乳腺癌中白介素-11、信号转导和转录激活因子3的表达及相关性

目的通过研究白介素-11(interleukin 11,IL-11)、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在乳腺癌及乳腺良性病变中的表达水平,探讨IL-11和STAT3在乳腺癌中的表达与临床病理参数的关系及两个变量的相关性。方法将160例乳腺癌和20例乳腺良性病变组织应用免疫组织化学法,检测IL-11、STAT3在乳腺癌组织、乳腺良性病变组织中的表达情况;并分析IL-11、STAT3与不同分子分型(LuminalA、LuminalB、基底样型、HER-2过表达型)、临床病理参数的关系;了解IL-11、STAT3在乳腺癌表达中的相关性。结果在乳腺癌中IL-11、STAT3的阳性率分别为78.8%、76.3%,明显高于乳腺良性病变的阳性率15.0%、10.0%,差异具有统计学意义,(P<0.05);乳腺癌中IL-11与STAT3表达呈正相关,两者之间差异具有统计学意义(r=0.456,P=0.002)。结论乳腺癌组织中IL-11与STAT3表达呈正相关,乳腺癌中IL-11、STAT3表达情况与乳腺癌的组织学分级、TNM分期、淋巴结转移密切相关,提示两者在乳腺癌发生、发展及侵袭、转移中发挥重要作用。

寻常型银屑病皮损中磷酸化信号转导和转录激活因子-3与白介素-17的表达及意义

目的研究寻常型银屑病皮损中磷酸化信号转导和转录激活因子-3(phosphorylated signal transducer and acti-vator of transcription-3,P-Stat3)与白介素-17(Interleukin-17,IL-17)的表达及意义。方法实验组23例,对照组14例。两组均采用免疫组织化学法检测寻常型银屑病皮损组织和正常皮肤组织中P-Stat3与IL-17的表达。结果实验组银屑病皮损中P-Stat3和IL-17均高于对照组(Z值分别为-5.043和-4.324,均P<0.01),并且与PASI评分呈正相关(分别为rs=0.713和rs=0.797,均P<0.001),P-Stat3和IL-17呈正相关(rs=0.762,P<0.001)。结论 P-Stat3和IL-17在银屑病皮损中明显升高,且与疾病的严重程度呈正相关。

miR-182、信号传导和转录激活因子3、基质金属蛋白酶-7与食管癌老年患者临床病理及预后的关系

目的分析微小RNA(miR)-182、信号传导和转录激活因子(STAT)3、基质金属蛋白酶(MMP)-7与食管癌老年患者临床病理及预后的关系。方法 67例老年食管癌患者,收集其癌组织和癌旁组织,分析食管癌miR-182、STAT3、MMP-7表达和临床病理与预后的关系。结果 miR-182、STAT3、MMP-7癌组织高表达率均分别显著高于癌旁组织[52.24%(35/67)和14.93%(10/67),64.18%(43/67)和17.91%7(12/67),55.22%(37/67)和16.42%(11/67)](P<0.05)。miR-182、STAT3、MMP-7高表达与性别、年龄、肿瘤直径无关(P>0.05);miR-182、STAT3、MMP-7高表达与分化程度、T分期、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)。相关性分析可见,miR-182、STAT3、MMP-7均呈正相关,miR-182、STAT3、MMP-7高表达者2年生存率均分别低于低表达者,Cox比例风险显示,淋巴结转移、miR-182、STAT3、MMP-7高表达为食管癌患者预后独立危险因素。结论 miR-182、STAT3及MMP-7高表达可作为老年食管癌患者生物学行为与预后的参考指标,并为其治疗提供理论依据。

哮喘小鼠气道IL-6、信号转导和转录激活因子3的表达与活化及其与气道炎症的关系

目的研究气道IL-6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)在哮喘小鼠气道中的表达与活化,及其与气道炎症的关系。方法 30只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘未干预组和AG490干预组,每组10只。建立小鼠哮喘模型,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行炎性细胞分类计数,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、IL-6水平,免疫组织化学染色检测各组肺组织中STAT3表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织STAT3和p-STAT3水平。应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 HE染色显示哮喘未干预组可见明显气道炎症改变,AG490干预组炎症改变较轻;AG490干预组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)以及IL-4、IL-5水平均低于哮喘未干预组(P<0.05)。哮喘未干预组气道STAT3表达水平、肺组织STAT3和p-STAT3水平明显高于对照组(P<0.05),AG490干预组肺组织p-STAT3水平明显低于哮喘未干预组(P<0.05)。哮喘小鼠气道STAT3表达水平及肺组织p-STAT3水平分别与BALF中EOS计数、IL-4、IL-5、IL-6水平等呈正相关(P<0.05)。结论哮喘小鼠气道STAT3蛋白表达上调及活化程度增加,与气道IL-6的升高和Th2优势的气道炎症相关,IL-6/STAT3信号通路可能参与哮喘气道炎症的形成。

白细胞介素-6/糖蛋白130/转录激活因子3通路在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制

目的基于肺特异性白细胞介素-6(IL-6)敲除小鼠研究IL-6/糖蛋白130(gp130)/转录激活因子3(STAT3)通路在百草枯(PQ)诱导急性肺损伤(ALI)中的作用。方法野生型C57BL/6J小鼠分为IL-6野生型(IL-6 WT)组、IL-6 WT+PQ组,采用Sftpc(肺表面活性蛋白C基因)-Cre^(+)小鼠与IL-6^(FLOX/FLOX)小鼠交配的方式得到肺特异性IL-6敲除小鼠并分为IL-6 KO组、IL-6 KO+PQ组,单次腹腔注射PQ诱导ALI,比较四组小鼠肺组织病理改变、肺泡动脉氧分压差(PA-aO_(2))、肺组织湿/干质量比值(W/D)、IL-6/gp130/STAT3通路、核转录因子-κB(NF-κB) p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的差异。结果与IL-6 WT组比较,IL-6 WT+PQ组小鼠肺组织出现了典型的ALI病理改变,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO_(2)、W/D明显增加(P <0.05);与IL-6 WT+PQ组比较,IL-6 KO+PQ组小鼠肺组织病理改变明显改善,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β的表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO_(2)、W/D明显降低(P <0.05)。结论 IL-6/gp130/STAT3通路激活与PQ诱导ALI有关。

信号传导与转录激活因子3在乳腺癌中的表达及其与人基质金属蛋白酶2、9的关系研究

目的观察乳腺癌组织中信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的表达,分析其与患者临床特征的关系。方法应用免疫组织化学法(EnV ision)检测23例乳腺癌患者癌组织中STAT3、白细胞介素-6(interleukin,IL-6)、人基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果浸润性癌组织中STAT3表达高于非浸润性癌。23例乳腺癌组织中IL-6表达阳性11例,阳性率47.83%;MMP-2阳性10例,阳性率43.48%;MMP-9阳性9例,阳性率39.13%;STAT3阳性表达与浸润型乳腺癌有统计学差异(χ~2=7.738,P<0.05),两者呈正相关(r=0.161,P<0.05);STAT3阳性表达与IL-6阳性表达无相关性(r=0.032,P>0.05),与MMP-9(r=0.537,P<0.05)和MMP-2(r=0.649,P<0.05)阳性表达呈正相关。结论 STAT3与乳腺癌的浸润侵袭有关,其可能是通过调节MMP-2和MMP-9的表达控制乳腺癌的侵袭和转移。

黄芩素通过抑制NF-κB/STAT3/ERK信号通路改善过敏性鼻炎小鼠的炎症反应

目的探究黄芩素是否通过调控核转录因子(NF)-κB、信号传导与转录激活因子(STAT)3、细胞外调节蛋白激酶(ERK),参与影响过敏性鼻炎小鼠的炎症反应,探究NF-κB/STAT3/ERK信号通路作为黄芩素作用靶点的可能性。方法选取72只BALB/c小鼠随机分为健康对照组、过敏性鼻炎组、氯雷他定组、黄芩素处理组、黄芩素+ERK激活组、黄芩素+NF-κB激活组,每组12只。构建过敏性鼻炎小鼠模型,过敏性鼻炎症状评分评估各组的构模情况;苏木素-伊红(HE)染色观察各组鼻黏膜组织的病理学变化;血球计数法检测各组鼻腔灌洗液中各类细胞数量;酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测各组鼻腔灌洗液中白细胞介素(IL)-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平及血清中OVA特异性免疫球蛋白(Ig)E、IgG1水平;Western印迹法检测鼻黏膜组织中NF-κB/STAT3/ERK信号通路蛋白表达水平。结果健康对照组鼻黏膜组织完整;与健康对照组相比,过敏性鼻炎组鼻黏膜组织具有明显病理学变化,过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著升高,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量和NF-κB p65、STAT3、ERK蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05);与过敏性鼻炎组相比,氯雷他定组、黄芩素处理组黏膜组织逐渐恢复,过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著降低,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量和NF-κB p65、STAT3、ERK的蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05);与黄芩素处理组相比,分别激活ERK、NF-κB通路后,小鼠鼻黏膜组织恢复缓慢,过敏性鼻炎症状评分、鼻腔灌洗液中IL-12、TNF-α、IL-6含量和血清中IgE、IgG1含量显著升高,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数量显著升高(P<0.05);氯雷他定组和黄芩素处理组相比,各项指标无显著差异(P>0.05)。结论黄芩素通过调控NF-κB/STAT3/ERK信号通路,抑制NF-κB p65、STAT3、ERK蛋白磷酸化,减少炎症细胞聚集,减轻炎症反应,缓解小鼠过敏性鼻炎。

结核病患者外周血白细胞介素-8、信号传导和转录激活因子3表达差异及其辅助诊断价值

目的探索耐多药结核病患者(multi-drug resistant tuberculosis,MDR-TB)、药物敏感结核病患者(drug susceptible tuberculosis,DSP-TB)及健康人3组人群外周血白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)表达差异,为开展新型结核病实验室辅助诊断提供参考依据。方法对3组人群外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)mRNA芯片表达谱差异性进行分析;选取MDR-TB患者与DSP-TB患者为研究对象,以健康人为对照组,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组血清IL-8浓度,比较组间差异;同时分离3组人群PBMC,收集细胞并提取总RNA,分别通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术分析各组IL-8、STAT3 mRNA表达情况;以蛋白免疫印迹(Western Blot)实验比较各组STAT3蛋白表达差异。结果MDR-TB和DSP-TB 2组人群血清IL-8浓度明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MDR-TB组和DSP-TB组人群外周血PBMC中IL-8基因mRNA的相对表达量明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);qPCR与Western Blot实验结果均显示,健康组、DSP-TB组和MDR-TB组STAT3基因表达依次上调,组间差异有有统计学意义(P<0.05),实验所得结果与mRNA芯片结果一致。结论IL-8在活动性结核病(active tuberculosis,ATB)患者体内表达显著升高,可以作为标志物区分ATB与健康人群;STAT3浓度的变化不仅作为ATB的诊断参考,还可以鉴别DSP-TB与MDR-TB人群。IL-8、STAT3联合检测有望成为不同结核病患者的临床辅助诊断依据。

lncRNA NEAT1沉默通过IL-10/STAT3信号通路调节小胶质细胞极化对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

目的探讨长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)沉默通过白细胞介素(IL)-10/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路调节小胶质细胞极化对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CIRI组、CIRI+si-NC组、CIRI+si-NEAT1组,每组24只。除Sham组外,其余各组大鼠采用线栓法构建CIRI模型。建模结束后,各组大鼠给予对应处理7 d。对大鼠神经功能缺损进行评分;观察脑组织病理学变化;检测脑梗死体积百分比,脑组织中离子钙接头蛋白分子1阳性(Iba1+)细胞中M1型、M2型极化标志物阳性(Iba1+CD86+、Iba1+CD206+)细胞的数量,IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10,lncRNA NEAT1、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、IL-10 mRNA,IL-10、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果与Sham组相比,CIRI组大鼠脑组织病理损伤严重,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、脑组织中Iba1+CD86+、Iba1+CD206+阳性细胞数量、CD86/CD206比值、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10水平、lncRNA NEAT1、iNOS、Arg-1、IL-10 mRNA水平、IL-10、p-STAT3/STAT3蛋白水平显著升高(P<0.05);与CIRI组和CIRI+si-NC组相比,CIRI+si-NEAT1组大鼠脑组织病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、脑组织中Iba1+CD86+阳性细胞数量、CD86/CD206比值、IL-1β、TNF-α水平、lncRNA NEAT1、iNOS mRNA水平显著降低(P<0.05),Iba1+CD206+阳性细胞数量、IL-4、IL-10水平、Arg-1、IL-10 mRNA、IL-10、p-STAT3/STAT3蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论沉默lncRNA NEAT1可能通过激活IL-10/STAT3信号通路,调控小胶质细胞极化,从而改善CIRI大鼠脑组织损伤。

IL-17B和STAT3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探究白介素(IL)-17B、细胞信号和转录激活因子(STAT)3蛋白在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及临床意义。方法:免疫组化法检测IL-17B和STAT3在50例EOC、28例卵巢上皮性良性肿瘤及18例正常卵巢组织中的表达情况,探讨IL-17B和STAT3表达与EOC临床病理特征及预后的关系。结果:EOC中IL-17B和STAT3表达与FIGO分期、病理类型、组织分化程度有关(P<0.05),与年龄、淋巴结转移无关(P>0.05)。IL-17B和STAT3在EOC中表达呈正相关(r=0.364)。EOC中IL-17B和STAT3高表达与患者不良预后密切相关,IL-17B和STAT3高表达者的总生存期明显缩短(P<0.05)。结论:IL-17B和STAT3可能参与EOC的发生、发展,有望作为EOC临床预后预测指标。

白介素-22在胃癌恶性转化中的作用

目的:观察处于胃癌恶性转化不同阶段的患者组织中白介素-22(interleukin-22,IL-22)、IL-22受体1(interleukin-22receptor1,IL-22R1)和信号转导与转录激活因子3(signaling and transcriptional activation factor 3,STAT3)的表达,探讨IL-22在胃癌恶性转化过程中的作用。方法:收集慢性胃炎组织、癌前病变胃组织及胃癌组织各15例,用免疫组化和实时定量PCR(realtime PCR)的方法,测定3组中IL-22、IL-22R1及p-STAT3(S727)的分布及表达。结果:①IL-22主要分布在异形腺体上皮细胞和腺体间浸润的散在的淋巴细胞胞浆中,IL-22R1主要分布在异形腺体上皮细胞的胞浆中,p-STAT3则主要定位于异形腺体上皮细胞的胞核中;②胃癌前病变组及胃癌组中的IL-22、IL-22R1及p-STAT3蛋白的表达量都明显高于慢性胃炎对照组;同时,胃癌组中IL-22、IL22-R1及p-STAT3蛋白的表达量明显高于胃癌前病变组,差异均具有统计学意义(P<0.001);③胃癌前病变组及胃癌组中的IL-22和IL22-R1的mRNA表达量都明显高于慢性胃炎对照组;胃癌组中IL-22和IL22-R1的mRNA表达量明显高于胃癌前病变组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌前病变及胃癌组织中,IL-22不仅可由浸润的免疫细胞分泌,还可由异形腺体上皮细胞自分泌产生。胃癌的恶性转化过程中,IL-22可能起着促进作用,且其促进作用可能通过IL-22-IL-22R1-STAT3通路完成。

IL-22/STAT3信号通路在慢性间歇低氧致胰岛素抵抗中的作用

目的对照观察大鼠在慢性间歇低氧-复氧条件下,白细胞介素-22(IL-22)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)的关系,探讨IL-22/STAT3通路在慢性间歇低氧所致胰岛素抵抗中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为对照组(NC组)和间歇低氧组(CIH组),每组各12只。NC组置于常氧环境12周,CIH组先予间歇低氧8周,随后恢复常氧饲养至第12周。两组均于基线、第8周、第12周测定FBG、FINS、IL-22、p-STAT3/STAT3水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),比较组间差异。结果①两组基线时各观察指标之间差异无统计学意义(P>0.05);8周时,与NC组比较,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR水平增高、IL-22水平降低(均P<0.05),p-STAT3/STAT3有降低趋势,但差异无统计学意义;复氧4周时,两组FBG、FINS、HOMA-IR、IL-22水平比较差异无统计学意义(均P>0.05),CIH组p-STAT3/STAT3值较NC组增高(P<0.05)。②Spearman秩相关分析显示,HOMA-IR与IL-22、p-STAT3/STAT3均呈负相关(均P<0.05)。结论慢性间歇低氧能够抑制IL-22/STAT3信号通路的表达;IL-22/STAT3信号通路可能介导了慢性间歇低氧所致的胰岛素抵抗。

白细胞介素-6/信号传导与转录激活因子3信号通路在乙醇性肝纤维化性别差异中的作用研究

目的研究白细胞介素-6/信号传导与转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路在乙醇性肝纤维化性别差异中的作用。方法选择7~8周龄的C57BL/6N雌鼠和雄鼠各50只进行随机分为雌性对照组、雌性模型组、雄性对照组和雄性模型组,每组各25只。对照组用TP4030C Lieber-DeCarli液体饲料喂养8周,模型组用TP4030A Lieber-DeCarli液体饲料喂养8周,并且联合31.5%乙醇灌胃,剂量为5 g·kg^(-1),每周2次。用试剂盒检测各组小鼠的血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)酶活性和雌二醇(E_(2))、睾酮(T)浓度的变化,用天狼星红染色检测各组小鼠纤维化情况,用蛋白质印迹法检测IL-6/STAT3通路相关蛋白的表达水平。结果雌性对照组、雌性模型组、雄性对照组和雄性模型组的GPT酶活性分别为(8.46±3.30)、(49.65±17.35)、(9.96±3.29)和(82.44±10.76)U·L^(-1),GOT酶活性分别为(28.05±6.28)、(62.15±12.12)、(26.94±3.89)和(105.70±13.43)U·L^(-1),E2分别为(89.49±22.35)、(37.12±9.34)、(14.49±4.95)和(7.31±2.47)pg·mL^(-1),T分别为(3.55±2.33)、(0.75±0.30)、(106.10±22.52)和(47.60±7.86)ng·mL^(-1),胶原纤维光密度值分别为68.87±5.75、191.30±7.72、78.07±12.00和246.70±9.29,α-平滑肌肌动蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、1.36±0.26、1.18±0.13和1.61±0.17,IL-6蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、1.93±0.54、1.34±0.14和4.13±0.83,IL-6受体(IL-6R)蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、2.17±0.51、1.39±0.45和2.58±0.61,磷酸化STAT3蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、2.94±0.14、1.34±0.18和3.60±0.88。对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);雄性模型组的上述指标与雌性模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论在小鼠乙醇性肝纤维化中,与雌性小鼠相比,雄性小鼠肝中IL-6的水平显著升高,IL-6与可溶性受体IL-6R形成复合物,胞内STAT3聚集和磷酸化增多,进一步激活IL-6/STAT3信号通路,使雄性小鼠比雌性小鼠的肝纤维化更明显。

麦粒灸对Lewis肺癌小鼠炎性微环境中白介素-6及信号转导蛋白和转录激活因子3的影响

目的:观察麦粒灸对Lewis肺癌小鼠炎性微环境中血清白介素-6(IL-6)及瘤体信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT 3)的影响,探讨麦粒灸对Lewis肺癌的作用机制。方法:将C 57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组,每组10只。皮下注射Lewis肺癌细胞悬液建立Lewis肺癌小鼠模型。成瘤后治疗组予以麦粒灸治疗,取双侧"后三里"穴,每穴5壮,1次/d,共10d。观察各组小鼠的体质量、生存状态积分、瘤体体积和生存率,采用ELISA法检测血清IL-6的表达水平,采用Western blot法检测瘤体中STAT 3的表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠体质量明显升高(P<0.05)。模型组和治疗组小鼠瘤体体积逐渐增大,治疗8、10d时治疗组小鼠瘤体体积明显小于模型组(P<0.05)。模型组小鼠生存状态恶化、生存率降低,治疗6、8、10d时治疗组小鼠生存状态积分明显高于模型组(P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清IL-6和瘤体中STAT 3表达水平均明显升高(P<0.001);与模型组比较,治疗组小鼠血清IL-6和瘤体中STAT 3表达水平均明显下降(P<0.001)。结论:麦粒灸可提高Lewis肺癌小鼠生存状态,降低死亡率,控制瘤体生长速度,其机制可能与调节肿瘤炎性微环境、抑制信号因子IL-6及STAT 3持续活化有关。

电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑缺血皮质区白介素-4/信号传导及转录激活因子6与核因子-κB的影响

目的:观察电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑缺血皮质区白介素-4(IL-4)含量,信号传导及转录激活因子6(STAT 6)、磷酸化STAT 6(pSTAT 6)与核因子-κB(NF-κB)p 65蛋白表达的影响,探讨电针治疗局灶脑缺血/再灌注后炎性反应的可能机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组15只。采用改良线栓法制备大脑中动脉闭塞/再灌注模型。电针组电针刺激大鼠"百会""合谷""太冲",再灌注0、12、24h各电针1次。运用免疫组化及Western blot法检测大鼠大脑缺血皮质区pSTAT 6/STAT 6、NF-κB p 65的表达水平;ELISA法检测大鼠大脑缺血皮质区IL-4的含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠大脑缺血皮质区IL-4含量显著升高(P<0.001),胞质及胞核NF-κB p 65表达水平显著增加(免疫组化法P<0.001,Western blot法P<0.01);与模型组比较,电针组IL-4含量显著升高(P<0.01),pSTAT 6及pSTAT 6/STAT 6表达水平显著升高(均P<0.01),胞质及胞核NF-κB p 65表达水平显著降低(免疫组化法P<0.01,Western blot法P<0.05)。结论:电针能有效提高局灶脑缺血/再灌注损伤大鼠大脑缺血皮质区抗炎因子IL-4含量,增加pSTAT 6/STAT 6表达水平,同时NF-κB p 65入核显著减少,可能与激活IL-4/STAT 6信号通路有关。

JAK2-STAT3信号通路在重症急性胰腺炎大鼠肺组织中表达与外周炎性因子的相关性

目的探讨JAK2-STAT3信号通路在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织中表达与外周炎性因子的相关性。方法将5月龄雄性Wistar大鼠240只按随机数字表法分为SAP组、SAP+R组、SAP+S组、SAP+R+S组和假手术组(SO组),每组48只。各组动物于造模后3、6、12、18 h取腹主动脉血和肺组织,测定血清白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10),检测肺组织中JAK2 mRNA、STAT3 m RNA、p-JAK2蛋白、p-STAT3蛋白的表达水平。结果造模后3、6、12、18 h,五组血清IL-6和IL-10水平组间比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。SO组的血清IL-10水平组内比较差异有统计学意义(P <0.05)。SAP组、SAP+R组、SAP+S组及SAP+R+S组的血清IL-6和IL-10水平从造模后3 h开始逐渐升高,造模后12 h达到峰值,随后降低,组内不同时间点比较差异有统计学意义(P <0.05)。造模后3、6、12、18 h,五组肺组织JAK2 m RNA、STAT3 mRNA和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平组间比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。五组的肺组织JAK2 mRNA、STAT3 m RNA和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平从造模后3 h开始逐渐升高,造模后12 h达到峰值,随后降低,组内不同时间点比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论 SAP病程中,肺JAK2/STAT3通路活化可能与全身炎性反应密切相关。

甘草酸铵对过敏性紫癜性肾炎小鼠肾功能及IL-23/STAT3通路的影响

目的探讨甘草酸铵对过敏性紫癜性肾炎(HSPN)小鼠肾功能的影响及可能的作用机制。方法2020年7月—2021年1月在邯郸市中心医院实验室进行实验,C57BL/6雄性小鼠80只,随机选取12只作为空白对照组,其余小鼠建立HSPN模型。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(22 mg/kg)及甘草酸铵低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组12只。环磷酰胺组、甘草酸铵各剂量组小鼠腹腔注射相应剂量的药物,1次/d,空白对照组和模型组给予等量生理盐水,持续4周。给药结束后,检测小鼠24 h尿蛋白水平和尿红细胞计数,血清白介素-23(IL-23)、IL-17、免疫球蛋白A(IgA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、循环免疫复合物(CIC)水平,外周血单个核细胞中Th17、Treg细胞占比及肾脏组织中IL-23、信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其磷酸化蛋白表达水平;苏木素—伊红(HE)染色观察肾脏组织的形态学变化。结果与空白对照组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白水平、尿红细胞计数,血清IL-23、IL-17、IgA、CIC、BUN、SCr水平,外周血单个核细胞中Th17细胞占比、Th17/Treg细胞比值,肾脏组织中IL-23、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3蛋白表达升高(P<0.05),Treg细胞占比显著降低(P<0.05),肾脏组织出现严重的病理损伤。与模型组比较,环磷酰胺组及甘草酸铵中、高剂量组小鼠24 h尿蛋白水平、尿红细胞计数,血清IL-23、IL-17、IgA、CIC、BUN、SCr水平,外周血单个核细胞中Th17细胞占比、Th17/Treg细胞比值,肾脏组织中IL-23、p-STAT3/STAT3蛋白表达降低(F/P=45.928/0.000、52.976/0.000、64.629/0.000、151.382/0.000、277.542/0.000、55.985/0.000、203.736/0.000、261.569/0.000、214.406/0.000、226.046/0.000、228.611/0.000、148.613/0.000),Treg细胞占比显著升高(F/P=24.160/0.000),肾脏组织病理损伤明显减轻。与环磷酰胺组比较,甘草酸铵高剂量组小鼠上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘草酸铵可减轻HSPN小鼠肾损伤,其作用机制可能与抑制IL-23/STAT3通路的活化,调节Th17/Treg细胞免疫平衡有关。

基于IL-6/STAT3信号通路研究甘草泻心汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的观察甘草泻心汤对溃疡性结肠炎模型大鼠的疗效和IL-6/STAT3信号通路中相关分子的调节作用,以揭示其治疗溃疡性结肠炎的作用机制及安全性。方法将60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,美沙拉嗪组,甘草泻心汤低、中、高剂量组6组。以TNBS/乙醇法造模后分别以生理盐水、美沙拉嗪及甘草泻心汤各剂量灌胃。14d后检测血清ALT、AST、BUN及Cr含量,HE染色观察结肠组织结构改变,免疫组化分析结肠组织IL-6、STAT3及磷酸化STAT3的蛋白表达,以qPCR法检测结肠组织IL-6及STAT3的mRNA表达。结果与空白组比较,模型组血清AST含量明显升高(P<0.01),而ALT、BUN、Cr无明显变化(P>0.05),结肠组织病理评分明显增加(P<0.01),结肠组织IL-6和STAT3的蛋白和mRNA表达均明显增高(P<0.01),且STAT3活化明显增加(P<0.01)。与模型组比较,甘草泻心汤各剂量组血清AST含量明显降低(P<0.01),美沙拉嗪组及甘草泻心汤中剂量组结肠组织病理评分明显降低(P<0.01),结肠组织IL-6、STAT3和磷酸化STAT3的蛋白表达明显降低(P<0.01),IL-6和STAT3的mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论甘草泻心汤能改善溃疡性结肠炎模型大鼠结肠病理结构改变,尤以中剂量明显。其作用机制可能与降低结肠组织中IL-6水平,抑制IL-6/STAT3信号转导通路,降低STAT3表达与活化有关。甘草泻心汤对TNBS溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗安全有效。

欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠STAT3、p-STAT3信号通路的影响

目的探讨欣胃颗粒对胃癌前病变(precancerous lesionof gastric cancer,PLGC)大鼠信号传导及转录活化因子(signal transducers and activators of transcription,STATs)、酪氨酸磷酸化STAT3(p-STAT3)信号通路的影响。方法 96只Wistar大鼠随机分为空白对照组(空白组)16只,造模组80只。采用N-甲基-N′-硝基-亚硝基胍(MNNG)为主的复合因素造模法制备PLGC大鼠模型,将造模成功大鼠随机抽取75只分为模型组、维霉素组、欣胃颗粒低剂量组、欣胃颗粒中剂量组、欣胃颗粒高剂量组,每组15只。空白组随机抽取大鼠15只。空白组予普通标准饲料喂养,并予10mL/kg生理盐水灌胃;欣胃颗粒低、中、高剂量组每日分别给予1.254、2.508、5.016g/kg中药冲剂灌胃;模型组给予10mL/kg生理盐水灌胃;维酶素组将维酶素片研碎制成0.1g/mL的混悬液以10mL/kg灌胃。均每日1次,给药12周。观察各组大鼠的一般状态(包括大鼠皮毛、活动度、进食进水量、粪便、体重及存活情况)和胃黏膜组织病理学的变化,观察其对STAT3、p-STAT3表达的影响。结果与空白组比较,模型组STAT3、p-STAT3表达水平增高(P<0.05)。欣胃颗粒各剂量组大鼠活动度、进食水量、体重等一般状态较模型组好转;与模型组比较,欣胃颗粒低、中、高剂量组,STAT3、p-STAT3表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);PLGC即肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)和异性增生(dysplasia,DYS)发生率均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与维酶素组比较,欣胃颗粒中、高剂量组IM及DYS发生率均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),欣胃颗粒中、高剂量组STAT3、p-STAT3表达水平下降更显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论欣胃颗粒对PLGC大鼠胃黏膜组织病理具有明显改善作用,可下调STAT3、p-STAT3的表达以达到对抗PLGC的作用。

紫草素抑制STAT_3信号通路对人绒毛膜癌JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:观察紫草素抑制信号传导和转录激活因子-3(STAT_3)信号通路对人绒毛膜癌JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响,探讨其抗绒毛膜癌的可能机制。方法:体外培养JEG-3细胞,加入0.2、0.4μg·mL^(-1)紫草素作为实验组,阴性对照组加入等体积0.1%二甲基亚砜,甲氨蝶呤组(MTX组)作为阳性对照组加入2μg·mL^(-1)MTX。采用划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验,观察紫草素对JEG-3细胞迁移和侵袭能力的影响。采用免疫组织化学分析STAT_3和酪氨酸磷酸化STAT_3(p-STAT_3)阳性细胞的表达。进一步采用Real-Time PCR分析STAT_3mRNA和pSTAT_3mRNA的表达。结果:紫草素可显著抑制JEG-3细胞迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01),降低STAT_3和pSTAT_3阳性细胞的表达以及STAT_3mRNA和p-STAT_3mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:紫草素能明显抑制JEG-3细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制STAT_3信号通路有关。