白介素12A对CD4+CD25+Foxp3+Treg增殖分化的促进作用

目的:研究白介素12A(IL-12A)促进CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+Foxp3+Treg(iTreg)增殖分化的作用。方法:采用免疫磁珠分选法分选出脐带血中CD4+CD25-T细胞,实验组和对照组均采用抗CD3和抗CD28单克隆抗体活化,并加入10ng/mL的TGF-β1诱导,而实验组加入5ng/mL的IL-12A同时诱导。细胞培养72h后,采用流式细胞术(FACS)检测CD4+CD25+Foxp3+Treg(iTreg)细胞的比例,蛋白免疫印迹(Western-Blot)法检测细胞中Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的表达,实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的mRNA表达。体外共培养诱导后iTreg和CD4+CD25-T细胞,CCK-8法评价淋巴细胞活性。体外加入5ng/mL的IL-12A与iTreg、CD4+CD25-T细胞共培养检测IL-12A协同iTreg对于CD4+CD25-T细胞活性的影响。结果:FACS检测,IL-12A可以促进CD4+CD25-T向iTreg的分化,CCK-8结果显示,iTreg可以以浓度依赖方式抑制CD4+CD25-T细胞活性。而IL-12A可以协同iTreg对于CD4+CD25-T细胞活性的抑制作用。Western-Blot和RT-QPCR结果显示,iTreg分化过程中Foxp3、Smad2、Smad3、Smad6的表达水平增高,且相关mRNA的水平也增高。结论:IL-12A可以促进iTreg的诱导分化,对于效应T细胞的抑制有着一定的协同作用。

血清白介素-12p70、淀粉样蛋白A水平变化与慢性阻塞性肺疾病患者并发冠心病的关系

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清白介素-12p70(IL-12p70)、淀粉样蛋白A(SAA)水平变化及其与并发冠心病(CHD)的关系。方法选取2019年5月—2023年5月山西医科大学附属汾阳医院呼吸与危重症医学科诊治COPD患者150例,其中并发CHD患者58例纳入COPD-CHD组,未并发CHD患者92例纳入COPD组。检测血清IL-12p70、SAA水平;比较不同血清IL-12p70、SAA水平COPD患者并发CHD发生率;Logistic回归模型分析血清IL-12p70、SAA与COPD患者并发CHD的独立关系,受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清IL-12p70、SAA预测COPD患者并发CHD的价值。结果COPD-CHD组吸烟史比例、糖尿病比例、纤维蛋白原及血清IL-12p70、SAA水平高于COPD组[χ^(2)(t)/P=4.696/0.030、4.801/0.029、2.629/0.010、6.111/<0.001、5.744/<0.001];随着血清IL-12p70、SAA水平升高,COPD患者并发CHD发生率呈升高趋势(χ^(2)/P=27.864/<0.001、31.346/<0.001);血清IL-12p70、SAA升高均是COPD患者并发CHD的独立危险因素[OR(95%CI)=3.350(2.002~5.607),3.658(2.268~5.899)];ROC曲线分析显示,血清IL-12p70、SAA联合预测COPD患者并发CHD的AUC为0.835,优于各自单独预测效能(Z/P=2.180/0.029,2.244/0.025)。结论COPD患者血清IL-12p70、SAA水平升高,尤其是并发CHD时升高更显著,二者均为COPD患者并发CHD的独立危险因素,临床可通过检测两指标水平判断COPD患者并发CHD风险。

白介素12A基因多态性与OLP的相关性研究

目的:研究华东地区汉族人群IL-12A基因多态性与口腔扁平苔藓(orallichenplanus,OLP)的相关性。方法:采用TaqMan荧光定量PCR法检测华东地区292例OLP患者及686例正常对照者的IL-12A基因的5个SNP位点(rs3024415,rs2243123,rs583911,rs568408和rs2243143),分析IL-12A基因多态性与OLP的相关性。结果:①华东地区健康人群IL-12A基因3'-UTRrs568408位点AA、GA和GG基因型频率分别是0.7%、12.4%和86.8%,而OLP患者分别是1.1%、18.4%和80.5%,其中GA和AA基因型分布频率显著高于正常对照组(P=0.0427)。②正常对照组IL-12A基因rs583911位点AA、GA和GG基因型频率分别是4.2%、38.6%和57.1%,而OLP患者分别是9.5%、36.5%和54%,其中AA基因型分布频率显著高于对照组(P=0.00805)。③糜烂型OLP组IL-12A-rs568408/A等位基因频率显著高于正常对照组,分别为11.6%和6.94%(OR=1.76,95%CI:1.133-2.732,P=0.011)。结论:华东地区汉族OLP人群IL-12A基因rs568408位点存在多态性变异,可能与OLP的疾病易感性和严重程度有关。

白介素4与白介素12在变应性鼻炎、哮喘和特应性皮炎中的表达及意义

目的探讨Th2型细胞因子白介素4(interleukin 4,IL-4)及Th1型细胞因子白介素12(interleukin12,IL-12)在3种常见的Ⅰ型变态反应性疾病中的表达情况及临床意义。方法采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对临床诊断为屋尘螨过敏的变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)、哮喘(bronchial asthma,BA)、特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)患者以及健康人的外周血血清IL-12、IL-4、屋尘螨特异性IgE(specific IgE,SIgE)进行检测,并对3种疾病人群的IL-12和IL-4与血清SIgE进行相关性分析。结果IL-4在AR及BA患者中显著高于正常对照组(P=0.032,P=0.041),IL-12在AR及BA患者中表达显著低于正常对照组(P=0.007,P=0.003),二者在AD中的表达与正常对照组差异无显著性。AR和BA中IL-4的表达与SIgE呈正相关(AR:r=0.522,P=0.001;BA:r=0.622,P=0.001),IL-12的表达与SIgE的表达呈负相关(AR:r=-0.436,P=0.006;BA:r=-0.499,P=0.009)。AD中IL-12及IL-4与SIgE的表达无相关性。结论AR与BA在发病机制上具有共性,而AD与另外两种疾病存在差异性。提示皮肤变应性疾病与呼吸道变应性疾病的发病存在差异。

精神分裂症患者血浆白介素6、10、12水平研究

目的 探讨白介素 (IL) 6、1 0、1 2在精神分裂症的病因与发病机制中的作用。方法 采用酶联免疫吸附法 (ELSIA)检测 57例精神分裂症和 2 9名健康对照的血浆IL 6、IL 1 0、IL 1 2水平。结果 精神分裂症患者组血浆IL 1 2水平明显高于对照组 (P <0 0 5) ,而IL 6、IL 1 0水平两组间无显著性差异 ;女性患者的血浆IL 1 0水平明显低于女性对照组 (P <0 0 5) ,其IL 1 2则高于对照组 (P <0 0 5) ;Ⅱ型精神分裂症患者的血浆IL 6水平明显高于Ⅰ型(P <0 0 5) ,家族性亚型患者的IL 6水平明显高于散发性亚型 (P <0 0 1 ) ;患者组IL 6与IL 1 0呈正相关 (P <0 0 0 1 )。结论 精神分裂症患者存在IL 1 2介导的免疫功能异常 ,血浆IL 6水平升高可能是其某些临床亚型的特征性免疫学指标之一 。

不同感染状态下梅毒患者血清白介素2、10和12检测结果分析

梅毒是由梅素螺旋体（TP）引起的一种慢性性传播性疾病，可以引起全身各组织器官的损害，临床表现复杂多样。部分患者在出国、婚检、献血及手术等情况下意外发现，具体感染日期不明，且无临床表现，在排除神经梅毒后，称之为潜伏梅毒；另外部分患者经积极正规治疗，快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）滴度在早期梅毒半年、晚期梅毒1年以上不能下降或阴转，称之为血清固定：而大部分患者经治疗后RPR能够下降直至阴转。上述3类患者均无临床症状，但处于不同的感染状况。

白介素12基因修饰的树突细胞疫苗治疗自发性转移性肺癌

背景与目的:对转移性肺癌的治疗已进行了大量研究,但仍缺乏有效的治疗方法。本研究目的是探讨白介素12(IL-12)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对自发性转移性肺癌的治疗作用。方法:小鼠足垫注射3LLLewis肺癌细胞,建立自发性转移性肺癌模型,经IL-12基因修饰、3LL特异抗原多肽Mut1体外致敏DC疫苗(DC-IL-12/Mut1)皮下免疫2次,观察荷瘤鼠肺重量、肺表面转移结节数量、存活期及相应免疫指标的变化,组间差异行t检验,生存期行时序检验。结果:与对照组(DC-LacZ/Mut1)相比,DC-IL-12/Mut1组肺重量轻、肺表面转移结节数量少、存活期长(P<0.01),细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性和NK活性增强(P<0.01)。结论:IL-12基因修饰的DC疫苗对自发性转移性肺癌有明显的治疗作用,其可能机理是诱导特异性CTL和增强NK活性。

白介素12与粒细胞集落刺激因子联合应用对急性放射病小鼠的治疗作用

本研究旨在探究重组鼠白介素12(rmIL-12)与粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合应用对γ射线急性放射病小鼠的治疗作用。56只BALB/c小鼠给予60Coγ射线6.0 Gy一次全身照射,然后随机分为照射对照、rmIL-12治疗、G-CSF治疗和rmIL-12+G-CSF治疗4组。rmIL-12治疗组小鼠于照射后1 h及此后每3 d 1次腹腔注射rmIL-12 20μg/kg,共5次;G-CSF治疗组小鼠于照射后2 h开始每天1次皮下注射G-CSF 100μg/kg,共14 d;联合治疗组给予rmIL-12+G-CSF治疗,方法同上。每天2次观察小鼠一般情况,3 d检测1次外周血细胞数,分别于照射后14 d和28d收集骨髓细胞进行集落培养。结果表明,联合治疗组小鼠外周血白细胞(WBC)数恢复时间较对照组明显提前(7 dvs 11 d),恢复速度与G-CSF治疗组相当,血小板(Plt)数开始恢复时间较对照组明显提前(11 d vs 14 d),且Plt最低值明显高于对照组(16.5%vs 8.1%,P<0.01),恢复速度与rmIL-12治疗组相当。照射后14和28 d骨髓有核细胞集落培养结果提示,联合治疗组CFU-GM、CFU-Mix均明显高于对照组(P<0.05)。结论:rmIL-12与G-CSF联合应用可明显促进急性放射病小鼠造血功能的恢复。

白介素-4、12和干扰素-γ在早期显性梅毒转归中的动态变化

目的:了解早期显性梅毒患者外周血中白介素(IL)-4、、IL-12和干扰素(IFN)-γ的动态表达与预后的关系。方法:于治疗前及治疗后1、3、6、9、12个月分别取患者外周血单一核细胞(PBMC)与梅毒螺旋体(TP)共同培养,分别用ELISA及逆转录(RT)-PCR方法检测培养细胞上清和PBMC中的IL-4、12、IFN-γ及其mRNA的表达,同时观察快速血浆反应素(RPR)试验转阴情况。结果:IL-12和IFN-γ表达水平与血清RPR试验转阴无明显相关性,IL-4表达水平与血清RPR试验转阴率呈负相关。结论:早期梅毒患者外周血IL-4的表达水平可能可以作为判断梅毒预后的一个较敏感指标。

抗原肽致敏白介素12基因修饰的树突状细胞免疫治疗转移性肺癌

目的 探讨肿瘤多肽致敏的白介素 12 (IL 12 )基因修饰的树突状细胞 (DC)对自发性肺转移癌的治疗作用。方法 小鼠足垫注射 3LLLewis肺癌细胞建立自发性肺转移癌模型 ,经骨髓来源的IL 12基因修饰、3LL特异抗原多肽Mut1体外致敏DC(DC IL 12 Mut1)皮下免疫 2次 ,观察荷瘤鼠肺脏质量、肺表面转移结节、存活期的变化及相应免疫指标等变化 ,实验分8组 ,组间差异行t检验 ,生存期行时序检验。结果 与对照病毒组 (DC LacZ Mut1)及未处理DC组相比 ,DC IL 12 Mut1组肺脏质量最轻 (P <0 .0 1)、肺表面转移结节最少 (P <0 .0 1)、存活期最长 (P <0 .0 1) ,其诱导CTL活性 (P <0 .0 1)和NK活性 (P <0 .0 1)最显著。结论 MHCⅠ类限制性肿瘤抗原多肽致敏的IL

白介素12与强直性脊柱炎的研究进展

白介素12(IL-12)在机体的固有免疫和细胞免疫中扮演了重要角色。IL-12作为强直性脊柱炎(AS)的一种促炎症性细胞因子,在AS的发生发展过程中起了重要作用。现就IL-12的生物学意义、参与AS发病的证据及其在AS发病中可能的作用机制等方面作一综述。

早期梅毒血清固定患者的白介素2、4、10和12的水平检测

采用双抗体夹心ELISA法,检测早期梅毒患者血清中IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的水平,并与健康组对照。结果显示,IL-2和IL-12的水平均明显低于正常对照组,IL-4和IL-10水平均明显高于正常对照组。梅毒血清固定组患者血清中IL-2和IL-12的水平明显低于梅毒血清转阴组,IL-4和IL-10的水平明显高于梅毒血清转阴组,差异均有统计学意义(P<0.05)。早期梅毒血清固定患者存在Th1/Th2比例失衡,细胞免疫功能下降,这可能在梅毒的发病机制中发挥重要作用。

尼古丁对哮喘大鼠树突状细胞髓样分化因子88及白介素-10、白介素-12表达的影响

目的通过研究尼古丁对哮喘大鼠模型树突状细胞(DCs)Toll受体转导途径中重要接头蛋白髓样分化因子88(MyD88)表达影响及其与白介素-10(IL-10)、白介素-12(IL-12)的关系,从细胞水平探讨尼古丁加重哮喘的免疫学机制。方法制备哮喘大鼠模型,培养骨髓来源的DCs及脾脏来源的淋巴细胞,实验随机分为4组:对照组、哮喘组、尼古丁组和哮喘加尼古丁组,其中对照组和哮喘组大鼠DCs在培养5 d后在培养液中加入一定体积的PBS继续培养72 h,尼古丁组和哮喘加尼古丁组大鼠DCs在培养5 d后加入质量浓度为400μg/ml尼古丁作用72 h。收集各组细胞及细胞上清,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)测定各组IL-10和IL-12的浓度。采用免疫印迹(Western blot)法测定细胞内MyD88的含量。采用MTT法测定DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果①哮喘加尼古丁组和哮喘组大鼠DCs IL-10的表达均高于对照组,IL-12的表达均低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。哮喘加尼古丁组大鼠DCs IL-10和IL-12的表达均低于哮喘组大鼠,差异均具有统计学意义(P<0.05)。②尼古丁组、哮喘组和哮喘加尼古丁组大鼠DCs MyD88的表达低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。哮喘加尼古丁组大鼠DCs MyD88的表达低于哮喘组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。③哮喘组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力与对照组相比明显增强,差异具有统计学意义(P<0.01)。哮喘加尼古丁组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力与哮喘组和对照组相比明显减弱,差异均具有统计学意义(P<0.05)。④DCs MyD88的表达与IL-12呈显著的正相关(r=0.644,P<0.01),与IL-10的表达无明显相关性。IL-12与IL-10的表达呈显著的负相关(r=-0.388,P<0.05)。DCs中IL-10的表达与淋巴细胞增殖活性呈显著的正相关(r=0.524,P<0.01);IL-12的表达与淋巴细胞增殖活性无明显相关性。结论尼古丁可以抑制哮喘大鼠DCs MyD88以及IL-10、IL-12的表达,并降低DCs刺激淋巴细胞的增殖能力。这可能是吸烟加重哮喘的免疫学机制之一。其中MyD88依赖的Toll受体转导途径可能在尼古丁下调IL-12的表达中发挥了一定作用。

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠血浆中白介素12和血小板活化因子的影响

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血浆白介素12(IL-12)、血小板活化因子(PAF)的水平变化,探讨银杏苦内酯B(BN52021)对SAP的治疗作用。方法:Wistar大鼠随机分成SAP模型组(SAP)、BN52021治疗组(BN)和阴性对照组(NC)。前两组以5%牛磺胆酸钠逆行注入主胰管制成SAP模型,NC组仅翻动十二指肠并触摸胰腺数次关腹,制模15 min后,SAP组、NC组经股静脉注射生理盐水,BN组以BN52021静注;应用ELISA技术测定血浆IL-12和PAF水平。结果:各组血浆IL-12水平存在明显差异,BN组在1 h时相点较SAP、NC组显著性升高(P<0.01);SAP组在6 h1、2 h时相点较NC组显著性升高(P<0.01,P<0.05)。各组血浆PAF水平存在明显差异,在1 h时相点,SAP组与BN组PAF含量较NC组均显著升高(P<0.01);在6 h、12 h时相点,SAP组PAF含量显著高于NC组、BN组(P<0.05,P<0.01)。结论:SAP大鼠早期血浆IL-12水平降低,PAF水平显著升高;BN52021对SAP大鼠具有一定的治疗作用,使早期血浆IL-12水平升高,PAF水平下降。

人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达

[目的]研究人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达。[方法]采用ELISA和WesternBlot,检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。[结果]转基因马铃薯叶与块茎中均能被hIL-12p70二聚体特异性的抗体识别的蛋白表达,与野生对照组相比均有0.01水平显著差异。WesternBlot分析结果显示,在40kD处有特异性的蛋白条带出现。[结论]所建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能正确、有效表达hIL-12二聚体。

重组人白介素-12生物学活性检测方法的建立

目的建立重组人白介素-12(rhIL-12)的生物学活性检测方法。方法采用重组人白介素-12刺激外周血淋巴细胞分泌IFN-γ,并用国际标准品校正,进行生物学活性检测。结果用该方法对重组人白介素-12成品及原液进行检测,成品比活性平均值为1037460IU/mg,变异系数为26·0%(n=5);原液比活性平均值为1262270IU/mg,变异系数为16·8%(n=5)。结论该方法检测结果准确、客观,重复性好,可用于重组人白介素-12生物学活性的常规检测。

特应性皮炎患者血清白介素-18及-12水平检测及临床意义

目的:探讨特应性皮炎(AD)患者的血清白介素(IL)-18及IL-12的水平与AD发病的关系及其临床意义。方法:按常规方法作外周血嗜酸性粒细胞(PBEC)绝对计数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定AD患者和健康对照血清IL-18和IL-12的水平。结果:①AD组与对照组相比,血清IL-18水平和PBEC计数均显著升高(P<0.01),血清IL-12水平显著降低(P<0.01);②AD患者血清IL-18水平及PBEC计数与病情严重程度呈显著正相关(P<0.01),血清IL-12水平与病情严重程度呈显著负相关(P<0.01);③AD患者血清IL-18水平与PBEC计数呈显著正相关(P<0.05),血清IL-12水平与PBEC计数无显著相关性(P>0.05)。结论:AD患者存在免疫紊乱,其血清IL-18水平升高、IL-12水平降低;IL-18的水平升高和PBEC计数增加可能是AD患者病情恶化的指征之一。

妊娠期糖尿病患者白介素12的测定及其临床意义

目的探讨炎症介质白介素12(IL-12)在妊娠期糖尿病(GDM)发病机制中的作用。方法选取青岛海慈医院收治的GDM患者40例为研究组,健康孕妇45例为对照组。检测两组孕妇血清IL-12、胰岛素及空腹血糖水平,并分析IL-12在GDM患者中的表达及与胰岛素抵抗(IR)的关系。结果 GDM组空腹血糖[(4.97±0.56)mmol/L]、空腹胰岛素[(12.95±1.44)mU/L]、胰岛素抵抗指数(2.81±1.15)及IL-12[(68.36±3.42)pg/ml]均高于对照组[(4.62±0.48)mmol/l、(8.67±1.64)mU/L、1.78±0.97、(59.13±3.75)pg/ml],两组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01);IL-12与胰岛素抵抗指数呈正相关(r=0.867,P<0.01)。结论妊娠期糖尿病患者血清IL-12明显升高,并与胰岛素抵抗有关,IL-12可能参与了妊娠期糖尿病的发病。