进成纤维细胞产生eotaxin,以10 ng/ml和100 ng/ml的IL-13刺激成纤维细胞时,eotaxin浓度分别为(155.43±15.95)pg/ml和(221.31±17.23)pg/ml,较未刺激细胞(31.67±3.49)pg/ml明显增加(P<0.01)。单独给予LTD4刺激时,eotaxin浓度则无明显变化。但是以1×10-7mol/L和1×10-6mol/L浓度的LTD4分别联合10 ng/ml的IL-13共同刺激时,产生eotaxin的浓度分别为(204.4±25.4)pg/m和(255.1±38.3)pg/ml;较仅给予10 ng/ml的IL-13刺激时(155.4±16.0)pg/ml明显增加(P<0.01)。在LTD4+IL-13刺激组中,加入Mointelukast后eotaxin浓度为(148.3±15.7)pg/ml,较不加Montelukast(204.4±25.4)pg/ml明显降低(P<0.01)。人肺纤维细胞存在着CysLT1R mRNA的低表达,IL-13能够上调其表达,呈现时间与浓度依赖性。IL-13和LTD4对人肺成纤维细胞分泌的eoitaxin具有协同刺激作用,这可能与IL-13上调成纤维细胞CysLT1R mRNA表达有关,而Montelukast对这种刺激具有拮抗作用。

支气管哮喘患者白三烯受体1基因MicroRNA的表达

目的探讨支气管哮喘患者外周血细胞白三烯受体—1(CysLTR1)基因MicroRNA的表达及临床意义。方法选择支气管哮喘急性发作患者17例(哮喘发作组)、支气管哮喘诊断明确且临床症状完全缓解3个月以上患者15例(哮喘缓解组)和健康体检者20例(正常对照组),采用RT—PCR技术检测外周血细胞CysLTR1基因MicroRNA的表达,并比较分析3组检测结果。结果CysLTR1基因MicroRNA在正常对照人群和支气管哮喘患者中均有表达,但表达水平不同:哮喘发作组、哮喘缓解组和正常对照组CysLTR1/GAPDH分别为2.4059±0.1983、2.1800±0.2210和1.2300±0.1174,与正常对照组相比,哮喘发作组和哮喘缓解组CysLTR1基因MicroRNA的表达均明显增高(均P<0.05);哮喘发作组与哮喘缓解组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论哮喘患者CysLTR1基因MicroRNA高表达可能与哮喘发生或急性发作相关。

半胱氨酰白三烯受体1调节APP/PS1小鼠原代神经元β淀粉样蛋白生成及机制

目的探究半胱氨酰白三烯受体1(CysLT_(1)R)对体外培养的APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠(APP/PSI小鼠)皮质原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响及机制。方法①将携带CysLT_(1)R的慢病毒-绿色荧光蛋白载体(LV-CysLT_(1)R-EGFP)或空载体(LV-EGFP)转染至APP/PS1小鼠皮质原代神经元,使神经元过表达CysLT_(1)R(CysLT_(1)R-OE),采用Western印迹法检测神经元CysLT_(1)R蛋白表达水平。②分别以CysLT_(1)R激动剂YM17690(1μmol·L^(-1))单用或与CysLT_(1)R拮抗剂普仑司特(Pran 1μmol·L^(-1))联用处理CysLT_(1)R-OE神经元12 h;采用ELISA检测细胞培养基内Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)水平;Western印迹法检测神经元中淀粉样前体蛋白(APP)、β淀粉样前体蛋白切割酶1(BACE1)、早老素(PS)1和PS2表达水平。以YM17690(1μmol·L^(-1))单用或与Pran(1μmol·L^(-1))联用处理CysLT_(1)R-OE神经元2 h后,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞内的分布。③采用渗透差法在CysLT_(1)R-OE神经元中导入核定位序列多肽(NLS-pep,10 g·L^(-1))竞争性抑制CysLT_(1)R核转位或阴性对照多肽(NON-pep,10 g·L^(-1)),随即以YM17690(1μmol·L^(-1))处理CysLT_(1)R-OE神经元12 h,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R激活后细胞培养基内Aβ水平、胞质中APP和BACE1表达水平;以YM17690(1μmol·L^(-1))处理导入多肽后的CysLT_(1)R-OE神经元2 h,采用Western印迹法检测CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞内的分布。结果①CysLT_(1)R-OE神经元CysLT_(1)R蛋白表达水平较对照组显著增加(P<0.01)。②与CysLT_(1)R-OE组相比,CysLT_(1)R-OE+YM17690组神经元分泌Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)显著增加(P<0.05),胞质中BACE1及细胞核中CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基表达水平显著增加(P<0.05),而神经元中APP,PS1和PS2表达水平无明显改变。YM17690和Pran联用(CysLT_(1)R-OE+YM17690+Pran组)可消除上述改变。③与CysLT_(1)R-OE+YM17690组相比,CysLT_(1)R-OE+NLS-pep+YM17690组CysLT_(1)R和NF-κB P65亚基在细胞核内的表达水平显著下降(P<0.05),神经元分泌Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)显著下降(P<0.05),胞质中BACE1表达水平下调(P<0.05),APP未见显著改变。结论CysLT_(1)R被激活后,通过上调BACE1表达从而促进Aβ的生成,其机制可能是通过CysLT_(1)R发生核转位并激活NF-κB信号通路介导。

新型选择性半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)拮抗剂的设计合成及构效关系研究

半胱氨酰白三烯(CysLTs)是炎症脂介质,其受体(CysLTsR)在哮喘、过敏性鼻炎和癌症等疾病的发生发展中发挥重要作用.已发现3-取代1H-吲哚-2-羧酸衍生物具有半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)拮抗活性,但较差的溶解度限制了其进一步研究.基于已有研究基础继续进行结构优化,设计合成了多个系列化合物,其中3-{2-[(1E)-3-({3-[(1E)-2-(7-氯喹啉-2-基)乙烯基]苯基}氨基)-3-氧亚基丙-1-烯基]苯基}丙酸(T9)展现出良好的选择性CysLT1受体拮抗活性和改善的溶解度,其IC50值为(0.0066±0.0023)μmol/L,在水中溶解度为4.16×10^(-5) g/mL.

吸入干扰素-γ对支气管哮喘大鼠肺组织表达半胱氨酰白三烯受体1的影响及意义

目的研究半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)在支气管哮喘(哮喘)大鼠肺组织中的表达,探讨炎性因子IFN-γ是否参与调节哮喘大鼠肺组织CysLT1的表达。方法以卵清蛋白致敏激发制作大鼠哮喘模型,然后测定不同质量浓度组胺时大鼠呼吸道压力,再取其肺组织,采用免疫组织化学法、反转录-聚合酶链反应法检测IFN-γ干预前后哮喘大鼠肺组织中CysLT1 mRNA的表达。结果当各实验组大鼠吸入组胺质量浓度为0 mg·L-1、10 mg·L-1和20 mg·L-1时,测得呼吸道阻力值,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01);免疫组织化学(IHC)法检测正常对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、哮喘鼠雾化吸入低剂量IFN-γ干预组(L组)及高剂量干预组(H组)的CysLTl阳性细胞表达计数分别为11.889±2.369、19.333±3.240、26.000±5.522、33.222±4.493,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01);RT-PCR法检测N组、A组、L组及H组的CysLT1 mRNA/β-actin相对密度分别为0.218±0.050、0.323±0.084、0.447±0.083、0.670±0.108,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论高、低剂量IFN-γ均能上调CysLT1在哮喘大鼠肺组织的表达,其中炎性因子IFN-γ可能通过上调CysLT1的表达水平而参与哮喘的发生发展。

肿瘤坏死因子-α对半胱氨酰白三烯受体1在支气管上皮细胞表达的调控

目的探讨炎性因子TNF-α是否参与调控半胱氨酰白三烯受体1（CysLTl）在支气管上皮细胞的表达。方法于细胞培养液中加入不同质量浓度（0．00、0．05、0．50、5．00、20．00μg／L）的TNF-α仅刺激细胞支气管上皮细胞株16HBE48h，采用反转录（RT）-PCR法检测CysLT1 mRNA的水平，免疫组织化学染色检测CysLT1 在16HBE细胞的表达。结果免疫组织化学染色法在16HBE细胞未能检测到CysLTl，但用TNF-α仅处理细胞48h，可检测到CysLTl明显表达。RT—PCR法在16HBE细胞能检测到微弱的CysLT1 mRNA带，TNF-α刺激细胞48h后，CysLT1 mRNA表达增强。当TNF-α质量浓度分别为0．00、0．05、0．50、5．00、20．00μg／L时，CysLT1 mRNA／8．actin相对密度比分别为0．048、0．105、0．177、0．182、0．495。结论TNF-d能上调CysLT1在支气管上皮细胞株16HBE细胞的表达，这种上调作用呈浓度依赖性。在呼吸道病毒感染时，局部产生大量的TNF-α上调呼吸道上皮细胞CysLT1表达，增强呼吸道的炎性效应，这可能是病毒性呼吸道感染时诱发喘息发作的机制之一。

半胱氨酰白三烯受体-1在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor,CysLTsR1)在肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的可能作用.方法:以I/R大鼠肠I/R损伤模型为研究对象,并运用不同剂量CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特(0.2、2和20 mg/kg)加以干预,通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变、检测小肠质量变化、确定CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特对小肠的炎症程度的影响.结果:肠I/R可造成肠组织损伤,小肠含水量增加(模型组78.13 g±1.35 g vs正常组78.13 g±1.35 g,P<0.05),肠I/R时肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);应用孟鲁司特后,小肠含水量降低(低、中、高剂量组分别为76.47 g±1.48 g、72.67 g±5.35 g及75.39 g±3.66 g),肠组织损伤减轻,肠组织CysLTsR1蛋白表达和mRNA表达水平均减低(P<0.05).结论:CysLTsR1参与了肠I/R损伤的形成,孟鲁司特可以减轻肠I/R对肠组织的损伤,CysLTsR1是保护肠I/R损伤的新的作用靶点.

孟鲁司特对脓毒症大鼠肺组织半胱氨酰白三烯受体1表达的影响

目的探讨孟鲁司特对脓毒症大鼠肺组织半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)表达的影响。方法将48只SD大鼠随机均分成模型组及孟鲁司特治疗组。用盲肠结扎穿孔及导管留置法制备脓毒症急性肺损伤大鼠模型。治疗组术前30min用孟鲁司特钠咀嚼片按10mg·kg-1·d-1剂量稀释后给大鼠灌胃,持续至实验结束。两组分别在术后6、12、24、48h分别处死6只大鼠,取肺组织;用免疫组化法检测肺组织CysLT1R的表达,RT-PCR法检测肺组织CysLT1RmRNA表达,并观察肺组织的病理变化。结果各时间点治疗组大鼠肺组织CysLT1RmRNA和CysLT1R表达均低于模型组(P<0.05)。治疗组肺组织病理损伤较模型组减轻(P<0.05)。结论孟鲁司特能下调脓毒症大鼠肺组织CysLT1R的表达,对脓毒症大鼠肺损伤起到保护作用。

儿童哮喘与白三烯受体1及C4合成酶基因多态性的关系

目的探讨白三烯受体1(CYSLTR1)和白三烯C4合成酶(LTC4S)基因多态性与上海儿童哮喘及其严重程度之间的关系。方法 2006年9月至2009年8月本院儿科住院及门诊儿童哮喘患者72例,男39例,女33例,平均年龄(5.1±1.6)岁。根据哮喘发作程度分为间歇和轻度发作组44例、中重度发作组28例。健康对照组成人95例,男50例,女45例。应用连接酶检测反应(LDR)技术,对CYSLTR1的927T/C位点和LTC4S的444A/C位点基因多态性进行分析。结果①哮喘组和对照组927T/C位点基因型、等位基因频率比较(χ2=0.178,0.04,P(0.05)、444A/C位点基因型、等位基因频率比较(χ2=1.14,1.065,P(0.05)差异均无统计学意义。②927T/C和444A/C位点基因型频率在哮喘各组中的分布比较(χ2=0.927,1.138,P(0.05)差异均无统计学意义。结论在上海哮喘儿童中,CYSLTR1的927T/C位点和LTC4S的444A/C位点基因多态性可能不是其发病和严重程度的主要基因危险因素。

白三烯B4受体1拮抗剂U75302对脓毒症小鼠细胞免疫与炎症反应的影响

目的观察白三烯B4受体1(leukotriene B4receptor 1,LTB4-BLT1)拮抗剂U75302对脓毒症小鼠免疫功能的影响,探讨阻断白三烯B4受体1在脓毒症治疗中的意义。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症小鼠模型,将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=6)、CLP组(n=6)、CLP+腹腔注射U75302组(n=6)。手术后24h检测3组小鼠外周血中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素10(interleukin-10,IL-10)的水平,利用流式细胞术检测3组小鼠腹腔灌洗液中Gr-1+细胞的计数以及胸腺T淋巴细胞的凋亡情况。结果与CLP组相比,CLP+腹腔注射U75302组小鼠外周血中的TNF-α水平降低约43%(P<0.05),IL-10水平升高约88%(P<0.05),腹腔Gr-1+细胞计数降低(P<0.05),胸腺T淋巴细胞凋亡比例减少(P<0.01)。结论 LTB4-BLT1拮抗剂U75302可降低外周血TNF-α水平、提高IL-10水平、改善细胞免疫,可能干预脓毒症的炎症反应。

半胱氨酰白三烯受体1在原发性肝癌患者肝组织中的表达及其临床意义

目的通过临床病例研究，测定半脘氨酰白三烯受体1（CysLTlR）在肝癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法收集肝癌及癌旁肝组织标本各30例及12例肝血管瘤患者标本为正常对照。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学方法，分别从mRNA水平及蛋白水平检测肝组织中CysLTlR的表达量，以及其与肝癌临床病理参数的关系。采用SPSS17．0进行统计学处理，两组间比较用t检验和Fisher确切概率法，生存分析用Kaplan-Meier法，检验水准尸〈0．05为差异有统计学院意义。结果CysLT1R mRNA相对表达量在癌旁组织为0．0339±0．0221高于正常肝组织的0．0154±0．0123（t=-2．310，P=0．033）和肝癌组织的0．0127±0．0116，（t=2．911，JD=0．008），差异均有统计学意义；而在癌组织和正常肝组织中差异无统计学意义（P〉0．05），CysLT1R mRNA在癌旁组织中的表达在不同肿瘤分期中有显著差异Q=3．438，P=0．008），在HBV感染组与非感染组之间也存在统计学差异（t=3．59，P=0．006）。CysLT1R蛋白在癌旁组织的阳性表达率为100％大于正常肝组织的41．67％（P=0．000）和肝癌组织的43．33％ （P=0．000），受体的表达与肿瘤分期有关（P=0．042）。在肝癌组织中CysLT1R mRNA在不同表达水平组生存期差异有统计学意义（t=4．372，P〈0．05）。此外患者的生存时间受肿瘤的临床分期和甲胎蛋白水平影响（f值分别为24．187和8．75，P值均〈0．05）。结论CysLT1R在癌旁组织中表达量明显增高，且在肝组织中表达量与肿瘤临床分期及预后有关，提示CysLT1R可能参与肝癌的发生和发展过程。

白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特对小鼠气道炎症的抑制作用

【目的】探讨白三烯受体1拮抗剂孟鲁斯特(montelukast，MK)抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制。【方法】致敏的BALB／c小鼠持续吸入10g／L雾化卵白蛋白(OVA)30min，OVA吸入前2d开始连续3d或5d尾静脉给予MK或生理盐水(saline)，OVA吸入后24h及72h取材，瑞氏染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中炎症细胞的渗出情况；ELISA方法检测血清、BALF和肺组织中有关细胞因子水平；HE、刚果红染色观察肺组织炎症细胞的渗出；免疫组化染色观察血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达；原位杂交研究IL-5 mRNA的变化。【结果】给予MK5d减少BALF嗜酸性粒细胞渗出达90％以上，嗜酸性粒细胞减少随MK剂量(10、25、62.5mg／kg)的增加呈量效关系。ELISA结果表明给予3d MK使肺、血清和BALF中IL-5、IL-4水平显著降低，肺IL-13含量也明显减少(P＜0.05)。但MK组肺组织eotaxin下降与saline组比较无明显差异(P＞0.05)。免疫组化显示MK组肺组织VCAM-1和eotaxin表达比saline组明显减弱；原位杂交可见MK组肺组织IL-5 mRNA的表达比saline组减弱。【结论】MK减轻气道炎症，可能通过抑制VCAM-1表达和IL-5、IL-4、IL-13等细胞因子分泌起作用。急性哮喘中应用大剂量MK抗炎治疗值得进一步探讨。

半胱氨酰白三烯受体在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:通过临床病例的研究,检测CysLT1R和CysLT2R在乳腺癌中的表达情况,并分析C2ysLT1R和CysLT2R与乳腺癌患者病理特征及预后的关系。方法:采用实时荧光定量PCR方法,从mRNA水平上检测90例原发乳腺癌组织和30例匹配的癌旁组织中CysLT1R和CysLT2R基因的表达量,分析二者与临床病理学参数之间的关系,以及与乳腺癌患者预后的关系。结果:乳腺癌组织CysLT1R基因的表达明显高于癌旁组织,乳腺癌组织CysLT2R基因的表达明显低于癌旁组织,两者差异具有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌组织中CysLT1R的表达程度与肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移、TNM分期的表达呈正相关(P<0.05),CysLT2R的表达程度与肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移的表达呈负相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,CysLT1R mRNA高表达者的总的5年生存率显著低于低表达水平者(P=0.035),CysLT2R mRNA高表达者的总的5年生存率显著高于低表达水平者(P=0.025)。结论:CysLT1R和CysLT2R可作为乳腺癌判断预后的分子标志物。

活血温通汤对大鼠闭塞性细支气管炎肺组织损伤和CysLTR-1表达的影响

本研究采用活血温通汤干预闭塞性细支气管炎(BO)模型大鼠,观察对肺功能、肺组织病理、支气管炎症反应及半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR-1)蛋白表达的影响,以期揭示活血温通汤改善BO病症的可能机制。1材料与方法1.1实验动物:36只SPF级雄性Wistar大鼠,体质量(200±20)g,购于上海斯莱克实验动物有限公司,生产许可证号SCXK(沪)2022-0004;饲养于浙江鹰旸医药研发有限公司,饲养许可证号SYXK(浙)2021-0033。

普仑司特对链佐星诱导的1型糖尿病小鼠记忆损害和神经损伤的影响

目的研究半胱氨酰白三烯受体1(Cys LT1R)拮抗剂普仑司特对链佐星(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠记忆损害及神经炎症和凋亡的影响。方法选用雄性ICR小鼠,尾静脉注射STZ 150 mg·kg-1制备1型糖尿病小鼠模型。糖尿病小鼠每天ig给予普仑司特,连续给药4周。Morris水迷宫检测小鼠隐藏平台潜伏期、穿台次数及目标象限停留时间;Western蛋白印迹法检测小鼠脑海马和前额叶皮质Cys LT1R,NF-κB p65,白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α),剪切胱天蛋白酶3,Bax和Bcl-2蛋白表达水平;测定小鼠的空腹血糖、血清胰岛素含量以及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果 Morris水迷宫结果显示,与正常对照组比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长,穿台次数和目标象限探索时间均显著降低(P<0.05);给予普仑司特0.6和1.2 mg·kg-1组小鼠逃避潜伏期均显著缩短(P<0.05),穿台次数和目标象限探索时间均显著增加(P<0.05)。Western蛋白印迹结果显示,模型组小鼠海马和前额叶皮质Cys LT1R,NF-κB p65,IL-1β,TNF-α和剪切胱天蛋白酶3蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值显著升高(P<0.05);给予普仑司特0.6和1.2 mg·kg-1能显著抑制糖尿病小鼠脑内上述蛋白表达的变化(P<0.05)。但普仑司特对糖尿病小鼠高血糖、低血清胰岛素和脂质代谢紊乱无明显影响。结论普仑司特能够改善STZ诱导的1型糖尿病小鼠学习记忆损害和神经损伤。