血清IGF-1、IGFBP-3、VEGF及多项白介素在结直肠癌转移监测中的意义

目的:探讨血清人胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)及多项白介素在结直肠癌转移中的监测意义。方法:选取2008年5月～2011年10月于本院进行治疗的60例结直肠癌患者为观察组,同期进行健康体检的60例健康人员为对照组,将两组人员的血清IGF-1、IGFBP-3、VEGF及白介素中的促炎性细胞因子、抗炎性细胞因子水平进行检测及比较,并将观察组中复发、转移患者的上述检测指标与未复发、转移者进行比较。结果:观察组的血清IGF-1、VEGF-C及VEGF-D高于对照组,IGFBP-3低于对照组,血清IL-2低于对照组,其他白介素均高于对照组,同时观察组患者中存在复发、转移者则变化幅度更大,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:血清IGF-1、IGFBP-3、VEGF及多项白介素在结直肠癌转移中的监测价值较高,有助于了解肿瘤复发转移情况。

AFP、PLR、ILF3水平变化评估胃癌术后早期复发转移的应用价值

目的探究甲胎蛋白(AFP)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、白介素增强子结合因子3(ILF3)蛋白水平变化早评估胃癌术后复发转移的应用价值。方法选取安阳市中医院2018年4月至2021年4月收治的162例行胃癌根治术的患者临床资料,所有患者在术前进行AFP、PLR、ILF3检测,并在患者术后随访2年,根据患者术后早期复发转移情况将患者分为正常组(n=94)和转移组(n=68)。比较两组患者的一般资料和AFP、PLR、ILF3水平,采用多因素logistic回归分析影响胃癌患者术后早期复发转移的影响因素,并通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估AFP、PLR、ILF3水平变化对胃癌患者术后早期复发转移的预测价值。结果两组的TNM分期、Borrmann分型、淋巴脉管侵袭、年龄、肿瘤直径、CEA、AFP、PLR、ILF3水平进行比较,差异有统计学意义(χ^(2)=52.438、54.035、12.635,t=3.097、2.619、2.667、4.885、4.059、4.226,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,TNM分期、Borrmann分型、年龄、肿瘤直径、肿瘤浸润深度、CEA、AFP、PLR、ILF3水平均是影响胃癌患者术后早期复发转移的因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,AFP、PLR、ILF3水平及三者联合预测的AUC面积分别为0.725、0.696、0.713、0.857,提示三者均具有一定的预测价值,且三者联合效果最优(P<0.05)。结论胃癌术后早期复发转移患者术前血清中AFP、PLR、ILF3水平均呈现高水平表达状态,三者对于胃癌术后早期复发转移预测具有一定的应用价值。

联合检测外周血TIRAP、FOXO3a、HBP预测脓毒症患者近期预后的价值及意义

目的探讨联合检测外周血TOLL/白介素-1受体相关蛋白(TIRAP)、叉头蛋白转录因子3a(FOXO3a)、肝素结合蛋白(HBP)对脓毒症患者近期预后的预测价值。方法回顾性收集2020年1月—2022年12月本院205例脓毒症患者的临床资料,根据28 d生存情况分为生存组157例、死亡组48例。统计两组外周血TIRAP、FOXO3a、HBP及急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分。分析TIRAP、FOXO3a、HBP与APACHEⅡ、SOFA评分的相关性。采用Logistic回归方程分析TIRAP、FOXO3a、HBP交互作用对脓毒症近期预后的影响。评价TIRAP、FOXO3a、HBP联合预测脓毒症近期预后的价值。结果死亡组入院第1、3、7天外周血TIRAP、HBP水平及APACHEⅡ、SOFA评分高于生存组,FOXO3a水平低于生存组(P<0.05);入院第1天,脓毒症死亡患者TIRAP、HBP水平与APACHEⅡ、SOFA评分呈正相关,FOXO3a与APACHEⅡ、SOFA评分呈负相关(P<0.05);TIRAP×FOXO3a×HBP在脓毒症近期预后中存在交互作用(P<0.05);入院第1天外周血TIRAP+FOXO3a+HBP联合预测预后的曲线下面积(AUC)大于TIRAP+FOXO3a、TIRAP+HBP、FOXO3a+HBP,预测效能更佳(P<0.05)。结论脓毒症预后不良患者外周血TIRAP、HBP水平升高,FOXO3a水平降低,其水平变化与病情严重程度、近期预后有关,联合检测其水平可提高近期预后的预测效能。

转录因子TBX3在小鼠胚胎动脉囊及弓动脉发育过程中的表达

目的：探讨在小鼠胚胎早期发育过程中转录因子TBX3（T-box transcription factor3）和动脉囊发育的关系。方法：对胚龄9-12 d（E9-E12）的小鼠胚胎心做连续石蜡切片,抗转录因子TBX3抗体、抗胰岛因子-1（ISL-1）抗体、抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）抗体对切片进行免疫组织化学染色。结果：胚龄9 d,TBX3阳性细胞在呼吸内胚层聚集。胚龄10 d,在动脉囊和第3对弓动脉连接处可见TBX3阳性细胞。胚龄11 d,在第4、6对弓动脉之间可以观察到TBX3细胞的阳性表达。胚龄12 d,TBX3阳性表达集中于咽前间充质。结论：传导系的阳性心肌前体细胞TBX3参与动脉囊及弓动脉的形态发生。

敲减干扰素调节因子3对脂多糖刺激Raw264.7细胞核内Irak1bp1表达的影响

目的·扩增干扰素调节因子3(interferon regulator factor 3,IRF3)短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)腺病毒,并研究该病毒对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激诱导Raw264.7细胞核内白介素受体相关激酶1结合蛋白1(interleukin-1 receptor associated kinase 1 binding protein 1,Irak1bp1)表达的影响。方法·IRF3 sh RNA腺病毒的扩增在人胚肾293 T(HEK293T)细胞中进行,并采用TCID 50法测定病毒滴度。Raw 264.7细胞随机分为4组,1组为腺病毒(-)LPS(-),2组为腺病毒(-)LPS(+),3组为腺病毒(+)LPS(-),4组为腺病毒(+)LPS(+)。细胞IRF3基因表达采用real-time PCR方法检测;核内IRF3及Irak1bp1的表达采用Western blotting方法检测。结果·经计算扩增腺病毒滴度为2.2×10^(11) PFU/m L,最佳MOI为300。LPS刺激后Raw 264.7细胞内IRF3 m RNA较对照组明显增加,核内IRF3蛋白及Irak1bp1表达也明显增加;IRF3 sh RNA腺病毒应用后,细胞对IRF3 m RNA的组成性表达及LPS刺激诱导的IRF3 m RNA和核内蛋白质表达均明显受抑,但未刺激状态下IRF3蛋白核内组成性表达无明显影响;IRF3 sh RNA腺病毒应用对细胞静息及LPS刺激诱导的核内Irak1bp1表达并无影响。结论·IRF3 sh RNA腺病毒能够有效抑制LPS刺激诱导的核内IRF3的表达,但并不影响核内Irak1bp1的表达。

C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达

目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。

长链非编码RNA ILF3-AS1在临床常见恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤起病隐匿,缺乏特异性症状和有效的诊断和治疗手段,确诊时多为晚期且预后不良。高通量测序技术的发展使得针对突变基因的个体化精准治疗成为新的方向。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。白细胞介素增强子结合因子3-反义RNA 1(ILF3-AS1)作为一种新近发现的lncRNA在诸多临床常见恶性肿瘤中表达异常。lncRNA ILF3-AS1通过多种调控机制及信号通路促进恶性肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化过程,其表达水平与患者临床预后密切相关。因此,未来对lncRNA ILF3-AS1进行深入研究有助于相关恶性肿瘤的早期诊断、靶向治疗和预后评估。

ILF2通过调控线粒体内稳态促进非小细胞肺癌体内外细胞增殖

目的:探讨白介素增强子结合因子2(interleukin enhancer binding factor 2,ILF2)在非小细胞肺癌细胞增殖中的作用并探讨其机制。方法:选取来自某医院2016年3月至2022年6月间非小细胞肺癌患者癌及癌旁组织各15例,采用shRNA方法抑制非小细胞肺癌A549和H1299细胞系中ILF2表达,通过qRT-PCR、免疫组化和Western blot方法检测组织和细胞中ILF2的mRNA和蛋白表达,采用克隆形成和BrdU方法分析A549和H1299细胞体外增殖,无胸腺小鼠经皮下注射A549细胞后通过免疫组化技术观察Ki67和活化caspase 3(cleaved caspase 3)的表达,通过分析A549和H1299细胞中线粒体DNA(mtDNA)、线粒体质量和线粒体膜电位观察线粒内稳态。结果:与癌旁组相比,肺癌组织中ILF2的mRNA和蛋白表达均显著上调(P均<0.05);抑制ILF2表达可降低A549和H1299细胞体外克隆形成和增殖能力以及A549细胞在小鼠体内肺癌细胞生长能力(P均<0.05),小鼠肺组织中Ki67表达显著降低(P<0.05),A549和H1299细胞中mtDNA和线粒体质量均显著降低,线粒体膜电位显著上调(P均<0.05);过表达ILF2可促进A549和H1299细胞中体外克隆形成和增殖能力以及mtDNA和线粒体质量,降低线粒体膜电位(P均<0.05)。结论:ILF2在非小细胞肺癌进展过程中发挥重要作用,可能与破坏线粒体内稳态有关。

“三法三穴”推拿手法干预早期对Minor CCI模型大鼠脊髓背角IL-17A/RA、C/EBPβ信号通路影响的研究

目的 通过观察“三法三穴”推拿手法干预早期对轻度坐骨神经慢性压迫性损伤(Minor chronic compression injury of sciatic nerve, Minor CCI)模型大鼠脊髓背角中白介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、白介素-17A受体(interleukin-17A receptor, IL-17RA)、转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(transcription factor CCAAT/enhancer binding protein β, C/EBPβ)表达的影响,明确推拿对周围神经病理性疼痛(peripherally neuropathic pain, pNP)的即刻镇痛机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、推拿组,8只/组,模型组、推拿组复制Minor CCI模型。使用按摩推拿手法模拟仪模拟点法、拨法、揉法,对推拿组大鼠患侧殷门、承山、阳陵泉进行定时、定性、定量干预1次,通过机械缩足反射阈值(paw mechanical withdraw threshold, PMWT)与冷敏阈值(cold sensitivity threshold, CST)评价干预后即刻对大鼠机械痛觉、温度觉敏化情况变化;通过蛋白免疫印迹法(Western Bolt, WB)检测脊髓背角中IL-17A、C/EBPβ表达;通过荧光定量聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测脊髓背角中IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ表达。结果 与假手术组、模型组相比,推拿干预1次后可提高Minor CCI模型大鼠PMWT与CST(P<0.01);WB结果显示,与模型组相比,推拿可降低IL-17A、C/EBPβ在脊髓背角中蛋白的表达(P<0.05);RT-PCR结果显示,与模型组相比,推拿可降低IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ在脊髓背角中mRNA的表达(P<0.05)。结论 推拿干预1次后,可通过抑制脊髓背角中IL-17A、IL-17RA、C/EBPβ信号通路的表达,改善机械痛觉及冷刺激敏化情况,从而实现即刻镇痛的作用。

NLRP3炎性小体在呼吸机相关性肺炎患者中的表达及临床意义

目的观察核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors family pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体在呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonia,VAP)患者中的表达及临床意义。方法选取2014年1月至2019年1月于本院行机械辅助通气治疗的患者720例作为研究对象。根据是否发生VAP,将其分为VAP组(132例)和非VAP组(588例),按VAP患者病情严重程度将VAP组分为低危组(48例)、中危组(44例)和高危组(40例)。检测各组单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)mRNA表达及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平,评价NLRP3水平对VAP患者病情严重程度的预测价值。结果VAP组患者外周血NLRP3、Caspase-1 mRNA水平及外周血IL-1β和TNF-α水平显著高于非VAP组(P<0.05);VAP患者中高危组外周血NLRP3、Caspase-1 mRNA水平、急性生理学与慢性健康状况评分(acute physiology and chronic health evaluation score,APACHE II score)及外周血IL-1β和TNF-α水平最高,中危组次之,低危组最低。VAP组患者PBMCs NLRP3 mRNA表达与Caspase-1 mRNA、APACHE II评分、外周血IL-1β和TNF-α水平呈显著正相关(Caspase-1 mRNA:r=0.790,P<0.001;APACHE II评分:r=0.752,P<0.001;IL-1β:r=0.710,P=0.003;TNF-α:r=0.740,P<0.001)。ROC曲线分析显示,NLRP3 mRNA水平曲线下面积为0.862(95%CI 0.799~0.925),其最佳工作点为2.16,此时预测VAP患者病情严重程度的灵敏度和特异性分别为75.21%和81.69%,显著优于APACHE II评分、IL-1β及TNF-α。结论外周血NLRP3炎性小体与VAP的发生、发展密切相关,对于VAP患者病情严重程度的预测,具有一定的临床应用价值。

白介素-1β对小鼠胚胎体外发育及胚胎子宫内膜共培养体系分泌Hb—EGF、α_υβ_3的影响

目的使用不同浓度的白介素-1β(IL-1β)对小鼠胚胎体外发育进行干预并检测与着床相关因子Hb—EGF、αυβ3的分泌,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释成不同浓度,研究其对小鼠2-细胞期胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,并用酶联免疫吸附法检测不同浓度的IL-1β对胚胎子宫内膜共培养体系Hb—EGF、αυβ3表达的影响。结果 2-细胞胚胎体外培养,经含不同浓度的IL-1β培养液干预,培养72h的囊胚率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.01)。1ng/ml和10ng/ml组培养96h的胚胎孵出率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。100ng/ml组的孵出率与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。胚胎-子宫内膜共培养体系经1ng/ml、10ng/mlIL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达上调,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);共培养体系经100ng/ml IL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论合适的IL-1β可以促进体外培养小鼠胚胎发育及胚胎着床。

PM_(2.5)通过激活NLRP3/Caspse-1通路诱导大鼠子宫炎症反应

颗粒物(PM)对呼吸系统、心血管系统、神经系统和免疫系统均有损害,但目前关于吸入颗粒物对生殖损伤的研究较少。本研究旨在探讨细颗粒物(PM_(2.5))短期暴露对大鼠子宫炎症损伤及其作用机制。PM_(2.5)暴露30 d后,高剂量组大鼠的子宫脏器系数、内膜上皮细胞厚度和腺上皮高度均明显高于对照组(P<0.05),抑制剂MCC950则能明显降低PM_(2.5)对子宫的影响。子宫组织免疫荧光双染色结果显示,PM_(2.5)暴露组子宫内CD45白细胞和CD11b巨噬细胞均明显增加(P<0.05)。Elisa法检测子宫组织和血清中白介素1β(IL-1β)和转化生长因子-β1(TGF-β1),暴露组子宫组织和血清中IL-1β和TGF-β1含量明显升高(P<0.05)。Western印迹法检测结果显示,PM_(2.5)上调核苷酸结合低聚体结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、pro-IL-1β、pro-Caspase-1和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的蛋白质表达量(P<0.05)。与高剂量组相比,NLRP3抑制剂MCC950能明显降低NLRP3/Caspase-1通路中关键蛋白质表达水平(P<0.05)。综上,PM_(2.5)通过激活NLRP3/Caspase-1信号,诱导大鼠子宫炎症反应,为PM_(2.5)生殖毒性预防和治疗提供理论基础。

Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌1例及文献分析

目的:探讨Xp11.2易位/结合免疫球蛋白重链恒定区μ基因增强子的转录因子3(transcriptionfactor binding to IGHM enhancer 3,TFE3)基因融合相关性肾癌的临床病理特点。方法:报道1例Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌,并进行临床资料分析、病理组织形态及免疫组织化学观察。并复习相关文献报道。结果:患者男,16岁,因右腰痛及无痛性全程血尿4 d,肿瘤大小约3.0 cm×2.5 cm×2.0 cm,切面灰褐色、质软;光镜下可见肿瘤主要由细胞间分界清楚的肿瘤细胞排列呈纤细乳头状。肿瘤细胞胞浆丰富、透亮,呈嗜酸性红染,核染色质呈泡状,核仁明显。核分裂少见。可见沙砾体状钙化。免疫组织化学结果显示:肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)、TFE3阳性;细胞角蛋白(cytokeratin,CK)、上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)及波形蛋白(vimentin)灶状阳性;白细胞分化抗原34(cluster of differentiation 34,CD34)、黑素瘤标记物抗体-45(melanoma marker antibody,HMB-45)及结蛋白(desmin)均为阴性。结论:Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌少见,好发于儿童及青年人,临床常见肉眼血尿,免疫组织化学、荧光原位杂交及核型分析有助于诊断及鉴别诊断。治疗采用根治性肾脏全切术,预后不明确。

EZH2、IMP3、Glut1蛋白在恶性间皮瘤组织中的表达及意义

目的研究zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)、葡萄糖转运蛋白1(Glut1)在恶性间皮瘤(MM)组织中的表达及临床意义。方法以50例MM患者为观察组,20例反应性间皮细胞增生(RMH)患者为对照组,应用免疫组织化学SP法检测两种组织中EZH2、IMP3、Glut1蛋白表达,分析在良恶性间皮组织中表达的差异,并分析MM中3种抗体的表达及与临床病理参数的关系。结果两种组织中3种抗体的表达率比较,差异有显著性(χ2=15.36~35.19,P<0.05)。EZH2、IMP3、Glut1对MM诊断的灵敏度分别为88%、60%和68%,特异度分别为90%、95%和100%;EZH2并IMP3、EZH2并Glut1、IMP3并Glut1、EZH2并IMP3并Glut1对MM诊断的灵敏度分别为90%、98%、84%、98%。IMP3在MM腹膜组及胸膜组中阳性表达率比较,差异有显著性(χ2=5.22,P<0.05);IMP3的表达与MM患者其他临床病理学特征无关(P>0.05);EZH2、Glut1的表达与MM临床病理学特征无关(P>0.05)。IMP3阳性表达的MM患者生存率显著低于阴性表达者,差异有显著性(χ2=10.35,P<0.05)。结论EZH2、IMP3、Glut1联合检测对提高MM和RMH的鉴别诊断有重要临床价值。IMP3是影响MM患者预后的风险因素。

改良型富血小板纤维蛋白与β⁃磷酸三钙复合物诱导成骨作用与机制

目的探讨改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet⁃rich fibrin,A⁃PRF)与β⁃磷酸三钙(β⁃tricalcium phosphate,β⁃TCP)构成比例对兔股骨缺损模型骨形成的作用及机制,为临床治疗骨缺损提供新思路。方法24只新西兰大白兔构建骨缺损模型并分为模型组、1∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=1∶1)、2∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=2∶1)与4∶1复合物组(A⁃PRF∶β⁃TCP=4∶1),每组6只。复合物组在骨缺损处填充复合材料,模型组不充填材料,8周后安乐法处死动物采标本。采用micro⁃CT测定股骨缺损区新生骨的骨密度(bone mineral densi⁃ty,BMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁分离度(trabecular separation/spacing,Tb.Sp)。HE染色观察新骨及新生血管形成情况;扫描电镜观察新生骨组织的形态变化;酶联免疫法检测新生股骨组织中磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(phospho⁃p38 mitogen activated pro⁃tein kinase,p⁃p38MAPK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer⁃binding protein homologous pro⁃tein,CHOP)、磷酸化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(phospho⁃cysteine aspartic protease⁃3,p⁃Caspase3)含量;实时定量PCR检测新生骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨形态发生蛋白⁃2(bone morphogenetic protein⁃2,BMP⁃2)、核因子κ⁃B配体受体致活剂(receptor activator of nuclear factor kappa⁃B ligand,RANKL)、p38MAPK的mRNA表达量;免疫组织化学法观察新生骨组织中OPG、BMP⁃2、RANKL、p⁃p38MAPK、p⁃Caspase3蛋白表达情况;荧光Tunel染色观察新生股骨组织中细胞凋亡情况。结果模型组股骨缺损区域骨形成缓慢,成骨质量差。与模型组相比,复合物组动物股骨缺损区域成骨情况良好,BMD、BV.TV、Tb.Th、Tb.N升高,Tb.Sp下降,新生股骨组织中见新生毛细血管形成;p⁃p38MAPK、CHOP、p⁃Caspase3蛋白表达降低,OPG、BMP⁃2的mRNA与蛋白表达升高,RANKL与p38MAPK的mRNA表达降低(P<0.05);各组新生骨组织中的凋亡检测表明2:1复合物组样本中细胞凋亡率最低(P<0.05);A⁃PRF∶β⁃TCP=2∶1的配比成骨效果最佳。结论由A⁃PRF与β⁃TCP组成复合物能促进OPG表达,抑制RANKL表达和p38MAPK磷酸化,减少新生骨组织细胞凋亡,促进成骨分化。

川芎平喘合剂对哮喘患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响

目的:探讨川芎平喘合剂治疗哮喘的临床疗效及对患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响。方法:选取中医辨证为风哮夹瘀型且符合慢性持续期支气管哮喘诊断的患者,随机分为对照组和治疗组。对照组采用西医常规治疗(吸入沙美特罗/氟替卡松吸入剂),治疗组在对照组基础上加服川芎平喘合剂,疗程均为1个月。监测治疗前后两组中医证候积分、哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能,检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平及转录因子T-bet、结合蛋白-3(GATA-3)的mRNA表达变化,评价临床疗效。结果:两组中医证候积分均较治疗前显著下降(P<0.01),ACT评分、肺功能指标[1秒用力呼气容积占预计值%(FEV1%)、最大呼气峰流量占预计值%(PEF%)]均较治疗前明显升高(P<0.01),且治疗组的改善作用均优于对照组(P<0.01或P<0.05);两组血清IFN-γ、T-bet mRNA均明显升高(P<0.01),血清IL-4、GATA-3 mRNA均明显降低(P<0.01),且治疗组对IFN-γ/IL-4及T-bet/GATA-3的调节作用均显著优于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率为96.7%,对照组为80.0%,两组总体疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎平喘合剂对哮喘的疗效确切,且可能与调节患者Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3的平衡有关。

急性髓系白血病基因危险度分层的临床研究

目的检测急性髓系白血病(AML)患者Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)、核磷蛋白1(NPM1)、Ⅲ型酪氨酸激酶(C-KIT)及髓系转录因子CCAAT增强子结合蛋白-a(CEBPA)基因表达情况,探讨基因突变者临床特征。方法选取2015年4月～2017年4月我院的80例AML患者,检测骨髓染色体核型及基因突变情况,比较各基因突变患者的临床特征及预后相关指标。结果 80例AML患者中,染色体核型正常占比43.75%,异常占比56.25%;FLT3-ITD、NPM1、C-KIT-D861V、CEBPA基因突变阳性检出率分别为15.00%、17.50%、7.50%、8.75%,对应正常核型中检出率分别为25.71%、28.57%、0.00%、20.00%;FLT3-ITD基因突变阳性组骨髓原始细胞比例显著高于FLT3-ITD基因突变阴性组(P<0.05),而血红蛋白(Hb)浓度、免疫表型CD117及人类白细胞抗原DR(HLA-DR)表达阳性差异无统计学意义(P>0.05);NPM1基因突变、C-KIT-D861V基因突变阳性组与阴性组的骨髓原始细胞比例、Hb浓度、免疫表型CD117及HLA-DR表达阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);CEBPA基因双突变的Hb浓度显著高于阴性组(P<0.05),而骨髓原始细胞比例、免疫表型CD117及HLA-DR表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);FLT3-ITD突变阳性组的完全缓解(CR)率、1年无病生存(DFS)率及1年内总生存(OS)率均显著低于阴性组(P<0.05),NPM1突变、C-KIT-D861V突变、CEBPA双突变阳性组与阴性组在CR率、DFS率比较差异无统计学意义(P>0.05),但NPM1突变、CEBPA双突变阳性组的OS率显著高于阴性组(P<0.05),C-KIT-D861V突变阳性组的OS率显著低于阴性组(P<0.05)。结论 AML患者FLT3、NPM1、C-KIT、CEBPA不同基因突变者显示出一定程度不同临床特征,FLT3、C-KIT基因突变者预后不良,NPM1、CEBPA基因突变者预后良好。

猪ILF2基因的电子克隆与生物信息学分析

白介素增强子结合因子2调节白介素2基因表达的转录过程,属于重要的免疫相关基因。利用电子克隆技术,以人的ILF2基因(NM_004515)为种子序列,克隆了猪的ILF2基因。结果显示该cDNA序列长1 628 bp,包含1条长度为1 173 kb的开放阅读框架,5′非编码区长90 bp,3′非编码区长365 bp,编码390个氨基酸。推导的氨基酸序列与牛、马、人、小鼠、非洲爪蟾、斑马鱼的同源性分别为99%、99%、99%、99%、90%、87%。理论等电点为5.19,分子量为43 050.12 u。N端含有一个富含RGG的单链RNA结合基序,C端含有1个DZF锌指结构。猪ILF2基因的成功克隆,为进一步研究其基因结构、基因表达与调控奠定了基础。

神经营养因子-3对骨髓间充质干细胞增殖凋亡的影响及机制

探讨神经营养因子-3（neurotrophin-3，NT-3）对大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）增殖及凋亡的影响及可能机制。方法将NT-3过表达及干扰慢病毒转染的BMSCs细胞与神经元细胞共培养，分为过表达对照组、NT-3转染组、抑制对照转染组、shRNA-NT-3转染组（NT-3沉默组）4组，MTT检测共培养24 h、48 h、72 h细胞增殖情况；流式细胞术检测48 h细胞周期变化及凋亡情况；实时荧光定量PCR检测C/EBPβ mRNA表达情况；Western blot检测C/EBPβ蛋白表达情况。结果MTT结果显示，与过表达对照组比较，48 h及72 h时间点NT-3转染组BMSCs细胞增殖能力（0.650±0.042，0.826±0.074）显著增强（P〈0.05），与抑制对照转染组比较，48 h及72 h时间点NT-3沉默组BMSCs细胞增殖能力（0.426±0.062，0.516±0.088）显著降低（P〈0.05）；流式细胞术检测48 h细胞周期及凋亡结果显示，NT-3转染组BMSCs细胞G1期比例降低，G2及S期升高，凋亡减少；NT-3沉默组BMSCs细胞G1期比例升高，G2及S期降低，凋亡增加；荧光定量PCR及Western blot结果表明C/EBPβ mRNA及蛋白水平在NT-3转染组BMSCs细胞中显著上调，而在NT-3沉默组BMSCs细胞中显著降低（P〈0.05）。结论NT-3可能通过促进C/EBPβ表达影响其下游相关靶基因的表达，从而抑制BMSCs细胞增殖分化过程中的细胞凋亡。

滋肾清热利湿化瘀方对多囊卵巢综合征小鼠C/EBPβ-STAT3信号通路的调节作用

目的:探讨滋肾清热利湿化瘀方(简称滋肾方)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)可能机制。方法:将40只C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常组、模型组、滋肾方组及枸橼酸氯米芬组,每组10只。除正常组外,其余各组来曲唑(LET)诱导PCOS模型,滋肾方组给予11.8 g·kg^(-1)·d^(-1)滋肾方,枸橼酸氯米芬组给予1 mg·kg^(-1)·d^(-1)枸橼酸氯米芬,正常组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液,持续14 d。观察记录小鼠阴道动情周期及体质量;测量卵巢质量,计算卵巢质量指数;HE染色法进行卵巢组织病理学观察,并对黄体及囊性卵泡数量进行统计;ELISA法检测小鼠血清中促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、白细胞介素(IL)-6、IL-10及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western Blot法检测转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、信号转导和转录活化因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果:与模型组比较,经滋肾方干预后小鼠体质量增长率、卵巢质量、卵巢质量指数和囊性卵泡数量有不同程度下降(P<0.05,P<0.01),黄体数量显著升高(P<0.01);LH、LH/FSH、T、IL-6及TNF-α水平显著下降(P<0.01),FSH和IL-10水平显著上升(P<0.01);C/EBPβ蛋白表达量显著上调(P<0.01),p-STAT3/STAT3蛋白表达量显著下调(P<0.01)。结论:滋肾方能有效改善LET诱导的PCOS小鼠炎症损伤,可能是通过C/EBPβ-STAT3信号通路实现的。