哮喘儿童白三烯受体调节剂临床疗效与白三烯C4合成酶及5-脂氧化酶基因的相关性

目的探讨白三烯C4合成酶(LTC4S)与5-脂氧化酶(ALOX5)基因多态性与白三烯受体拮抗剂临床疗效的关系。方法 2011年6月至2013年6月门诊72例中度持续哮喘患儿分为两组,分别予吸入型糖皮质激素激素(ICS)、ICS联合白三烯受体拮抗剂(LTRA)治疗12周,然后交叉治疗12周;采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法(PCRRFLP),对LTC4S RS730012、ALOX5 RS2115819位点进行基因分型;分析患儿治疗前后肺功能及儿童哮喘控制测试问卷(C-ACT)评分与基因多态性的关系。结果经ICS联合LTRA治疗后,LTC4S RS730012基因组中的A/C、C/C基因型患儿的75%肺活量时的用力呼气流速(FEF75)改善率显著优于A/A型,差异均有统计学意义(P<0.01);A/A基因型患儿在治疗前后改善情况的差异无统计学意义。ICS联合LTRA治疗前后,ALOX5 RS2115819基因组中的不同基因型患儿间的肺功能指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LTC4S RS730012不同基因型患儿在哮喘治疗后小气道功能改善有差异,与LTRA相关。

维吾尔族支气管哮喘患儿白三烯C4合成酶基因多态性分析

目的:分析白三烯C4合成酶(LTC4S)基因A-444C位点基因型和等位基因在新疆维吾尔族支气管哮喘患儿中的分布频率,并比较其与不同种族支气管哮喘患儿间的分布差异,为制定维吾尔族支气管哮喘患儿哮喘个体化用药方案提供依据。方法:采用荧光染色原位杂交方法检测190例维吾尔族支气管哮喘患儿的LTC4S A-444C基因多态性,并与国内外不同种族支气管哮喘患儿的该位点基因多态性进行比较,分析基因型频率和等位基因频率间是否存在差异性。结果:190例新疆维吾尔族支气管哮喘患儿中,LTC4S A-444C三种基因型CC、AC和AA的分布频率分别为6.8%、49.0%和44.2%;A、C等位基因频率分别为68.7%、31.3%。维吾尔族支气管哮喘患儿LTC4S A-444C的基因型、等位基因频率与韩国、澳大利亚及中国东北地区汉族支气管哮喘患儿均差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:新疆维吾尔族支气管哮喘患儿LTC4S A-444C的基因型与等位基因的分布频率与国内外不同种族支气管哮喘患儿存在较大差异性。通过此研究,可以指导维吾尔族支气管哮喘患儿临床个体化用药,使哮喘临床用药更具有针对性、高效性和安全性。

新疆地区疑似支气管哮喘学龄前儿童低亲和力IgE受体、白三烯C4合成酶基因多态性分析

目的:探讨低亲和力IgE受体(FCER2)基因T2206C位点、白三烯C4合成酶(LTC4S)基因A-444C位点基因型和等位基因在新疆地区哈萨克族、汉族、维吾尔族疑似支气管哮喘学龄前儿童中分布特征的差异性,为新疆不同民族学龄前支气管哮喘儿童的早期诊断提供参考。方法:采用荧光染色原位杂交方法检测245例新疆疑似支气管哮喘学龄前儿童(哈萨克族48例、维吾尔族68例、汉族129例)的FCER2 T2206C及LTC4S A-444C基因多态性,分析基因型频率和等位基因频率在不同民族及不同地区相同民族间是否存在差异。结果:新疆地区汉族患儿与维吾尔族、哈萨克族患儿LTC4S A-444C基因型频率及等位基因频率比较差异有统计学意义(P<0.05)。新疆地区汉族儿童与维吾尔族、哈萨克族患儿FCER2 T2206C基因型频率及等位基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:新疆不同民族疑似支气管哮喘学龄前儿童LTC4S A-444C的基因型与等位基因的分布频率存在差异。本研究为进一步探讨儿童支气管哮喘分子诊断方法、疾病预测及防治奠定了基础。

支气管肺发育不良早产儿外周血清5-脂氧合酶激活蛋白、白三烯C4合成酶及半胱氨酰白三烯受体1的表达研究

目的:探讨新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)及支气管肺发育不良(bronchopul-monary dysplasia,BPD)患儿血清中5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase activating protein,FLAP)、白三烯C4合成酶(leukotriene C4 synthase,LTC4S)及半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)水平变化的意义,旨在寻找BPD早期敏感的生物学指标。方法:收集2015年8月—2017年12月在南京医科大学第一附属医院儿科收治入院的胎龄<37周、出生体重<2 500 g的新生儿病例。待其出院后根据患儿完整住院信息将病例整理为无肺部疾病的早产儿65例(对照组),不合并BPD的NRDS早产儿60例(NRDS组),BPD早产儿49例(BPD组)。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测新生儿生后3、7、14 d血清中FLAP、LTC4S、CysLTR1水平。比较3组各时间点各指标的浓度水平,采用方差分析、t检验及卡方检验等进行统计学分析。结果:生后3 d BPD组血清FLAP、CysLTR1水平均高于对照组和NRDS组(P均<0.05)。生后7 d BPD组血清FLAP、LTC4S、CysLTR1水平均高于对照组(P均<0.05),BPD组血清FLAP和CysLTR1水平分别高于NRDS组(P <0.05)。生后14 d BPD组仅血清LTC4S水平高于对照组(P <0.05)。结论:生后3 d血清PLAP、CysLTR1水平,生后7 d血清FLAP、LTC4S和CysLTR1水平,生后14 d血清LTC4S水平可作为BPD早期诊断的生物学指标。

白三烯C_4合成酶-A_(-444)C基因多态性与支气管哮喘关系的研究

目的初步探讨白三烯C4合成酶(LTC4S)-A444C基因多态性在北京地区汉族支气管哮喘患者中的分布及其与哮喘病情严重程度、哮喘患者应用白三烯受体拮抗剂临床反应的关系。方法哮喘患者101例,健康成人对照105例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测LTC4S-A444C基因多态性。从哮喘组中选择规律吸入激素2个月以上的患者18例,在原用药基础上加用孟鲁司特钠治疗2周。结果(1)哮喘组中LTC4S基因-444位点基因型AA、AC及CC频率分别为65.4%、30.5%及3.8%,等位基因A、C频率分别为81.0%、19.0%,与健康对照组的分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)哮喘组中,哮喘非急性发作期AC及CC型患者第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)显著低于AA型患者[(58.6±21.6)%比(70.3±22.4)%,P<0.05],AC及CC型患者哮喘病情重于AA型患者(P<0.05)。(3)应用孟鲁司特钠1周后,AA型患者FEV1改善率显著高于AC型患者[(10.8±10.2)%比(-9.8±16.2)%,P<0.01];用药2周后,AA型基因患者FEV1改善率及改善值高于AC型患者,但差异无统计学意义。结论北京地区汉族人群中LTC4S A-444C基因多态性与哮喘非急性发作期病情严重程度及肺功能损害程度相关,并可能与哮喘患者应用白三烯受体拮抗剂的临床反应相关。

系统性红斑狼疮患者外周血多形核粒细胞磷脂酶A25-脂氧化酶和白三烯C4合成酶mRNA的表达

目的探讨磷脂酶A2(cPLA2)、5-脂氧化酶(5-LO)和白三烯C4合成酶(LTC4-S)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血多形核粒细胞(PMNs)中的表达水平,及其在SLE发病机制中的作用及意义。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测了28例活动期SLE患者和25名正常人PMNs中cPLA2、5-LO和LTC4-SmRNA的表达水平。结果活动期SLE患者cPLA2、5-LO和LTC4-S的阳性表达率与正常对照组相比差异无统计学意义;但活动期SLE患者PMNs中的5-LOmRNA的平均表达水平(0.89±0.26)明显高于正常对照组(0.64±0.14),LTC4-SmRNA的平均表达水平(0.68±0.38)也明显高于正常对照组(0.40±0.14),两者差异均有统计学意义(P<0.01);活动期SLE组cPLA2的平均表达水平(0.63±0.27)与正常对照组(0.50±0.19)处于同一表达水平,差异无统计学意义。结论活动期SLE患者PMNs中5-LO和LTC4-SmRNA的表达增加,通过诱导半胱氨酸白三烯(CysLTs)的产生参与SLE的发病过程,为特异性5-LO抑制剂或CysLTs受体拮抗剂应用于SLE的治疗提供了理论依据。

白三烯C4合成酶基因多态性与儿童哮喘易感性及孟鲁司特疗效关联研究

目的研究白三烯C4合成酶(LTC4S)基因rs730012、rs3776944两个单核苷酸多态性位点(SNPs)与儿童哮喘易感性和孟鲁司特疗效的关系,以指导哮喘早期预防及精准治疗。方法选取2016年5月-2017年8月沈阳军区总医院就诊的哮喘患儿215例为病例组,228例非哮喘儿童为对照组,应用聚合酶链反应(PCR)及测序法对所有研究对象LTC4Srs730012、rs3776944位点进行基因分型,并于孟鲁司特治疗前后进行肺功能、尿LTE4儿童哮喘控制测试问卷(CACT)评分。结果 1)病例组与对照组在rs730012及rs3776944位点基因型频率差异均无统计学意义(χ2=0.079、0.617,P均>0.05)。2)中重度哮喘组A/C+C/C基因型频率明显高于对照组和轻度哮喘组,差异有统计学意义(χ2=4.129、6.088,P均<0.05)。3)A/C+C/C基因型哮喘患儿在经过孟鲁斯特钠治疗后FEF50、FEF75改善率明显高于A/A型患儿(P均<0.05),而单纯应用布地奈德组患儿差异无显著性(P均>0.05)。4)A/A基因型患儿应用孟鲁司特疗效更佳,较A/C+C/C基因型尿液LTE4改变率高,rs730012和rs3776944位点差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LTC4Srs730012SNP与哮喘严重程度有关,rs730012及rs3776944SNPs野生型应用孟鲁司特疗效更佳。

白三烯C4合成酶基因多态性与呼吸道合胞病毒毛细支气管炎易感性及疗效的相关性

目的研究白三烯C4合成酶(LTC4S)基因rs730012位点多态性与呼吸道合胞病毒(RSV)感染的毛细支气管炎易感性及孟鲁司特钠疗效的关系,为毛支患儿的临床个体化治疗研究提供一定参考。方法选取2018年3月-2019年6月南阳市第二人民医院确诊的RSV毛细支气管炎患儿120例作为病例组,健康体检儿80例为对照组。检测两组受试儿LTC4S rs730012位点基因型;病例组在常规治疗的同时口服孟鲁司特钠连续治疗2周,观察不同基因型病例组患儿临床表现的差异,检测治疗前后其血清半胱氨酰白三烯(CysLTs)、尿白三烯E4(LTE4)、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平以及潮气呼吸肺功能参数的变化。结果LTC4S基因的rs730012位点基因型及等位基因频率在病例组和对照组间总体分布差异无统计学意义(χ^(2)=0.797,0.624,P>0.05)。治疗后AC/CC组患儿1周后临床症状评分、咳嗽缓解时间、喘息、哮鸣音消失时间以及住院时间上均显著低于AA组(t=3.552、2.284、3.446、2.716、2.871,P<0.05);治疗1周后,AC/CC组患儿血清CysLTs、尿LTE4、血清ECP水平均显著低于AA组(t=4.653、5.917、9.933,P<0.001),肺功能指标潮气量、TPTEE/TE和VPEE/VE也显著高于AA组(t=2.090、2.104、2.312,P<0.05)。结论RSV毛细支气管炎患儿LTC4S基因多态性与RSV毛细支气管炎易感性无相关性,但可能与孟鲁司特钠疗效有关,AC/CC基因型患儿疗效相对优于AA型。

白三烯C_4合成酶mRNA荧光定量PCR方法建立及结果的分析

目的半胱氨酰白三烯(CysLTs)合成主要限速酶白三烯C4合成酶(LTC4S)可使用FQPCR检测方法。本研究拟比较2-△△CT法及标准曲线法分析LTC4S mRNA表达水平,为临床与基础研究提供能准确反映体内LTC4S基因表达水平的检测手段。方法本研究通过基因克隆方法,构建含目的基因LTC4S CDNA的质粒标准品为模板,从而建立LTC4S mRNA的RT-FQPCR标准曲线检测方法,用于检测LTC4S的表达。并同时通过2-△△CT法计算mRNA表达的结果。结果 2-△△CT法及标准曲线法均可用于分析mRNA表达水平,而2-△△CT法临床上更为简便,二者差异无统计学意义,可替代标准曲线法。结论本研究成功建立了LTC4S mRNA FQPCR检测方法,该方法的建立可为临床与基础研究提供能更准确反映体内LTC4S基因表达水平的检测手段,便于进一步了解LTs在哮喘发病机制中的地位,并为哮喘药物的发展和疗效的评估提供客观依据。

普罗布考对动脉粥样硬化兔主动脉白三烯C_4的影响

目的:观察普罗布考对高同型半胱氨酸(Hcy)血症诱导动脉粥样硬化(AS)兔主动脉白三烯C4(LTC4)的影响。方法:将24只雄性新西兰大耳白兔随机分成3组各8只:对照组给予基础饲料喂养;模型组和普罗布考组在基础饲料中加入1%的蛋氨酸;普罗布考组从第12周起用普罗布考(1 g/d)灌胃;饮食量200 g/d,均喂养20周。第20周末用RT-PCR检测动脉血管中白三烯C4合成酶(LTC4S)的mRNA表达,用ELISA检测动脉血管中LTC4的含量。结果:模型组腹主动脉LTC4S的mRNA表达及LTC4的含量较对照组增高(P<0.05),普罗布考组腹主动脉LTC4S的mRNA表达水平及LTC4含量低于模型组(P<0.05)。结论:普罗布考能抑制主动脉LTC4S的mRNA表达,降低主动脉LTC4的含量,该作用可能为其抗AS的机制之一。

LTC4S基因多态性与呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的相关性

目的探讨LTC4SA-444C基因多态性与呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎的发生及病情的严重程度的关系。方法采用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测60例RSV毛细支气管炎(RSV毛支炎组,再分为中重度和轻度)、50例RSV无喘息呼吸道感染患儿(RSV无喘组)和30例健康儿童(正常对照组)LTC4SA-444C位点多态性,并用ELISA方法检测尿白三烯E4(LTE4)水平。结果 RSV毛支炎组中重度者和轻度者LTC4S基因-444位点基因型AA、AC和CC频率分别为90%、7%、3%和53%、33%、14%,等位基因A、C频率分别为93%、7%和70%、30%,RSV毛支炎组与RSV无喘组、正常对照组的-444位点基因型和等位基因分布比较差异无统计学意义(P>0.05);RSV毛支炎组中重度者变异型C-444基因携带者(AC+CC型)及等位基因的频率与轻度者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RSV毛支炎中重度组、轻度组LTC4SA-444C位点A→C的变异与尿LTE4比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LTC4SA-444C位点A→C变异与珠海地区RSV毛细支气管炎的病情严重程度相关,与尿LTE4水平的变化无相关性。

LTC4S A-444C多态性与阿司匹林致荨麻疹的相关性研究

目的探索白三烯C4合成酶(LTC4S)A-444C位点多态性与阿司匹林致荨麻疹的相关性。方法收集2015年1月至2017年12月就诊于单县东大医院且接受阿司匹林抗血小板治疗的患者,依据患者是否出现荨麻疹将其分为病例组与对照组,通过对LTC4S基因A-444C变异位点的检测,统计分析该位点的变异对药物不良反应的影响。结果病例组患者中LTC4S A-444C等位基因的频率高于对照组患者。AC基因型相对于AA基因型患者发生荨麻疹的风险高2.762倍,CC基因型相较AA基因型患者发生荨麻疹的风险高4.296倍。结论 LTC4S A-444C位点A变异为C与阿司匹林致荨麻疹显著相关,患者在用药前进行LTC4S A-444C位点变异检测,可为临床中阿司匹林的安全用药提供参考。

儿童哮喘与白三烯受体1及C4合成酶基因多态性的关系

目的探讨白三烯受体1(CYSLTR1)和白三烯C4合成酶(LTC4S)基因多态性与上海儿童哮喘及其严重程度之间的关系。方法 2006年9月至2009年8月本院儿科住院及门诊儿童哮喘患者72例,男39例,女33例,平均年龄(5.1±1.6)岁。根据哮喘发作程度分为间歇和轻度发作组44例、中重度发作组28例。健康对照组成人95例,男50例,女45例。应用连接酶检测反应(LDR)技术,对CYSLTR1的927T/C位点和LTC4S的444A/C位点基因多态性进行分析。结果①哮喘组和对照组927T/C位点基因型、等位基因频率比较(χ2=0.178,0.04,P(0.05)、444A/C位点基因型、等位基因频率比较(χ2=1.14,1.065,P(0.05)差异均无统计学意义。②927T/C和444A/C位点基因型频率在哮喘各组中的分布比较(χ2=0.927,1.138,P(0.05)差异均无统计学意义。结论在上海哮喘儿童中,CYSLTR1的927T/C位点和LTC4S的444A/C位点基因多态性可能不是其发病和严重程度的主要基因危险因素。

阿司匹林性哮喘的呼吸道炎症在其发病机制中的作用

阿司匹林性哮喘(aspirin inducedasthma,AIA)在呼吸道中表达5脂氧化酶(5 LO)的嗜酸性粒细胞和肥大 细胞数增加;白三烯C4(LTC4)合成酶,半胱氨酰白三烯合成通路中的终端酶,在大部分AIA患者呼吸道活检组织 中的过度表达等构成了AIA独特的呼吸道炎症,在一定程度上也阐明了AIA的发病机制。